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大豆凝集素的分离纯化及活性鉴定

吉林大学学报（理学版） 2012年第5期50卷 1041-1044页

作者：车东升刘飞飞穆成龙张海全孙泽威秦贵信吉林农业大学动物生产及产品质量安全教育部重点实验室动物科学技术学院长春130118

以D-半乳糖胺为配基、FF-sepharose 4B为固定相,制备大豆凝集素亲和层析填料.分离和纯化大豆中的大豆凝集素蛋白,测定其纯度、免疫原性和凝集活性,并与美国Sigma公司的标准品比较.结果表明:每毫升GalN-FF-Sepharose-4B层析填料能结合10... 详细信息

以D-半乳糖胺为配基、FF-sepharose 4B为固定相,制备大豆凝集素亲和层析填料.分离和纯化大豆中的大豆凝集素蛋白,测定其纯度、免疫原性和凝集活性,并与美国Sigma公司的标准品比较.结果表明:每毫升GalN-FF-Sepharose-4B层析填料能结合10 mg大豆凝集素;纯化获得的大豆凝集素分子量为30 000;SDS-PAGE测定纯度大于98%;Western blot结果为阳性;1 mg/mL SBA血集效价为1/210;其纯度、免疫原性和凝集活性等指标与大豆凝集素标准品相同,与理论值相符.

关键词：大豆凝集素纯化亲和层析

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大豆凝集素基因Le2克隆及转化

大豆科学 2011年第4期30卷 706-709页

作者：方标王丕武于雷卢春蕾吉林农业大学农学院吉林长春130118

大豆凝集素对提高植物的抗虫性有重要作用。应用基因工程手段,克隆大豆凝集素基因Le2,构建植株表达载体pSy-Le2,将大豆凝集素Le2基因通过农杆菌介导法导入烟草中,经过筛选获得转基因植株,为进一步鉴定Le2的基因功能提供了试验基础。

关键词：大豆凝集素基因工程抗虫性农杆菌烟草

大豆凝集素在兔消化道不同部位内的免疫活性残留

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大豆科学 2009年第3期28卷 524-527页

作者：王利民王彬胡海霞秦贵信吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

为揭示大豆凝集素在兔消化道不同部位的食糜中免疫活性的残留规律,用经N-乙酰基-D-半乳糖胺-epox-y-sepharose6B亲和层析体系纯化的大豆凝集素制备兔抗大豆凝集素多克隆抗体,建立大豆凝集素间接抑制ELISA定量检测方法,检测下限低于***-... 详细信息

为揭示大豆凝集素在兔消化道不同部位的食糜中免疫活性的残留规律,用经N-乙酰基-D-半乳糖胺-epox-y-sepharose6B亲和层析体系纯化的大豆凝集素制备兔抗大豆凝集素多克隆抗体,建立大豆凝集素间接抑制ELISA定量检测方法,检测下限低于***-1。以含质量分数为20%生大豆和1%Cr2O3(外源指示剂)的日粮饲喂未接触过大豆制品的兔(75日龄)14d,最后一次进食后2h,检测其胃、十二指肠、空肠前段、空肠中段、空肠后段、回肠、盲肠和结肠食糜中具免疫活性的大豆凝集素残留率分别为(74.33±2.57)%、(37.68±1.91)%、(12.15±1.97)%、(8.94±1.17)%、(7.34±1.45)%、(3.72±1.21)%、(2.04±1.19)%和(1.47±0.42)%。结果表明:在兔的消化道不同部位内均能检测到具有免疫活性的大豆凝集素,且由前向后总地呈下降的趋势,其中由胃到十二指肠和由十二指肠到空肠前段的残留率变化均达到了极显著水平(P<0.01)。

关键词：大豆凝集素兔消化道免疫活性残留

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大豆凝集素结构及其活性测定方法的研究进展

大豆科学 2009年第1期28卷 160-163页

作者：张柏林秦贵信刘宁孙泽威赵元王涛王波吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

大豆凝集素是大豆中重要的蛋白质之一,同时也是大豆中主要的抗营养因子之一。自被发现半个世纪以来,大豆凝集素在糖生物化学、血型鉴定、生物医药等领域有着广泛的应用。综述大豆凝集素结构及其活性测定方法,为研究者进一步了解大豆凝... 详细信息

大豆凝集素是大豆中重要的蛋白质之一,同时也是大豆中主要的抗营养因子之一。自被发现半个世纪以来,大豆凝集素在糖生物化学、血型鉴定、生物医药等领域有着广泛的应用。综述大豆凝集素结构及其活性测定方法,为研究者进一步了解大豆凝集素不同活性测定方法之间的差异,选择合适的大豆凝集素活性测定方法提供依据。

关键词：大豆凝集素结构活性测定方法

大豆凝集素的纯化及其凝集不同肿瘤细胞的探讨

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第3期19卷 401-405页

作者：荆剑赵翔张页北京大学医学部细胞生物学与遗传学系北京100083

A novel and efficient method for purification of soybean agglutinin (SBA) from soybean was reported. The method was characterized by selective extraction of SBA from soybean homogenate with barbiturate buffer (pH 6 2), removal of impurity by hydroxyapatite, and the final purification of SBA by guaran affinity chromatography. The purified SBA showed a single band of 27 5 kD by SDS PAGE. The lowest concentration of SBA that caused agglutination of the rabbit red blood cells was 0 31 mg/L. Agglutination of different cancer cell lines by the purified SBA was examined. Strong agglutination of the human nasopharyngeal CNE cells, mouse Lewis lung carcinoma cells, and rat mammary adenocarcinoma R3230AC cells was observed. However, SBA could not agglutinate the human hepatocellular carcinoma BEL 7402 cells, suggesting that unlike the above mentioned three cell lines, the BEL 7402 cells may not express N acetylgalactosamine (GalNAc) or galactose (Gal) residues in significant amount at the non reducing terminals of their cell surface glycans.

关键词：大豆凝集素纯化肿瘤细胞凝集反应

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大豆凝集素及其对动物健康的影响

大豆科学 2007年第2期26卷 259-263页

作者：吴莉芳秦贵信孙玲朱丹吉林农业大学动物科技学院长春130118

大豆来源广、营养价值高、氨基酸组成基本平衡。是畜禽及水产动物主要的植物蛋白源之一。但是,大豆中含有抗营养因子,大豆凝集素是大豆中主要抗营养因子之一。对动物营养物质的消化吸收产生影响,不仅会影响动物的生长,而且大豆凝集素能... 详细信息

大豆来源广、营养价值高、氨基酸组成基本平衡。是畜禽及水产动物主要的植物蛋白源之一。但是,大豆中含有抗营养因子,大豆凝集素是大豆中主要抗营养因子之一。对动物营养物质的消化吸收产生影响,不仅会影响动物的生长,而且大豆凝集素能够与肠道上皮细胞结合,影响肠道的结构和功能,影响消化酶的活性,甚至对动物机体的全身都会产生一定的影响。本文概述了凝集素和大豆凝集素的含义和分类,大豆凝集素的生物学功能及对动物健康的影响,旨在为开发利用大豆蛋白源提供依据。

关键词：大豆凝集素动物健康影响

大豆凝集素le2基因RNA干扰表达载体构建及转化的研究

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大豆科学 2013年第3期32卷 306-309页

作者：魏强李鲁华王春艳付永平马建曲静王丕武吉林农业大学农学院吉林长春130118

以构建RNA干扰表达体系,探索改良大豆品质方法为目的,根据GenBank中已知的大豆凝集素le2基因核酸保守序列(AY342212),设计相应引物,克隆le2基因核心保守序列,测序并与原序列比对同源性为99.77%。以质粒p3301-PFNZ-α'作为基础载体,通过... 详细信息

以构建RNA干扰表达体系,探索改良大豆品质方法为目的,根据GenBank中已知的大豆凝集素le2基因核酸保守序列(AY342212),设计相应引物,克隆le2基因核心保守序列,测序并与原序列比对同源性为99.77%。以质粒p3301-PFNZ-α'作为基础载体,通过亚克隆构建含有RNA干扰元件和bar基因的表达载体pCAMBIA3301-le2RNAi。通过农杆菌转化法将RNA干扰表达载体导入受体大豆吉农28,获得PCR阳性T1代植株5株,种子23粒。研究结果为大豆品质改良奠定了基础。

关键词： RNA干扰大豆凝集素载体构建遗传转化

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大豆凝集素批量提取方法及工艺的优化

吉林农业大学学报 2022年

作者：赵进鹏秦贵信刘佳伟鄂天姣潘丽鲍男赵元吉林农业大学动物科学技术学院动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林省动物营养与饲料科学重点实验室

为实现大豆凝集素批量提取，本研究在原有实验条件的基础上，将SBA浸提条件和纯化条件进行了优化。优化SBA浸提条件为浸提液选取0.9% NaCl溶液和PBS(pH 7.4)缓冲液，温度选取4 ℃和室温，时间为6、12、24h，结合BCA蛋白浓度测定结果、SD... 详细信息

为实现大豆凝集素批量提取，本研究在原有实验条件的基础上，将SBA浸提条件和纯化条件进行了优化。优化SBA浸提条件为浸提液选取0.9% NaCl溶液和PBS(pH 7.4)缓冲液，温度选取4 ℃和室温，时间为6、12、24h，结合BCA蛋白浓度测定结果、SDS-PAGE鉴定结果和凝集活性试验结果确定最佳浸提条件。SBA纯化方法的优化为，在原有异丙醇体积的基础上，根据瓜尔胶与氢氧化钠和3-氯环氧丙烷的比例，适当增加瓜尔胶粉末的重量，提高交联瓜尔多糖凝胶制备的效率，将SBA粗提液与瓜尔胶搅拌后亲和层析，实现纯化优化。浸提条件优化试验结果表明：在相同的温度和浸提液条件下，不同时间浸提蛋白浓度均为差异不显著(P >0.05)；在相同时间和浸提液条件下，室温中浸提蛋白质的浓度显著高于4℃(P 大豆凝集素得率均显著高于其他方案(P 大豆凝集素得率均显著高于小型层析柱(P 大豆凝集素的产率为542.72±16.97 mg·100 g-1，SBA纯度约为93.4%，活性与标准品SBA相一致。因此，室温条件下选择PBS(pH 7.4)溶液浸提6h作为浸提条件，结合优化后制胶方案大型层析柱提取蛋白效率较以往试验提升约4倍，该工艺可为大豆凝集素批量化生产技术支持。

关键词：大豆凝集素浸提纯化瓜尔胶红细胞凝集

大豆凝集素诱导动物肠道损伤的抗营养机制的研究进展

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中国兽医学报 2022年第6期42卷 1295-1301页

作者：刘佳伟赵进鹏鄂天姣潘丽鲍男赵元秦贵信吉林农业大学动物科学技术学院吉林省动物营养与饲料科学重点实验室吉林长春130118

大豆凝集素(soybean agglutinin, SBA)是大豆中主要的抗营养因子,约占成熟大豆蛋白的10%。SBA可与小肠上皮细胞发生特异性结合,产生抗营养作用,阻碍动物营养吸收,降低动物生产性能,引起动物肠道疾病。随着对SBA的不断研究,SBA对上皮细... 详细信息

大豆凝集素(soybean agglutinin, SBA)是大豆中主要的抗营养因子,约占成熟大豆蛋白的10%。SBA可与小肠上皮细胞发生特异性结合,产生抗营养作用,阻碍动物营养吸收,降低动物生产性能,引起动物肠道疾病。随着对SBA的不断研究,SBA对上皮细胞的形态、细胞增殖、凋亡、自噬以及信号传导途径的影响有了一些新的发现。本研究对SBA的理化性质和生物学功能进行了简述,着重论述SBA对动物肠道的组织结构和肠上皮细胞生物学功能的影响,并重点从细胞生物学、分子生物学和蛋白质组学等角度揭示SBA的抗营养机制,为降低或阻断SBA的抗营养作用,以及饲料加工技术的优化和生物医药产品的研发具有重要意义。

关键词：大豆凝集素肠道上皮细胞抗营养机制细胞生物学