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外周t细胞淋巴瘤非特指型的诊断学特征

中国实用医刊 2019年第1期46卷 6-9页

作者：李毅蔡瑞敏王文洋冯强卜凡山东省泰安市中心医院 271000 泰山医学院山东泰安271000

目的讨论外周t细胞淋巴瘤非特指型的临床及病理学特征、诊断及治疗方法。方法对2017年9月4日泰安市中心医院收治的1例50岁男性外周t细胞淋巴瘤非特指型患者进行病历分析并复习相关文献。结果患者50d前右侧耳后触及花生米大小的肿大淋巴... 详细信息

目的讨论外周t细胞淋巴瘤非特指型的临床及病理学特征、诊断及治疗方法。方法对2017年9月4日泰安市中心医院收治的1例50岁男性外周t细胞淋巴瘤非特指型患者进行病历分析并复习相关文献。结果患者50d前右侧耳后触及花生米大小的肿大淋巴结,3d前明显增大至鹌鹑蛋样大小,伴压痛。甲状腺激素及肿瘤标志物等检验指标均正常。彩色多普勒超声结果示双侧颌下区、双侧颈部、双侧锁骨上、双侧腋窝淋巴结肿大;双侧腹股沟区淋巴结稍肿大;腹腔淋巴结肿大;脾大。Ct结果示右肺下叶斑片状阴影,双肺小结节,纵隔淋巴结肿大。骨髓形态示异常幼稚细胞(考虑为淋巴瘤细胞)占14.5%;骨髓流式结果可见约占35.09%的CD4阴性CD8阳性异常的t淋巴细胞;考虑为t细胞淋巴瘤白血病来源。病理显示倾向于外周t细胞淋巴瘤非特指型;免疫组化:CD3(+)、CD5(+)、CD2(+)、CD7(+)、CD45RO散在(+)、CD20(+)、CD23(+)CD21(+)、B细胞淋巴瘤基因2(BCL-2)点状(+)、CD56散在弱(+)、B细胞特异性激活蛋白(PAX)-5(-)、细胞周期性蛋白(CyclinD1)(-)、粒酶B(+/-)、穿孔素(-)、t细胞内抗原(tIA)(-)、Ki67约15%。结论外周t细胞淋巴瘤非特指型是淋巴瘤的少见类型之一,病情进展迅速,侵袭性强。目前多种治疗手段效果不理想,预后较差,期待新型药物的不断开发应用。

关键词：外周t细胞淋巴瘤,非特指型淋巴瘤淋巴结活检免疫分型

红细胞分布宽度在外周t细胞淋巴瘤非特指型患者预后评估中的价值

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山东医药 2020年第16期60卷 62-65页

作者：胡歌王先火张会来天津医科大学附属肿瘤医院·国家癌症临床研究中心·癌症防治重点实验室·中美淋巴瘤白血病诊治中心天津300060

目的探讨红细胞分布宽度(RDW)在外周t细胞淋巴瘤非特指型(PtCL-NOS)患者预后评估中的价值。方法选择PtCL-NOS患者75例,均为初治。收集患者临床资料及初始治疗前的实验室检查指标,用全自动血细胞分析仪检测RDW,根据受试者工作特征(ROC)... 详细信息

目的探讨红细胞分布宽度(RDW)在外周t细胞淋巴瘤非特指型(PtCL-NOS)患者预后评估中的价值。方法选择PtCL-NOS患者75例,均为初治。收集患者临床资料及初始治疗前的实验室检查指标,用全自动血细胞分析仪检测RDW,根据受试者工作特征(ROC)曲线确定RDW截断值。治疗后对患者进行电话随访,统计患者存活情况,计算1、2、3年生存率。用Log-rank方法进行预后影响因素的单因素分析,Cox比例风险回归模型进行多因素分析。结果确定RDW评估PtCL-NOS患者预后的最佳截断值为13.25%,此时其敏感度为0.714,特异度为0.600;当治疗前RDW为13.25%时,曲线下面积最大为0.624。75例患者中RDW≤13.25%者34例,RDW>13.25者41例;死亡33例,1、2、3年生存率分别为88.0%(66/75)、68.0%(51/75)、52.0%(39/75)。预后单因素分析显示:年龄>60岁、美国东部肿瘤协助组体质状态评分≥2分、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期、国际预后指数(IPI)≥2分、PtCL-NOS预后指数评分≥2分、RDW>13.25%、血清白蛋白水平降低为预后不良因素(P均型多因素分析发现,年龄>60岁、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期及RDW>13.25%为患者预后不良的因素(P均tCL-NOS患者预后不良,RDW可作为患者预后评估的指标。

关键词：外周t细胞淋巴瘤,非特指型红细胞分布宽度预后

非特指型外周t细胞淋巴瘤中FGR和tP73蛋白表达及其基因改变的研究

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非特指型外周T细胞淋巴瘤中FGR和TP73蛋白表达及其基因改变的研究

作者：王艳茹中国人民解放军军事医学科学院

学位级别：硕士

背景和目的非特指型外周t细胞淋巴瘤(PtCL-NOS)是一组来源于成熟t细胞的高侵袭性肿瘤,预后差,五年生存率仅200%。发病有明显地域和种族差异,我国及亚洲其他国家较西方国家高发。目前,该肿瘤发病机制不明,可能与EBV和HtLV-1感染有关。本... 详细信息

背景和目的非特指型外周t细胞淋巴瘤(PtCL-NOS)是一组来源于成熟t细胞的高侵袭性肿瘤,预后差,五年生存率仅200%。发病有明显地域和种族差异,我国及亚洲其他国家较西方国家高发。目前,该肿瘤发病机制不明,可能与EBV和HtLV-1感染有关。本课题组前期研究应用1Mb a-CGH技术对31例PtCL-NOS进行了染色体改变的分析,发现9例在1p36.32-p36.11区段改变最为明显,且与患者的不良预后显著相关,其中8例频发性获得,1例缺失。分别位于1p36.11和1p36.32位点的FGR和tP73均为肿瘤相关基因,且都参与淋巴造血系统肿瘤的发生发展,但其在PtCL-NOS中的作用尚未见文献报道。我们拟从蛋白和基因两个水平研究FGR和tP73在PtCL-NOS中的可能作用,以验证前期研究发现,并探讨它们在PtCL-NOS发生发展中的分子机制,为该肿瘤的病理诊断和预后评估提供科学依据。方法应用免疫组织化学技术和间期荧光原位杂交技术分别从蛋白和基因两个水平对其进行研究。具体步骤如下: 1.标本收集:收集山西肿瘤医院、304医院、307医院和306医院病理科2001年10月-2010年10月临床病理活检中PtCL-NOS甲醛固定石蜡包埋组织标本34例(其中19例在前期研究中进行了1Mb a-CGH的检测)。10例扁桃体和反应性淋巴组织增生作为对照。 2.免疫组织化学技术:采用EnVision二步法,检测FGR和tP73在PtCL-NOS组织中的表达情况。实验步骤按说明书进行,每次实验均设置阳性对照和空白对照。 3.探针制备 (1) BAC DNA:FGR基因RP1-159A19 (1p36.13)和tP73基因RP5-1092A11 (1p36.26.33),由英国剑桥大学刘宏祥教授惠赠。DNA提取过程为:BAC克隆过夜培养后,Qiagen’s Qiaprep Miniprep kit提取细菌中的质粒并纯化,然后用紫外分光光度计(NanoDrop)检测DNA的浓度,浓度约为15 ng/μl。 (2) templiPhi扩增环状BAC DNA:因缺口平移法标记探针需DNA为1μg,故先使用templiPhi扩增试剂盒(美国GE Healthcare公司)对BAC DNA进行高效特异扩增,使BAC DNA的浓度达到20000 ng/μl,以备荧光标记所需。 (3)探针标记:应用缺口平移试剂盒(Nick translation Kit,美国Abbott Molecular-Vysis公司)进行探针标记。因购买的1号染色体着丝粒(CEP1)探针为罗丹明红色荧光标记,故对BAC DNA进行FItC绿色荧光标记,以示对照。 (4)探针沉淀:标记探针中含有未反应底物以及有机或无机离子,故需对探针进行纯化;又因BAC DNA中包含很多DNA重复序列,故加入人COt-1 DNA与制备探针共沉淀,以阻断FISH检测过程中的非特异性杂交。基本步骤为标记好的探针溶液中加入人COt-1 DNA、3M醋酸钠和无水酒精低温共沉淀,离心后70%酒精洗涤,低温沉淀后再次离心,最后用LSI/WCP杂交缓冲液(Abbott Molecular Vysis)重悬,4℃冰箱中保存。 4.间期荧光原位杂交:自制特异位点探针与1号染色体着丝粒探针(作为对照)混合,进行间期双色荧光原位杂交,扁桃体组织作为对照。 5.统计学分析:应用SPSS 17.0统计软件包,采用Kaplan-Meier法对病例随访资料进行生存分析,log-rank检验进行两组生存率差异的比较,Fisher’s精确检验进行两种因素之间的相关性分析,PtCL-NOS患者中,男性23例,女性11例,男女之比2.1:1,中位年龄51岁(63岁);20例发生于淋巴结,12例发生于结外组织,余2例发生部位不明。12例获得临床分期者,2例为Ⅰ级,2例为Ⅱ级,5例为Ⅲ级,3例为Ⅳ级,余临床分期不明。仅18例(52.9%)获得临床随访资料,中位随访时间为11.8个月(22个月),其中15例死亡,3例生存,余失访。在组织病理学上,正常组织结构破坏,弥漫性肿瘤细胞浸润。组成肿瘤细胞中等大小或体积较大,核形不规则,核深染或泡状核,核仁明显,核分裂多见。个别病例细胞较小,核异型性明显,可见透明细胞或R-S样细胞。肿瘤间质中高内皮小静脉增多。 2. FGR和tP73蛋白表达 (1) FGR蛋白表达:PtCL-NOS肿瘤细胞部分表达FGR蛋白,阳性产物主要位于细胞质和/或细胞核。本组34例中有11例表现为不同程度的FGR阳性,阳性表达率为32.4%。此外,肿瘤间质和反应性淋巴组织中浸润的炎细胞(主要为粒细胞和组织细胞)亦表达FGR蛋白。 (2) tP73蛋白表达:tP73

关键词：外周t细胞淋巴瘤,非特指型 FGR tP73 免疫组织化学荧光原位杂交

非特指型外周t细胞淋巴瘤染色体改变特点的研究

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非特指型外周T细胞淋巴瘤染色体改变特点的研究

作者：段瑞中国人民解放军军事医学科学院

学位级别：硕士

背景和目的非特指型外周t细胞淋巴瘤(PtCL-NOS)是一类起源于成熟t细胞的恶性肿瘤,是除去t/NK细胞淋巴瘤、淋巴母细胞淋巴瘤、间变大细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性t细胞淋巴瘤等特指型外周t细胞淋巴瘤外的一组t细胞肿瘤。该肿瘤在我国及... 详细信息

背景和目的非特指型外周t细胞淋巴瘤(PtCL-NOS)是一类起源于成熟t细胞的恶性肿瘤,是除去t/NK细胞淋巴瘤、淋巴母细胞淋巴瘤、间变大细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性t细胞淋巴瘤等特指型外周t细胞淋巴瘤外的一组t细胞肿瘤。该肿瘤在我国及其他亚洲国家发病率较高,占到成人非霍奇金淋巴瘤的近20%,其进展快、预后差,在临床表现、病理形态学、免疫表现和和遗传学特征等方面都具有明显的异质性。尽管近来对该肿瘤的生物学和遗传学特征有一些研究,但是其发生、发展的分子机制仍不清楚。本研究目的是了解非特指型外周t细胞淋巴瘤(PtCL-NOS)的分子遗传学改变特征,从而为揭示其发生、发展的分子机制、分型、诊断、治疗及预后评估提供科学依据。方法比较基因组杂交(comparative genomic hybridization, CGH)技术的基本原理是用不同的荧光染料(Cy3:蓝色;Cy5:红色)标记待测肿瘤的DNA和正常的基因组DNA,同正常人的中期染色体杂交,通过检测染色体上两种荧光信号的相对强度比率,了解待测组DNA拷贝数的改变,同时发现发生异常的染色体的位置。Array-CGH将基因组DNA转移到芯片上进行杂交,提高了检测灵敏度和精确性。本实验应用1Mb Array-CGH检测37例PtCL-NOS染色体改变,并使用tile path array-CGH和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)验证其部分结果。根据克隆性分析结果、形态学特征和提取DNA质量,最终确定本研究对象。其具体步骤如下: 1.收集解放军306医院、山西省肿瘤医院和上海长海医院病理科2001年10月-2008年12月存档的PtCL-NOS石蜡包埋组织标本47例,使用CD3抗体对5 m组织切片进行免疫组化染色,定性、定位肿瘤细胞,经手工显微切割法去除坏死组织等提高肿瘤细胞成分的比例;2. DNA提取:采用QIAamp DNA Mini Kit提取、纯化石蜡包埋组织的DNA,使用多重PCR(产物为100bp, 200bp, 300bp和400bpDNA片段)对DNA质量进行检测;3.克隆性检测:应用BIOMED-2多重PCR体系(美国InVivoScribe公司),分析t细胞受体基因重排的克隆性;4.应用1Mb Array-CGH检测PtCL-NOS染色体改变;并经tile path array-CGH验证1Mb Array-CGH的部分1、6、7、14号染色体改变;5.应用FISH对1Mb Array-CGH部分结果进行进一步验证,确定或排除一些不确定的结果,同时可以发现一些染色体拷贝数目改变。结果 1.经免疫组化染色和显微切割技术筛选后,对47例PtCL-NOS石蜡包埋组织进行DNA提取;经多重PCR检测提取DNA片段大小,结果显示:400bp,17例;300bp,10例;200bp+,10例;200bp,8例;100bp,2例。克隆性分析结果显示,26例为单克隆性,10例为多克隆性,1例结果不明确。选取DNA片段200bp+以上的37例PtCL-NOS进行1Mb Array-CGH分析,结果显示18例出现不同的染色体异常,19例未发现染色体异常。其中6例无明显染色体异常且呈多克隆基因型的病例,进一步复查组织切片未见明确的肿瘤性淋巴组织。因此,最终用于该研究的共31例,其中21例男性和10例女性,中位年龄52岁(12～75岁);11例发生在淋巴结,18例发生在结外组织,余2例部位不明;3例属于临床Ⅲ期,9例属于Ⅳ期,其余临床分期不清。25例获得临床随访资料,其中20例死亡,仅5例存活。 2. 1Mb Array-CGH分析结果显示,31例中17例(55%)出现染色体异常改变,14例未发现染色体异常。频发性染色体获得(≥3例)的区域是:1p36.13-1p36.32, 1q21.1-1q23.3, 3p24.2-3p24.3, 3p13-3p14.3, 7q22.1, 7p22.1-7p22.,7q36.1-7q36.3,7q32.1-7q32.3,7q22.1-7q34,8q11.21-8q22.3,8q24.3,9p11.2-9q12,9q33.3-9q34.3和11p15.5,其中1p36.13-1p36.32,7q22.1,7q36.1-7q36.3,7q32.1-7q32.3,7q22.1-7q34,9p11.2-9q12和9q33.3-9q34.3是最常见的基因获得(≥4例)区域;频发性染色体缺失的(≥3例)区域是:1p21.2-1p12, 5q21.7-5q23.2, 6q24.2-6q25.3, 6q27,6q22.1,9p21.1-9p21.3,10q25.3-10q26.3,10p11.23-

关键词：外周t细胞淋巴瘤,非特指型芯片-比较基因组杂交荧光原位杂交

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血管内外周t细胞淋巴瘤的临床病理特征

中华血液学杂志 2021年第7期42卷 583-590页

作者：管雪杨亦宸祁昱巩文辰徐晓莹王雅蕾郭玉虹罗烨孙琳付凯孟斌天津医科大学肿瘤医院病理科国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤防治重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津医科大学肿瘤医院中美淋巴血液肿瘤诊治中心300060 天津医科大学肿瘤医院中美淋巴血液肿瘤诊治中心美国罗斯威尔帕克癌症研究所病理科

目的总结血管内t细胞和NK细胞淋巴瘤的临床病理特点,增加对此类疾病的认识,以减少漏诊、误诊。方法回顾性分析1例原发于淋巴结内的血管内外周t细胞淋巴瘤,非特指型(IVPtCL,NOS)患者的临床及病理学特点,并复习相关文献资料。结果患者,男... 详细信息

目的总结血管内t细胞和NK细胞淋巴瘤的临床病理特点,增加对此类疾病的认识,以减少漏诊、误诊。方法回顾性分析1例原发于淋巴结内的血管内外周t细胞淋巴瘤,非特指型(IVPtCL,NOS)患者的临床及病理学特点,并复习相关文献资料。结果患者,男性,66岁,PEt-Ct示全身多发淋巴结肿大,活检示正常淋巴结结构消失,淋巴滤泡部分破坏。高倍镜下显示大量血管弥漫增生、扩张,其内见异型淋巴样细胞团局限生长于管腔内,部分浸润大血管壁,细胞中等偏大,胞质中等,核不规则,可见单个或多个核仁,染色质呈凝聚状,部分空亮,核分裂象可见。肿瘤细胞表达CD3、CD43、CD8、GrB、tIA-1及穿孔素等;原位杂交EBV-EBER(-);tCR基因重排检测(+)。予CHOP联合西达本胺方案化疗,患者不足2个月因感染、心肺功能衰竭死亡。检索相关文献,收集到有明确分型的血管内t细胞和NK细胞淋巴瘤56例,其中鼻型结外NK/t细胞淋巴瘤47例(男性27例,女性20例),间变性大细胞淋巴瘤8例(男性3例,女性5例),仅有1例为原发于脑组织的IVPtCL,NOS。本例为第2例报道的IVPtCL,NOS,且为第1例原发于淋巴结内的病例报道。结论血管内t细胞和NK细胞淋巴瘤为高度侵袭性疾病,目前尚无有效治疗方案。此病累及淋巴结的报道少,尚需积累更多病例进一步研究。

关键词：外周t细胞淋巴瘤,非特指型血管内淋巴瘤淋巴结病理诊断

CD200和ICOS在血管免疫母细胞性t细胞淋巴瘤中表达的意义与预后研究

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CD200和ICOS在血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤中表达的意义与预后研...

作者：李爱平南华大学

学位级别：硕士

目的:通过免疫组织化学检测方法研究CD200和ICOS蛋白在血管免疫母细胞性t细胞淋巴瘤、外周t细胞淋巴瘤,非特指型及经典霍奇金淋巴瘤中的表达情况;比较AItL中CD200、ICOS与CXCL-13、PD-1、CD10、BCL-6等蛋白表达的差异;分析CD200和ICOS... 详细信息

目的:通过免疫组织化学检测方法研究CD200和ICOS蛋白在血管免疫母细胞性t细胞淋巴瘤、外周t细胞淋巴瘤,非特指型及经典霍奇金淋巴瘤中的表达情况;比较AItL中CD200、ICOS与CXCL-13、PD-1、CD10、BCL-6等蛋白表达的差异;分析CD200和ICOS蛋白表达与AItL预后的关系。方法:1、收集郴州地区(郴州市第一人民医院、郴州市第三人民医院、郴州市第四人民医院和湘南附属医院)在2012年6月至2019年12月期间,通过组织学形态及免疫组织化学诊断为AItL的患者40例,并收集其临床资料、随访资料及组织标本。经两名高级职称医生复审,有39例患者确诊为AItL。2、收集郴州市第一人民医院在2016年8月至2019年7月期间诊断为CHL及PtCL-NOS病例各10例,并收集其组织标本。3、通过免疫组织化学检测方法,检测AItL患者中CD200、ICOS、CXCL-13、PD-1、CD10和BCL-6等蛋白表达情况。用同样的方法检测CHL和PtCL-NOS患者中CD200和ICOS蛋白表达情况。4、采用SPSS.23.0统计软件进行统计分析。运用卡方检验分析AItL患者中CD200和ICOS蛋白表达与患者性别、年龄、临床分期、LDH、肝脾肿大、骨髓受累、B症状、PD-1、CD10和BCL-6蛋白表达水平的比较,PtL患者中CD200、ICOS、PD-1、CD10、BCL-6等蛋白及患者性别、年龄、临床分期、LDH、肝脾肿大、骨髓受累、B症状等临床参数进行单因素生存分析,并绘制生存曲线;运用Cox比例风险模型进行多因素分析,PtL患者中CXCL-13、CD10、PD-1、BCL-6、CD200和ICOS的阳性率分别为57.69%(15/26)、41.03%(16/39)、87.18%(34/39)、74.36%(29/39)、71.79%(28/39)、61.54%(24/39);在CHL患者中CD200和ICOS阳性率分别为70%(7/10)和0%(0/10);在PtCL-N0S患者中CD200和ICOS阳性率分别为40%(4/10)和10%(1/10)。2、分析CD200和ICOS蛋白在AItL、CHL、PtCL-NOS患者中表达差异。结果显示:ICOS蛋白在AItL与CHL(P=0.001)/PtCL-NOS(P=0.004)之间的表达差异均有统计学意义;但CD200在AItL与CHL/PtCL-NOS之间的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。3、分析AItL患者中CD200和ICOS蛋白表达与临床参数及CD10、PD-1、BCL-6蛋白表达的差异。统计结果显示:CD200在AItL患者的LDH(P=0.012)及IPI评分(P=0.001)之间表达有显著差异,而CD200在AItL患者的性别、年龄、ECOG体能评分、临床分期、结外受累、肝脾肿大、B症状及CD10、PD-1、BCL-6蛋白表达等参数之间的表达无统计学意义(P>0.05);ICOS在AItL患者的LDH(P=0.010)及PD-1(P=0.002)之间表达有显著差异,而ICOS在AItL患者的性别、年龄、ECOG体能评分、临床分期、结外受累、IPI评分、肝脾肿大、B症状及CD10、BCL-6蛋白表达等参数之间的表达无统计学意义(P>0.05)。4、Kaplan-Meier法单因素分析结果显示:CD200蛋白表达(PtL患者预后差有关;CD200蛋白表达(PtL患者的病情恶化有关。5、COX比例风险回归模型多因素分析结果显示:CD200蛋白表达是判断AItL患者预后及病情进展的独立影响因素(P=0.001,P=0.001),且CD200阳性患者的死亡风险是CD200阴性患者的13.16(1/0.076)倍,恶化风险是13.33(1/0.075)倍;结外受累是判断AItL患者预后的独立影响因素(P=0.016),且结外受累≥2个患者的死亡风险是结外受累tL患者预后的独立影响(P=0.109)。结论:1、CD200和ICOS蛋白可以作为辅助诊断AItL的免疫组织化学指标。2、ICOS蛋白有助于AItL与CHL/PtCL-NOS的鉴别。3

关键词： CD200 ICOS 血管免疫母细胞性t细胞淋巴瘤滤泡辅助t细胞霍奇金淋巴瘤外周t细胞淋巴瘤,非特指型预后