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基于IFNγ-STAT1、IL-4-STAT6信号通路探究复方五凤草液治疗结核性溃疡的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：黄子慧钱佳燕洪练青郭丹丹马朝群南京中医药大学南京中医药大学附属南京市中西医结合医院南京中医药大学附属医院

目的：观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效，并基于干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ）/信号转导和转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1，STAT1)、白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)/信号转导和转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6，STAT6)信号通路和卡介苗（Bacillus Calmette Guerin，BCG）诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法：（1）临床试验：将135 例结核性溃疡患者分为观察组、中医对照组和西医对照组。在规范抗结核治疗基础上，观察组予复方五凤草液，中医对照组予康复新液，西医对照组予异烟肼液局部外用治疗，观察周期28 d。分别观察三组患者观察安全性指标、创面愈合总有效率、创面组织病理学形态及创面组织、血液中IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，填写中医评分量表(Traditional Chinese Medicine Syndrome Score Scale， TCMSSS）病例报告表(Case Report Form， CRF)。（2）细胞实验：建立BCG诱导THP-1巨噬细胞模型，分别予不同药物处理后分为BCG组、BCG+康复新液组、BCG+异烟肼液组、BCG+复方五凤草液组。镜下观察各组BCG菌落情况，收集细胞上清液并离心，蛋白质印迹（Western Blot）、实时荧光定量(Real Time Quantitative PCR，RT-qPCR）技术检测IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，流式细胞术检测药物对CD11b、CD86、CD163、CD206表达的影响。结果：（1）临床试验：治疗期间，3组患者安全性指标无明显差异；观察组总有效率（95.56%）高于中医对照组（82.22%）、西医对照组（75.56%）；治疗28 d后，与中、西医对照组比较，观察组创面组织病理学形态改善更为明显，观察组患者IFN-γ、STAT1的表达低于中、西医对照组，IL-4、STAT6的表达高于中、西医对照组；与中、西医对照组比较，观察组中医证候积分显著降低。（2）细胞实验：THP-1巨噬细胞在感染BCG后吞噬泡明显增多，自噬小体增多；各组药物干预后胞内结核分枝杆菌的存活率降低。Western blotting、RT-qPCR、流式实验结果显示与对照组相比，BCG组M1型巨噬细胞所占比例较多，另3组M2型巨噬细胞所占比例较多。其中，BCG+复方五凤草液组中M2巨噬细胞占比显著，高于其他3组。BCG+复方五凤草液组IFN-γ、STAT1表达降低，IL-4、STAT6表达增高，CD86表达明显下调，CD206的表达显著上调。结论：复方五凤草液治疗结核性溃疡临床疗效显著，其作用机制可能与抑制病原菌，干预IFN-γ/STAT1、IL-4/STAT6信号通路以介导M1/M2巨噬细胞极化平衡有关。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡 IFN-γ/STAT1 IL-4/STAT6 BCG 巨噬细胞极化

复方五凤草液对创面愈合和巨噬细胞极化的影响

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中成药 2022年第5期44卷 1612-1617页

作者：高璐珏黄子慧朱思洵高敏行钱佳燕孙佳玥陈晓钰余洋南京中医药大学附属南京市中西医结合医院江苏南京210014

目的观察复方五凤草液对创面愈合和巨噬细胞极化的影响,探究其泄毒生新的机制。方法人单核系U937细胞经PMA诱导成为M0型巨噬细胞,采用LPS/IFN-γ和IL-4/IL-13诱导成为M1和M2型巨噬细胞,加入1.0、1.5、2.0 mg/mL复方五凤草液进行处理,采... 详细信息

目的观察复方五凤草液对创面愈合和巨噬细胞极化的影响,探究其泄毒生新的机制。方法人单核系U937细胞经PMA诱导成为M0型巨噬细胞,采用LPS/IFN-γ和IL-4/IL-13诱导成为M1和M2型巨噬细胞,加入1.0、1.5、2.0 mg/mL复方五凤草液进行处理,采用流式细胞仪检测细胞膜表面CD86、CD206的表达,采用免疫印迹法检测Arg-1、iNOS蛋白表达,ELISA法检测上清液中TNF-α、TGF-β水平。建立大鼠难愈性创面模型,对照组采用凡士林处理,治疗组采用复方五凤草液处理,在第1、3、7、14天记录创面愈合率、肉芽量和腐肉量,并取创面肉芽组织,采用实时荧光定量法检测组织匀浆中Arg-1、iNOS的mRNA表达,ELISA法检测TNF-α、TGF-β水平。结果不同剂量复方五凤草液对M1型标志分子iNOS、TNF-α、CD86的表达无影响;能上调M2型标志分子Arg-1、TGF-β、CD206的表达。与对照组比较,复方五凤草液能提高创面的肉芽量和愈合率,降低创面的腐肉量,降低iNOS和TNF-α的表达,提高Arg-1和TGF-β的表达。结论复方五凤草液通过调节巨噬细胞M1、M2的极化发挥“泄毒生新”作用,促进慢性难愈性创面的修复。

关键词：复方五凤草液慢性难愈性创面巨噬细胞极化泄毒生新

从巨噬细胞角度探讨复方五凤草液干预结核性溃疡的机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第4期29卷 86-96页

作者：钱佳燕黄子慧孙佳玥许费昀王裕玲余洋南京中医药大学附属南京市中西医结合医院江苏210014

目的:探讨复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效及对巨噬细胞极化的影响。方法:(1)临床实验。将南京市中西医结合医院145例结核性溃疡患者按随机数字表法分为观察组、对照Ⅰ组和对照Ⅱ组。3组均予以基础抗结核化学治疗的同时,观察组予... 详细信息

目的:探讨复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效及对巨噬细胞极化的影响。方法:(1)临床实验。将南京市中西医结合医院145例结核性溃疡患者按随机数字表法分为观察组、对照Ⅰ组和对照Ⅱ组。3组均予以基础抗结核化学治疗的同时,观察组予以复方五凤草液,对照Ⅰ组予以康复新液,对照Ⅱ组予以异烟肼液局部外用治疗,疗程4周。分别观察3组患者创面愈合总有效率、中医证候积分、创面组织病理学形态及创面组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)的表达水平。(2)细胞实验。RAW264.7细胞在完全培养基DMEM(10%的胎牛血清,1%青-链酶素溶液)于37℃、5%CO_(2)的细胞培养箱中培养。经佛波酯(PMA)诱导后向巨噬细胞分化,分别用脂多糖(LPS)诱导成M1巨噬细胞、白细胞介素-4(IL-4)诱导成M2巨噬细胞,分别予康复新溶液、异烟肼液、复方五凤草液处理以上细胞模型36 h,收集细胞上清液并离心,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、iNOS和Arg-1的蛋白量的表达,流式细胞术(FCM)检测药物对CD86、CD206表达的影响。结果:(1)临床实验。与对照Ⅰ组[87.5%(42/48),χ^(2)=3.962,P复方五凤草液组的总有效率[98.0%(48/49)]明显较高;治疗28 d后,与对照Ⅰ组、对照Ⅱ组比较,复方五凤草液组的中医证候积分明显降低(P复方五凤草液组创面组织病理学形态改善更为明显;免疫组化结果显示,治疗28 d后,与对照Ⅰ组、对照Ⅱ组比较,复方五凤草液组局部病灶组织样本中的iNOS表达量明显降低(P液组、LPS+复方五凤草液组中iNOS、TNF-α表达下降(P液组、LPS+复方五凤草液组中iNOS表达下降(P复方五凤草液组TNF-α水平显著下降(P液组比较,LPS+复方五凤草液组中TNF-α表达下降(P液组、IL-4+复方五凤草液组中Arg-1、TGF-β表达升高(P液组、IL-4+复方五凤草液组中Arg-1、TGF-β表达升高(P液组比较,IL-4+复方五凤草液组中Arg-1、TGF-β表达升高(P液组、LPS+复方五凤草液组中CD86表达下降(P液组、LPS+复方五凤草液组中CD86表达下降(P液组比较,LPS+复方五凤草液组中CD86表达下降(P液组、IL-4+复方五凤草液组中CD206表达升高(P液组、IL-4+复方五凤草液组中CD206表达升高(P液组比较,IL-4+复方五凤草液组中CD206表达升高(P复方五凤草液能有效促进结核性溃疡愈合,其作用机制可能是通过抑制iNOS、TNF-α、CD86的表达并促进Arg-1、TGF-β、CD206的表达,从而调控M1/M2巨噬细胞极化平衡来完成。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡巨噬细胞极化慢性创面

基于PI3K/AKt通路探讨复方五凤草液干预结核性溃疡的作用机制

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基于PI3K/AKt通路探讨复方五凤草液干预结核性溃疡的作用机制

作者：陈晓钰南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:1.观察复方五凤草液外治结核性溃疡的临床效果;2.以PI3K/AKt通路为切入点,结合巨噬细胞极化理论,从分子水平初步探讨复方五凤草液干预结核性溃疡可能的作用机制。方法:将76例纳入研究的患者随机分为试验组（复方五凤草液组）和对... 详细信息

目的:1.观察复方五凤草液外治结核性溃疡的临床效果;2.以PI3K/AKt通路为切入点,结合巨噬细胞极化理论,从分子水平初步探讨复方五凤草液干预结核性溃疡可能的作用机制。方法:将76例纳入研究的患者随机分为试验组（复方五凤草液组）和对照组（康复新液组）两组,每组各38例。所有患者均以规范抗结核治疗为基础,对照组以中成药康复新液进行局部换药处理,试验组予以院内协定方复方五凤草液外治。观察时间为28天,以治疗前及治疗后第7、14、21、28天作为时间节点,观察各个时间节点创面愈合率、创面腐去时间、上皮生长时间、中医证候积分的变化,定期监测血常规、肝肾功能,于各时间节点采集患者血液及创面组织样本,观察在不同治疗阶段PI3K、AKt、MDM2、p53、TNF-α、VEGF的表达水平。结果:1.试验组和对照组在治疗第21天起,愈合趋势明显,治疗后第21、28天的创面愈合率远超治疗后第7天（P＜0.05）;组间比较,试验组在28天创面愈合率高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.与康复新液组相比,复方五凤草液组能明显提高创面愈合率、缩短创面腐去时间与上皮生长时间,在改善中医证候积分方面,均成效显著,差异有统计学意义（P＜0.05）。***检测两组血浆中PI3K、AKt、MDM2、p53、TNF-α、VEGF的蛋白表达水平:治疗过程中TNF-α、p53呈现递减趋势,PI3K、AKt、MDM2、VEGF呈递增趋势;治疗后第21天起,六项指标开始显著变化;治疗后期,同一时间点,试验组与对照组相比,试验组更有效提高PI3K、AKt、MDM2、VEGF蛋白表达水平,降低了 TNF-α、p53蛋白表达水平,差异显著（P＜0.05）。*** 检测两组创面组织中 PI3K、AKt、MDM2、p53、TNF-α、VEGF mRNA 表达水平:PI3K、AKt表达整体为上升趋势,但在治疗过程中,治疗后第21天表达量低于第14天,而后表达再次提高,且高于治疗前;MDM2、VEGF呈现递增趋势,TNF-α、p53呈现递减趋势,且于治疗后第14天起六项指标开始显著变化;治疗后期,同一时间点,试验组与对照组相比,试验组更有效提高PI3K、AKt、MDM2、VEGF mRNA表达水平,降低了 TNF-α、p53 mRNA表达水平,差异具有统计学意义（P＜0.05）。*** Blot法检测两组创面组织中PI3K、AKt、MDM2、p53、TNF-α、VEGF蛋白表达情况,治疗后PI3K、AKt、MDM2、VEGF蛋白水平升高、TNF-α、p53蛋白水平降低。结论:1.复方五凤草液显著促进结核性创面愈合,具有高效、安全等特点,临床疗效值得肯定。2.复方五凤草液通过下调TNF-α、p53的水平,上调PI3K、AKt、MDM2、VEGF的水平,抑制M1型巨噬细胞极化——抑制炎症反应,并促进向M2型极化——促进肉芽组织新生,泄毒生新,起到推进结核性创面愈合的作用。***3K/AKt通路通过调控巨噬细胞极化在一定程度上参与了结核性溃疡的创面进展,上述相关因子在患者体内的动态表达,反映了复方五凤草液治疗结核性溃疡的过程,对疗效评判有借鉴意义,值得更多角度去探讨可能存在的机理。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡 PI3K/AKt通路巨噬细胞极化

基于HPLC指纹图谱和化学计量学的复方五凤草液的质量评价

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海峡药学 2023年第9期35卷 14-19页

作者：吕令蕊钱佳燕马潇乔洲柳文媛黄子慧中国药科大学药物分析系江苏南京211198 南京中医药大学附属南京市中西医结合医院江苏南京210014 甘肃省药品检验研究院甘肃兰州730070 中国药科大学分析测试中心江苏南京211198

目的建立复方五凤草液HPLC指纹图谱,结合化学计量学,测定成分含量,对不同产地泽漆的复方五凤草液进行质量评价。方法采用HiQ sil C_(18)W色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);... 详细信息

目的建立复方五凤草液HPLC指纹图谱,结合化学计量学,测定成分含量,对不同产地泽漆的复方五凤草液进行质量评价。方法采用HiQ sil C_(18)W色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为270 nm;柱温为40℃;建立不同产地泽漆的复方五凤草液指纹图谱,进行相似度评价以及化学计量学分析,借助变量重要性投影值等方式筛选指认目标成分,进行含量测定。结果15批复方五凤草液指纹图谱含7个共有峰,所有样品与对照图谱相似度在0.795~0.999之间;经化学计量学分析,15批复方五凤草液聚为两类,复方五凤草液中没食子酸成分含量0.90~4.32 mg·g^(-1)。结论建立的指纹图谱分析和含量测定方法可靠、重复性好,可为复方五凤草液的质量控制提供参考。

关键词：复方五凤草液 HPLC 指纹图谱化学计量学没食子酸含量测定

复方五凤草液调控M1/M2巨噬细胞极化干预结核性溃疡的临床研究

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复方五凤草液调控M1/M2巨噬细胞极化干预结核性溃疡的临床研究

作者：钱佳燕南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:1.基于巨噬细胞极化角度研究复方五凤草液作用于结核性溃疡的分子机制;2.为结核性溃疡患者提供一种临床疗效确切,作用机制清晰,便于应用推广的外用药物。方法:临床研究一:纳入结核性溃疡患者58例作为试验组（CTB）,健康志愿者55例... 详细信息

目的:1.基于巨噬细胞极化角度研究复方五凤草液作用于结核性溃疡的分子机制;2.为结核性溃疡患者提供一种临床疗效确切,作用机制清晰,便于应用推广的外用药物。方法:临床研究一:纳入结核性溃疡患者58例作为试验组（CTB）,健康志愿者55例作为空白组（CK）,对比分析两组的性别、年龄情况,并用ELISA、qPCR技术检测两组血浆中M1型巨噬细胞表型指标iNOS及细胞因子TNF-α、M2型巨噬细胞表型指标Arg-1及细胞因子TGF-β的表达水平。临床研究二:纳入结核性溃疡患者64例,随机分为治疗组（复方五凤草液外用组）、对照组（异烟肼外用组）,每组32例,均予以基础抗结核治疗联合局部换药,治疗28天。观察治疗过程中两组的创面愈合率、愈合速度、腐去时间及速度、中医证候积分、总有效率,并用ELISA、qPCR技术检测血浆和组织中M1型巨噬细胞表型指标iNOS及细胞因子TNF-α、M2型巨噬细胞表型指标Arg-1及细胞因子TGF-β的表达水平。结果:临床研究一:1.两组性别、年龄分布无统计学差异（P＞0.05）。***检测两组血浆中iNOS、TNF-α、Arg-1、TGF-β蛋白表达情况:两组血浆中四个指标共同表达。其中,试验组血浆中iNOS、TNF-α蛋白表达水平显著高于空白组（P＜0.001）;试验组血浆中Arg-1、TGF-β蛋白表达水平低于空白组（P＜0.05）。***检测两组血浆中iNOS、TNF-α、Arg-1、TGF-β mRNA表达情况:两组血浆中四个指标共同表达。其中,试验组血浆中iNOS、TNF-αmRNA表达水平显著高于空白组（P＜0.001）;试验组血浆中Arg-1、TGF-β mRNA表达水平低于空白组（P＜0.05）。临床研究二:1.两组性别、年龄、病程分布无统计学差异（P＞0.05）;两组治疗前的创面面积、窦道深度分布无统计学差异（P＞0.05）。2.治疗组与对照组治疗28天后总有效率分别为93.75%、71.88%,治疗组高于对照组（P＜0.05）;两组治疗期间第28天的创面愈合率、愈合速度、中医证候积分均优于第14天（P＜0.05或P＜0.01）。治疗组的创面愈合率、愈合速度、腐去时间及速度、中医证候积分均优于对照组（P＜0.05或P＜0.01）。***与qPCR检测四个指标血浆中蛋白及mRNA水平的表达趋势一致。两组治疗前血浆中iNOS、TNF-α、Arg-1、TGF-β的表达情况比较,均无统计学差异（P＞0.05）;第14、28天,治疗组血浆中iNOS、TNF-α表达水平均低于治疗前（P＜0.05或P＜0.01）,Arg-1、TGF-β表达水平高于治疗前（P＜0.05或P＜0.01）;与对照组相比,治疗组更有效降低了血浆中iNOS、TNF-α表达水平（P＜0.05）,提高 Arg-1、TGF-β表达水平（P＜0.05）。*** 检测两组治疗前组织中iNOS、TNF-α、Arg-1、TGF-β mRNA表达情况比较,均无统计学差异（P＞0.05）;第14、28天,两组组织中iNOS、TNF-αmRNA表达水平均低于治疗前（P＜0.05 或 P＜0.01 或 P＜0.001）,Arg-1、TGF-β mRNA 表达水平高于治疗前（P＜0.05 或 P＜0.01或P＜0.001）,其中,治疗组的表达情况明显优于对照组（P＜0.05或P＜0.01或P＜0.001）。结论:1.结核性溃疡患者与健康人体内处于M1、M2型巨噬细胞极化共存状态。较之健康人,结核性溃疡患者M1型巨噬细胞处于极高表达状态,而能够抑制肉芽肿形成、促进创面修复的M2型巨噬细胞表达较低。2.本实验从调控巨噬细胞极化角度论证了复方五凤草液的创面修复能力——通过有效抑制M1型巨噬细胞极化并促进M2型巨噬细胞极化完成结核性溃疡的愈合。3.治疗期间,结核性溃疡患者血浆与组织中巨噬细胞极化趋势一致,为未来临床药物疗效研究以及血清生物标记物的选择提供实验室依据。4.在西药抗结核的基础上,复方五凤草液外用治疗结核性溃疡能有效祛除腐肉,提高创面愈合率,改善中医证候积分,且无明显不良反应,可纳入结核性溃疡的治疗并在临床推广应用。

关键词：复方五凤草液巨噬细胞极化结核性溃疡外用治疗

UPLC-PDA法同时测定复方五凤草液中7种成分

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中成药 2020年第1期42卷 37-40页

作者：钱佳燕黄子慧陈肯余洋朱思洵高璐珏高敏行南京中医药大学江苏南京210046 南京中医药大学附属南京市中西医结合医院江苏南京210014

目的建立UPLC-PDA法同时测定复方五凤草液(五凤草、白芨、猫爪草)中没食子酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、金丝桃苷、槲皮素、柚皮素的含有量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);... 详细信息

目的建立UPLC-PDA法同时测定复方五凤草液(五凤草、白芨、猫爪草)中没食子酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、金丝桃苷、槲皮素、柚皮素的含有量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;检测波长266 nm。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率96.96%~102.26%,RSD 0.65%~2.10%。结论该方法稳定准确,重复性好,可用于复方五凤草液的质量控制。

关键词：复方五凤草液化学成分 UPLC-PDA

外敷复方五凤草液对结核性溃疡患者创面愈合影响及作用机制研究

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中国中医基础医学杂志 2021年第10期27卷 1622-1626,1637页

作者：薛倩一黄子慧钱佳燕洪练青南京中医药大学附属南京市中西医结合医院南京210014

目的:观察外敷复方五凤草液对结核性溃疡患者创面愈合的临床疗效并初步探究其作用机制。方法:选择60例结核性溃疡患者随机分为对照组和观察组各30例,在基础抗结核治疗基础上,对照组给予康复新液外用治疗,观察组给予以复方五凤草液外用治... 详细信息

目的:观察外敷复方五凤草液对结核性溃疡患者创面愈合的临床疗效并初步探究其作用机制。方法:选择60例结核性溃疡患者随机分为对照组和观察组各30例,在基础抗结核治疗基础上,对照组给予康复新液外用治疗,观察组给予以复方五凤草液外用治疗,观察4周。在给药前以及给药治疗第1、2、4周记录患者的局部体征积分,检测患者血浆中TGF-β、TNF-α,肉芽组织中IL-1,IL-6,NF-κB,VEGF,PDGF的含量,采用qPCR技术检测肉芽组织中TGF-β、TNF-αmRNA的表达,并观察创面大体观及组织病理切片。结果:观察组总体有效率明显高于对照组,给药4周后与对照组比较,观察组患者血浆TNF-α,肉芽组织中IL-1,IL-6,NF-κB含量明显降低,血浆TGF-β及肉芽组织VEGF,PDGF含量显著提高,肉芽组织TGF-βmRNA水平上升、TNF-αmRNA水平下降,溃疡创面肉芽组织学形态改善。结论:复方五凤草液能有效促进结核性溃疡患者创面的愈合,其作用机制可能与降低TNF-α通路相关蛋白的表达水平、提高TGF-β相关生物因子的表达水平相关。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡肿瘤坏死因子-α 转化生长因子-β 作用机制

基于CXC趋化因子的复方五凤草液外用干预结核性溃疡临床效应机制研究

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基于CXC趋化因子的复方五凤草液外用干预结核性溃疡临床效应机制...

作者：高璐珏南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察复方五凤草液外治结核性溃疡的临床疗效,同时基于CXC趋化因子对其作用机制进行初步的探讨,以及尝试性地挖掘CXCL9、10在结核性溃疡药效评估方面的价值。方法:收集2020年5月1日至2020年12月31日于南京市中西医结合医院瘰疬科病... 详细信息

目的:观察复方五凤草液外治结核性溃疡的临床疗效,同时基于CXC趋化因子对其作用机制进行初步的探讨,以及尝试性地挖掘CXCL9、10在结核性溃疡药效评估方面的价值。方法:收集2020年5月1日至2020年12月31日于南京市中西医结合医院瘰疬科病区住院治疗符合此课题研究的诊断、纳入及排除标准的结核性溃疡患者80例进行临床研究,脱落3例,共计完成77例,其中对照组（康复新液组）38人,观察组（复方五凤草液组）39人。在规范抗结核治疗基础上,对照组以中成药康复新液进行局部换药处理,治疗组予以院内协定方复方五凤草液外治。以治疗前及治疗后d3、7、14、21天作为时间点,动态观察创面愈合率、创面腐去时间、腐肉量、中医证候积分、血常规、肝肾功能以及CXCL9、CXCL10等指标,进行统计学分析,判定疗效。结果:1、对两组患者性别、年龄、病程、创面面积、窦道深度等基本信息进行统计分析,差异无统计学意义（P＞0.05）,两组具有可比性。2、两组治疗后的白细胞水平较前降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,组间差异无统计学意义（P＞0.05）。HBG、AST、ALT、Scr、BUN水平在治疗前后及组间差异无统计学意义（P＞0.05）。3、两组患者治疗后d14、d21的创面愈合率较前有差异（P＜0.05）,组间比较,观察组（复方五凤草液组）在d14、d21愈合率高于对照组（康复新液组）,差异有显著性（P＜0.01）。4、治疗过程中,创面腐肉量渐减少,组间比较,治疗d7、d14,观察组比对照组腐肉减少明显（P＜0.05）,d21两组差异显著（P＜0.01）。5、实验结束时,观察组腐肉脱尽患者数高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。且观察组腐肉脱尽所需的平均时间较对照组短,两者相比有差异（P＜0.05）。6、两组患者治疗前的中医症候积分差异无统计学差异（P＞0.05）,治疗7天、14天后中医症候积分与之前相比有差异（P＜0.05）,d21差异显著（P＜0.01）。组间比较,两组7、14、21天不同时间点间的中医症候积分的差异也具有显著性（P＜0.05或P＜0.01）。7、ELISA检测两组血浆中CXCL9、10的蛋白表达水平,治疗过程中CXCL9、10 水平的变化呈现递减趋势。治疗后7天、14天和21天差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。治疗后,不同时间点的组间差异也具有显著性（P＜0.05或P＜0.01）。8、RT-qPCR检测两组血浆、组织中CXCL9、10mRNA表达水平,在治疗过程中,血浆以及组织中CXCL9、10均有下降趋势。两组各时间点间的CXCL9、10mRNA表达水平的差异均具有显著性（P＜0.05或P＜0.01）。对比CXCL9、10mRNA在血浆中的表达,其在组织中呈现的灵敏度及趋势更为明显。结论1、复方五凤草液治疗结核性溃疡疗效显著,可提高创面愈合率,改善中医证候积分,具有愈合速度快,袪腐能力强、安全性能高等特点,值得临床推广运用。2、CXCL9、CXCL10在结核性溃疡患者体内普遍高表达,复方五凤草液可能通过降低CXC趋化因子的表达水平,从而起到创面修复的作用。3、CXC趋化因子可能在一定程度上参与了结核性溃疡的发病,趋化因子表达水平的变化对评估药物治疗结核性溃疡的疗效有一定的临床意义,值得进一步深入研究。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡 CXC趋化因子临床研究