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Science China(Life Sciences) 2012年第9期55卷 782-787页

作者： HAN HongBin LI Kai YAN JunHao ZHU Kai FU Yu Department of Radiology Peking University Third HospitalBeijing 100191China Beijing Key Laboratory of Magnetic Resonance Imaging Device and Technique Beijing 100191China Department of Anatomy Histology and EmbryologyPeking University Health Science CenterBeijing 100083China Department of Neurology Peking University Third HospitalBeijing 100191China

The nature of brain interstitial fluid (ISF) has long been a subject of controversy. Most of the previous studies on brain ISF were carried out in vitro. In the present study, a novel method was developed to characterize ISF in the living rat brain by magnetic resonance (MR) imaging using gadolinium-diethylenetriaminepentaacetic acid (Gd-DTPA) as a tracer. Sprague Dawley rats (n=8) were subjected to MR scanning before and after the introduction of Gd-DTPA into the caudate nucleus. A one-way drainage of brain ISF was demonstrated on the dynamic MR images. According to the traditional diffusion model, the diffusion and clearance rate constants of the tracer within brain extracellular space (ECS) were derived as (3.38±1.07)×10-4 mm 2 s-1 and (7.60±4.18)×10-5 s-1 . Both diffusion and bulk flow contributed to the drainage of ISF from the caudate nucleus, which demonstrated an ISF-cerebrospinal fluid confluence in the subarachnoid space at the lateral and ventral surface of the brain cortex at 3 h after the injection. By using this newly developed method, the brain ECS and ISF can be quantitatively measured simultaneously in the living brain, which will enhance the understanding of ISF and improve the efficiency of drug therapy via the brain interstitium.

关键词：脑组织 MRI 生物物理特性大鼠脑示踪法体内扩散模型大脑皮质

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大鼠脑周细胞的培养与鉴定

中华病理学杂志 2013年第8期42卷 551-553页

作者：李强李文龚李博黄宇星喻安永葛红飞杨云峰胡荣阮怀珍吴国材唐卫华冯华第三军医大学附属西南医院神经外科重庆400038 第三军医大学基础部神经生物学教研室济南军区总院神经外科

脑周细胞是一种多能性细胞，广泛参与维持血脑屏障、调节微血流、介导血管构筑等生理病理过程。在中枢神经系统，周细胞与神经退行性病变、肿瘤生长与迁移、新生儿颅内出血等疾病密切相关。目前对脑周细胞的研究受困于无有效的离体培养... 详细信息

脑周细胞是一种多能性细胞，广泛参与维持血脑屏障、调节微血流、介导血管构筑等生理病理过程。在中枢神经系统，周细胞与神经退行性病变、肿瘤生长与迁移、新生儿颅内出血等疾病密切相关。目前对脑周细胞的研究受困于无有效的离体培养模型，因而缺乏单因素的研究手段。

关键词：培养模型周细胞大鼠脑神经退行性病变新生儿颅内出血鉴定中枢神经系统血脑屏障

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原代大鼠脑微血管内皮细胞培养方法的改进

首都医科大学学报 2016年第5期37卷 693-698页

作者：徐平湘齐特陆莉薛明肇玉明首都医科大学基础医学院药理系北京100069

血脑脊液屏障（blood brain barrier,BBB）是机体的内部屏障之一,由介于血循环与脑实质间的软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包于壁外的胶质膜所组成,是中枢神经系统的重要解剖结构基础[1]。血脑脊液屏障主要是由脑微血管内皮细胞（brain... 详细信息

血脑脊液屏障（blood brain barrier,BBB）是机体的内部屏障之一,由介于血循环与脑实质间的软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包于壁外的胶质膜所组成,是中枢神经系统的重要解剖结构基础[1]。血脑脊液屏障主要是由脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells,BMECs）和周细胞构成,星形胶质足突包绕毛细血管的外周,覆盖其95%～99%的表面积。

关键词：脑微血管内皮细胞细胞培养方法大鼠脑血脑脊液屏障脑毛细血管壁中枢神经系统 brain cells

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大鼠脑特异基因rRP58的克隆及定位分析

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第5期33卷 563-568页

作者：康建胜杨永臣刘海兰李永红杜雨苍李荣秀中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所!上海200031 中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心!上海200233

EST(AW 0 5 5 733)是在SD大鼠脑内一特异表达基因cDNA的 3′端片段 ,与人和小鼠的一个转录抑制因子基因 (RP5 8)同源。利用RT PCR的方法 ,从SD大鼠脑中得到rRP5 8基因两个不同长度的转录本。全长的rRP5 8基因编码产物为C2 H2 型锌指蛋... 详细信息

EST(AW 0 5 5 733)是在SD大鼠脑内一特异表达基因cDNA的 3′端片段 ,与人和小鼠的一个转录抑制因子基因 (RP5 8)同源。利用RT PCR的方法 ,从SD大鼠脑中得到rRP5 8基因两个不同长度的转录本。全长的rRP5 8基因编码产物为C2 H2 型锌指蛋白 ,含两个保守结构域 :氨基端的POZ结构域及羧基端的锌指结构域 (ZFD)。在POZ和ZFD结构域之间的序列 ,BLAST搜索未发现保守结构 ,但是富含酸性氨基酸残基。将编码ZFD结构域 (nt10 33～ 15 6 9)及POZ结构域 (nt 1～ 372 )的序列克隆到原核表达载体 pQE30中 ,表达并分离纯化了His6 ZFD和His6 POZ(融合了 6个组氨酸标签的蛋白质产物 )。用His6 ZFD和His6 POZ免疫兔子后 ,得到了ZFD和POZ两者的多克隆抗体 ,并利用所制备的抗体进一步分析了rRP5 8基因多转录本产物在大鼠中的组织分布 ,免疫组织化学实验结果显示rRP5 8蛋白主要分布在小脑颗粒细胞中

关键词： rRP58 锌指结构 POZ 大鼠脑抗体

脑创伤后单唾液酸四己糖神经节苷脂对大鼠脑保护作用机制的研究

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黑龙江畜牧兽医 2015年第9期 216-218页

作者：尹立国崔建忠高俊玲赵雅宁河北省遵化市人民医院神经外科河北遵化064200 唐山市工人医院河北唐山063000 河北联合大学河北唐山063000

随着生产、生活方式和交通模式的改变,人、畜颅脑创伤发病率逐年增加。此类疾病的研究是医疗工作者和基础研究工作者面临的重大课题。线粒体在脑创伤后自由基信号传导中发挥着重要作用,本研究运用改进的Marmarou方法建立大鼠弥漫性脑损... 详细信息

随着生产、生活方式和交通模式的改变,人、畜颅脑创伤发病率逐年增加。此类疾病的研究是医疗工作者和基础研究工作者面临的重大课题。线粒体在脑创伤后自由基信号传导中发挥着重要作用,本研究运用改进的Marmarou方法建立大鼠弥漫性脑损伤模型,用单唾液酸四己糖神经节苷脂（GM-1）进行干预,

关键词：神经节苷脂大鼠脑唾液酸保护作用创伤己糖机制交通模式

氯化血红素对心肺复苏后大鼠脑红蛋白表达影响

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中华急诊医学杂志 2011年第11期20卷 1167-1169页

作者：孙江丽孙志扬三门峡市中心医院ICU 河南省三门峡472000 上海同济大学附属东方医院神经外科

心搏骤停（cardiacarreast，CA）是急救医学较常见的危重症之一，而脑复苏成功与否，是心肺复苏最后成功的关键。组织的严重缺血缺氧以及复苏后组织再灌注则是CA后脑组织损伤的主要原因。脑红蛋白（nueorglboin，Ngb）是德国学者Burmes... 详细信息

心搏骤停（cardiacarreast，CA）是急救医学较常见的危重症之一，而脑复苏成功与否，是心肺复苏最后成功的关键。组织的严重缺血缺氧以及复苏后组织再灌注则是CA后脑组织损伤的主要原因。脑红蛋白（nueorglboin，Ngb）是德国学者Burmester等在2000年发现的一种主要位于脑内神经元的携氧球白，能可逆地结合，在脑缺血缺氧时，Ngb在神经元中表达增加，作为一种内源性神经保护因子可保护神经元免受缺血性损害。

关键词：心肺复苏后氯化血红素蛋白表达大鼠脑脑组织损伤脑内神经元脑缺血缺氧神经保护因子

乌司他丁对重症急性胰腺炎大鼠脑毛细血管渗漏的影响

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中华肝胆外科杂志 2011年第6期17卷 507-508页

作者：李洪森黄鹤光曹洪庆福建医科大学附属协和医院普外科福州350001

胰性脑病是重症急性胰腺炎（SAP）的严重并发症，与大脑的毛细血管渗漏紧密相关。occludin蛋白是脑组织重要的紧密连接蛋白，与大脑毛细血管通透性密切相关。乌司他丁（UTI）是一种广谱的蛋白酶抑制剂，已经广泛用于临床，但其对胰性脑... 详细信息

胰性脑病是重症急性胰腺炎（SAP）的严重并发症，与大脑的毛细血管渗漏紧密相关。occludin蛋白是脑组织重要的紧密连接蛋白，与大脑毛细血管通透性密切相关。乌司他丁（UTI）是一种广谱的蛋白酶抑制剂，已经广泛用于临床，但其对胰性脑病的治疗及机制研究甚少。本研究旨在探讨occludin在SAP大脑毛细血管渗漏中的作用及UTI治疗胰性脑病的作用机制。

关键词：重症急性胰腺炎毛细血管渗漏乌司他丁大鼠脑脑毛细血管通透性 occludin 胰性脑病紧密连接蛋白

半枝莲黄酮对复合Aβ所致大鼠脑内Tau蛋白多位点磷酸化水平的影响

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神经药理学报 2018年第6期 47-48页

作者：马帅高杨商亚珍河北省中医药抗痴呆重点研究室河北省中药研究与开发重点实验室承德医学院中药研究所

目的:探讨半枝莲黄酮(SBF)对淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)联合三氯化铝(AlCl3)和人类重组转移因子-β1(RHTGF-β1)(复合Aβ)所致大鼠脑内tau蛋白多个位点磷酸化水平表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠,10%水合氯醛(240 mg·kg-1)麻醉,固定... 详细信息

目的:探讨半枝莲黄酮(SBF)对淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)联合三氯化铝(AlCl3)和人类重组转移因子-β1(RHTGF-β1)(复合Aβ)所致大鼠脑内tau蛋白多个位点磷酸化水平表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠,10%水合氯醛(240 mg·kg-1)麻醉,固定于大鼠脑立体定位仪,颅顶正中矢状切开,暴露硬脑膜,标记前囟点位置。以前囟点为坐标原点,于前囟点后2.0 mm、矢状缝右侧旁开1.4 mm、深4.6 mm确认丘脑背侧核位置。于前囟点后1.2 mm、矢状缝左侧旁开2.0 mm、深4.0 mm确认侧脑室位置,三棱锥钻一直径为0.2 mm孔,埋置导管,用硫酸锌水门汀固定导管。模型对照组侧脑室给药Aβ25-35 14 d,AlCl3 5 d,假手术对照组给予等体积生理盐水,首次注射时在丘脑前背侧核注入RHTGF-β110 ng。在手术第45 d利用Morris水迷宫进行4 d的大鼠记忆障碍模型筛选,以第4 d水迷宫成绩进行记忆障碍模型筛选。成功模型大鼠i.g 35、70和140 mg·kg-1的SBF,持续37 d。Western blot法检测大鼠海马、皮层中Thr205、Thr212和Ser214位点磷酸化的tau蛋白水平。结果:与假手术组大鼠相比,模型组大鼠皮层与海马中Thr205、Thr212和Ser214位点磷酸化tau蛋白表达明显增加(P大鼠皮层和海马中p-tau(Thr205)、p-tau(Thr212)、p-tau(Ser214)蛋白表达分别增加了165.15%(P脑室注射复合Aβ大鼠i.g 35、70和140 mg·kg-1 SBF 36 d不同程度地调节了上述位点磷酸化tau蛋白的表达。与模型组相比,3个剂量SBF使p-tau(Thr205)在皮层中分别降低了69.75%(35 mg·kg-1SBF,P脑室注射复合Aβ使大鼠脑内Thr205、Thr212和Ser214位点磷酸化tau蛋白表达明显增加。i.g 35、70和140 mg·kg-1的SBF37 d可显著逆转复合Aβ所致脑内tau蛋白Thr205和Ser214位点过度磷酸化及海马Thr212位点磷酸化tau蛋白的过表达。表明SBF具有抑制tau蛋白过度磷酸化活性。结合本实验室以往的研究SBF能改善复合Aβ所致大鼠学习记忆障碍和减轻复合Aβ对神经损伤,并能抑制NFT异常生成。提示SBF能够改善复合Aβ所致大鼠学习记忆障碍、抑制大鼠脑内NFT增多,其机制可能与抑制tau蛋白多位点过度磷酸化有关,特别是tau蛋白Thr205和Ser214。

关键词：磷酸化水平 tau 半枝莲黄酮大鼠脑 Tau

牛磺酸对重型颅脑创伤大鼠脑线粒体呼吸功能的影响

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中华外科杂志 2010年第6期48卷 466-467页

作者：常小丽黄慧玲莫丽冬范维佳王辰天津医科大学研究生院 300070 天津市环湖医院神经外科研究所

线粒体是产生能量的重要部位。颅脑创伤使得神经元线粒体电子传递链遭到破坏，氧化呼吸功能受损，引起一系列脑供氧减少的级联反应。牛磺酸对肝脏、心肌线粒体的保护作用，国内外报道很多，但牛磺酸对颅脑创伤后脑组织线粒体呼吸功能的... 详细信息

线粒体是产生能量的重要部位。颅脑创伤使得神经元线粒体电子传递链遭到破坏，氧化呼吸功能受损，引起一系列脑供氧减少的级联反应。牛磺酸对肝脏、心肌线粒体的保护作用，国内外报道很多，但牛磺酸对颅脑创伤后脑组织线粒体呼吸功能的影响未见报道，因此我们观察了牛磺酸对脑创伤大鼠脑线粒体呼吸功能的影响，报告如下。

关键词：线粒体呼吸功能重型颅脑创伤牛磺酸大鼠脑神经元线粒体电子传递链心肌线粒体功能受损

大鼠脑线粒体体外蛋白翻译体系的建立及蛋白产物的鉴定

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中国应用生理学杂志 2002年第1期18卷 1-4页

作者：蔡明春柳君泽吴利平第三军医大学病理生理教研室重庆400038 第四军医大学西京医院陕西西安710032

目的 :建立大鼠脑组织线粒体的体外蛋白合成体系并对其合成产物进行电泳分离和分子量鉴定。方法 :分离大鼠脑组织线粒体 ,用3 H 亮氨酸掺入法探索线粒体体外翻译的最佳条件 ,3 5S 蛋氨酸掺入并对翻译后产物经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和... 详细信息

目的 :建立大鼠脑组织线粒体的体外蛋白合成体系并对其合成产物进行电泳分离和分子量鉴定。方法 :分离大鼠脑组织线粒体 ,用3 H 亮氨酸掺入法探索线粒体体外翻译的最佳条件 ,3 5S 蛋氨酸掺入并对翻译后产物经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影进行分子量鉴定。结果 :分离的线粒体氧化磷酸化偶联程度高 ,呼吸控制率(RCR)在 3.5～ 5 .5之间 ;体外3 H 亮氨酸的掺入活性在 6 0min内近似线性增长 ,而后维持在一相对稳定水平 ;3 H 亮氨酸的掺入活性随线粒体蛋白浓度而增加 ,而单位线粒体蛋白的掺入活性在 1mg/ml时最高 ;3 5S 蛋氨酸掺入SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳后可观察到清晰的 8条自显影带 ,分子量分别为 (单位Kda) 86、6 6、5 6、43、33、2 9、2 5、18。结论 :用此方法建立的脑线粒体离体翻译反应体系具有高活性和翻译忠实性等特点。

关键词：线粒体翻译大鼠脑 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白产物鉴定体外翻译体系