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亚低温及缺营养/复营养对星形胶质细胞AQP4表达的影响

亚低温及缺营养/复营养对星形胶质细胞AQP4表达的影响

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：周勇良任玥曾红张昆南江西省人民医院神经内科江西省神经病学研究所

目的 :观察缺营养/复营养对星形胶质细胞AQP4表达的影响及在亚低温实验条件下AQP4随相应时间点的表达规律,拟探讨神经系统疾病中脑水肿的发病机制,并阐明其细胞分子的发生机理,为临床脑水肿的治疗开辟新的策略。方法:1、直接荡摇分离培... 详细信息

目的 :观察缺营养/复营养对星形胶质细胞AQP4表达的影响及在亚低温实验条件下AQP4随相应时间点的表达规律,拟探讨神经系统疾病中脑水肿的发病机制,并阐明其细胞分子的发生机理,为临床脑水肿的治疗开辟新的策略。方法:1、直接荡摇分离培养、纯化和扩增星形胶质细胞;用免疫组化鉴定星形胶质细胞,将星形胶质细胞(AC)分为正常对照组(C)、缺营养/复营养组(L/R)、缺营养/复营养亚低温组(L/R+S)。用不含血清的培养基制作细胞常温缺营养模型,记录缺营养损伤时间,缺营养组时间分别为4h、8h、12h、16h、24h,对照组不作处理。采用台盼蓝染色法判断缺营养不同时间细胞活力状况。2、缺营养12小时后分别调节温度37℃及32℃,开始记复营养时间。每组设复营养4h、8h、12h、16h共4个时间点,建立缺营养/复营养常温组(L/R)、缺营养/复营养亚低温组(L/R+S)模型。用PCR分析AQP4的表达情况,免疫荧光染色观察AQP4表达情况。结果 :1、通过对原代星形胶质细胞的分离和纯化,第三代星形胶质细胞经GFAP免疫组化鉴定纯度在95%以上。2、常温下星形胶质细胞在缺营养12h后与对照组细胞活力比较(P复营养后保持其良好状态,能满足实验要求。3、取缺营养12h的细胞分别分为缺营养/复营养常温组(L/R)、缺营养/复营养亚低温组(L/R+S),每组设复营养4h、8h、12h、16h共4个时间点,PCR分析AQP4的表达情况,免疫荧光染色观察AQP4。且PCR表达量分析结果与对照组相比(P复营养12h、16h其表达强度均低于相同时间点常温组结果。结论:星形胶质细胞在缺营养状态下随时间延长,其AQP4m RNA的表达下降,AQP4的免疫荧光灰度也下降。当星形胶质细胞在缺营养12h后恢复营养其AQP4的表达随相应时间点升高,而在亚低温实验条件下,AQP4的表达幅度较常温组更小,减轻了星形胶质细胞的水肿状态。故在脑水肿形成阶段时应用亚低温治疗及AQP4阻断剂,能够有效缓解脑水肿临床症状,为解除脑细胞缺血缺氧赢得时间。

关键词：亚低温缺营养复营养星形胶质细胞 AQP4

来源： cnki会议评论

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