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多元pcr在黑鲍(Haliotis rubra)微卫星遗传研究中的应用

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海洋与湖沼 2005年第4期36卷 319-325页

作者：黎中宝 Appleyard Sharon A Elliott Nicholas G 集美大学水产学院厦门361021 CSIRO Marine Research GPO Box 1538HobartTasmania 7001Australia

根据D03等11个微卫星引物单位点pcr扩增时优化的扩增条件(退火温度、MgCl2等)和11个微卫星引物所带有的荧光颜色、等位基因大小变异范围及反应的灵敏度,可将11个微卫星引物分成A组(D03、G04、B04和H08)、B组(A09、H11、A08和G01)和C组(C... 详细信息

根据D03等11个微卫星引物单位点pcr扩增时优化的扩增条件(退火温度、MgCl2等)和11个微卫星引物所带有的荧光颜色、等位基因大小变异范围及反应的灵敏度,可将11个微卫星引物分成A组(D03、G04、B04和H08)、B组(A09、H11、A08和G01)和C组(CmrHr1.24、CmrHr2.30和CmrHr2.23)进行多元pcr扩增,结果显示各组内位点之间的分离清晰,这表明多元pcr可以大大提高微卫星检测仪器的使用效率和提高实验效果,在微卫星研究中是一种快速便捷的方法。

关键词：微卫星黑鲍多元pcr rrouchDown pcr

应用多元pcr鉴定水体中大肠杆菌的毒素基因

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中国农学通报 2010年第16期26卷 40-43页

作者：关怡黄天培潘洁茹福建农林大学生命科学学院福州350002 福州市疾病预防控制中心福州350004

根据已发表的大肠杆菌(Escherchia coli)毒素基因序列,针对大肠杆菌的8种毒素基因设计特异引物并进行多元pcr扩增,检测某猪场排污口附近分离的16株大肠杆菌的毒素基因。结果表明,从16株待测样品中成功扩增出7个毒素基因,即fanA、fedA、a... 详细信息

根据已发表的大肠杆菌(Escherchia coli)毒素基因序列,针对大肠杆菌的8种毒素基因设计特异引物并进行多元pcr扩增,检测某猪场排污口附近分离的16株大肠杆菌的毒素基因。结果表明,从16株待测样品中成功扩增出7个毒素基因,即fanA、fedA、aidA-1、stx2e、astA、fasA和sepA。其pcr产物大小与预期一致。在16个样品中,aidA-1的检出率最高,总共16株。其后依次为stx2e 9株,astA 8株,fanA 7株,sepA 2株,fedA和fasA各1株。实验成功验证了多元pcr技术的可靠性及其在水环境中大肠杆菌毒素基因检测的实用性。

关键词：多元pcr 大肠杆菌毒素基因

Simultaneous detection of HBV and HCV by multiplex pcr normalization

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World Journal of Gastroenterology 2004年第16期10卷 2439-2443页

作者： Ning Wang Xue-Qin Gao Jin-Xiang Han Shandong Medicinal Biotechnological Center,Shandong Academy of Medical Sciences Key Laboratory for Biotechdrugs,Ministry of Public Health,Jinan 250062,Shandong Province,China Shandong Medicinal Biotechnological Center Shandong Academy of Medical Sciences Key Laboratory for Biotechdrugs Ministry of Public Health Jinan 250062 Shandong Province China

AIM: To design and establish a method of multiplex pcr normalization for simultaneously detecting HBV and ***: Two pairs of primers with a 20 bp joint sequence were used to amplify the target genes of HBV and HCV by two rounds of amplification. After the two rounds of amplification all the products had the joint sequence. Then the joint sequence was used as primers to finish the last amplification. Finally multiplex pcr was normalized to a single pcr system to eliminate multiplex factor interference. Four kinds of nucleic acid extraction methods were compared and screened. A multiplex pcr normalization method was established and optimized by orthogonal design of 6 key factors. Then twenty serum samples were detected to evaluate the validity and authenticity of this ***: The sensitivity, specificity, diagnostic index and efficiency were 83.3%, 70%, 153.3% and 72.2%,respectively for both HBsAg and anti-HCV positive patients,and were 78.6%, 80%, 258.6% and 79.2%, respectively for HBsAg positive patients, and were 75%, 90%, 165% and 83.3%, respectively for anti-HCV positive ***: The multiplex pcr normalization method shows a broad prospect in simultaneous amplification of multiple genes of different sources. It is practical, correct and authentic, and can be used to prevent and control HBV and HCV.

关键词： HBV HCV 多元pcr 基因型肝炎

闽江流域福州过境段大肠杆菌毒素基因的定性定量分析与季节性变化

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福建农业学报 2008年第4期23卷 408-414页

作者：黄文文陈彬庄一廷陈宁郑伟文福建师范大学生命科学学院福建福州350108 福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省环境监测中心站福建福州350003 福建省环境保护局福建福州350003 福建农林大学教育部生物农药与化学生物重点实验室福建福州350003

分别于不同季节在闽江流域福州过境段的洪山桥和解放大桥断面采集水样,进行大肠杆菌的分离、鉴定,用多元pcr方法对不同季节分离的大肠杆菌毒素基因的时空分布进行定性与定量分析。从分离的2 015株粪大肠杆菌中发现840株潜在的致病性大... 详细信息

分别于不同季节在闽江流域福州过境段的洪山桥和解放大桥断面采集水样,进行大肠杆菌的分离、鉴定,用多元pcr方法对不同季节分离的大肠杆菌毒素基因的时空分布进行定性与定量分析。从分离的2 015株粪大肠杆菌中发现840株潜在的致病性大肠杆菌,分别属于肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠聚集性大肠杆菌(EAEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)和肠产毒性大肠杆菌(ETEC);检出的10种毒素基因中,以扩散性黏附素基因(aidA-1)、热稳定性肠毒素基因(astA)和耐药性因子(sepA)为最多;细菌总量、大肠杆菌总数和致病性大肠杆菌总数在冬季较少,春季较多,夏秋季节达到全年数量的高峰;潜在的致病性大肠杆菌毒素基因的种类和数量也是在冬季最少,春夏季上升,秋季最多。

关键词：闽江流域大肠杆菌毒素基因多元pcr