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延髓头端腹外侧区的大麻素一型受体对自发性高血压大鼠发病机制的研究

延髓头端腹外侧区的大麻素一型受体对自发性高血压大鼠发病机制的...

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作者：李国旗河北医科大学

学位级别：硕士

高血压(hypertension)是常见严重危害人类健康的一种全身性心血管系统疾病。近50年来,高血压病患者几乎按几何级数增长,已成为全球范围内的最大公共卫生问题。虽然众多学者从多方面对高血压的发病机理进行了广泛的研究,仍有90%的高血压... 详细信息

高血压(hypertension)是常见严重危害人类健康的一种全身性心血管系统疾病。近50年来,高血压病患者几乎按几何级数增长,已成为全球范围内的最大公共卫生问题。虽然众多学者从多方面对高血压的发病机理进行了广泛的研究,仍有90%的高血压病人病因不清。长期高血压会导致心、脑、肾等重要脏器的慢性损害,严重危害人民的健康。因此,如何防治高血压,降低心、脑血管病的发病率和死亡率,提高人们生活质量是目前有待解决的重大医学问题。延髓头端腹外侧区(rostral ventrolateral medulla,RVLM)是交感神经兴奋性的主要来源,是中枢调控心血管的重要部位之一。研究表明,高血压时交感中枢兴奋性增强主要与RVLM区的前交感神经元紧张性活动有关,RVLM神经元发出的轴突穿行于延髓背内侧区直接到达脊髓胸腰段中间外侧柱的交感节前神经元(Sympathetic peganglinoic neurons,PSNS),是调控血压的最后通路。大麻素一型受体(cannabinoid type 1 receptor CB1R)主要存在于脑组织中,也称中枢性大麻素受体。在中枢神经系统中,CB1R高度表达于前脑、基底核、小脑、海马和大脑皮层,与肥胖、血脂异常、高血压、疼痛和糖尿病等多种生理活动紧密联系。此外CB1R分布在多种神经元的突触前,参与调节多种神经递质的释放。自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)是学者Aoki和Okamoto利用Wistar大鼠培育的而获得具有稳定的高血压遗传性的大鼠。SHR出生后血压随鼠龄而升高,3至4个月时为高血压确立期,6个月时血压升高到顶峰,成鼠血压水平一般>200 mm Hg。因此SHR是研究高血压的病理,生理,药理等方面的理想动物模型。本研究采用雄性SHR作为研究对象,探究大麻素一型受体在延髓头端腹外侧区(RVLM)对血压调节的潜在机制。目的:1观察RVLM区大麻素一型受体(CB1R)激动剂在SHR和Wistar大鼠心血管调控中的作用。2检测SHR和Wistar大鼠的RVLM区内CB1R的表达量,以及观察RVLM区内神经细胞CB1R密度分布和RVLM区内CB1R与儿茶酚胺类神经元,谷氨酸能神经元和GABA能神经元(γ氨基丁酸能神经元)的共定位情况。方法:1首先将SHR或Wistar大鼠麻醉,之后做气管插管保持机械性通气,左侧股动脉插管监测动脉血压。左侧背部开口打开腹腔分离肾神经,同时记录左侧肾交感神经放电(renal sympathetic nerve activity,RSNA);脑定位之后,RVLM区微量注射大麻素一型受体激动剂acea(Arachidonyl-2-chloroethylamide)、大麻素一型受体拮抗剂AM251,观察其对SHR和Wistar大鼠的动脉血压和RSNA的作用。2通过western blot的方法和免疫荧光的方法检测SHR和Wistar大鼠RVLM区CB1R表达量。3通过免疫荧光双标的方法观察CB1R在SHR和Wistar大鼠的RVLM区不同的神经细胞上的表达,CB1R在儿茶酚胺类神经元,谷氨酸能神经元和GABA能神经元上的表达情况。结果:1基础状态下,SHR的动脉血压和肾交感神经放电显著高于Wistar大鼠,并且在SHR和Wistar大鼠RVLM区微量注射选择性大麻素一型受体激动剂acea(10μmol/L,100μmol/L,1mmol/L)浓度依赖性的升高血压和增强肾交感神经放电。acea(100μmol/L和1mmol/L)对SHR血压程度升高显著高于Wistar大鼠。此外,大麻素一型受体阻断剂AM251(10μmol/L)能够显著阻断acea(100μmol/L)升高血压和增强肾交感神经放电的效应。2通过Western blot的结果显示,SHR的RVLM区CB1R表达量显著高于Wistar大鼠。通过免疫荧光的方法显示,SHR的RVLM区内CB1R在神经细胞上的光密度值显著高于Wistar大鼠。3免疫荧光双标实验表明无论SHR还是Wistar大鼠CB1R在儿茶酚胺类神经元、谷氨酸能神经元以及GABA能神经元均有共定位情况。结论:自发性高血压大鼠SHR由于RVLM区内CB1R的上调,提高中枢兴奋性,引起外周交感神经兴奋,外周血管收缩,导致血压升高。

关键词：大麻素一型受体大麻素一型受体激动剂acea 高血压延髓头端腹外侧区自发性高血压大鼠

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