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分子植物育种 2019年第22期17卷 7386-7389页

作者：黄静常沙沙杨卫丽曾玉高新征海南医学院基础医学与生命科学学院海口571199 海南医学院药学院海口571199

利用分子克隆的方法构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adkc的双T-DNA表达载体。首先设计基因Adkc、启动子E8和终止子Hsp的引物,选用植物双T-DNA表达载体pGreen-DT。其次将E8、Adkc和Hsp按顺序连接到载体上,构建Adkc双T-DNA、果实特异... 详细信息

利用分子克隆的方法构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adkc的双T-DNA表达载体。首先设计基因Adkc、启动子E8和终止子Hsp的引物,选用植物双T-DNA表达载体pGreen-DT。其次将E8、Adkc和Hsp按顺序连接到载体上,构建Adkc双T-DNA、果实特异表达的表达载体。使用Q5超保真酶成功把Adkc和Hsp扩增到一起,经酶切和连接后将启动子E8、Adkc和Hsp成功插入植物双T-DNA表达载体pGreen-DT上。成功构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adkc的双T-DNA表达载体。为后续研究中将该载体转入植物中表达,分析Adkc的功能及其参与的代谢途径、获得高效表达虾青素且不含抗生素基因的转基因植株做好了前期准备。

关键词：虾青素夏侧金盏花 Adkc pGreen-DT载体

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夏侧金盏花虾青素合成相关基因Adketo和Adkc的表达

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海南医学院学报 2012年第12期18卷 1689-1691页

作者：高新征李栎邬强蔡群芳唐历波黎岳南蒋洁海南医学院理学院海南海口571199 海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571199

目的:研究夏侧金盏花中虾青素合成相关基因Adketo和Adkc在不同组织部位的表达,从而从基因表达角度探讨这两个基因与虾青素合成的关系。方法:根据GenBank上的Adketo和Adkc基因以及内参Adactin基因的序列设计荧光定量PCR引物,通过Real-tim... 详细信息

目的:研究夏侧金盏花中虾青素合成相关基因Adketo和Adkc在不同组织部位的表达,从而从基因表达角度探讨这两个基因与虾青素合成的关系。方法:根据GenBank上的Adketo和Adkc基因以及内参Adactin基因的序列设计荧光定量PCR引物,通过Real-time PCR分析Adketo和Adkc基因的组织部位表达情况。结果:Adketo和Adkc基因均只在花中大量表达(3%),其余组织内只能检测到少量或微量表达(10-5～10-3)。结论:虾青素主要在夏侧金盏花的花中合成具有正相关关系,为证明Adketo和Adkc是虾青素合成相关基因添加了又一证据。

关键词：夏侧金盏花虾青素基因表达

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夏侧金盏花Actin基因片段的克隆及表达分析

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海南医学院学报 2013年第3期19卷 293-295,299页

作者：高新征刘嫱邬强唐历波李栎蔡望伟海南医学院理学院海南海口571101 海南医学院药学院海南海口571101 海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571101

目的:克隆夏侧金盏花中Actin基因片段并分析其组织部位表达,为以Actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础。方法:通过比较其它植物中Actin基因序列,设计夏侧金盏花Actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,... 详细信息

目的:克隆夏侧金盏花中Actin基因片段并分析其组织部位表达,为以Actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础。方法:通过比较其它植物中Actin基因序列,设计夏侧金盏花Actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,获得序列信息;根据获得的序列设计半定量RT-PCR引物,分析Actin基因在夏侧金盏花不同组织部位的表达。结果:克隆获得一长度为1 009bp的夏侧金盏花Actin基因片段,命名为AdACT,并在GenBank注册,登录号为JX436162;半定量PCR研究发现其在不同组织部位的表达无显著差异。结论:本研究初步表明其可作为研究夏侧金盏花基因表达的内参基因。

关键词：夏侧金盏花 Actin基因基因克隆基因表达

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夏侧金盏花中虾青素酯类化合物皂化及其它化合物的分离鉴定研究

夏侧金盏花中虾青素酯类化合物皂化及其它化合物的分离鉴定研究

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作者：李莉青岛大学

学位级别：硕士

夏侧金盏花是一种毛茛目、毛茛科、侧金盏花属的一年生草本植物,含有抗氧化活性极高的虾青素。因此,从夏侧金盏花提取虾青素及其它天然化合物引起研究者的极大关注。虾青素具有很强的抗氧化活性,主要从雨生红球藻和其它水生动植物中提... 详细信息

夏侧金盏花是一种毛茛目、毛茛科、侧金盏花属的一年生草本植物,含有抗氧化活性极高的虾青素。因此,从夏侧金盏花提取虾青素及其它天然化合物引起研究者的极大关注。虾青素具有很强的抗氧化活性,主要从雨生红球藻和其它水生动植物中提取获得,而从陆生植物中进行提取研究较少,夏侧金盏花作为虾青素的陆生植物来源,具有很大的研究潜力。本论文以陆生植物夏侧金盏花为研究对象,通过有机溶剂萃取的方式得到粗提物。对提取得到的虾青素类衍生物进行皂化反应条件优化,TLC检测获得的最佳皂化条件为:20 mg的粗提物使用7 mL的二氯甲烷:0.5%NaOH甲醇溶液=1:3为皂化溶剂,室温25C,皂化1 h。在此皂化条件下,对样品进行脂肪酸成分分析,得到主要脂肪酸类型为C18:3不饱和脂肪酸类化合物,并用制备薄层(pTLC)制备分离得到游离的虾青素,经核磁共振技术进行结构鉴定,并测得其含量为0.513%(以干花计)。本论文对夏侧金盏花提取得到的粗提物进行了分离鉴定,得到14个单体化合物,其中含有虾青素的自氧化产物2个(AA 1-2)、黄酮类化合物4个(AA 3-6)、甾体类化合物3个(AA 7-9)、木脂素类化合物1个(AA 10)、简单化合物2个(AA 11-12)、脂肪酸类化合物2个(AA 13-14);其中化合物AA 1为新化合物,并对其进行了生源途径的推测。对所分离得到的部分化合物进行DPPH清除自由基活性及抗菌活性实验测试,黄酮类化合物的清除自由基活性较强,其中化合物AA 3、AA 4、AA 6的IC值分别为10、8、50μg/mL;在抗菌活性试验中,化合物AA 3、AA 4和AA 6均对大肠杆菌、嗜水气单胞菌、哈氏弧菌、副溶血性弧菌、鳗弧菌具有抗菌活性;化合物AA 1对大肠杆菌、小麦纹枯病菌、柑橘绿霉病菌表现出一定的抑菌活性;化合物AA 2对大肠杆菌、柑橘绿霉病菌表现出一定的抑菌活性。本研究结果表明,夏侧金盏花中具有较高的虾青素含量,提取、分离方法简单易行,是一种具有发展潜力的虾青素来源。对虾青素酯类的皂化条件进行了合理优化,得到最佳皂化条件;并对夏侧金盏花中其它的化合物进行了分离鉴定,对其中部分化合物活性进行研究分析,为夏侧金盏花的种植应用提供了科学依据。

关键词：夏侧金盏花虾青素皂化结构鉴定生物活性

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夏侧金盏花中化学成分的分离鉴定及活性研究

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有机化学研究 2019年第1期7卷 26-30页

作者：李莉邢雅成马晓梅青岛大学化学化工学院山东青岛

夏侧金盏花(Adonis aestivalis L.)是一种毛茛目,毛茛科的一年生草本植物,利用有机溶剂进行提取得到粗提物,所得粗提物用正相硅胶、反相硅胶、SephadexLH-20凝胶与制备薄层色谱(pTLC)等进行分离得到7个单体化合物,通过核磁共振波谱、质... 详细信息

夏侧金盏花(Adonis aestivalis L.)是一种毛茛目,毛茛科的一年生草本植物,利用有机溶剂进行提取得到粗提物,所得粗提物用正相硅胶、反相硅胶、SephadexLH-20凝胶与制备薄层色谱(pTLC)等进行分离得到7个单体化合物,通过核磁共振波谱、质谱等鉴定得出化合物的结构,其中化合物1、2、3、4都是黄酮类化合物,化合物5、6、7为甾体类化合物,对所得到的化合物进行相关性质测试,并对所得到的化合物进行了DPPH活性测试,黄酮类化合物的抗氧化活性较强,为夏侧金盏花的种植使用提供了科学的依据。

关键词：夏侧金盏花结构鉴定 DPPH活性

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