检索结果-南通市图书馆

醛糖还原酶(AR)基因对大鼠肾系膜细胞的转染及AR抑制剂对其增殖的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（医学版） 2005年第4期32卷 383-387页

作者：车祺蒋涛林伊凤李慧张农复旦大学上海医学院病理学系上海200032

目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染及AR抑制剂(ARI)对体外培养大鼠肾系膜细胞(MsC)增殖的影响。方法应用Westernblot检测转基因MsC及PDGF作用MsC后AR的表达。四唑蓝比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比大鼠正常MsC和... 详细信息

目的观察醛糖还原酶(AR)基因转染及AR抑制剂(ARI)对体外培养大鼠肾系膜细胞(MsC)增殖的影响。方法应用Westernblot检测转基因MsC及PDGF作用MsC后AR的表达。四唑蓝比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比大鼠正常MsC和转基因MsC的生长情况,并观察ARI———Sorbinil和Zopolrestat对血小板源性生长因子(PDGF)和小牛血清(NBS)促细胞增殖作用的影响。结果①Westernblot鉴定转基因MsCAR表达较正常MsC明显增高;②转染组较正常组生长速度快;③PDGF作用MsC后可上调AR的表达;④PDGF和10%NBS均可显著刺激两组细胞的增殖,ARI可部分抑制PDGF对正常组和转染组的促增殖作用,对10%NBS,ARI可部分抑制其对转染组的促增殖作用,而对正常组无显著影响,抑制作用呈剂量依赖性。结论AR可能参与了MsC在病理状况下的过度增殖过程。

关键词：醛糖还原酶(AR) 大鼠肾系膜细胞抑制剂 Westernblot 血小板源性生长因子促细胞增殖作用促增殖作用 PDGF blot检测 MsC 流式细胞术剂量依赖性转基因 ARI 正常组体外培养基因转染 MTT法细胞周期小牛血清生长速度

金钗石斛总碱对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞增殖及PPAR-γ表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

金钗石斛总碱对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞增殖及PPAR-γ表达的影响

作者：何晓然遵义医学院

学位级别：硕士

目的：观察金钗石斛总碱对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及基质积聚和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达影响影响及其机制。方法：1、金钗石斛干品经酸性乙醇提取后通过强酸性阳离子交换树脂富集,鉴定方法选用气质联用... 详细信息

目的：观察金钗石斛总碱对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及基质积聚和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达影响影响及其机制。方法：1、金钗石斛干品经酸性乙醇提取后通过强酸性阳离子交换树脂富集,鉴定方法选用气质联用分析,总碱含量采用酸性染料比色法测定。2、将大鼠肾系膜细胞分为正常对照组(NC)、高糖对照组(HG)、溶媒对照组(MC)、罗格列酮对照组(ROZ)、金钗石斛总碱低(LD)、中(MD)、高(HD)剂量组,各组细胞3份重复,分别药物作用24h后通过CCK-8法检测细胞增殖情况。3、qPCR法检测GF-β1、FN及PPAR-γ mRNA的表达情况。4、免疫荧光细胞化学法、酶联免疫法、免疫印迹法分别检测FN、TGF-β1, PPAR-γ的蛋白表达情况。结果：①金钗石斛提取物总碱为黄褐色晶体颗粒,不溶于水,易溶于甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂,经气质联用检测分析,确定为金钗石斛碱成分,酸性染料比色法测定总碱含量约为69%;②CCK-8法检测发现,金钗石斛总碱各组细胞增殖率均低于高糖模型组(P0.05);⑤Western blot检测PPAR-γ蛋白表达,金钗石斛总碱中、低剂量组表达量相较于高糖模型组无统计学意义(P>0.05),金钗石斛总碱高剂量组降低(P肾系膜细胞的增殖,并对纤维粘连蛋白及转化生长因子的表达有下调;对PPAR-γ mRNA及蛋白表达检测发现,其表达量并未上调,推测金钗石斛总碱对PPAR-γ并无激活作用。金钗石斛总碱对高糖诱导的大鼠肾系膜细胞增殖及TGF-β1、FN的抑制作用并非通过PPAR-γ信号转导途径。

关键词：金钗石斛总碱大鼠肾系膜细胞细胞增殖基质积聚

转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞MMP-2、uPA及Col Ⅳ表达的改变

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

临床与实验病理学杂志 2004年第1期20卷 83-86页

作者：于鸿汪怡王小刚陈琦张秀荣郭慕依复旦大学上海医学院病理学系上海200032

目的　通过大鼠肾小球系膜细胞 (mesangialcell,MsC)转染Smad7基因 ,观察转基因MsCMMP 2、uPA和ColⅣ表达的改变 ,以阐明Smad7在肾小球硬化发生中的作用及其机制。方法　经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC ,用G4 18筛选及... 详细信息

目的　通过大鼠肾小球系膜细胞 (mesangialcell,MsC)转染Smad7基因 ,观察转基因MsCMMP 2、uPA和ColⅣ表达的改变 ,以阐明Smad7在肾小球硬化发生中的作用及其机制。方法　经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC ,用G4 18筛选及Westernblot、RT PCR法鉴定 ;采用Westernblot、酶谱分析和RT PCR法 ,检测转染阳性MsC克隆MMP 2、uPA和ColⅣ表达改变。结果　成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆 (S 2 2 ,S 2 6 ) ,并证实其MMP 2蛋白分泌和酶活性明显增加 ,以及uPAmRNA及其蛋白的表达明显增强 ,并伴有MsCColⅣ合成的显著下降。结论　Smad7可能通过增强MsCMMP 2。

关键词：转染Smad7基因大鼠肾系膜细胞 MMP-2 uPA ColⅣ表达肾小球硬化

转染Smad2基因的大鼠肾系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原表达的改变（摘要）

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（医学版） 2005年第5期32卷 575-575页

作者：王小刚于鸿陈琦赵仲华张志刚郭慕依复旦大学上海医学院病理学系上海200032

目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad 2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制.方法经磷酸钙介... 详细信息

目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad 2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制.方法经磷酸钙介导将含有Smad 2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析法鉴定,又分别采用Western印迹分析法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染阳性细胞克隆FN及ColⅣ表达的改变.结果成功建立高表达Smad 2蛋白的阳性MsC克隆(T-12、T-31、T-35、T-40),并证实其FN及ColⅣ的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调.阳性MsC克隆FN蛋白为对照组2.4倍(P＜0.05),mRNA为对照组的2.7倍(P＜0.05);阳性MsC克隆ColⅣ蛋白为对照组的2.9倍(P＜0.01),mRNA为对照组的3.3倍(P＜0.01).结论TGF-β/Smad信号转异途径中Smad 2可能是促进FN及ColⅣ在肾小球中积聚,是导致肾小球硬化发生的重要信号转导分子.

关键词： Smad2基因大鼠肾系膜细胞纤连蛋白 Ⅳ型胶原 Western印迹分析转染胶原表达 ColⅣ表达逆转录-聚合酶链反应

Losartan下调高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β受体的表达

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国现代医学杂志 2008年第23期18卷 3425-3428,3432页

作者：郭志新邱明才山西医科大学第二医院内分泌科山西太原030001 天津医科大学总医院内分泌科天津300052

目的观察血管紧张素II受体拮抗剂losartan对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β受体表达的影响。方法取4～8代系膜细胞进行实验。系膜细胞转种在50mL塑料培养瓶和置有消毒盖玻片的24孔培养板中培养。系膜细胞长至亚融合状态时,换成无血... 详细信息

目的观察血管紧张素II受体拮抗剂losartan对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β受体表达的影响。方法取4～8代系膜细胞进行实验。系膜细胞转种在50mL塑料培养瓶和置有消毒盖玻片的24孔培养板中培养。系膜细胞长至亚融合状态时,换成无血清RPMI-1640培养基培养24h,使细胞同步于静止期,然后分为4组:低糖(LG)组:加10%FBS RPMI-1640培养液(葡萄糖浓度为5.6mmol/L);低糖+D-甘露醇(LG+M)组:加D-甘露醇(D-Mannitol)24.4mmol/L和10%FBS RPMI-1640培养液(葡萄糖浓度为5.6mmol/L);高糖(HG)组:加10%FBS RPMI-1640高糖培养液(葡萄糖浓度为30mmol/L);高糖+losar-tan(HG+L)组:加losartan10-5mol/L和10%FBS RPMI-1640高糖培养液(葡萄糖浓度为30mmol/L)。各组系膜细胞继续培养72h。每3瓶细胞作为1组,用半定量RT-PCR检测各组系膜细胞转化生长因子βI型受体(TβRI)、转化生长因子βII型受体(TβRII)和纤维连接蛋白(FN)mRNA的表达。24孔培养板中每4孔作为1组,用免疫组织化学检测各组系膜细胞TβRI、TβRII和FN蛋白表达。结果HG组TβRI、TβRII和FN mRNA表达以及TβRI、TβRII蛋白表达显著高于LG组和LG+M组(P0.05)。结论高糖上调肾小球系膜细胞TGF-β受体和FN的表达,其作用与渗透压无关。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂losartan能逆转高糖的上述作用,从而产生肾保护作用。

关键词： Losartan 高糖大鼠肾系膜细胞 TGF-β受体