检索结果-南通市图书馆

一种新型检测大肠杆菌O157∶H7的免疫磁珠-量子点纳米颗粒的制备和应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与发酵工业 2022年第13期48卷 48-54页

作者：文湘郡滕鑫丁星宇佘竹欣李壹熊晓辉南京工业大学食品与轻工学院江苏南京211800

研究建立了免疫磁珠和荧光量子点标记的抗体检测大肠杆菌O157∶H7的方法。采用溶剂热法制备了Fe_( 3)o_( 4)纳米颗粒,并用Sio_(2)、羧基和大肠杆菌O157∶H7抗体依次包覆制得免疫磁珠。游离的大肠杆菌O157∶H7首先与免疫磁珠结合,然后由... 详细信息

研究建立了免疫磁珠和荧光量子点标记的抗体检测大肠杆菌O157∶H7的方法。采用溶剂热法制备了Fe_( 3)o_( 4)纳米颗粒,并用Sio_(2)、羧基和大肠杆菌O157∶H7抗体依次包覆制得免疫磁珠。游离的大肠杆菌O157∶H7首先与免疫磁珠结合,然后由量子点标记的抗体与大肠杆菌结合,形成一个三明治结构;随后分析磁分离采集的磁珠的荧光强度(激发/发射波长为370 nm/472 nm)。Sio_(2)壳结构的引入,减少了传统免疫磁珠的非特异性吸附,提高了对目标菌的选择性,同时有效的阻止了三明治结构中量子点因电子转移至Fe_(3)o_(4)而引起的荧光猝灭,保证了分析方法的可行性。动态范围为10~10^(8) CFU/mL,检出限为10 CFU/mL。牛肉、牛奶和蜂蜜样品中大肠杆菌O157∶H7的平均加样回收率分别为95%~104%、90%~94%和90%~110%;相对标准偏差分别为2.1%~3.8%、3.2%~7.8%和5.8%~6.3%。

关键词：大肠杆菌O157∶H7 免疫磁珠量子点 Sio_(2)

基于DNA四面体的微流控芯片用于致病性大肠杆菌O157∶H7的检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析化学 2020年第4期48卷 473-483页

作者：朱福琳卞晓军田润李亮颜娟刘刚上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海) 中国农业科学院生物技术研究所上海市计量测试技术研究院生物计量实验室

设计了一种微流控芯片,在其通道表面修饰DNA四面体,并通过生物素-链霉亲和素反应连接适配体作为捕获探针,用于大肠杆菌O157∶H7(Escherichia coli o157∶h7,E.coli o157∶h7)的检测研究。微流控芯片鱼骨形结构的设计降低了细菌捕获时受... 详细信息

设计了一种微流控芯片,在其通道表面修饰DNA四面体,并通过生物素-链霉亲和素反应连接适配体作为捕获探针,用于大肠杆菌O157∶H7(Escherichia coli o157∶h7,E.coli o157∶h7)的检测研究。微流控芯片鱼骨形结构的设计降低了细菌捕获时受到的剪切力;在其表面修饰DNA四面体,可进一步调节探针之间的距离,提高探针对细菌的识别效率。琼脂糖凝胶电泳表征结果证实了DNA四面体纳米结构的成功制备和DNA四面体-适配体捕获体系的构建。采用荧光显微镜对检测结果进行进一步成像分析,并将此微流控芯片检测平台用于实际样品的检测。结果表明,不需要大型仪器或设备及其它信号放大技术的辅助,在普通光学显微镜下,利用此检测系统即能实现浓度为10 CFU/mL的E.coli o157∶h7的检测,且操作简便,检测耗时少于2 h。实际样品的检测回收率为88.3%～108.3%。本研究基于DNA四面体纳米结构构建的微流控平台,不仅为食源性致病菌的检测提供了一种有效的检测方法,在其它食品安全隐患、疾病早期诊断等研究领域也具有潜在应用价值。

关键词： DNA四面体微流控芯片适配体大肠杆菌O157∶H7

大肠杆菌O157∶H7噬菌体EC-p9的内溶酶和穿孔素的特性预测及克隆表达

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与发酵工业 2021年第9期47卷 107-113页

作者：解天慧石慧西南大学食品科学学院重庆400715

大肠杆菌O157∶H7是一种常见的能严重威胁公共卫生安全的食源性致病菌,噬菌体及其内溶酶、穿孔素是新型的抑菌剂。该文利用十聚体寡核苷酸随机引物初步鉴定了噬菌体EC-p9;应用PCR技术获得该噬菌体的内溶酶Lys 9和穿孔素hol 9的基因;利... 详细信息

大肠杆菌O157∶H7是一种常见的能严重威胁公共卫生安全的食源性致病菌,噬菌体及其内溶酶、穿孔素是新型的抑菌剂。该文利用十聚体寡核苷酸随机引物初步鉴定了噬菌体EC-p9;应用PCR技术获得该噬菌体的内溶酶Lys 9和穿孔素hol 9的基因;利用生物学信息预测了这2种蛋白的特性;通过大肠杆菌表达体系表达了这2种蛋白。结果表明,噬菌体EC-p9是dsDNA肌尾科噬菌体,具有“穿孔素-内溶酶”裂解体系。内溶酶Lys 9是一种不含跨膜结构的肽聚糖水解酶。穿孔素hol 9是Ⅲ型穿孔素,仅有1个跨膜结构。内溶酶Lys 9和穿孔素hol 9都能通过大肠杆菌表达体系成功表达,但穿孔素hol 9的表达会对大肠杆菌BL21(DE3)产生毒害作用,导致表达量较少。最终获得了质量浓度为2.49 g/L的内溶酶Lys 9和0.95 g/L的穿孔素hol 9。该研究为开展内溶酶Lys 9和穿孔素hol 9的抑菌能力以及噬菌体EC-p9的裂解体系的研究奠定了基础。

关键词：大肠杆菌O157∶H7 噬菌体EC-p9 内溶酶Lys 9 穿孔素hol 9

宽谱大肠杆菌O157∶H7 CVCC4050噬菌体vB_EcoM_GXBP08的分离鉴定及特性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2022年第7期49卷 2735-2745页

作者：周雨晴马东鑫吴洁王晓晔广西大学动物科学技术学院南宁530004 防城港市行政审批服务中心防城港538000

【目的】探究宽谱大肠杆菌O157∶H7噬菌体的生物学特性和全基因组特征。【方法】采用双层琼脂平板法从广西南宁某猪场污水样品中分离宽谱大肠杆菌O157∶H7裂解性噬菌体,通过空斑试验、噬斑试验对噬菌体进行宿主谱和裂解效价的测定;利用... 详细信息

【目的】探究宽谱大肠杆菌O157∶H7噬菌体的生物学特性和全基因组特征。【方法】采用双层琼脂平板法从广西南宁某猪场污水样品中分离宽谱大肠杆菌O157∶H7裂解性噬菌体,通过空斑试验、噬斑试验对噬菌体进行宿主谱和裂解效价的测定;利用透射电镜观察、最佳感染复数测定、一步生长曲线测定、热稳定性与酸碱稳定性评估、杀菌试验及全基因组测序的方法分析噬菌体的形态学、生物学和全基因组特征。【结果】试验成功分离1株宽谱大肠杆菌O157∶H7裂解性噬菌体,命名为vB_EcoM_GXBP08。噬菌体vB_EcoM_GXBP08能高效裂解14株大肠杆菌,裂解效价可达10^(9)~10^(10)PFU/mL。以大肠杆菌O157∶H7 CVCC4050为宿主菌测得噬菌体的最佳感染复数(multiplicity of infection,MoI)为1。一步生长曲线显示,该噬菌体的潜伏期和爆发期分别为20和50 min,爆发量为154 PFU/cell,耐受温度范围为30~70℃,在ph为4.0~10.0的环境中能维持其活性。在宿主菌CVCC4050中的杀菌试验结果显示,MoI为1时噬菌体vB_EcoM_GXBP08具有良好的杀菌效果。根据透射电镜观察和全基因组序列分析,该噬菌体属于有尾噬菌体目肌尾噬菌体科T4-like噬菌体属,基因组片段总长为108114 bp,GC含量为36.23%。噬菌体vB_EcoM_GXBP08基因组中含有8个CDS,编码与噬菌体裂解有关的蛋白,未发现与抗生素耐药性、毒力因子、毒素和溶源性相关的基因。【结论】噬菌体vB_EcoM_GXBP08宿主谱宽、效价高,且温度、酸碱稳定性良好,在液体培养基中的杀菌能力强,本研究结果为后续研制宽谱噬菌体制剂以及在食品业、养殖业防治大肠杆菌O157∶H7感染中的应用提供参考。

关键词：大肠杆菌O157∶H7 噬菌体生物学特性全基因组分析

基于电阻抗分析的免疫层析试纸条定量检测大肠杆菌O157∶H7

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国食品学报 2013年第7期13卷 175-180页

作者：吴海云陈晨左月明王晓闻荆小院魏丰禅山西农业大学工学院山西太谷030801 山西农业大学食品科学与工程技术学院山西太谷030801 山西农业大学生命科学学院山西太谷030801

为寻找食源性致病菌的快速定量检测方法，将阻抗技术和免疫层析技术相结合，研制一种双抗夹心免疫层析试纸条，探讨该试条电阻抗法定量检测大肠杆菌o157：h7的可行性。采用具有良好导电性的聚苯胺标记大肠杆菌o157：h7多克隆抗体，硝酸... 详细信息

为寻找食源性致病菌的快速定量检测方法，将阻抗技术和免疫层析技术相结合，研制一种双抗夹心免疫层析试纸条，探讨该试条电阻抗法定量检测大肠杆菌o157：h7的可行性。采用具有良好导电性的聚苯胺标记大肠杆菌o157：h7多克隆抗体，硝酸纤维素膜（NC膜）作为固相支撑物。通过阻抗一时间法表征层析过程中试条阻抗的变化，确定免疫反应稳定时间。通过交流阻抗法研究样品的多频响应，确定最佳测试频率。根据免疫反应稳定后不同浓度大肠杆菌o157：h7样品相对空白样品的阻抗改变率，来实现对大肠杆菌o157：h7的定量检测。试验结果表明，滴加样品180s后免疫反应达到平衡。当测试频率为1hz时，试纸条的阻抗变化率与菌液浓度的对数值呈线性相关。线性检测范围是1．15×10^3～1．15×10^6CFU／mL．决定系数R0为0．9616，最低检测限为7．08×10^2CFU／mL（S／N=3），检测时间低于6min。该方法灵敏度高，检测时间短，操作简单，可应用于大肠杆菌o157：h7的快速定量检测。同时为其它食源性致病菌的定量检测提供参考。

关键词：免疫层析试纸条阻抗技术大肠杆菌O157∶H7 快速定量检测

纳米金标记抗体增强SPR检测大肠杆菌O157∶H7

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高等学校化学学报 2013年第6期34卷 1333-1338页

作者：刘霞李蓉卓李蕾李文进周春娇湖南农业大学食品科技学院食品科学与生物技术湖南省重点实验室湖南农业大学理学院长沙410128

将金纳米粒子(AuNPs)标记的大肠杆菌O157∶H7(E.coli o157∶h7)的多克隆抗体(PAb)作为二抗,采用氨基偶联法将PAb固定在传感器表面作为一抗,通过三明治方法用双通道表面等离子体子共振(SPR)传感器对E.coli o157∶h7进行检测,并与SPR直接... 详细信息

将金纳米粒子(AuNPs)标记的大肠杆菌O157∶H7(E.coli o157∶h7)的多克隆抗体(PAb)作为二抗,采用氨基偶联法将PAb固定在传感器表面作为一抗,通过三明治方法用双通道表面等离子体子共振(SPR)传感器对E.coli o157∶h7进行检测,并与SPR直接法检测进行了比较.结果表明,直接法的检出限为103cfu/mL,线性范围为103～109cfu/mL;AuNPs增强三明治法的检出限为10 cfu/mL,线性范围为10～1010cfu/mL,灵敏度比直接法提高了100倍,且具有更宽的检测范围.本方法不仅检测时间短,而且具有良好的选择性和重现性.

关键词：金纳米粒子大肠杆菌O157∶H7 表面等离子体子共振标记检测

食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的检测技术研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国食品添加剂 2024年第1期35卷 303-313页

作者：周炳武于泽闫兆伦刘雨涵侯嘉欣刘晓倩谢婧宜刘晔天津科技大学食品科学与工程学院天津300457 清华大学深圳国际研究生院生物医药与健康工程学院深圳518000 河北农业大学理工学院沧州061100

近年来,因食源性致病菌造成的食品中毒正在不断增加,严重威胁了人类的健康,大肠杆菌(E.coli)o157∶h7由于其低感染剂量和高致病性等特点引起了研究人员和世界卫生组织的高度重视。因此精准快速的检测食品中的E.coli o157∶h7对食品安全... 详细信息

近年来,因食源性致病菌造成的食品中毒正在不断增加,严重威胁了人类的健康,大肠杆菌(E.coli)o157∶h7由于其低感染剂量和高致病性等特点引起了研究人员和世界卫生组织的高度重视。因此精准快速的检测食品中的E.coli o157∶h7对食品安全问题有着重要的意义,是预防和控制食源性疾病传播的重要技术,为此本文对E.coli o157∶h7的常规检测方法、免疫学法、分子生物学法和其他方法进行论述,介绍了这些方法的优缺点,对各种方法进行了整体比较,以期为有关工作者在选择检测方法或研发新方法提供参考。

关键词：食源性致病菌大肠杆菌O157∶H7 食品安全检测方法

免疫磁分离结合胶体金免疫层析法快速检测大肠杆菌O157∶H7

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析化学 2013年第12期41卷 1812-1816页

作者：崔希熊齐荣熊勇华山珊赖卫华南昌大学食品科学与技术国家重点实验室中国检验检疫科学研究院食品安全研究所

以抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体偶联磁珠制得免疫磁珠;以胶体金标记的抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体为标记抗体,抗大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别作为检测线和质控线成分制备胶体金免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离和胶体... 详细信息

以抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体偶联磁珠制得免疫磁珠;以胶体金标记的抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体为标记抗体,抗大肠杆菌O157∶H7多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别作为检测线和质控线成分制备胶体金免疫层析试纸条。将免疫磁珠分离和胶体金免疫层析法相结合应用于大肠杆菌O157∶H7的现场快速检测中。结果表明:1 mL 7.6×103CFU/mL菌液经过免疫磁珠分离富集后,用胶体金免疫层析法检测可得到阳性结果。对于10 CFU/g大肠杆菌O157∶H7污染的食品样本,经过6 h预增菌,免疫磁珠分离和胶体金试纸条检测72 min即可检出。本方法的建立对于食品中有害物质的现场快速检测具有重要意义。

关键词：免疫磁分离胶体金免疫层析大肠杆菌O157∶H7

一种快速鉴别牛肉中大肠杆菌o157:h7检测方法的建立及应用

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2020年第4期36卷 272-279,296页

作者：赵亚男曾德新郭德华蒋原蒋鲁岩李鑫妮陈伟汤芳薛峰戴建君南京农业大学动物健康与食品安全国际合作实验室南京210095 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 南京海关动植物与食品检测中心南京210001 合肥工业大学食品与生物工程学院合肥230601

目的建立一种快速、准确检测牛肉中大肠杆菌O157∶H7的方法。方法利用抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体2G5(捕获抗体),酶标单克隆抗体2E3(hRP-2E3,检测抗体),建立可用于检测大肠杆菌O157∶H7的双抗体夹心ELISA方法,同时对反应条件进行优化... 详细信息

目的建立一种快速、准确检测牛肉中大肠杆菌O157∶H7的方法。方法利用抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体2G5(捕获抗体),酶标单克隆抗体2E3(hRP-2E3,检测抗体),建立可用于检测大肠杆菌O157∶H7的双抗体夹心ELISA方法,同时对反应条件进行优化并对该方法进行评价。结果通过优化得到最佳反应条件,单克隆抗体2G5最佳包被浓度为4.48μg/mL,hRP-2E3最佳检测浓度为19.9μg/mL。该方法对纯培养菌液最低检出限为1×10^5 CFU/mL,具有良好的敏感性,且特异性良好,与其他大肠杆菌、沙门氏菌、李斯特菌等均无交叉反应。板内及板间变异系数均小于7%,具有较高的精密度。人工污染牛肉样品增菌8 h后,对大肠杆菌O157∶H7的检出限为1 CFU/25 g。结论建立的双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度、准确度、重复性良好,特异性强,可用于临床实际样品检测。

关键词：大肠杆菌O157∶H7 双抗体夹心ELISA 单克隆抗体牛肉