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中药药理与临床 2021年第3期37卷 103-108页

作者：李晓华仇广杰曹占鸿姜艳清李晶李宜平杨擎石晓征李娜曲晓波李银清长春中医药大学长春130117 吉林农业大学长春130118

目的:基于多肽体外标记定量技术(TMT)蛋白定量检测,研究哈蟆油调节大鼠骨代谢,防治绝经后骨质疏松作用。方法:采用蛋白裂解法提取大鼠股骨总蛋白,依次经过胰蛋白酶酶解、TMT试剂标记、HPLC分级、HPLC-MS联用技术鉴定蛋白,利用生物信息... 详细信息

目的:基于多肽体外标记定量技术(TMT)蛋白定量检测,研究哈蟆油调节大鼠骨代谢,防治绝经后骨质疏松作用。方法:采用蛋白裂解法提取大鼠股骨总蛋白,依次经过胰蛋白酶酶解、TMT试剂标记、HPLC分级、HPLC-MS联用技术鉴定蛋白,利用生物信息学分析方法进行差异表达蛋白注释、GO富集分析、通路富集分析和蛋白结构域富集分析,利用平行反应监测(PRM)技术验证典型特异表达蛋白。结果:蛋白质定量分析共鉴定到5654个蛋白,其中注释到4889个蛋白。与空白对照组比较,模型对照组参与富集度较高的信号通路中差异表达蛋白共22个(fold change>2.0,fold change2.0,fold change<1/2.0,P<0.05),其中有6个蛋白发生表达上调,有5个蛋白发生表达下调。这些差异蛋白重点参与了大鼠体内糖酵解/糖异生、细胞外基质(ECM)-受体相互作用、核糖体代谢、蛋白质消化吸收、脂肪酸降解、补体和凝血级联及心肌病、坏死症、百日咳、病毒病、红斑狼疮等疾病代谢途径。PRM实验验证肌钙蛋白I(Tnni1)、心肌肌钙蛋白C(Tnnc1)、丝氨酸蛋白酶的抑制剂(Serpina3k)、半乳糖凝集素(Galentin-1)及肌球蛋白轻链III(My13)蛋白表达趋势与TMT检测结果一致。结论:哈蟆油对骨质疏松大鼠骨代谢调节作用可能与Tnni1等11个差异表达蛋白相关,其中与Tnni1、Tnnc1、Serpina3k、Galentin-1及My13等5个蛋白密切相关。

关键词：哈蟆油蛋白质组学骨质疏松多肽体外标记定量技术作用机制

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基于蛋白组学探讨龙生蛭胶囊抗动脉粥样硬化作用机制

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中药药理与临床 2023年第4期39卷 13-18页

作者：方欢乐姜欢欢周亚明王礼丰陈衍斌西安培华学院医学院西安710125 陕西步长制药有限公司科研部西安710075 西安交通大学医学部西安710061

目的:探讨龙生蛭胶囊对动脉粥样硬化(AS)ApoE^(-/-)小鼠的干预作用及可能机制。方法:ApoE^(-/-)雄性小鼠分为模型对照组、龙生蛭胶囊1.8 g/kg组,每组10只,另取10只C57BL/6小鼠作为正常对照组;高脂饮食喂养ApoE^(-/-)小鼠8 w建立动脉粥... 详细信息

目的:探讨龙生蛭胶囊对动脉粥样硬化(AS)ApoE^(-/-)小鼠的干预作用及可能机制。方法:ApoE^(-/-)雄性小鼠分为模型对照组、龙生蛭胶囊1.8 g/kg组,每组10只,另取10只C57BL/6小鼠作为正常对照组;高脂饮食喂养ApoE^(-/-)小鼠8 w建立动脉粥样硬化模型。生化法检测小鼠血脂及MPO含量;HE染色观察主动脉病理形态变化;Western Blot检测主动脉TGF-β、Smad3蛋白表达;4D-Label-free定量蛋白质组学技术分析各组小鼠主动脉血管差异蛋白的表达;GO注释和KEGG通路富集分析相关通路和蛋白;平行反应监测(PRM)验证典型特异蛋白表达。结果:造模8 w后,与正常对照组比较,模型对照组血脂TC、TG、LDL含量升高,HDL含量降低(P定量分析显示,与正常对照组相比,模型对照组有213个差异蛋白,其中上调177个,下调36个;与模型对照组比较,龙生蛭胶囊1.8 g/kg组共筛选出74个差异蛋白,其中42个表达上调,32个表达下调。这些差异蛋白主要参与了JAK2-STAT3信号通路、TGF-β信号通路、半乳糖代谢、RAP1信号通路、鞘磷脂信号通路、等。龙生蛭胶囊1.8 g/kg组可显著下调CDK9、MPO、SAA2、MSR1、FBN1、等蛋白表达,显著上调ABCA1等蛋白表达。结论:龙生蛭胶囊具有一定的抗动脉粥样硬化作用,其可能主要通过调控动脉粥样硬化ApoE^(-/-)小鼠炎症、脂质代谢相关蛋白及通路改善动脉粥样硬化。

关键词：龙生蛭胶囊 ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化多肽体外标记定量技术作用机制

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