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大脑中动脉栓塞模型大鼠海马组织circRNA-miRNA-mRNA三元转录网络分析

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中国病理生理杂志 2022年第3期38卷 479-486页

作者：陈博威唐荣梅徐雅倩易健刘柏炎湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的:探讨脑缺血模型大鼠海马组织中差异表达的环状RNAs(circRNAs)及信使RNAs(mRNAs),并进行circRNA-微小RNA(miRNA)-mRNA三元转录网络的构建。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组8只,其中每组用于神经行为学评分8只,尼氏染... 详细信息

目的:探讨脑缺血模型大鼠海马组织中差异表达的环状RNAs(circRNAs)及信使RNAs(mRNAs),并进行circRNA-微小RNA(miRNA)-mRNA三元转录网络的构建。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组8只,其中每组用于神经行为学评分8只,尼氏染色4只,对照组基因芯片检测4只,模型组基因芯片检测3只。模型组大鼠使用大脑中动脉栓塞法(MCAO)复制脑缺血模型。7 d后采用神经行为学评分和尼氏染色验证造模成功,Agilent竞争性内源RNA(ceRNA)芯片筛选差异表达的circRNAs及mRNAs,通过GO功能和KEGG通路富集分析差异基因参与的主要生物学过程,RT-qPCR验证基因芯片结果,最后构建circRNA-miRNA-mRNA转录网络。结果:与对照组相比,模型组大鼠神经行为学评分显著升高(P<0.01),并出现海马神经元损伤。ceRNA芯片筛选出脑缺血大鼠海马组织中有18个差异表达的circRNAs和836个差异表达的mRNAs(FC≥1.5,P<0.05)。RT-qPCR验证结果显示,随机挑选的RNO_CIRCpedia_136、RNO_CIRCpedia_5686、RNO_CIRCpedia_9127及α-血红蛋白稳定蛋白(Ahsp)在模型组中表达下调(P<0.05或P<0.01),分泌型磷蛋白1(Spp1)及清道夫受体1(Msr1)在模型组中表达上调(P<0.01),与基因芯片结果的变化趋势一致。构建了由3个circRNAs、4个miRNAs及9个mRNAs组成的三元转录网络。生物信息学分析显示这些差异基因可能通过血管内皮生长因子信号通路、Toll样受体信号通路、Janus激酶-信号转导及转录激活因子信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路及Hedgehog信号通路等调控脑缺血损伤。结论:脑缺血大鼠海马组织存在差异表达的circRNAs和mRNAs,这些差异基因可能通过circRNAmiRNA-mRNA三元转录网络系统调控脑缺血损伤。

关键词：大脑中动脉栓塞基因微阵列环状RNA 竞争性内源RNA

大脑中动脉栓塞后慢性不可预见性应激大鼠下丘脑肿瘤坏死因子α及其信号通路的激活

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生理学报 2014年第4期66卷 463-468页

作者：王姗姗陈海英孙虹王婷管锦群解放军总医院南楼神经内科北京100853

本研究旨在探讨大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后慢性不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)状态下,下丘脑细胞因子及其调控通路蛋白表达的变化。成年Sprague Dawley(SD)大鼠经左侧MCAO后,再经过慢性不可预见的温和应激,建立脑卒中后抑郁模型。通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测下丘脑细胞因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factors-α,TNF-α)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing factor,CRF)及细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokines signaling 3,SOCS3)mRNA表达水平,用ELISA检测下丘脑TNF-α和CRF蛋白水平,用Western blot检测下丘脑SOCS3和磷酸化的信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的蛋白水平。结果显示,与对照组相比,MCAO+CUMS组大鼠下丘脑CRF、TNF-α和SOCS3 mRNA水平明显升高,CRF、TNF-α、SOCS3和pSTAT3的蛋白水平显著上调。Spearman相关性分析结果显示,CRF与TNF-α、TNF-α与SOCS3及SOCS3与pSTAT3之间有相关性。以上结果提示,缺血性脑卒中合并慢性应激所导致的抑郁状态下,下丘脑-垂体-肾上腺轴活性上调,可能受到下丘脑细胞因子转导通路的调控,其中包括JAK/STAT3信号通路。

关键词：大脑中动脉栓塞慢性不可预见性温和应激脑卒中后抑郁肿瘤坏死因子α 促肾上腺皮质激素释放激素细胞因子信号转导抑制因子3 信号转导和转录活化因子3

大脑中动脉栓塞模型大鼠的中枢电压依赖性钾通道mRNA表达的改变

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药学学报 2006年第4期41卷 328-332页

作者：张海霞李正斌王晓良中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050

目的观察几种代表性电压依赖性钾通道亚型在脑缺血不同时间大鼠海马和皮层mRNA表达水平的变化。方法采用大脑中动脉栓塞模型致大鼠脑缺血损伤,应用RT-PCR方法检测Kv1.4,Kv1.5,Kv2.1和Kv4.2mRNA表达水平在海马和皮层中的改变。结果大脑... 详细信息

目的观察几种代表性电压依赖性钾通道亚型在脑缺血不同时间大鼠海马和皮层mRNA表达水平的变化。方法采用大脑中动脉栓塞模型致大鼠脑缺血损伤,应用RT-PCR方法检测Kv1.4,Kv1.5,Kv2.1和Kv4.2mRNA表达水平在海马和皮层中的改变。结果大脑中动脉栓塞模型大鼠出现明显的神经损伤症状。缺血2 h时,海马组织的Kv1.4,Kv2.1和Kv4.2 mRNA表达水平分别增加了50%,67%和90%,在缺血24 h时Kv1.4和Kv4.2mRNA仍保持高水平表达。大鼠皮层组织在缺血2 h后,Kv1.4,Kv1.5,Kv2.1和Kv4.2 mRNA水平均无明显改变,缺血24 h后,Kv2.1和Kv4.2 mRNA水平分别增加了70%和62%。结论大脑中动脉栓塞模型大鼠的海马和皮层组织中电压依赖性钾通道亚型的mRNA表达发生明显上调。

关键词：钾通道逆转录聚合酶链式反应大脑中动脉栓塞 mRNA表达

大脑中动脉栓塞大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的变化规律

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中国老年学杂志 2016年第14期36卷 3411-3413页

作者：吴相春王少卿唐璐朱文浩高颖北京中医药大学东直门医院神经内科北京100700

目的探讨大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴变化规律。方法 SD大鼠70只随机分为正常组、假手术组、手术组,假手术组与手术组按不同时间分为6 h、48 h、72 h组,每组10只。以大脑中动脉栓塞法建立MCAO大鼠模型,分别在手... 详细信息

目的探讨大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴变化规律。方法 SD大鼠70只随机分为正常组、假手术组、手术组,假手术组与手术组按不同时间分为6 h、48 h、72 h组,每组10只。以大脑中动脉栓塞法建立MCAO大鼠模型,分别在手术完成后6 h、48 h、72 h腹主动脉取血,放射免疫法检测大鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、血清促肾上腺皮质激素(ACTH)和血清皮质酮(CORT)的水平。结果与假手术组比较,MCAO大鼠在3 h时血浆CRH,血清ACTH、CORT增高,在48 h、72 h时血浆CRH,血清ACTH降低,血清CORT水平进一步增高。结论 MCAO大鼠存在明显的HAP轴功能紊乱,调节紊乱的HPA轴功能可能为脑血管疾病的防治提供新的途径。

关键词：大脑中动脉栓塞下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴

微透析技术联用UPLC-Q/TOF-MS的大脑中动脉栓塞大鼠代谢组学研究

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中草药 2019年第13期50卷 3155-3161页

作者：韦园诗朱黎霞黄星星张英丰广州中医药大学中药学院广东广州510006 南方医科大学珠江医院中医科广东广州510282

目的研究大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠的脑纹状体代谢组学特征。方法采用线栓栓塞大脑中动脉以复制MCAO大鼠模型,脑纹状体植入微透析探针,清醒、自由活动状态下采集脑微透析样品,正、负离子模式下超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-... 详细信息

目的研究大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠的脑纹状体代谢组学特征。方法采用线栓栓塞大脑中动脉以复制MCAO大鼠模型,脑纹状体植入微透析探针,清醒、自由活动状态下采集脑微透析样品,正、负离子模式下超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)测定脑微透析样品,多元统计建立代谢组学模型。结果成功进行了微透析技术的脑靶向性代谢组学研究,代谢组学模型可明显区分对照组和模型组,发现并鉴定了7个差异代谢物。结论MCAO大鼠脑代谢特征发生了明显改变,基于微透析技术的代谢组学研究丰富了代谢组学的研究方法。

关键词：大脑中动脉栓塞微透析技术超高效液相色谱-飞行时间质谱纹状体代谢组学

异亚丙基莽草酸对大脑中动脉栓塞大鼠脑含水量和能量代谢的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2002年第4期16卷 270-272页

作者：王宏涛孙建宁徐秋萍郭亚健北京中医药大学中药学院药理学教研室北京100102

目的　探究异亚丙基莽草酸 (ISA)减轻脑缺血损伤是否与改善能量代谢与减轻脑水肿有关。方法　采用三氯化铁致大脑中动脉栓塞模型 ,观察药物对脑组织含水量 ,能荷及Na+ ,K+ ATP酶的影响。结果　ISA 2 0 0mg·kg- 1可降低模型大鼠脑组织... 详细信息

目的　探究异亚丙基莽草酸 (ISA)减轻脑缺血损伤是否与改善能量代谢与减轻脑水肿有关。方法　采用三氯化铁致大脑中动脉栓塞模型 ,观察药物对脑组织含水量 ,能荷及Na+ ,K+ ATP酶的影响。结果　ISA 2 0 0mg·kg- 1可降低模型大鼠脑组织含水量 ,减轻脑水肿程度 ;ISA 2 0 0 ,10 0mg·kg- 1可明显增加模型大鼠脑组织能荷值 ;ISA 2 0 0 ,10 0 ,5 0mg·kg- 1对模型大鼠脑组织Na+ ,K+ ATP酶活力均有明显的提高作用。结论　ISA可能通过保护脑组织能量代谢和提高脑组织Na+ ,K+ ATP酶活力 ,减轻脑水肿程度。

关键词：脑缺血损伤异亚丙基莽草酸大脑中动脉栓塞大鼠脑含水量能量代谢

异亚丙基莽草酸对大脑中动脉栓塞大鼠脑组织自由基代谢的影响

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中国药理学通报 2002年第5期18卷 569-571页

作者：王宏涛孙建宁徐秋萍郭亚建北京中医药大学中药学院药理学教研室北京100102

目的　研究异亚丙基莽草酸 (ISA)对大脑中动脉栓塞模型 (MCAT)大鼠脑组织自由基代谢的影响。方法　采用三氯化铁致大脑中动脉栓塞模型 ,观察ISA对脑组织总超氧化物歧化酶 (T SOD)、Cu Zn SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH px)活力及丙二醛 (... 详细信息

目的　研究异亚丙基莽草酸 (ISA)对大脑中动脉栓塞模型 (MCAT)大鼠脑组织自由基代谢的影响。方法　采用三氯化铁致大脑中动脉栓塞模型 ,观察ISA对脑组织总超氧化物歧化酶 (T SOD)、Cu Zn SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH px)活力及丙二醛 (MDA)含量的影响。结果　ISA2 0 0 ,10 0mg·kg-1可提高模型大鼠脑组织T SOD活力 ;ISA2 0 0 ,10 0 ,5 0mg·kg-1均可明显增加模型大鼠脑组织Cu Zn SOD和GSH px活力 ;ISA 2 0 0 ,10 0 ,5 0mg·kg-1对模型大鼠脑组织MDA升高有明显的抑制作用。

关键词：异亚丙基莽草酸血栓大脑中动脉栓塞脑缺血脑梗死自由基动物实验药物抗氧化

通塞脉微丸对大脑中动脉栓塞模型大鼠的保护作用

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中成药 2009年第5期31卷 685-688页

作者：胡晨卞慧敏仇锦春杨洪宝南京中医药大学中医药研究院江苏南京210029

目的:观察通塞脉微丸对大脑中动脉栓塞(MCAO)模型大鼠的保护作用。方法:用线栓法制备大鼠MCAO模型,缺血3 h后再灌注,观察通塞脉微丸不同剂量对模型大鼠脑含水量、神经功能缺损情况、脑梗死面积及血浆中前列腺素1α(6-K-PGF1α)、血栓烷... 详细信息

目的:观察通塞脉微丸对大脑中动脉栓塞(MCAO)模型大鼠的保护作用。方法:用线栓法制备大鼠MCAO模型,缺血3 h后再灌注,观察通塞脉微丸不同剂量对模型大鼠脑含水量、神经功能缺损情况、脑梗死面积及血浆中前列腺素1α(6-K-PGF1α)、血栓烷素B2(TXB2)、内皮素(ET)含量的影响。结果:通塞脉微丸可以改善MCAO模型大鼠24 h的行为学异常,缩小脑梗塞面积,降低缺血脑组织的含水量,减轻脑水肿,降低血浆中ET、TXB2,从而改善脑组织的缺血缺氧状态。结论:通塞脉微丸对大脑中动脉栓塞模型大鼠有一定的保护作用。

关键词：通塞脉微丸大脑中动脉栓塞实验研究

刺五加注射液对大鼠大脑中动脉栓塞所致脑缺血损伤的保护作用

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中草药 2007年第10期38卷 1544-1546页

作者：谢湘林刘宏雁邹洪斌刘凯李晔臧晓峰吉林大学药学院药理教研室吉林长春130021 吉林大学第一临床医院吉林长春130021

刺五加注射液为刺五加的茎叶制成的灭菌水溶液,其主要成分为黄酮,也含有皂苷等其他成分。临床上广泛应用于缺血性脑血管病的治疗。大脑中动脉栓塞与人类缺血性中风比较类似,但关于刺五加注射液对大脑中动脉栓塞所致脑缺血损伤的研究报... 详细信息

刺五加注射液为刺五加的茎叶制成的灭菌水溶液,其主要成分为黄酮,也含有皂苷等其他成分。临床上广泛应用于缺血性脑血管病的治疗。大脑中动脉栓塞与人类缺血性中风比较类似,但关于刺五加注射液对大脑中动脉栓塞所致脑缺血损伤的研究报道甚少,有的研究观察时间较短,本实验旨在探讨刺五加注射液对大脑中动脉栓塞所致脑缺血损伤大鼠的保护作用,为临床应用提供科学依据。[第一段]

关键词：大脑中动脉栓塞刺五加注射液脑缺血损伤保护作用大鼠缺血性脑血管病临床应用灭菌水溶液