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复苏合剂对感染性休克患者舌下微循环及相关因素的影响

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中国中西医结合杂志 2022年第8期42卷 968-972页

作者：张雪梅郭文辉于秋香孙玮婷高培阳成都中医药大学附属医院重症医学科成都610075 成都中医药大学临床医学院成都610075

目的探讨感染性休克患者加用中药复苏合剂对舌下微循环及相关因素的影响。方法筛选162例受试者,采用随机数字表法分组,将纳入的81例感染性休克患者分为常规组40例和复苏合剂组41例,两组均按照2016年感染性休克的治疗指南进行治疗,复苏... 详细信息

目的探讨感染性休克患者加用中药复苏合剂对舌下微循环及相关因素的影响。方法筛选162例受试者,采用随机数字表法分组,将纳入的81例感染性休克患者分为常规组40例和复苏合剂组41例,两组均按照2016年感染性休克的治疗指南进行治疗,复苏合剂组同时加用中药复苏合剂10 g,每日3次,口服/鼻饲,疗程5天。监测两组患者0、24、72、120 h舌下微循环指标:包括血管总密度(TVD)、灌注血管密度(PVD)、血管灌注比例(PPV)、血管平均血流指数(MFI)的变化;观察28天病死率及ICU住院时间。结果与常规组同期比较,复苏合剂组治疗72、120 h时MFI值升高(P0.05)。复苏合剂组ICU住院时间较常规组缩短(P复苏合剂组28天病死率低于常规组(29.3%vs.37.5%),但差异无统计学意义(P=0.5042)。结论复苏合剂可以改善感染性休克患者的微循环障碍,缩短ICU住院时间。

关键词：感染性休克旁流暗视野舌下微循环复苏合剂

复苏合剂治疗脓毒症相关性急性呼吸窘迫征大鼠的miRNAs调控机制研究

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复苏合剂治疗脓毒症相关性急性呼吸窘迫征大鼠的miRNAs调控机制研...

作者：王诗成都中医药大学

学位级别：硕士

动物实验部分第一部分:观察中药复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠肺组织损伤的影响目的:观察复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠肺组织病理HE染色以及肺损伤评分,研究复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠一般情况、病理HE染色及肺损伤病理评分... 详细信息

动物实验部分第一部分:观察中药复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠肺组织损伤的影响目的:观察复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠肺组织病理HE染色以及肺损伤评分,研究复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠一般情况、病理HE染色及肺损伤病理评分的影响。方法:在30只雄性wistar大鼠适应性喂养后,随机选取2只大鼠,取肺组织病理切片,观察造模是否成功;根据随机数字表法,将造模大鼠分成了二个组:模型组(A)、复苏合剂中剂量组(D),开始随机选取的余下8只继续作为空白组,灌服复苏合剂2次,空白组和模型组采用预设方式。对大鼠一般状况进行观察,对三组大鼠进行HE染色和肺损伤评分。结果:复苏合剂中剂量组大鼠一般情况较模型组均有所改善;肺组织病理学切片HE染色和肺损伤评分指数:在LPS干预48小时后,与空白组相比,模型组的肺损害指数从1.43上升到7.29,差异有显著性(P复苏合剂中剂量组的肺损伤得分降低,复苏合剂中剂量组得分均数为3.71,两组间的差异有统计学显著性。(P复苏合剂在脓毒症相关性ARDS模型中的miRNAs表达变化,寻找复苏合剂干预脓毒症相关性ARDS的潜在靶标miRNA以及mRNA。方法:本研究从三组大鼠肺组织中随机选择3只共9个样本,进行Illumina Hiseq高通量测序,得到数据RawReads或RawData,进行质量控制和长度筛选,得到CleanReads。再与指定物种基因组比对,统计比对率并进行分类注释,未注释上的reads用于新miRNA的预测;筛选出差异的miRNA进行后续靶基因预测和KEGG、GO富集分析以及基于ceRNA理论的miRNA-mRNA的预测。结果:差异miRNA与mRNA表达相关性分析:与空白组相比,模型组预测出29个差异表达的miRNA,预测出靶基因的差异miRNA数量为21,靶基因个数3214个,结合位点为3354个。与模型组相比,复苏合剂中剂量组预测出6个差异表达的miRNA,预测出靶基因,靶基因个数448个,结合位点为448个差异miRNA功能预测:空白组与模型组GO分析结果显示,差异表达的miRNA在3245个GO条目中富集。结论:复苏合剂能够改善LPS诱导的ARDS大鼠一般情况;能够显著减轻大鼠肺损伤程度,对脓毒症相关性ARDS大鼠起到治疗作用。模型组VS空白组的GO分析预测:生物过程主要富集于生物过程、RNA聚合酶的正向调节,蛋白质磷酸化等过程;分子功能主要蛋白结合,分子结合,ATP结合等功能;细胞成分主要定位在富集在细胞核质等成分;复苏合剂中剂量组VS模型组的GO分析预测生物过程主要富集于转录,DNA模板等过程。分子功能主要体现在蛋白结合,蛋白质同源二聚体活性等功能。细胞成分主要富集定位在细胞核等生物成分;通过KEGG公共数据库对模型组与空白组通路富集,富集到MAPK通路、钙离子信号通路等相关通路;复苏合剂中剂量组与模型组KEGG通路富集,其中富集到MAPK通路、糖基磷脂酰肌醇锚定生物合成等相关通路;根据ceRNA机制在得到复苏合剂中剂量组与模型组7对预测miRNA-mRNA关系对。细胞实验部分目的:选取了上述预测的miRNA-mRNA,探索复苏合剂在体外对人脐静脉细胞的影响,对其中的调控机制进行进一步的探索。方法:细胞模型实验:使用不同浓度的LPS(0、0.001、0.01、0.1、1、10、50和100ug/mL)诱导人脐静脉内皮细胞构建肺损伤细胞模型,CCK8检测细胞增殖情况,CCK8检测细胞增殖情况,选择最佳的LPS浓度;RT-PCR验证肺损伤ARDS细胞模型所引起的差异性变化。结果:根据CCK8统计结果选择最佳的LPS浓度,最终确定为0.1ug/mL LPS处理48h;培养人脐静脉内皮细胞,RT-PCR 检测 miR-141-5p、CD99L2-2、Hepacam、Fmn2和S100B-2的表达,第一组结果为:0.1ug/mL LPS处理48h后miR-141-5p的表达显著降低,CD99L2-2、Hepacam、Fmn2和S100B-2的表达都没有显著性变化第二组结果为:miR-141-5p、CD99L2-2和Hepacam的表达都显著降低,第三组结果为 0.01ug/mL LPS 和 0.1ug/mL LPS 处理 48h 后 CD99L2-2、Hepacam和S100B-2的表达都没有显著性变化,miR-141-5p的表达显著降低。结论:利用CCK8细胞检测细胞活力,最终确定为0.1ug/mL LPS处理48h后HUVEC细胞,为最佳浓度,RT-PCR对前期复苏

关键词：脓毒症急性呼吸窘迫综合征复苏合剂高通量测序微小RNA(miRNA)

基于mRNA/lncRNA表达谱探索复苏合剂干预脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征的作用机制

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中华中医药杂志 2022年第8期37卷 4297-4302页

作者：周秀娟张莉张传涛龙坤兰陈骏丁鹏高培阳成都中医药大学附属医院/四川省中医院成都610075 成都中医药大学附属医院重症医学科/四川省中医院成都610075

目的:基于mRNA/lncRNA表达谱,从转录后调控环节探索复苏合剂干预脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、复苏合剂高剂量组(10.5 g/kg)、复苏合剂中剂量组(7.875 g/kg),采用脂多糖... 详细信息

目的:基于mRNA/lncRNA表达谱,从转录后调控环节探索复苏合剂干预脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、复苏合剂高剂量组(10.5 g/kg)、复苏合剂中剂量组(7.875 g/kg),采用脂多糖制备脓毒症相关性ARDS模型;干预结束后,HE染色观察肺组织病理情况;高通量测序筛选mRNA/lncRNA表达谱,并通过超几何分布算法对lncRNA共表达的mRNA进行GO和KEGG富集分析。结果:复苏合剂高、中剂量组肺组织病理损伤评分较模型组显著下降(P复苏合剂中剂量组中被恢复下调,有11个下调的lncRNA在复苏合剂中剂量组中被恢复上调;Pearson相关性分析提示23个差异表达的lncRNA共有59个共表达mRNA,且二者之间呈强相关性(P复苏合剂可能通过泛素依赖性蛋白分解代谢、蛋白转运、细胞内mRNA定位等生物过程以及NF-κB信号通路、T细胞受体信号通路等信号转导途径,从转录后调控层面干预脓毒症相关性ARDS。

关键词：复苏合剂脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征长链非编码RNA NF-κB信号通路

基于转录组学的复苏合剂治疗肺外源性急性呼吸窘迫综合征的作用机制研究

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基于转录组学的复苏合剂治疗肺外源性急性呼吸窘迫综合征的作用机...

作者：周志莲成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:基于转录组学技术,探究复苏合剂治疗肺外源性急性呼吸窘迫综合征患者外周血转录组水平变化,基于这些变化,利用生信语言分析其可能的作用机制,再以脂多糖诱导人肺微血管内皮细胞炎症为模型,以复苏合剂含药血清为干预措施,验证其作... 详细信息

目的:基于转录组学技术,探究复苏合剂治疗肺外源性急性呼吸窘迫综合征患者外周血转录组水平变化,基于这些变化,利用生信语言分析其可能的作用机制,再以脂多糖诱导人肺微血管内皮细胞炎症为模型,以复苏合剂含药血清为干预措施,验证其作用机制,为复苏合剂后续的临床应用提供依据。方法:根据诊断、纳入、排除标准筛选ARDSexp患者,随机分为对照组和复苏合剂组,对照组以常规西医治疗,复苏合剂组在常规西医治疗的基础上合用复苏合剂,健康受试者为空白组,分别采集三组受试者外周血液样本,采用普通转录组的测序方法测定全血细胞的m RNA,获得原始数据,采用HISAT2软件将原始数据与Illumina Nova Seq测序平台中数据比对,获得有效数据,利用HISAT2软件获得m RNA的counts数和FPKM值。然后使用DESeq2和Edge R软件进行差异基因分析,以P复苏合剂含药血清为干预措施验证其作用信号通路,具体方法如下:(1)探索HPMEC炎症模型的LPS浓度:体外培养并鉴定人肺微血管内皮细胞,用RT-PCR法测定不同浓度LPS处理HPMEC后样本中IL-1β、TNF-αm RNA含量,明确HPMEC损伤模型所需LPS浓度。(2)探索复苏合剂治疗HPMEC炎症模型的机制:(1)制备含药血清;(2)将HPMEC随机分为5组,空白对照组、LPS组、复苏合剂低剂量组(LPS+2%含药血清)、复苏合剂中剂量组(LPS+5%含药血清)、复苏合剂高剂量组(LPS+8%含药血清),除对照组外,其余各组在常规培养基中加入50μg/m L LPS培养24h后,按分组给予相应的含药血清培养24h,运用ELISA检测各组IL-1β、TNF-α炎症因子的含量。运用RT-PCR法检测各组IL-1β、TNF-α、NF-κB m RNA转录水平。结果:(1)被复苏合剂逆转的m RNA表达:与空白组相比,在对照组中上调的2189个m RNA中,有447个m RNA在复苏合剂治疗组中被恢复下调。在对照组中下调的2330个m RNA中,有307个m RNA在复苏合剂治疗组中被恢复上调,总共有754个m RNA被复苏合剂逆转表达。GO功能富集分析:从富集TOP20条目可见,BP主要富集在炎症反应的正向调节、先天免疫反应、吞噬作用的正向调节;MF主要富集在蛋白质结合、蛋白酶结合、钙粘蛋白结合等;CC主要定位在细胞外泌体、特殊颗粒腔、胞外区等。KEGG通路富集分析:从TOP30富集通路柱状图可见,在溶酶体、细胞凋亡、白细胞跨内皮迁移、Nod样受体信号通路、MAPK信号通路、NF-κB信号通路富集显著。从TOP30富集通路气泡图可见,主要富集在溶酶体、Nod样受体信号通路、白细胞跨内皮迁移、MAPK信号通路、NF-κB信号通路等。(2)LPS浓度为1μg/ml、5μg/ml、20μg/ml时,样本中IL-1β、TNF-αm RNA转录水平无明显升高;当LPS为50μg/ml时,样本中IL-1β、TNF-αm RNA的转录水平均明显升高(P复苏合剂含药血清均下调IL-1β、TNF-αm RNA表达水平,降低其含量,对HPMEC炎性损伤起到保护作用,其中8%复苏合剂含药血清最显著(P复苏合剂含药血清处理后NF-κB1(P=0.0111)、IκBα(P=0.0271)m RNA的转录水平恢复下调。结论:(1)复苏合剂治疗肺外源性ARDS的机制可能与Nod样受体信号通路、MAPK信号通路、NF-κB炎症信号通路相关。(2)复苏合剂通过下调IL-1β、TNF-αm RNA转录表达,降低IL-1β、TNF-α炎症因子含量,对人微血管内皮细胞起到保护作用;复苏合剂对人微血管内皮细胞的炎症保护可能是通过抑制NF-κB信号通路。

关键词：肺外源性急性呼吸窘迫综合征转录组学 NF-κB信号通路复苏合剂人肺微血管内皮细胞

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复苏合剂对感染性休克血流动力学影响的研究

中国中西医结合急救杂志 2010年第6期17卷 337-339页

作者：高培阳王春霞郑翔鸿成都中医药大学附属医院急诊科ICU 四川成都610075

目的探讨复苏合剂对感染性休克患者血流动力学的影响.方法选择2007年8月至2009年8月本院重症监护病房（ICU）收治的21例感染性休克患者,以入选时年龄单双数随机分为中药治疗组（11例）和对照组（10例）.对照组给予内科基础治疗;治疗... 详细信息

目的探讨复苏合剂对感染性休克患者血流动力学的影响.方法选择2007年8月至2009年8月本院重症监护病房（ICU）收治的21例感染性休克患者,以入选时年龄单双数随机分为中药治疗组（11例）和对照组（10例）.对照组给予内科基础治疗;治疗组在对照组基础上加用复苏合剂（药物组成：附子30 g、生牡蛎30 g、干姜15 g、麻黄15 g、炙甘草10 g）25 ml鼻饲,每日4次,连用3 d.监测两组患者纳入时[中心静脉压（CVP）≥8 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）,T0]及纳入后24、48、72 h（T24、T48、T72）时的CVP、心排血指数（CI）、血管外肺水指数（EVLWI）、外周血管阻力指数（SVRI）、全心舒张期末容积指数（GEDVI）等血流动力学指标的变化,并记录28 d病死率.结果与对照组比较,治疗组T0、T24、T48、T72时CI、GEDVI明显增加[CI（L·min-1·m-2）T0：3.96±1.48比2.73±0.63,T24：4.07±2.18比2.68±0.42,T48：3.73±1.42比2.64±0.47,T72：4.09±0.95比2.99±0.51;GEDVI（ml/m2）T0：838.36±166.07比599.30±206.68,T24：828.91±212.81比554.60±102.28,T48：802.09±187.63比574.10±134.36,T72：712.27±170.30比575.20±102.17],EVLWI（ml/m2）明显降低（T0：5.83±1.76比10.20±3.15,T24：7.31±1.45比10.12±3.15,T48：6.85±2.27比9.99±1.79,T72：5.45±1.68比7.91±3.33,P＜0.05或P＜0.01）;而两组各时间点CVP、SVRI比较差异无统计学意义（均P＞0.05）.治疗组28 d病死率低于对照组（45.6%比80.0%）,但差异无统计学意义（P〉0.05）.结论复苏合剂可以明显增加感染性休克患者的CI、GEDVI,降低EVLWI,而对CVP、SVRI、28 d病死率影响不明显.

关键词：复苏合剂感染性休克血流动力学

复苏合剂对内毒素诱导的脓毒症相关性ARDS模型大鼠的疗效相关研究

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复苏合剂对内毒素诱导的脓毒症相关性ARDS模型大鼠的疗效相关研究

作者：杨杭燕成都中医药大学

学位级别：硕士

研究目的:通过观察复苏合剂干预脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)模型大鼠血清中TNF-α、HPA、IL-10水平的影响,以及肺组织形态学的改变,评价复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠的治疗作用。研... 详细信息

研究目的:通过观察复苏合剂干预脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)模型大鼠血清中TNF-α、HPA、IL-10水平的影响,以及肺组织形态学的改变,评价复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠的治疗作用。研究方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为空白组和造模组,造模组使用内毒素(3mg/kg,注射时间5min)经左侧股静脉注射诱导脓毒症ARDS动物模型,空白组大鼠按同样方法注射等体积生理盐水,将造模组分为复苏合剂高剂量组、复苏合剂中剂量组、复苏合剂低剂量组、模型组。内毒素作用持续2h后立即进行药物干预。空白组、模型组给予灌服等体积生理盐水,复苏合剂高、中、低剂量组分别给予不同浓度的等体积的复苏合剂溶液,间隔24h灌药一次,总共干预2次。分别在24h、48h的2个时间点对每组大鼠进行大鼠一般情况观察,2个时间点各随机抽取一半的大鼠,取肺组织进行HE染色法以及免疫组化法进行组织形态观察,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中TNF-α、HPA、IL-10的水平。从以上几个方面综合评估中药复苏合剂治疗脓毒症ARDS的疗效。研究结果:(1)大鼠一般情况:复苏合剂治疗组大鼠的一般状态较模型组有改善。(2)免疫组化法观察肺组织微血管数目/视野:空白组大鼠平均微血管7-9条/视野。造模后24h,模型组肺组织微血管数量较空白组减少,复苏合剂高、中、低剂量组微血管数量较模型组增加。造模后48h,模型组血管破坏较重,未查见微血管,复苏合剂高、中、低剂量组微血管数量增加。(3)HE染色法观察肺组织肺损伤评分:造模后24h,模型组肺损伤评分均数由0.91增加为1.58。复苏合剂高中低剂量组肺损伤评分降低,低剂量组1.33,中剂量组0.916,高剂量组0.916。造模后48h,模型组肺损伤评分均数由0.91增加为1.83,复苏合剂高中低剂量组肺损伤评分降低,低剂量组1.25,中剂量组1.08,高剂量组0.83。(4)在24h时,与空白组比较,模型组大鼠血清HPA水平无明显升高(P>0.05);与模型组比较,复苏合剂高剂量组、复苏合剂中剂量组、复苏合剂低剂量组血清HPA水平均无明显变化(P>0.05)。在48h时,与空白组比较,模型组血清HPA含量明显增多(P复苏合剂高剂量组血清HPA水平未见明显下降(P>0.05);与模型组比较,复苏合剂中剂量、低剂量组血清HPA水平明显降低(P复苏合剂高、中、低剂量组血清IL-10、TNF-α水平均明显降低(P复苏合剂高、中、低剂量组进行组间比较,血清IL-10、TNF-α水平无明显差异(P>0.05)。研究结论:(1)复苏合剂能够改善脓毒症相关性ARDS大鼠的一般情况,提高生存质量;(2)复苏合剂能减轻脓毒症相关性ARDS过程肺组织出血、炎症、渗出、断裂的发生,减少微血管损伤,以改善肺组织形态而起到治疗的作用;(3)2个时间点复苏合剂高、中、低剂量均明显降低血清中IL-10、TNF-α水平,在48h时间点复苏合剂中、低剂量明显降低血清中HPA水平。综合以上几方面得出复苏合剂对脓毒症相关性ARDS有一定的治疗作用。

关键词：复苏合剂脓毒症ARDS HAP IL-10 TNF-α

复苏合剂治疗急性呼吸窘迫综合征（阳气暴脱型）的随机对照研究

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复苏合剂治疗急性呼吸窘迫综合征（阳气暴脱型）的随机对照研究

作者：丁鹏成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:评价复苏合剂联合西医常规治疗阳气暴脱型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的临床疗效,探索中医药在危急重症中的作用,为ARDS的临床治疗提供新的思路与证据支持。方法:采用随机、对照、双盲的临床研究方法,将符合纳入标准的60例患者... 详细信息

目的:评价复苏合剂联合西医常规治疗阳气暴脱型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的临床疗效,探索中医药在危急重症中的作用,为ARDS的临床治疗提供新的思路与证据支持。方法:采用随机、对照、双盲的临床研究方法,将符合纳入标准的60例患者随机分为试验组和对照组。按照预定的治疗方案,两组患者均接受西医常规治疗,试验组加用中药复苏合剂(20g口服或鼻饲tid),对照组给予安慰剂(20g口服或鼻饲tid),预计治疗周期为14天。主要观察指标是有创/无创机械通气支持时间,治疗第七天、第十四天的氧合指数(Pa O/Fi O)和呼吸末正压(PEEP);次要观察指标是第28 d的病死率,院内死亡率,总住院时间,治疗14 d后的中医疗效评价,第一周和第二周所减少的的中医症候评分,APACHEⅡ评分;并观察两组患者在治疗过程中出现的不良反应。采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析,评价其临床疗效及安全性。结果:试验总计纳入了68例患者,脱落8例,试验组和对照组各30例。其中男性28例,女性40例,平均年龄为57.59±12.77岁。轻度ARDS患者13例(19.12%),中度ARDS患者有32例(47.06%),重度ARDS患者有23例(33.82%)。两组患者基线特征比较,差异无统计学意义(P>0.05),表明两组患者基线均衡,组间具有可比性。(1)机械通气时间:试验组所需的中位时间为207.50 h,对照组为234.50 h。两组患者比较,试验组所需要的的支持时间更少,差异具有统计学意义(Z=2.225,P=0.0260.05)。但试验组总住院天数少于对照组,差异具有统计学意义(16.27±6.70d vs.21.52±9.96d,P复苏合剂联合西医常规治疗阳气暴脱型急性呼吸窘迫综合征患者优于单纯的西医治疗。复苏合剂能减少阳气暴脱型ARDS患者机械通气支持时间,改善氧合指数、PEEP,减少中医症状评分、APACHEⅡ评分;并在一定程度上降低了患者的病死率,改善患者预后,且具有良好的安全性。

关键词：复苏合剂急性呼吸窘迫综合征阳气暴脱型随机对照中医有效率

基于LncRNAs调控的复苏合剂治疗脓毒症相关性急性肺损伤大鼠的作用机制研究

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基于LncRNAs调控的复苏合剂治疗脓毒症相关性急性肺损伤大鼠的作...

作者：张莉成都中医药大学

学位级别：硕士

第一部分观察中药复苏合剂对脓毒症相关性ALI大鼠肺组织损伤及血清炎症指标的影响目的:通过观察复苏合剂对脓毒症相关性ALI模型大鼠肺组织病理及血清TNF-α、IL-1β水平的影响,研究复苏合剂对脓毒症相关性ALI大鼠的保护作用。方法:(1)... 详细信息

第一部分观察中药复苏合剂对脓毒症相关性ALI大鼠肺组织损伤及血清炎症指标的影响目的:通过观察复苏合剂对脓毒症相关性ALI模型大鼠肺组织病理及血清TNF-α、IL-1β水平的影响,研究复苏合剂对脓毒症相关性ALI大鼠的保护作用。方法:(1)将44只雄性Wistar大鼠适应性喂养一周后随机取12只大鼠作为空白组(C),余下32只大鼠作为造模组予脂多糖(3mg/kg,注射时间5min)经左侧股静脉注射诱导ALI动物模型,空白组大鼠按同样的方法经左侧股静脉注射等体积生理盐水。脂多糖作用2h后,空白组和造模组各随机取2只大鼠经肺组织病理切片HE染色及肺损伤评分判断造模是否成功。(2)模型成功后按随机数字表法将30只造模大鼠分为模型组(A)、复苏合剂高剂量组(F)和复苏合剂中剂量组(D),复苏合剂高、中剂量组大鼠分别予灌服不同浓度、等体积复苏合剂溶液,间隔24h给药一次,共给药2次,空白组和模型组按照同样的方法灌服等体积生理盐水。在中药干预48h后,对每组大鼠进行一般情况观察,同时每组各随机选取6只大鼠进行肺组织病理切片HE染色及肺损伤评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平。结果:(1)大鼠一般情况观察:复苏合剂高、中两个剂量组大鼠一般情况较模型组均有所改善。(2)肺组织病理切片HE染色及肺损伤评分:中药干预48h后,与空白组相比较,模型组肺损伤评分均数由1.33增加为7.67,差异具有统计学意义(P复苏合剂高、中剂量组肺损伤评分降低,高剂量组评分均数为3.83,中剂量组评分均数为3.67,差异具有统计学意义(P复苏合剂高、中剂量组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)血清炎症相关指标变化:中药干预48h后,与空白组相比,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平明显升高(P复苏合剂高、中剂量组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平明显下降(P复苏合剂高、中剂量组比较大鼠血清TNF-α、IL-1β水平无明显差异(P>0.05)。第二部分转录组高通量测序检测肺组织LncRNA差异表达谱及其共表达mRNA的GO功能和KEGG通路富集分析目的:通过高通量测序技术,探讨复苏合剂对脓毒症相关性ALI大鼠肺组织lncRNA表达谱的影响,探寻复苏合剂治疗脓毒症相关性ALI的可能作用靶点,为复苏合剂的临床应用和深入机制研究奠定基础和依据。方法:根据大鼠肺损伤程度及血清相关指标水平分别从空白组、模型组、复苏合剂中剂量组中各筛选3只大鼠肺组织样品,提取样品总RNA,RNA质量检测,建库测序,应用eXpress和Bowtie2软件对转录本定量,获得每组样品lncRNA和编码基因的表达水平(Fragments PerKilobase Million,FPKM),通过 DESeq 软件筛选差异表达的lncRNA和mRNA,以P复苏合剂中剂量组有133个差异表达的lncRNA(62个上调和71个下调)和59个差异表达mRNA(26个上调和33个下调)。火山图分析结果显示,空白组与模型组之间以及模型组与复苏合剂中剂量组之间的lncRNAs表达差异显著。(2)大鼠肺组织中被复苏合剂逆转的LncRNAs表达谱通过对空白组和模型组以及模型组与复苏合剂中剂量组差异表达基因取交集后发现,与空白组比较,模型组中有21个上调的lncRNA在复苏合剂中剂量组中被恢复下调,有11个下调的lncRNA在复苏合剂中剂量组中被恢复上调。聚类分析显示了空白组、模型组与复苏合剂中剂量组交集lncRNA的表达值,并提示这三组间的表达模式存在显著差异。(3)差异LncRNA与mRNA表达相关性分析将32个被复苏合剂逆转的lncRNA与差异表达mRNA的表达量数据进行pearson相关性检验,结果提示23个差异表达的lncRNA共有59个共表达mRNA,其对应的相关系数的绝对值均大于0.8,P复苏合剂逆转的lncRNA其共表达mRNA的GO功能分

关键词：脓毒症相关性ALI 复苏合剂炎症长链非编码RNA

基于肺泡灌洗液中炎症介质研究复苏合剂在中—重度ARDS患者临床应用

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基于肺泡灌洗液中炎症介质研究复苏合剂在中—重度ARDS患者临床应...

作者：植丽佳成都中医药大学

学位级别：硕士

一、研究目的观察中药复苏合剂对中-重度ARDS患者支气管肺泡灌洗液中炎症因子的影响,评价复苏合剂应用于中-重度ARDS患者的有效性及安全性,为中医药防治ARDS提供思路及证据。二、研究方法选择在2019年12月至2020年12月间,成都中医药大... 详细信息

一、研究目的观察中药复苏合剂对中-重度ARDS患者支气管肺泡灌洗液中炎症因子的影响,评价复苏合剂应用于中-重度ARDS患者的有效性及安全性,为中医药防治ARDS提供思路及证据。二、研究方法选择在2019年12月至2020年12月间,成都中医药大学附属医院重症医学科(Intensive care unit,ICU)收治的中-重度ARDS患者60例。按照随机、双盲对照的原则,把符合研究标准的患者随机分为两组,治疗组给予西医综合治疗(2019年ICS指南:急性呼吸窘迫综合征的管理)+复苏合剂20g鼻饲或口服q6h×7天,对照组在西医综合治疗(2019年ICS指南:急性呼吸窘迫综合征的管理)+安慰剂组20g鼻饲或口服q6h×7天。疗程为7天,收集两组患者治疗前后肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6和IL-10(流式荧光法)、氧合指数、PEEP、机械通气时间、APACHEⅡ评分等治疗。使用统计软件R(Version 3.6.3;R Core Team,2020)进行数据统计学分析,复苏组与对照组临床疗效及安全性指标的差异。三、结果1.肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6和IL-10情况:治疗后与治疗前比较,组内比较,患者肺泡灌洗液中的各炎症因子(IL-10、IL-6、TNF-α)都明显下降(P0.001);治疗后,复苏合剂组的肺泡灌洗液中炎性因子均比安慰剂组明显下降(P复苏合剂组氧合指数显著改善(P复苏合剂组PEEP水平随着干预时间增加呈显著下降趋势(P复苏合剂组患者PEEP下降趋势较安慰剂组明显,组间比较无差异。4.机械通气时间:与安慰剂组相比,复苏合剂组机械通气时间显著降低(P复苏合剂组治疗后的中医症候评分显著降低(P复苏合剂组治疗后的中医症候评分较治疗前显著降低(P复苏合剂组与安慰剂组患者治疗后的中医疗效评价,复苏合剂组中患者疗效倾向于分布为治愈、显效;安慰剂组患者疗效更倾向于分布为有效或无效,即复苏合剂组患者的整体疗效显著优于对照组(P=0.019)。*** II评分:与安慰剂组相比,复苏合剂组第1天、第3天APACHE II评分无差异(P>0.05),而第7天时复苏合剂组APACHE II评分显著降低(P0.05)。四、结论中药复苏合剂联合西医综合治疗有效减低中-重度ARDS患者肺泡渗出液中的炎性介质;同时在改善氧合情况、PEEP、APACHE II评分,减少机械通气时间,改善中医症候评分及疗效。

关键词： ARDS 复苏合剂 IL-6 IL-10 TNF-α