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藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

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中草药 2017年第14期48卷 2912-2917页

作者：刘伟石林琳石晏丞巴珂李佳川顾健西南民族大学药学院四川成都610000

目的通过研究藏药波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对大鼠肝星状HSC-T6细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用,进一步探讨TLHPS抗肝纤维化的作用机制。方法实验分为对照组,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组,阳性药秋水仙碱0.1μg/mL组。用加入各组... 详细信息

目的通过研究藏药波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对大鼠肝星状HSC-T6细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用,进一步探讨TLHPS抗肝纤维化的作用机制。方法实验分为对照组,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组,阳性药秋水仙碱0.1μg/mL组。用加入各组药物的培养基分别培养HSC-T6细胞24、48、72 h,采用CCK8法检测各组细胞24、48、72 h的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blotting法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、核转录因子-κB(NF-κB)的表达水平。结果与对照组相比,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组对HSC-T6细胞24、48、72 h时的增殖抑制率明显增高(P细胞早期凋亡率与晚期凋亡率明显升高(P细胞数明显增多(P细胞数无明显差异(P>0.05),S期细胞数明显减少(P肝星状细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：波棱瓜子总木脂素大鼠肝星状细胞增殖凋亡 Bcl-2 Bax 核转录因子-κB

红景天苷抗大鼠肝星状细胞氧应激脂质过氧化作用的研究

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中药材 2005年第9期28卷 794-796页

作者：张奕刘永刚华南理工大学医院药剂科广州510640 武警广东总队医院药剂科广州510507

目的:探讨红景天苷(Salidroside,SDS)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)氧应激所致脂质过氧化的作用。方法:HSC与FeNTA共同培养产生氧应激。以MTT法测定红景天苷对HSC增殖的效应;LDH法测定红景天苷对HSC的毒性作用;以ELISA... 详细信息

目的:探讨红景天苷(Salidroside,SDS)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)氧应激所致脂质过氧化的作用。方法:HSC与FeNTA共同培养产生氧应激。以MTT法测定红景天苷对HSC增殖的效应;LDH法测定红景天苷对HSC的毒性作用;以ELISA法测定细胞培养液中Ⅰ型胶原的水平;以试剂盒分别测定细胞培养液中MDA、GSH、GSH-PX、SOD水平。结果:HSC与FeNTA共同培养后,细胞内MDA、GSH水平明显升高,GSH-PX、SOD活力明显降低,并能明显促进HSC增殖和提高细胞培养上清中Ⅰ型胶原的水平。红景天苷可以逆转上述所有FeNTA所致效应。结论:红景天苷抗肝纤维化作用可能与其抑制脂质过氧化有关。

关键词：红景天苷肝星状细胞氧应激肝纤维化氧应激脂质过氧化作用大鼠肝星状细胞 GSH-PX 抗肝纤维化作用细胞培养液 SOD活力

盐霉素抑制大鼠肝星状细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的研究

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中国临床药理学杂志 2021年第2期37卷 115-118页

作者：罗玉平黄璐王正根南华大学附属第二医院临床药学科湖南衡阳421001 南华大学附属第二医院消化内科湖南衡阳421001

目的研究盐霉素抑制大鼠肝星状细胞胶原蛋白合成的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6),以酶联免疫吸附(ELISA)法检测HSC-T6上清液中Ⅰ型(ColⅠ)和Ⅲ型(ColⅢ)胶原蛋白的分泌,以实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)和蛋白质... 详细信息

目的研究盐霉素抑制大鼠肝星状细胞胶原蛋白合成的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6),以酶联免疫吸附(ELISA)法检测HSC-T6上清液中Ⅰ型(ColⅠ)和Ⅲ型(ColⅢ)胶原蛋白的分泌,以实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路下游蛋白β-catenin、cyclinD1的表达,以荧光素酶报告基因检测β-catenin/T细胞因子(TCF)的转录活性。结果ELISA结果显示,低、中、高浓度实验组ColⅠ水平分别为6.68±0.57,4.15±0.61,3.02±0.42,ColⅢ水平分别为5.61±0.55,3.19±0.43,2.28±0.36,且呈现浓度依赖性,而对照组ColⅠ和ColⅢ的水平分别为5.42±0.53,4.59±0.49,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Real time-PCR和Western blot检测结果显示,盐霉素能显著下调Wnt/β-catenin通路下游β-catenin、cyclinD1蛋白的表达,且呈浓度依赖性,高浓度盐霉素抑制作用大于秋水仙碱(均P<0.05)。实验组TOPFlash报告基因荧光素酶活性显著下降,且在高浓度实验组下降最为显著(均P<0.05),提示盐霉素能显著下调β-catenin/TCF转录活性,且呈浓度依赖性,而秋水仙碱下调β-catenin/TCF转录活性强度大于高浓度实验组(P<0.05)。结论盐霉素通过下调Wnt/β-catenin通路活性抑制HSC-T6的胶原蛋白合成,从抑制肝纤维化,且抗纤维化效果优于秋水仙碱组。

关键词：盐霉素肝纤维化大鼠肝星状细胞 Wnt/β-连环蛋白信号通路胶原蛋白

荔枝核总黄酮对大鼠肝星状细胞的增殖抑制作用及对蛋白TGF-β_1和а-SMA表达的影响

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时珍国医国药 2012年第10期23卷 2502-2504页

作者：孙旭锐覃浩靳雅玲欧士钰罗伟生桂林医学院附属医院广西桂林541004

目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其作用机制。方法 MTT法测定TFL对HSC-T6的增殖抑制;吖啶橙染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。Western Blot检测细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白表达。结果 MTT... 详细信息

目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及其作用机制。方法 MTT法测定TFL对HSC-T6的增殖抑制;吖啶橙染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期。Western Blot检测细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白表达。结果 MTT结果显示,TFL对HSC-T6具有增殖抑制活性(P细胞中出现核浓缩、核碎裂及致密浓染亮绿色凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示,对照组细胞G1期细胞比例为(47.68±2.92)%,G2期为(19.58±2.93)%,S期为(32.75±2.09)%;TFL药物处理组细胞G1期细胞数量增加,而G2期细胞显著减少,与对照组比较,P细胞中TGF-β1和а-SMA蛋白,随药物浓度增加,其表达呈下降趋势,与对照组比较,100 mg/ml及120 mg/ml药物浓度组的TGF-β1和а-SMA蛋白表达明显降低(P细胞TGF-β1和а-SMA蛋白表达,达到阻滞细胞增殖周期和诱导细胞凋亡。

关键词：荔枝核总黄酮大鼠肝星状细胞增殖抑制 TGF-β1a-SMA

青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达的影响

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中国医院药学杂志 2015年第6期35卷 506-510页

作者：张洪齐倩熊远果张英彭锐武汉大学人民医院药学部湖北武汉430060

目的：探讨青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞增殖并可促进细胞凋亡的作用机制。方法：大鼠肝星状细胞体外培养,分别用含梯度质量浓度（0,1,5,12.5,25,37.5μg·ml-1）青蒿琥酯的培养基培养24 h。采用Western blot方法检测青蒿琥酯对大鼠肝星... 详细信息

目的：探讨青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞增殖并可促进细胞凋亡的作用机制。方法：大鼠肝星状细胞体外培养,分别用含梯度质量浓度（0,1,5,12.5,25,37.5μg·ml-1）青蒿琥酯的培养基培养24 h。采用Western blot方法检测青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞HSC-T6内Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响;采用实时荧光定量PCR方法检测随着药物浓度的变化在RNA水平上的变化。结果：0-37.5μg·ml-1的青蒿琥酯作用大鼠肝星状细胞24 h后蛋白β-catenin和GSK-3β（ser9）逐渐降低（P〈0.05）并且有一定的剂量相关性,而GSK-3β逐渐升高（P〈0.05）。实时定量PCR结果提示,1-37.5μg·ml-1的青蒿琥酯能抑制β-catenin的表达,且呈剂量相关性。但是GSK-3β在低剂量青蒿琥酯（1-12.5μg·ml-1）的时候并无明显变化（P〉0.05）,在高剂量青蒿琥酯（12.5-37.5μg·ml-1）抑制GSK-3β的表达（P〈0.05）。结论：青蒿琥酯抑制大鼠肝星状细胞与Wnt/β-catenin信号通路相关。

关键词：青蒿琥酯大鼠肝星状细胞 Wnt/β-catenin

白细胞介素7对转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞的影响

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中华传染病杂志 2012年第6期30卷 330-333页

作者：方红龙吴金明张雪琴吴建胜黄智铭温州医学院附属第一医院消化科 325000

肝星状细胞（HSC）的活化和增殖是肝纤维化形成的关键环节。转化生长因子（TGF）B1可通过HSC内的TGFβ1／Smads信号通路促进纤维化的发生发展，被认为是调控肝纤维化的核心物质。抑制TGFβ1合成或其信号传导已证明能拮抗HSC活化与细胞... 详细信息

肝星状细胞（HSC）的活化和增殖是肝纤维化形成的关键环节。转化生长因子（TGF）B1可通过HSC内的TGFβ1／Smads信号通路促进纤维化的发生发展，被认为是调控肝纤维化的核心物质。抑制TGFβ1合成或其信号传导已证明能拮抗HSC活化与细胞外基质的产生，成为抗肝纤维化的主要目标。IL-7是在骨髓中最早发现的一种细胞因子，以往研究证实其能通过上调成纤维细胞Smad7的表达抑制TGFβ1／Smads信号通道，具有抗纤维化的作用口。本实验旨在了解IL-7在肝纤维化中的作用，并探讨其作用的分子机制。

关键词：转化生长因子β1 大鼠肝星状细胞白细胞介素7 肝纤维化形成 TGFβ1 Smads IL-7 细胞外基质

草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞体外增殖与凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2012年第15期18卷 246-250页

作者：金春丽朴熙绪李春浩金永日金海燕黄媛延边大学附属医院吉林延吉133000 延边肿瘤医院吉林延吉133000

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Ann... 详细信息

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Annexin V与碘化丙啶(PI)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察药物作用后细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果:①MTT实验表明草苁蓉乙醇提取物能抑制HSC-T6细胞增殖,并显出量效和时效关系。0.75 g·L-1草苁蓉刺激12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的抑制率分别为(44.58±1.42)%,(51.56±1.34)%,(63.83±0.99)%,(74.77±3.40)%(P细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等。③草苁蓉处理后HSC-T6被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,且表现出明显量效关系。0.75 g·L-1草苁蓉乙醇提取物改变HSC-T6周期分布,使G0/G1期细胞由(50.33±0.80)%增至(61.46±1.07)%,表现出G0/G1期阻滞;同时诱导HSC-T6凋亡,凋亡率由(1.44±0.43)%增至(14.20±0.98)%(P细胞增殖,其作用可能与诱导细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关。

关键词：草苁蓉乙醇提取物大鼠肝星状细胞细胞增殖细胞凋亡肝纤维化

姜黄素对大鼠肝星状细胞中TGF-β调节的NADPH氧化酶4的激活及Smad信号通路的影响

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安徽医科大学学报 2015年第3期50卷 319-323页

作者：王雅蕊李俊黄成李小枫李晓慧王欢安徽医科大学药学院合肥230032 安徽医科大学肝病研究所合肥230032 安徽创新药物产业共性技术研究所合肥230032

目的研究姜黄素潜在的抗纤维化作用,以及转化生长因子β(TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后,用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响;用RT-PCR法检测其mRNA水平... 详细信息

目的研究姜黄素潜在的抗纤维化作用,以及转化生长因子β(TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞(HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后,用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响;用RT-PCR法检测其mRNA水平的表达;用Westem blot法检测表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外基质主要成分α1I胶原(Col1α1)、NADPH氧化酶4(NOX 4)、Smad 2、Smad 3及其磷酸化的水平。结果 40μmol/L的姜黄素组刺激HSC-T6 48 h后,其抑制率达到最大,显著低于仅TGF-β1刺激组、5、10及20μmol/L姜黄素组(P细胞外基质的沉积;有效降低了NOX 4的蛋白水平,减少了活性氧的水平;还明显降低Smad2、Smad 3的磷酸化程度,呈浓度依赖性。结论姜黄素在体外能够明显地抑制HSC-T6激活,对肝纤维化的发生发展具有一定抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β诱导的NOX4的激活及Smad信号通路有关。

关键词：姜黄素大鼠肝星状细胞转化生长因子β NADPH氧化酶4 Smad蛋白

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铁超载对大鼠肝星状细胞的影响

中国病理生理杂志 2015年第10期 1917-1918页

作者：张颖河北中医学院基础医学院病理教研室

目的:研究铁超载对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响以初步证实铁超载对肝纤维化的促进作用。方法:大鼠肝星状细胞HSC-T6给予硫酸亚铁2μmol/L负载24 h,正常对照组给予DMSO 2μmol/L。免疫荧光染色法观察铁在HSC-T6中的分布面积,流式细... 详细信息

目的:研究铁超载对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响以初步证实铁超载对肝纤维化的促进作用。方法:大鼠肝星状细胞HSC-T6给予硫酸亚铁2μmol/L负载24 h,正常对照组给予DMSO 2μmol/L。免疫荧光染色法观察铁在HSC-T6中的分布面积,流式细胞术检测HSC-T6增殖,TUNEL法检测HSC-T6凋亡,Western blot检测HSC-T6基质金属蛋白酶1(MMP-1)和金

关键词：铁超载大鼠肝星状细胞 HSC