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头孢噻呋及去呋喃甲酰基头孢噻呋的四极杆轨道阱串联质谱分析及其在肉鸡体内的残留规律研究

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质谱学报 2017年第5期38卷 526-533页

作者：洪云鹤刘艳崔凤云许秀丽方恩华张经华张峰张宝善陕西师范大学陕西西安710119 中国检验检疫科学研究院北京100176 北京市理化分析测试中心北京市食品安全分析测试工程技术研究中心北京100089 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心北京100026 厦门市出入境检验检疫局检验检疫技术中心福建厦门361026

建立了头孢噻呋及其主要代谢物去呋喃甲酰基头孢噻呋残留的超高效液相色谱-四极杆轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Orbitrap MS)分析方法。选用Kinetex F5 100A色谱柱(50mm×3.0mm×2.6μm)分离,在Q-Exactive高分辨质谱Full MS/dd-MS2扫描模式... 详细信息

建立了头孢噻呋及其主要代谢物去呋喃甲酰基头孢噻呋残留的超高效液相色谱-四极杆轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Orbitrap MS)分析方法。选用Kinetex F5 100A色谱柱(50mm×3.0mm×2.6μm)分离,在Q-Exactive高分辨质谱Full MS/dd-MS2扫描模式下采集数据进行定性定量分析。两种目标物在3种基质中相应浓度范围内的线性关系良好,相关系数r2均大于0.990,回收率为83.2%~129.7%,RSD均小于15%。通过对鸡体内头孢噻呋及其代谢物残留规律的分析表明,给药后,鸡胸肉中头孢噻呋和去呋喃甲酰基头孢噻呋均可检出,且消除时间均为12~24h;鸡肝、鸡肾中头孢噻呋可在0.5h内迅速代谢为去呋喃甲酰基头孢噻呋,鸡肝和鸡肾中去呋喃甲酰基头孢噻呋的消除时间分别为48~72h和72~120h。本研究可为保障动物源性食品安全以及鸡体内头孢噻呋最大残留限量标准和休药期的制订提供理论和实践依据。

关键词：四极杆轨道阱串联质谱(Q-Orbitrap MS) 头孢噻呋鸡肉食品安全

头孢噻呋-卵黄低密度脂蛋白的制备及其对细胞内金黄色葡萄的抑制效果

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头孢噻呋-卵黄低密度脂蛋白的制备及其对细胞内金黄色葡萄的抑制...

基于体外吸收模型探讨木犀草素对头孢噻呋肠吸收的影响及其机制研究

中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：赵一王永菲郭莉莉毛伟曹金山

已有多种研究证明金黄色葡萄球菌可以在吞噬细胞或内皮细胞内持续存在很长时间,因此被称为兼性细胞内病原体,这一行为也与其复杂的免疫逃避机制相关,这使得兽医临床上由该病原体导致的疾病存在着久治不愈和反复感染的情况。目的:本研究... 详细信息

已有多种研究证明金黄色葡萄球菌可以在吞噬细胞或内皮细胞内持续存在很长时间,因此被称为兼性细胞内病原体,这一行为也与其复杂的免疫逃避机制相关,这使得兽医临床上由该病原体导致的疾病存在着久治不愈和反复感染的情况。目的:本研究以天然纳米颗粒卵黄低密度脂蛋白（heLDL）作为药物递送系统,负载头孢噻呋（CFT）,以达到抗生素跨膜杀灭胞内寄生金黄色葡萄球菌的目的。方法:本研究从卵黄中提取出heLDL,随后通过共孵育的方法将CFT包载至heLDL,制备得到头孢噻呋-卵黄低密度脂蛋白（CFT-heLDL）;采用动态光散射法对其大小分布和zeta电位进行检测,通过透射电镜观察其表征,SDS凝胶电泳检测其蛋白表征,采用LC/MS对其的药物包载率进行测定;采用油红染色和激光共聚焦显微镜检测其在奶牛子宫内膜上皮细胞内的积累;通过溶酶体共定位探针,观察CFT-heLDL在细胞内的分布;建立奶牛子宫内膜上皮细胞胞内感染金黄色葡萄球菌的模型,通过激光共聚焦和破碎细胞后涂布平板计数菌落的方法,观察CFT-heLDL对胞内菌的杀灭作用。结果:通过透射电镜的观察,CFT-heLDL的粒径相比于heLDL更为均一,且未见粒径较大的融合颗粒,动态光散射法测得的平均粒径也与此结果相吻合,且CFT-heLDL的zeta电位的绝对值大于heLDL,这显示包载后的药物体系更为稳定;通过SDS凝胶电泳观察到,heLDL的载脂蛋白在包载前后没有明显的变化,说明包载过程没有破坏其载脂蛋白的结构;通过LC/MS测定药物的包载率为22.23%±5.628%;油红染色和激光共聚焦试验结果显示,包载药物在细胞内有较好的蓄积效果;溶酶体共定位试验的结果显示,从药物孵育的4h起可以观察到药物与溶酶体的共定位,且可持续至24 h;在体外药物杀灭胞内菌的实验中,通过激光共聚焦可以观察到,CFT-heLDL药物组细胞内聚集的死菌要多于CFT药物组,这与破碎细胞后涂布平板计数胞内菌存活情况的结果相一致。

关键词：卵黄低密度脂蛋白头孢噻呋纳米载药系统细胞内杀菌活性金黄色葡萄球菌

来源： cnki会议评论

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基于体外吸收模型探讨木犀草素对头孢噻呋肠吸收的影响及其机制研...

作者：王如霞沈阳农业大学

学位级别：硕士

随着养殖规模的不断扩大,细菌性疾病给养鸭业造成的损失不容忽视。头孢噻呋作为首个动物专用的第三代头孢菌素类抗生素,因具有广谱高效的抗菌活性,是治疗鸭细菌性疾病的常用药物。据报道,天然黄酮类化合物能够影响药物在肠道的转运从而... 详细信息

随着养殖规模的不断扩大,细菌性疾病给养鸭业造成的损失不容忽视。头孢噻呋作为首个动物专用的第三代头孢菌素类抗生素,因具有广谱高效的抗菌活性,是治疗鸭细菌性疾病的常用药物。据报道,天然黄酮类化合物能够影响药物在肠道的转运从而促进其吸收。但尚未见有关木犀草素对头孢噻呋在鸭的肠吸收影响的相关报道。本研究通过建立鸭的外翻肠囊模型和Caco-2单层细胞模型探究黄酮类化合物木犀草素对头孢噻呋肠吸收的影响及其机制,将为兽医临床联合应用头孢噻呋与木犀草素防治鸭的细菌性疾病提供理论依据。本研究通过建立体外模型-鸭外翻肠囊模型,利用HPLC法检测各组肠囊液中头孢噻呋的浓度,计算和分析头孢噻呋的表观渗透系数(P)、吸收率和吸收速率等参数,考察了木犀草素对头孢噻呋肠吸收的影响。结果显示,木犀草素能够显著升高头孢噻呋的P、吸收率和吸收速率,这表明木犀草素能够促进头孢噻呋在鸭肠道的吸收,且随着木犀草素浓度的增加其促进作用增强。通过建立离体细胞模型—Caco-2单层细胞模型进一步考察了头孢噻呋的转运机制及木犀草素对头孢噻呋跨膜转运的影响。结果显示,头孢噻呋的P为1.065×10 cm/s,其外排比率(ER)为1.96,木犀草素能够显著降低头孢噻呋的P和ER,且MRP2抑制剂丙磺舒能够显著降低头孢噻呋在Caco-2细胞中的P和累积转运量。这表明头孢噻呋在肠道以主动转运的方式被吸收,吸收程度中等,为不完全吸收物质;MRP2转运蛋白参与头孢噻呋的外排,且木犀草素能促进头孢噻呋在Caco-2细胞的转运;该结果与头孢噻呋在鸭肠中的试验结果一致。采用实时荧光定量PCR和Western Blot技术分别检测了头孢噻呋的相关转运蛋白MRP2和紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1、ZO-1编码基因的m RNA表达量和蛋白表达量。结果显示,木犀草素能够显著下调MRP2、Occludin、Claudin-1、ZO-1的m RNA和蛋白的表达量(p头孢噻呋相关转运蛋白和紧密连接蛋白的转录水平和蛋白表达水平显著降低,从而促进头孢噻呋的肠吸收并抑制其外排。本研究表明头孢噻呋在鸭肠道以主动转运的方式被吸收,吸收程度中等,为不完全吸收物质,且存在外排现象;木犀草素可通过下调头孢噻呋相关转运蛋白和紧密连接蛋白的基因转录和翻译,从而抑制头孢噻呋的外排,促进其在肠道的转运,将为兽医临床联合应用头孢噻呋与木犀草素防治动物的细菌性疾病提供理论依据。

关键词：头孢噻呋肠吸收木犀草素体外模型鸭

受体分析结合酶联免疫检测牛乳中的头孢噻呋残留

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高等学校化学学报 2008年第3期29卷 473-476页

作者：李铁柱孙永海郗伟东吉林大学生物与农业工程学院长春130022

利用源于肺炎链球菌的青霉素结合蛋白PBP2x对β-内酰胺类抗生素具有高度亲和力的性质,提出了一种受体分析结合酶联免疫快速检测牛乳中头孢噻呋残留的新方法.在样品中残留的β-内酰胺类抗生素只有头孢噻呋的前题下,该法可作为定量筛选方... 详细信息

利用源于肺炎链球菌的青霉素结合蛋白PBP2x对β-内酰胺类抗生素具有高度亲和力的性质,提出了一种受体分析结合酶联免疫快速检测牛乳中头孢噻呋残留的新方法.在样品中残留的β-内酰胺类抗生素只有头孢噻呋的前题下,该法可作为定量筛选方法.对牛乳中头孢噻呋的检测极限可达到欧盟规定最大残留量的1/5,并且不需要烦琐的样品预处理.给出了头孢噻呋残留检测的标准曲线,可用于快速定量分析.

关键词：牛乳头孢噻呋受体分析酶联免疫分析

头孢噻呋对猪粪厩肥中微生物群落及耐药基因的影响

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头孢噻呋对猪粪厩肥中微生物群落及耐药基因的影响

头孢噻呋晶体注射液在猪临床疾病治疗中的应用

中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：马文瑾田校源寇紫艳徐向月霍美霞黄玲利国家兽药安全性评价(环境)实验室(HZAU) 国家兽药残留基准实验室(HZAU)华中农业大学动物医学院

目的动物粪便被认为是抗生素抗性细菌(ARB)和抗生素抗性基因(ARGs)的主要储存库,粪便中存在的抗生素可能会引起广泛的毒性作用,并促进ARB和ARGs的选择。好氧堆肥可以有效去除粪便中的抗生素,但是不能完全去除ARGs。头孢噻呋(CEF)由于具... 详细信息

目的动物粪便被认为是抗生素抗性细菌(ARB)和抗生素抗性基因(ARGs)的主要储存库,粪便中存在的抗生素可能会引起广泛的毒性作用,并促进ARB和ARGs的选择。好氧堆肥可以有效去除粪便中的抗生素,但是不能完全去除ARGs。头孢噻呋(CEF)由于具有抗菌活性强的β-内酰胺环被广泛应用于治疗动物细菌性疾病,对环境存在巨大的潜在风险。然而,CEF在好氧堆肥过程中的迁移转化及对微生物群落结构和ARGs的影响迄今不明,无法评估其环境安全性。材料与方法使用传统好氧堆肥法研究猪粪中CEF在堆肥过程的消散及对微生物和ARGs的影响。建立粪便样品前处理方法,使用UPLC-MS/MS对粪便中的CEF进行检测,研究CEF在堆肥过程中的降解特性;根据欧洲药品管理局(EMA)指南,计算CEF的土壤环境暴露浓度。利用宏基因组测序,分析堆肥过程中微生物群落结构变化、ARGs的丰度变化及两者与环境因子间的相关性。结果 CEF在堆肥的高温期快速降解,降解半衰期(DT50)为1.12天。对环境中的CEF在土壤中的暴露浓度进行预测,计算出初始暴露浓度为136μg·kg,代入DT50值进行修正级风险评估,土壤中的暴露浓度为1.73μg·kg。在好氧堆肥过程中,CEF对粪便理化性质影响较小,微生物的菌群结构随时间变化,其中变形菌门、放线菌门、厚壁菌门、拟杆菌门是优势菌门;主要存在的ARGs为四环素类、氨基糖苷类和多药耐药类耐药基因。堆肥10天后,与对照组相比,粪便中存在CEF会导致变形菌门丰度降低,并且部分ARGs丰度呈现出先减少后增加的趋势。对堆肥过程中环境因子、MGEs、微生物和ARGs相关性进行分析,发现pH和C/N是影响ARGs分布的主要因素,厚壁菌门和变形菌门是ARGs的主要宿主菌,可移动元件intI1与部分ARGs存在正相关,对ARGs在环境中的转移起到重要作用。结论本研究揭示了CEF在堆肥中的降解规律及对堆肥过程微生物群落的影响。CEF在堆肥高温期迅速降解,好氧堆肥可以有效去除猪粪中的CEF,降低CEF进入土壤环境中的风险,不需要进行后续的生态效应评估。但是好氧堆肥不能降低粪便中的致病菌和ARGs,并且粪便中存在的CEF会产生选择压力导致变形菌门和部分ARGs在堆肥结束后丰度增高,增加ARGs转移风险。

关键词：头孢噻呋好氧堆肥微生物群落抗生素抗性基因

来源： cnki会议评论

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猪业科学 2022年第1期39卷 72-74页

作者：冯言言吴连勇郭传珍郑莉李龙飞崔进常雪孔梅齐鲁动物保健品有限公司山东济南250100 齐鲁制药有限公司山东济南250002

头孢噻呋晶体注射液是长效第三代头孢菌素类抗生素,可抑制细胞壁合成,属于时间依赖型抗生素,具有杀菌作用,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有效。头孢噻呋晶体注射液已被批准用在预防和治疗由胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、副猪嗜... 详细信息

头孢噻呋晶体注射液是长效第三代头孢菌素类抗生素,可抑制细胞壁合成,属于时间依赖型抗生素,具有杀菌作用,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有效。头孢噻呋晶体注射液已被批准用在预防和治疗由胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌和猪链球菌引起的猪呼吸道疾病,以及治疗猪链球菌感染引起的败血症.

关键词：多杀性巴氏杆菌胸膜肺炎放线杆菌头孢噻呋副猪嗜血杆菌猪呼吸道疾病猪链球菌细胞壁合成革兰氏阳性菌

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头孢噻呋在兽医临床应用及残留量测定

养殖与饲料 2022年第8期21卷 124-126页

作者：王俊菊刘爱玲天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心天津300402 天津瑞普生物技术股份有限公司天津300381

头孢噻呋是畜禽专用的第三代头孢菌素,是用于治疗动物机体感染革兰阳性菌、革兰阴性菌等疾病的一种广谱抗生素药物,主要包括牛、绵羊、山羊、猪和马的呼吸道感染、家禽肠道细菌感染、犬猫肠道细菌感染等疾病。头孢噻呋在机体代谢后的残... 详细信息

头孢噻呋是畜禽专用的第三代头孢菌素,是用于治疗动物机体感染革兰阳性菌、革兰阴性菌等疾病的一种广谱抗生素药物,主要包括牛、绵羊、山羊、猪和马的呼吸道感染、家禽肠道细菌感染、犬猫肠道细菌感染等疾病。头孢噻呋在机体代谢后的残留量检测是保证动物健康生长的关键,也是动物源性食品安全使用的基本保证。本文从头孢噻呋的基本结构及抗菌活性、兽医临床应用、药物代谢和排泄、毒性研究、机体残留量检测等几个方面对头孢噻呋的使用进行了总结,以期为兽医临床对其使用作技术指导,更加有效保障头孢噻呋使用后的动物源性食品的安全。

关键词：头孢噻呋兽医临床治疗检测

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头孢噻呋在猪组织中残留消除规律

畜牧兽医学报 2013年第8期44卷 1311-1316页

作者：李帅鹏黄显会孔祥凯张晓会李向阳华南农业大学国家兽药残留基准实验室广州510642 洛阳惠中兽药有限公司洛阳471003

本研究旨在分析头孢噻呋在猪体内的残留消除规律,并为制定休药期提供依据。改进了猪可食性组织中头孢噻呋残留检测的高效液相色谱法(HPLC),试验猪按体重以5mg·kg-1肌注给药,连续给药3d,分别在最后一次给药后第12小时及第3、5、7、9天... 详细信息

本研究旨在分析头孢噻呋在猪体内的残留消除规律,并为制定休药期提供依据。改进了猪可食性组织中头孢噻呋残留检测的高效液相色谱法(HPLC),试验猪按体重以5mg·kg-1肌注给药,连续给药3d,分别在最后一次给药后第12小时及第3、5、7、9天随机宰杀5头猪取样。样品先用二硫赤藓糖醇提取,再用碘乙酰胺衍生化后经MCX固相萃取小柱净化,经高效液相色谱C18柱分离后用紫外检测器检测。结果显示:给药后第12小时肾脏组织中的药物浓度最高,为2.589μg·g-1,第3天所有组织的药物浓度均低于最高残留限量(MRL)。采用Win-nonlin软件计算各组织的消除动力学参数,消除快慢依次为皮脂、肌肉、肝、肾和注射位点,其消除半衰期(t1/2β)分别为28.99、35.80、36.76、55.72和160.8h。肾的药时曲线下面积(AUC)最高,为123.4h·μg·g-1,说明肾脏是头孢噻呋作用的靶器官。参照EMEA对头孢噻呋制定的MRL,计算得注射位点的休药期最长,为98.64h。结果提示水性头孢噻呋注射液吸收迅速,体内分布广,消除较快,建议休药期为5d。

关键词：高效液相色谱头孢噻呋残留休药期

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头孢噻呋的合成

中国医药工业杂志 2001年第6期32卷 241-242页

作者：朱阳许峰上海三维制药有限公司三维药物研究中心上海200331

头孢噻呋可以 7- ACA为原料 ,先与 2 -呋喃甲硫羟酸缩合得到 7-氨基 - 3- [(2 -呋喃基羰基 )硫甲基 ]- 3-头孢烯 -4-羧酸 ,再以活性硫酯 (5 )取代需用三苯甲基保护氨基的 2 -氨基噻唑 - 4-羧酸的 1H -苯并三唑 - 1-基活性酯 ,进行 7-位... 详细信息

头孢噻呋可以 7- ACA为原料 ,先与 2 -呋喃甲硫羟酸缩合得到 7-氨基 - 3- [(2 -呋喃基羰基 )硫甲基 ]- 3-头孢烯 -4-羧酸 ,再以活性硫酯 (5 )取代需用三苯甲基保护氨基的 2 -氨基噻唑 - 4-羧酸的 1H -苯并三唑 - 1-基活性酯 ,进行 7-位酰胺化反应制得。 5为反应剂可缩短反应时间 (3h) ,简化操作 ,收率可由 34 %提高至 6 4.6 %。产品质量较好 ,成本较低。

关键词：头孢噻呋活性硫酯合成