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细胞外调节激酶抑制剂PD98059对大鼠心肺复苏后脑缺血再灌注损伤的改善作用及其机制

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山东医药 2023年第5期63卷 15-18页

作者：黄京菊李诺韦永先王文艳覃涛杨叶桂广西医科大学第二附属医院重症医学科南宁530005 广西医科大学第一临床医学院桂林医学院附属医院重症医学科

目的通过观察细胞外调节激酶(ERK)抑制剂PD98059对大鼠心肺复苏(CPR)后脑缺血再灌注损伤的改善作用,探讨其机制是否与抑制ERK/Calpain-2/Caspase-12信号通路、降低内质网应激介导的细胞凋亡有关。方法将36只SD大鼠随机分为对照组、PD98... 详细信息

目的通过观察细胞外调节激酶(ERK)抑制剂PD98059对大鼠心肺复苏(CPR)后脑缺血再灌注损伤的改善作用,探讨其机制是否与抑制ERK/Calpain-2/Caspase-12信号通路、降低内质网应激介导的细胞凋亡有关。方法将36只SD大鼠随机分为对照组、PD98059组、假手术组各12只。除假手术组外,各组均经食道交流电刺激诱导建立心跳骤停/心肺复苏模型。电刺激诱导心跳骤停6min后,PD98059组、对照组大鼠经静脉分别注射0.3mg/kg PD98059及等体积生理盐水,并启动常规心肺复苏;假手术组仅进行手术操作而不行电刺激诱导心跳骤停。记录大鼠CPR后自主循环恢复(ROSC)时间、ROSC后24h神经功能评分(NDS);Western blotting法检测ROSC后24 h大鼠脑皮质组织中内质网应激相关凋亡蛋白钙蛋白酶2(Calpain-2)、天冬氨酸蛋白水解酶12(Caspase-12)、cleaved Caspase-3表达。结果PD98059组ROSC后24h NDS高于对照组(P蛋白假手术组

关键词：细胞外信号调节激酶抑制剂细胞外调节激酶钙蛋白酶2 天冬氨酸蛋白水解酶缺血再灌注损伤心肺复苏术

壮药龙钻通痹方对活动期类风湿关节炎纤维蛋白原及Caspase-1、3、9及MMP-1水平的影响分析

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湖北中医药大学学报 2022年第2期24卷 91-93页

作者：王亚渭陕西中医药大学针灸推拿学院陕西西安712000

目的观察壮药龙钻通痹方对活动期类风湿关节炎纤维蛋白原及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)及基质金属蛋白酶(MMP-1)的影响... 详细信息

目的观察壮药龙钻通痹方对活动期类风湿关节炎纤维蛋白原及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)及基质金属蛋白酶(MMP-1)的影响。方法将我院确诊治疗的类风湿关节炎且均处在活动期的90例患者随机分为对照组与观察组各45例。对照组服用双氯芬酸钠缓释片(扶他林)治疗,观察组采用壮药龙钻通痹方治疗。比较两组患者临床治疗效果,治疗前后血清D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、C-反应蛋白(CRP)及关节液及软骨组织中纤维蛋白原及Caspase-1、3、9及MMP-1表达水平的变化。结果治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(P蛋白原及Caspase-1、3、9的水平,改善患者临床症状。

关键词：类风湿关节炎壮药龙钻通痹方天冬氨酸蛋白水解酶基质金属蛋白酶-1

活血化瘀方对脑缺血大鼠海马组织Apaf-1/Caspase信号通路的影响

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中华中医药杂志 2017年第5期32卷 1938-1943页

作者：崔一然刘欣李德凤张毅杨洪军中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学中药学院北京100102

目的:探讨活血化瘀方丹红注射液对脑缺血大鼠海马组织凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)/天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)通路的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、丹红注射液组。采用大脑中动脉栓塞(MCAO)法制备大... 详细信息

目的:探讨活血化瘀方丹红注射液对脑缺血大鼠海马组织凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)/天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)通路的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、丹红注射液组。采用大脑中动脉栓塞(MCAO)法制备大鼠脑缺血模型,检测神经功能评分、脑梗死体积,应用HE染色观察海马组织病理形态学改变,TUNEL荧光染色检测海马CA1区神经细胞凋亡,Western blot法检测海马组织Apaf-1、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达变化。结果:与假手术组比较,缺血性脑卒中大鼠神经功能缺失,脑梗死体积增加(P蛋白表达增加(P蛋白表达显著降低(P<0.05),Bcl-2表达显著增加(P<0.05)。结论:丹红注射液能够抑制大鼠海马组织Apaf-1介导的Caspase通路,从而抑制缺血性脑卒中大鼠海马神经细胞的凋亡,推测活血化瘀方可能通过调控Apaf-1抑制内源性神经细胞凋亡途径。

关键词：脑缺血凋亡蛋白酶活化因子1 天冬氨酸蛋白水解酶活血化瘀丹红注射液海马细胞凋亡

细胞色素P450表氧化酶经线粒体途径抗内皮细胞凋亡的机制研究

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临床心血管病杂志 2018年第8期34卷 809-811页

作者：陈积雄黄晓燕王萍符秀虹曾敏汪道文海南省人民医院保健中心三区海口570311 华中科技大学附属同济医院

目的:研究细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞抗凋亡的机制。方法:原代培养主动脉内皮细胞(BAECs)2周后,分别转染细胞色素P450表氧化酶基因rAAV-F87V。用肿瘤坏死因子(TNF-α)和放线菌素D(ActD)诱导凋亡,用Western blot... 详细信息

目的:研究细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞抗凋亡的机制。方法:原代培养主动脉内皮细胞(BAECs)2周后,分别转染细胞色素P450表氧化酶基因rAAV-F87V。用肿瘤坏死因子(TNF-α)和放线菌素D(ActD)诱导凋亡,用Western blot法分别检测细胞胞质及线粒体的细胞色素C的含量。以ELISA方法检测Caspase-3、-8、-9的活性。结果:Western Blot结果表明,转染CYP P450表氧化酶后细胞胞质的细胞色素C明显减少,线粒体的细胞色素C明显增加。ELISA结果显示Caspase-3、-8、-9的活性均较对照组明显降低(均P酶基因rAAV-F87V抑制内皮细胞凋亡是通过抑制线粒体途径发挥作用的。

关键词：细胞色素P450表氧化酶内皮细胞凋亡细胞色素C 天冬氨酸蛋白水解酶

儿童原发性EB病毒感染caspase-3／6水平与肝损害的相关性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2018年第1期32卷 17-20页

作者：温正旺陈益平徐志伟石海矾狄军波陈均亚陈洁蔡晓红温州医科大学附属第二医院儿童感染科 325000 温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科 325000

目的研究不同发病时期和年龄儿童原发性EB病毒（Epstein—Barrvirus，EBV）感染肝功能损害与含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶6（caspase-6）的相关性。方法收集2016年7月至2017年6月在... 详细信息

目的研究不同发病时期和年龄儿童原发性EB病毒（Epstein—Barrvirus，EBV）感染肝功能损害与含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶6（caspase-6）的相关性。方法收集2016年7月至2017年6月在温州医科大学附属第二医院住院确诊为原发性EBV感染患儿249例，1到14岁。168例有肝功能损伤的患儿为肝功能异常组，检测急性期和恢复期指标，剩余81例为肝功能正常组。肝功能异常组再分4个亚组：幼儿组37例，学龄前组50例，学龄组36例，青少年组45例。检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBLL）、谷氨酰转移酶（GGT）和直接胆红素（DBLL），ELISA法检测caspase-3／6的分子蛋白含量。结果肝功能异常组相较于肝功能正常组caspase3／6升高，差异具有统计学意义（P均〈0．001）；急性期caspase3／6相较于恢复期升高，差异有统计学意义（P均〈0．001）；青少年组ALT、caspase-3／6相较于其他3组差异具有统计学意义（P均〈0．001），余各组之间差异无统计学意义；AST、TBLL、GGT和DBLL比较差异均无统计学意义；急性期ALT与caspase-3／6之间存在线性相关（r=0．982，r=0．965，P均〈0．001），恢复期则无相关性。结论EBV感染导致肝功能损伤的过程中，急性期caspase-3／6和ALT之间的升高存在线性相关，提示EBV导致的肝功能损伤与caspase-3／6密切相关。

关键词： EB病毒肝炎天冬氨酸蛋白水解酶

Tat-SmacN7融合肽对乳腺癌细胞辐射增敏作用的研究

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Tat-SmacN7融合肽对乳腺癌细胞辐射增敏作用的研究

作者：郭艳婷北京协和医学院

学位级别：硕士

目的通过体外实验观察Tat-SmacN7对人乳腺癌SK-BR-3细胞的辐射增敏作用并初步探讨其机制。方法(1)取对数生长期乳腺癌SK-BR-3细胞,分为对照组、γ射线照射组、Tat-SmacN7组和Tat-SmacN7联合丫射线照射组(以下简称联合组)。MTT法检测Tat-... 详细信息

目的通过体外实验观察Tat-SmacN7对人乳腺癌SK-BR-3细胞的辐射增敏作用并初步探讨其机制。方法(1)取对数生长期乳腺癌SK-BR-3细胞,分为对照组、γ射线照射组、Tat-SmacN7组和Tat-SmacN7联合丫射线照射组(以下简称联合组)。MTT法检测Tat-SmacN7对SK-BR-3细胞的毒性;克隆形成实验检测Tat-SmacN7的存活分数;单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比(SER)。(2)流式细胞术检测Tat-SmacN7联合γ射线照射对细胞凋亡的影响;彗星实验观察Tat-SmacN7联合Y射线照射对细胞射线照射后DNA双链断裂的影响作用。(3) Western blot和RT-PCR观察XIAP、cIAP-1蛋白表达水平和mRNA水平的变化。(4)Western blot观察caspase-3%caspase8%caspase-9和PARP活性变化。结果(1) Tat-SmacN7随浓度升高对SK-BR-3细胞的增殖抑制率增大,药物浓度与细胞增殖率呈正相关(r2=0.924,P蛋白表达水平均降低;Tat-SmacN7组和联合处理组XIAP的mRNA均下降。(4)与单纯照射组和Tat-SmacN7单独作用组相比,联合处理组caspase-8、caspase-3、PARP活化增强,caspase-9的表达和活化在四组之间变化无差异。结论Tat-SmacN7通过抑制人乳腺癌细胞SK-BR-3细胞照射后DNA修复以及通过促进线粒体凋亡途径促进凋亡增加其辐射敏感性。促凋亡作用这一特性与抑制XIAP的mRNA转录和促进cIAP-1的降解以及caspase的激活有关。

关键词： Tat-SmacN7 放射增敏凋亡 DNA双链断裂凋亡抑制蛋白天冬氨酸蛋白水解酶

灯盏花素对非小细胞肺癌A549细胞的作用及机制研究

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陕西中医 2021年第10期42卷 1363-1366页

作者：刘婷李洋石志红西安交通大学第一附属医院涉外病房陕西西安710061 西安交通大学第一附属医院呼吸与危重症医学科陕西西安710061

目的:探讨灯盏花素(BVP)对非小细胞肺癌A549细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法:将非小细胞肺癌A549细胞分为对照组、BVP低剂量组(20μmol/L)、BVP中剂量组(40μmol/L)、BVP高剂量组(80μmol/L),使用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞12、24、... 详细信息

目的:探讨灯盏花素(BVP)对非小细胞肺癌A549细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法:将非小细胞肺癌A549细胞分为对照组、BVP低剂量组(20μmol/L)、BVP中剂量组(40μmol/L)、BVP高剂量组(80μmol/L),使用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞12、24、48 h细胞存活率,使用AnnexinV-FITC/PI双染法检测各组细胞24 h细胞凋亡情况,使用蛋白印记法检测各组细胞细胞周期、凋亡相关蛋白表达。结果:BVP低、中、高剂量组A549细胞12、24、48 h时的细胞存活率依次呈降低趋势(P蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达均明显低于对照组(P蛋白(Bax)、天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达量均明显高于对照组(P蛋白表达有关。

关键词：非小细胞肺癌 A549细胞灯盏花素细胞增殖细胞凋亡天冬氨酸蛋白水解酶

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线粒体DNA介导的细胞焦亡与脓毒症

中国小儿急救医学 2021年第11期28卷 988-992页

作者：张莉鹏张琪中日友好医院儿科北京协和医学院中国医学科学院北京100029

脓毒症是宿主对感染反应失调引起的严重危及生命的器官功能障碍性疾病,是重症监护病房常见的死亡原因。焦亡是由含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶介导的一种坏死和炎性程序性细胞死亡,其机制分为典型炎性小体激活和非典型炎性小体激活,ca... 详细信息

脓毒症是宿主对感染反应失调引起的严重危及生命的器官功能障碍性疾病,是重症监护病房常见的死亡原因。焦亡是由含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶介导的一种坏死和炎性程序性细胞死亡,其机制分为典型炎性小体激活和非典型炎性小体激活,caspase-1/11及消皮素D是焦亡发挥作用的关键底物。线粒体DNA作为一种损伤相关分子模式介导细胞焦亡,与脓毒症严重程度相关。本文就线粒体DNA介导的细胞焦亡与脓毒症的关系进展作一综述。

关键词：线粒体DNA 细胞焦亡脓毒症天冬氨酸蛋白水解酶消皮素D

三七总皂苷联合三苯氧胺对人乳腺癌细胞的抑制作用及对PI3K-AKT-mTOR信号通路的影响

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安徽医药 2017年第10期21卷 1780-1784页

作者：李军黄梅石新蕾广州中医药大学第一附属医院乳腺科广东广州510405

目的探讨三七总皂苷(PNS)联合三苯氧胺(TAM)对人乳腺癌细胞的抑制作用及对PI3K-AKT-m TOR信号通路的影响。方法 70只裸鼠于右胸部皮下接种乳腺癌LCC2细胞,选取造模成功的66只裸鼠随机分为6组,每组11只,分别为模型对照组、单纯5 mg·kg^(... 详细信息

目的探讨三七总皂苷(PNS)联合三苯氧胺(TAM)对人乳腺癌细胞的抑制作用及对PI3K-AKT-m TOR信号通路的影响。方法 70只裸鼠于右胸部皮下接种乳腺癌LCC2细胞,选取造模成功的66只裸鼠随机分为6组,每组11只,分别为模型对照组、单纯5 mg·kg^(-1)TAM组、100 mg·kg^(-1)PNS组、200 mg·kg^(-1)PNS组、5 mg·kg^(-1)TAM+100 mg·kg^(-1)PNS组、5 mg·kg^(-1)TAM+200 mg·kg^(-1)PNS组、连续给药30 d,每周记录裸鼠体质量,肿瘤抑制率,给药结束后分离瘤体并称重,观察瘤体病理组织学结果,采用免疫组化法检测HER-2,谷胱甘肽S转移酶(GST-л)及天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)的表达情况。结果与TAM组相比较,5 mg·kg^(-1)TAM+100 mg·kg^(-1)PNS组和5 mg·kg^(-1)TAM+200 mg·kg^(-1)PNS组肿瘤抑制率均大于单纯TAM组(P<0.05),5 mg·kg^(-1)TAM+100 mg·kg^(-1)PNS组和5 mg·kg^(-1)TAM+200 mg·kg^(-1)PNS组HER-2及GST-л表达水平显著低于单纯TAM组(P<0.05),Caspase-3表达显著高于单纯TAM组(P<0.05)。结论 PNS能显著增加TAM抗乳腺癌的作用,其机制可能与调控m TOR信号通路有关。

关键词：三七总皂苷乳腺癌 mTOR信号通路 HER2 谷胱甘肽S转移酶天冬氨酸蛋白水解酶