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复方斑蝥注射液抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖相关通路的研究

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复方斑蝥注射液抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖相关通路的研究

作者：李琳哈尔滨商业大学

学位级别：硕士

复方斑蝥注射液(Compound Cantharide Injection,CCI),活血化瘀中药斑蝥和扶正理气中药人参、黄芪、刺五加组方而成。有益气养阴、清热解毒、消瘀散结的功效,对人肝癌、肺癌、直肠癌等均有较好的治疗作用,在肿瘤临床治疗中应用较为广泛... 详细信息

复方斑蝥注射液(Compound Cantharide Injection,CCI),活血化瘀中药斑蝥和扶正理气中药人参、黄芪、刺五加组方而成。有益气养阴、清热解毒、消瘀散结的功效,对人肝癌、肺癌、直肠癌等均有较好的治疗作用,在肿瘤临床治疗中应用较为广泛,但复方斑蝥注射液对胃癌的药学研究及相应的作用机理研究较少,相关机制不明确。本课题组前期采用网络药理学采用大数据的方法,对复方斑蝥注射液的作用机理进行了分析和预测。本文在此基础上对网络药理学预测的复方斑蝥注射液抗胃癌的机制进行实验验证。本论文以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象,首先对复方斑蝥注射液抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的药效学进行了考察,其次对其诱导人胃癌SGC-7901细胞发生周期阻滞的机制进行研究,最后对抑制胃癌细胞增殖的相关蛋白通路进行了验证。本文主要开展了五个方面的研究,分别为:(1)复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞细胞毒作用的影响;(2)复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的影响;(3)复方斑蝥注射液对胃癌SGC-7901细胞TNF-α通路的影响;(4)复方斑蝥注射液对胃癌SGC-7901细胞AR通路的影响;(5)复方斑蝥注射液对胃癌SGC-7901细胞TGF-β通路的影响。在复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞细胞毒作用的研究中,MTT法和绘制细胞生长曲线的方法观察复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用,发现复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞具有较好的增殖抑制作用。倒置显微镜法和荧光显微镜法观察复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞形态的影响,发现复方斑蝥注射液能够显著改变人胃癌SGC-7901细胞形态,破坏细胞膜和细胞核结构促进人胃癌SGC-7901细胞死亡。通过这部分研究表明复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞有明显的增殖抑制作用。网络药理学的研究结果表明,复方斑蝥注射液抑制人胃癌作用于引起人胃癌细胞周期阻滞、调控人胃癌细胞TNF-α信号通路、AR信号通路和TGF-β信号通路密切相关,因此接下来我们观察了复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞周期、TNF-α信号通路、AR信号通路和TGF-β信号通路的影响。复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞周期阻滞的研究中,应用流式细胞术和PI单染法测定复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞周期的影响,发现复方斑蝥注射液能够将人胃癌SGC-7901细胞阻滞在S期;检测复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞周期调控相关蛋白表达的影响,发现CDK4和cyclinD1的表达量随着药物浓度的增加,呈现上升趋势,促使处在G/G期的细胞逐渐向S期细胞转变,CDK2和cyclin A的表达量呈现下降趋势,阻滞S期细胞进入G期。复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞TNF-α通路的影响中,检测复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞TNF-α、IKB-α、NF-κB、MEKK1、MKK7、JNK、caspase 8、caspase 3和caspase7蛋白表达的影响,发现随着复方斑蝥注射液浓度的增加,可以上调TNF-α、P-IKBα、MEKK1、P-MKK7、P-JNK、cleaved caspase 8、cleaved caspase 3和cleaved caspase 7的表达,下调IKB-α、NF-κB、JNK和caspase 3的表达,而对MKK7、caspase 8和caspase 7三种蛋白表达量无明显影响,表明复方斑蝥注射液通过调控人胃癌SGC-7901细胞caspase家族介导的细胞凋亡途径、NF-κB参与转录调控的信号通路以及JNK信号转导途径这三条TNF-α经典通路起到抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用。复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞AR通路影响过程中,检测复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞AR和STEAP1蛋白表达的影响,发现复方斑蝥注射液可以上调AR(cytoplasmic)蛋白的表达,下调AR(nucleus)和STEAP1蛋白的表达,表明复方斑蝥注射液通过促进人胃癌SGC-7901细胞AR蛋白在胞浆和胞核间的分布,调控AR蛋白通路发挥抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用。最后研究了复方斑蝥注射液对人胃癌SGC-7901细胞TGF-β蛋白通路的影响,检测复方斑蝥注射液对胃癌SGC-7901细胞TGF-β、smad2/3和smad4蛋白表达水平的影响,发现复方斑蝥注射液浓度能够上调smad4蛋白的表达,下调TGF-β和p-smad2/3蛋白的表达,而对smad2/3蛋白表达无明显影响。表明复方斑蝥注射液通过调控人胃癌SGC-7901细胞TGF-β蛋白发挥细胞增殖抑制作用。本文研究发现复方斑蝥注射液能够抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,这一作用与阻滞人胃癌SGC-7901细胞于S

关键词：复方斑蝥注射液人胃癌SGC-7901细胞 TNF-α通路细胞周期 AR通路 TGF-β通路

复方斑蝥注射液辅助结直肠癌根治术治疗结直肠癌的效果及安全性分析

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中华中医药学刊 2019年第7期37卷 1718-1720页

作者：陈中建苟菲张天锋南阳医学高等专科学校第一附属医院普通外科一科

目的:分析复方斑蝥注射液辅助结直肠癌根治术治疗结直肠癌的效果及安全性分析。方法:选取行结直肠癌根治术的患者82例,根据治疗方法不同分为对照组和观察组。对照组患者术后1个月行单纯化疗治疗,观察组患者术后1个月采用复方斑蝥注射液... 详细信息

目的:分析复方斑蝥注射液辅助结直肠癌根治术治疗结直肠癌的效果及安全性分析。方法:选取行结直肠癌根治术的患者82例,根据治疗方法不同分为对照组和观察组。对照组患者术后1个月行单纯化疗治疗,观察组患者术后1个月采用复方斑蝥注射液辅助化疗治疗,分析两组患者治疗后的临床效果。结果:观察组患者总有效率为43.90%,对照组为29.27%,观察组患者总有效率高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,两组患者TGF-β1、VEGF水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周、4周后,观察组患者TGF-β1、VEGF水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者1年、3年复发率分别为0.00%,4.88%;对照组为2.44%,24.39%;观察组3年复发率低于对照组,但1年复发率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:结直肠癌根治术后采用复方斑蝥注射液辅助治疗效果显著,可降低患者TGF-β1、VEGF水平,减少不良反应和复发的发生率,安全性高。

关键词：复方斑蝥注射液结直肠癌根治术疗效不良反应

复方斑蝥注射液对直肠癌术后FOLFOX4化疗患者免疫功能及血清TGF-β_1和CRP表达的影响

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现代中西医结合杂志 2018年第27期27卷 2986-2989页

作者：管云柱福建省宁德市医院福建宁德352100

目的观察复方斑蝥注射液对直肠癌术后FOLFOX4化疗患者免疫功能及血清转化生长因子-β_1(TGF-β_1)和C反应蛋白(CRP)表达的影响。方法将98例直肠癌术后患者随机分为2组,对照组49例给予FOLFOX4方案化疗,研究组49例给予复方斑蝥注射液联合F... 详细信息

目的观察复方斑蝥注射液对直肠癌术后FOLFOX4化疗患者免疫功能及血清转化生长因子-β_1(TGF-β_1)和C反应蛋白(CRP)表达的影响。方法将98例直肠癌术后患者随机分为2组,对照组49例给予FOLFOX4方案化疗,研究组49例给予复方斑蝥注射液联合FOLFOX4方案治疗,2组均以2周为1个化疗周期,持续治疗3个化疗周期。比较2组治疗后临床疗效,检测2组治疗前后免疫功能指标及血清TGF-β_1、CRP水平。结果治疗后,研究组临床治疗总有效率显著高于对照组(P0.05),研究组CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+和NK细胞水平均较治疗前显著升高(P均复方斑蝥注射液联合FOLFOX4方案化疗治疗能明显改善直肠癌术后患者免疫功能,降低血清TGF-β_1和CRP水平,从而阻止肿瘤细胞生长、转移。

关键词：复方斑蝥注射液 FOLFOX4化疗直肠癌手术免疫功能转化生长因子-β1 C反应蛋白

复方斑蝥注射液对中晚期结直肠癌TGF-β1表达影响的前瞻性临床研究

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云南中医学院学报 2016年第4期39卷 47-50页

作者：刘冰心唐世锋李有杰王璐孙铮迪臧传鑫孙长岗山东中医药大学山东济南250355 潍坊市中医院山东潍坊261041

目的探讨复方斑蝥注射液对中晚期结直肠癌患者TGF-β1表达的影响。方法选取潍坊市中医院肿瘤中心收治的中晚期结直肠癌患者92例,随机分为2组,每组各46例。对照组采用FOLFOX4化疗方案治疗,治疗组在化疗基础上联合复方斑蝥注射液,分别检... 详细信息

目的探讨复方斑蝥注射液对中晚期结直肠癌患者TGF-β1表达的影响。方法选取潍坊市中医院肿瘤中心收治的中晚期结直肠癌患者92例,随机分为2组,每组各46例。对照组采用FOLFOX4化疗方案治疗,治疗组在化疗基础上联合复方斑蝥注射液,分别检测治疗前及治疗1、2、3个周期后两组患者血清TGF-β1水平以及评价近期临床疗效。结果在化疗进行到第1、2、3周期时,两组患者血清中TGF-β1水平均有所改善,治疗组与对照组比较水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论复方斑蝥注射液能下调结直肠癌组织中的TGF-β1的表达水平,抑制肿瘤的生长、浸润,其作用机制可能与肿瘤血管的抑制和癌细胞的死亡有关,具有良好的临床疗效。

关键词：复方斑蝥注射液结直肠癌 TGF-β1 临床疗效

复方斑蝥注射液结合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的效果探析

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世界最新医学信息文摘 2016年第16期 146-147页

作者：魏岩吉林省白城市中医院内三科

目的:分析复方斑蝥注射液结合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法:选取本院中晚期非小细胞肺癌患者90例,接受治疗的时间为2012年3月至2014年8月期间,随机分为两组(观察组和对照组),观察组对照组两组均采用化疗治疗,观察组再采... 详细信息

目的:分析复方斑蝥注射液结合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法:选取本院中晚期非小细胞肺癌患者90例,接受治疗的时间为2012年3月至2014年8月期间,随机分为两组(观察组和对照组),观察组对照组两组均采用化疗治疗,观察组再采用复方斑蝥注射液治疗,比较两组患者治疗后的总有效率和住院时间。结果:观察组中晚期非小细胞肺癌患者治疗后的总有效率和住院时间优于对照组中晚期非小细胞肺癌患者(P复方斑蝥注射液结合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌具有良好的临床效果。

关键词：复方斑蝥注射液化疗治疗中晚期非小细胞肺癌

复方斑蝥注射液辅助化疗药物用于原发性肝癌患者化疗中对其疗效的影响

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中国民康医学 2015年第24期27卷 78-79页

作者：陈坤燕江苏省启东市人民医院江苏启东226200

目的:探讨复方斑蝥注射液辅助化疗药物用于原发性肝癌患者治疗中的疗效,为临床化疗提供指导。方法:选取原发性肝癌患者86例按照病历序号分为观察组和对照组。观察组患者44例,采用复方斑蝥注射液辅助化疗药物进行治疗;对照组患者42例,按... 详细信息

目的:探讨复方斑蝥注射液辅助化疗药物用于原发性肝癌患者治疗中的疗效,为临床化疗提供指导。方法:选取原发性肝癌患者86例按照病历序号分为观察组和对照组。观察组患者44例,采用复方斑蝥注射液辅助化疗药物进行治疗;对照组患者42例,按常规化疗方法治疗。连续治疗30 d后,对两组患者的疗效,毒副作用及生存质量等数据进行比较。结果:观察组患者的有效率可达56.8%,毒副作用发生率为36.4%,生存质量改善率为68.2%,明显优于对照组(P复方斑蝥注射液辅助化疗药物用于原发性肝癌化疗患者的治疗中能够在确保疗效的基础上,降低其毒副作用,改善患者的生存质量,具有重要的临床价值。

关键词：复方斑蝥注射液化疗原发性肝癌生存质量不良反应

复方斑蝥注射液在中西医结合治疗恶性肿瘤中的临床研究与应用进展

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医学综述 2011年第5期17卷 779-781页

作者：王国栋米淑玲天津医科大学第二医院药剂科天津300211

恶性肿瘤是危害人类健康和生命的严重疾病,中西医结合疗法成为研究热点之一。复方斑蝥注射液作为一种现代中药制剂,已经广泛应用于肿瘤的临床辅助治疗。该制剂配合放化疗可以明显提高放、化疗的疗效,同时降低放、化疗的不良反应,提高机... 详细信息

恶性肿瘤是危害人类健康和生命的严重疾病,中西医结合疗法成为研究热点之一。复方斑蝥注射液作为一种现代中药制剂,已经广泛应用于肿瘤的临床辅助治疗。该制剂配合放化疗可以明显提高放、化疗的疗效,同时降低放、化疗的不良反应,提高机体免疫力,改善患者的生存质量。现就该药近年来的临床研究与应用进展进行综述,为进一步的循证医学研究提供依据。

关键词：复方斑蝥注射液抗肿瘤现代中药制剂中西医结合综合治疗

复方斑蝥注射液联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效观察

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中国医药指南 2010年第23期8卷 65-67页

作者：明君李小明辽宁省铁法煤业集团总医院胸外科 112700

目的观察复方斑蝥注射液对中晚期非小细胞肺癌化疗的增效减毒作用。方法选择62例中晚期非小细胞肺癌患者,分为治疗组32例,对照组30例。两组均应用相同化疗方案予以全身化疗,治疗组同时应用复方斑蝥注射液。2～4个周期化疗后评价疗效。... 详细信息

目的观察复方斑蝥注射液对中晚期非小细胞肺癌化疗的增效减毒作用。方法选择62例中晚期非小细胞肺癌患者,分为治疗组32例,对照组30例。两组均应用相同化疗方案予以全身化疗,治疗组同时应用复方斑蝥注射液。2～4个周期化疗后评价疗效。结果①治疗组的总有效率为59.4%,对照组的总有效率为33.3%,有统计学意义(P复方斑蝥注射液对于中晚期非小细胞肺癌化疗具有增效减毒作用。

关键词：非小细胞肺癌化疗复方斑蝥注射液

复方斑蝥注射液联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效观察

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大家健康(学术版) 2012年第10期 24-25页

作者：明军李小明辽宁省铁法煤业集团总医院胸外科

目的观察复方斑蝥注射液对中晚期非小细胞肺癌化疗的增效减毒作用。方法选择60例中晚期非小细胞肺癌患者随机分为2组。2组均应用相同全身化疗方案,治疗组同时应用复方斑蝥注射液。化疗2～4个周期后进行疗效评价。结果治疗组的总有效率为... 详细信息

目的观察复方斑蝥注射液对中晚期非小细胞肺癌化疗的增效减毒作用。方法选择60例中晚期非小细胞肺癌患者随机分为2组。2组均应用相同全身化疗方案,治疗组同时应用复方斑蝥注射液。化疗2～4个周期后进行疗效评价。结果治疗组的总有效率为59.4%,对照组的总有效率为33.3%,两组差异有统计学意义(P复方斑蝥注射液对于中晚期非小细胞肺癌化疗具有增效减毒作用。

关键词：非小细胞肺癌化疗复方斑蝥注射液