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基于病理大标本切片的喉癌手术组织学及分子切缘的研究

基于病理大标本切片的喉癌手术组织学及分子切缘的研究

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作者：银珍广西医科大学

学位级别：硕士

目的和意义:喉癌是耳鼻咽喉头颈外科常见的恶性肿瘤,无论治疗喉癌的理念和方法如何变化,手术是治疗喉癌的主要方式。由于患者对于保留喉功能和提高术后生活质量的强烈需求,功能保留性手术成为当前主流术式。追求在完整切除肿瘤的同时,... 详细信息

目的和意义:喉癌是耳鼻咽喉头颈外科常见的恶性肿瘤,无论治疗喉癌的理念和方法如何变化,手术是治疗喉癌的主要方式。由于患者对于保留喉功能和提高术后生活质量的强烈需求,功能保留性手术成为当前主流术式。追求在完整切除肿瘤的同时,最大程度保留喉部正常的功能结构,对于提高患者的生存质量有重要的意义。手术方式可选择开放或经口入路切除原发病灶。经口入路切除喉癌原发病灶的手术方式的优势是能完整切除肿瘤并可最大程度地保留喉结构和功能,难点是喉癌深部边界的判断难度大。而传统开放性手术对喉的功能和结构破坏严重,且需要气管切开,手术创伤大,费用高昂,住院时间长和患者痛苦明显。能否内镜下切除喉癌肿瘤并留充分安全边缘,且在保留喉支架的同时进行内镜下适度软骨切除,同时尽量保留正常结构对于提高患者生存质量意义重大。本项实验研究利用喉癌标本病理大切片,收集不同喉癌原发肿瘤的分级的浸润范围和其手术切缘与肿瘤的边界数据—喉内以及喉外软组织、软骨膜-软骨的宽度深度等,探索喉癌原发肿瘤在喉组织中不同层面的安全切缘数据,并利用免疫组织化学染色及实时荧光定量PCR技术,在分子层面上对喉癌安全切缘进行进一步探索研究。旨在探讨能否经口入路完整切除喉癌肿瘤并减少手术切除范围提供数据支持。方法:收集病理科取材后剩余的喉癌手术标本,整块制作喉癌组织病理大标本石蜡块,经病理大标本制片、切片,苏木素-伊红染色,根据手术切除范围分为三组S组(Soft tissue)=软组织组(12例)、SC组(Soft tissue+Cartilages)=软组织+甲状软骨组(31例),P组(Penetrates)=软组织+甲状软骨+软骨外组织组(9例),利用正置荧光相差显微镜成像分析系统分别测量各组手术切缘与肿瘤的主癌灶及微癌灶在各层组织的边界数据(喉内/外软组织、软骨膜-软骨的宽度深度等);选取病理大标本制片后的喉癌蜡块,采取免疫组织化学染色技术检测三组中Ki-67、P27、Survivin以及eIF4E四种抗体的表达情况;收集喉癌患者手术切除的新鲜喉癌组织,取肿瘤组织及癌旁组织,根据肿瘤缘距离癌旁组织距离分为三组10mm组(5例);行荧光定量PCR法检测喉癌肿瘤及癌旁组织Ki-67、P27、Survivin以及eIF4E四种基因的表达情况。结果:(1)S组未发现微癌灶,基于主癌灶的测量数值与公认的喉癌外科学安全切缘5mm(以眼观癌灶为基准)对比分析,除喉腔面上肿瘤边缘到手术外科切缘的距离外均有统计学意义,P值大于公认的头颈鳞癌病理学安全切缘1mm(以镜观微癌灶为基准)。即肿瘤微癌灶到外科切缘的距离远大于1mm,表明SC组病例的切缘为阴性,且过多切除了包括甲状软骨板在内的正常组织。SC2均值(4.05±2.56mm)小于5mm,提示假若保留了眼观5mm的切缘距离,在靠近切缘边界的组织区域有存在微癌灶的可能性,对于SC组,5mm的切缘距离不能满足肿瘤完整切除的需要。而SC组中,以主癌灶为基准的镜下实际外科切缘距离为SC4=SC2+SC3(9.74±3.16mm),可知目前对于肿瘤未穿透甲状软骨板的病例,实际外科手术切缘范围过于充分,远大于5mm近乎10mm。为了探索在肿瘤主癌灶到微癌灶外扩展切除多少距离的切缘能满足肿瘤病灶被完整切除的同时,尽量的保留正常的喉功能结构,缩小实际外科切缘范围,本实验通过在SC2的基础上增加1mm、3mm及5mm的虚拟切缘数据,与相应的实际外科切缘数据进行比较分析。结果显示为:增加1mm和3mm的虚拟外科切缘对比实际外科切缘,差异有统计学意义,均值距离小于实际外科切缘SC4(9.74±3.16mm)。增加5mm者差异无统计学意义。结果表明了,结合SC2(4.05±2.56mm),在肿瘤主癌灶到微癌灶的距离外扩展切除3mm,即保留眼观切缘距离在(7.05±2.26mm)的范围内就能满足需要。(3)P组中,P2、P5按照5mm,其余测量数值按照1mm的标准对比,除微癌灶到甲状软骨板内侧骨膜(P1)、外侧骨膜(P4)的

关键词：喉恶性肿瘤大标本手术切缘分子切缘

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