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中华航海医学与高气压医学杂志 2023年第1期30卷 76-81页

作者：徐张扬刘光盛冯旭闵天骄张建何颖蒋蓓尔海军军医大学海军特色医学中心海洋生物医药与极地医学研究室上海200433 海军军医大学基础医学院学员三大队上海200433 海军军医大学研究生院上海200433

目的研究复合益生元制剂对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、美沙拉嗪组和益生元组,每组10只。对照组连续7 d给予饮用水,其余3... 详细信息

目的研究复合益生元制剂对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、美沙拉嗪组和益生元组,每组10只。对照组连续7 d给予饮用水,其余3组连续7 d自由饮用3%DSS水溶液建立UC小鼠模型。造模成功后第1天起美沙拉嗪组和益生元组同步灌胃给药(10 ml/kg),对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续9 d,每天记录小鼠体重、粪便性状及便血情况;9 d后处死小鼠,测量结肠长度,HE染色评估小鼠结肠组织病理学变化,ELISA法检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)水平,并通过16S rRNA测序法检测小鼠肠道菌群的变化。结果与模型组相比,益生元组制剂给药治疗后小鼠体重降低减缓,腹泻和便血症状显著改善,差异有统计学意义(P复合益生元制剂治疗后,菌群多样性有一定的提高,在门水平上主要表现为厚壁菌门和变形菌门显著降低,拟杆菌门丰度增高,属水平上主要为Muribaculaceae_unclassified和拟杆菌属丰度增高,螺杆菌属丰度降低。结论复合益生元制剂可有效治疗UC小鼠,其通过恢复和改善肠道菌群多样性调节UC小鼠的肠道菌群组成,从而发挥治疗作用。

关键词：复合益生元溃疡性结肠炎炎症因子肠道菌群

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复合益生元对发酵乳杆菌DALI02肠道定殖与免疫调节的影响

复合益生元对发酵乳杆菌DALI02肠道定殖与免疫调节的影响

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作者：刘潇潇扬州大学

学位级别：硕士

益生元不易被人体直接消化吸收,却可以选择性地增殖肠道内部分共生菌,从而促进肠道内短链脂肪酸的产生。益生元能否被益生菌利用是评估其益生特性的重要依据,而目前关于多种益生元促进益生菌在肠道定殖、免疫调节及肠道菌群的研究较少... 详细信息

益生元不易被人体直接消化吸收,却可以选择性地增殖肠道内部分共生菌,从而促进肠道内短链脂肪酸的产生。益生元能否被益生菌利用是评估其益生特性的重要依据,而目前关于多种益生元促进益生菌在肠道定殖、免疫调节及肠道菌群的研究较少。因此探究益生菌与多种益生元的配比及其功能特性变化,对开发合生元健康产品具有重要意义。本研究通过体外试验对Limosilactobacillusfermentum DALI02高粘附的复合益生元配方进行优化,同时,从肠道定殖、免疫调节、肠道菌群与短链脂肪酸含量等方面,探究复合益生元对L.fermentum DALI02在体内益生功能的潜在影响,主要研究内容与结果如下:（1）L.fermentum DALI02高粘附的益生元组合优化。采用体外Caco-2细胞粘附模型,通过单因素和二次正交旋转实验,以粘附率为指标,优化复合益生元添加量,以此确定提高L.fermentum DALI02粘附能力的益生元组合。结果显示当复合益生元配方为:低聚果糖添加量为0.05%（w/w,下同）、低聚半乳糖添加量为0.20%、菊粉添加量为0.30%、水苏糖添加量为0.20%和低聚木糖添加量为0.30%时,L.fermentum DALI02体外粘附率为3.98%,显著高于其他组合（p＜0.05）。（2）复合益生元对L.fermentum DALI02定殖能力的影响。建立免疫低下大鼠模型,通过测定菌株在肠道内定殖数量和定殖时间来确定最佳干预时间,并探究在最佳干预时间时复合益生元对L.fermentum DALI02定殖能力的影响。结果显示,在定殖时间上,复合益生元发酵液分别干预2周和4周后,大鼠肠道上定殖的菌株拷贝数分别为5.20 lg（copies/g）和5.12 lg（copies/g）,显著高于干预1天（p＜0.05）。在定殖数量上,复合益生元发酵液组停止干预48 h后,其干预2周时的菌株拷贝数为4.01 lg（copies/g）,干预4周时的菌株拷贝数为4.48 lg（copies/g）,均显著高于干预1天（p＜0.05）,而干预4周的定殖数量高于干预2周的定殖数量。结果表明,干预4周可以提高菌株定殖数量和定殖时间。测定干预4周的大鼠肠道中菌株定殖能力,结果显示复合益生元发酵液组在停止干预后粪便中菌株拷贝数为4.98 lg（copies/g）,定殖时间为5天,显著高于空白组（p＜0.05）,与DALI02发酵液组的菌株拷贝数相比增加了 26.72%。结果表明复合益生元对L.fermentum DALI02的肠道定殖时间与肠道定殖数量均有促进作用。（3）复合益生元对L.fermentum DALI02体内免疫调节作用的影响。建立免疫低下大鼠模型,测定各组大鼠体重增量、脏器指数、脾淋巴细胞增殖能力、免疫因子水平以及肠屏障完整性,研究复合益生元对L.fermentum DALI02的免疫调节能力影响。结果显示,复合益生元发酵液组大鼠的体重增量和胸腺指数较模型组显著增加21.27%和23.08%（p＜0.05）,脾淋巴细胞增殖能力显著提高了 49.65%（p＜0.05）,血清中免疫球蛋白M和白球比例（A/G）分别为0.13 mmol/L和0.80,较模型组显著提高了 30%和29.03%（p＜0.05）;同时,血清中白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量分别为125.70 pg/mL 和 209.43 pg/mL,较模型组显著减少了 5.38%和 40.04%（p＜0.05）;血清中脂多糖（LPS）和D-乳酸的含量分别为74.11 pg/mL和40.33 μmol/L,较模型组显著下降了 27.44%和20.97%（p＜0.05）。同时,复合益生元发酵液组大鼠的胸腺指数与脾淋巴细胞增殖能力较复合益生元组分别显著提高了 23.08%和20.57%（p＜0.05）,较DALI02发酵液组分别显著提高了 45.45%和15.30%（p＜0.05）;血清中TNF-α、LPS和D-乳酸的含量较复合益生元组分别显著减少了 24.76%、7.74%和9.08%（p＜0.05）,较DALI02发酵液组分别显著减少了 27.55%、6.82%和6.75%（p＜0.05）。结果表明,饲喂添加复合益生元发酵的L.fermentum DALI02发酵液可以提高免疫低下大鼠的免疫调节能力。（4）复合益生元对L.fermentum DALI02调节肠道菌群与短链脂肪酸的影响。通过高通量测序与气相色谱,测定大鼠肠道菌群结构与大鼠粪便中的短链脂肪酸成分及含量,研究复合益生元对L.fermentum DALI02调节大鼠肠道短链脂肪酸与菌群结构的影响。结果显示,经复合益生元发酵液单一干预后,大鼠肠道中的乳杆菌属、密螺旋体菌属和罗姆布茨菌属的相对丰度相较模型组均显著上升（p＜0.05）,而螺杆菌属、拟普雷沃氏菌属和Muribaculaceae属的相对

关键词：复合益生元发酵乳杆菌肠道定殖肠道菌群免疫调节

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复合益生元制剂对右旋葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的影响

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中华健康管理学杂志 2023年第1期

作者：徐张扬刘光盛冯旭闵天骄张建何颖蒋蓓尔海军军医大学海军特色医学中心海洋生物医药与极地医学研究室

目的研究复合益生元制剂对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、美沙拉嗪组和益生元组, 每组10只。对照组连续7 d给予饮用水, 其余... 详细信息

目的研究复合益生元制剂对右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗效果及其作用机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、美沙拉嗪组和益生元组, 每组10只。对照组连续7 d给予饮用水, 其余3组连续7 d自由饮用3% DSS水溶液建立UC小鼠模型。造模成功后第1天起美沙拉嗪组和益生元组同步灌胃给药(10 ml/kg), 对照组和模型组给予等体积生理盐水, 连续9 d, 每天记录小鼠体重、粪便性状及便血情况;9 d后处死小鼠, 测量结肠长度, HE染色评估小鼠结肠组织病理学变化, ELISA法检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)水平, 并通过16S rRNA测序法检测小鼠肠道菌群的变化。结果与模型组相比, 益生元组制剂给药治疗后小鼠体重降低减缓, 腹泻和便血症状显著改善, 差异有统计学意义(P复合益生元制剂治疗后, 菌群多样性有一定的提高, 在门水平上主要表现为厚壁菌门和变形菌门显著降低, 拟杆菌门丰度增高, 属水平上主要为Muribaculaceaeunclassified和拟杆菌属丰度增高, 螺杆菌属丰度降低。结论复合益生元制剂可有效治疗UC小鼠, 其通过恢复和改善肠道菌群多样性调节UC小鼠的肠道菌群组成, 从而发挥治疗作用。

关键词：复合益生元溃疡性结肠炎炎症因子肠道菌群

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三种多糖对小鼠肠道菌群失衡的干预特点分析

三种多糖对小鼠肠道菌群失衡的干预特点分析

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作者：姬星晨大连医科大学

学位级别：硕士

近年来的研究结果表明,肠道菌群的状态与人体健康水平息息相关,健康的肠道菌群不但对于维持消化系统自身的功能至关重要,也对全身各系统的正常运行具有重要作用。膳食对于肠道菌群的状态具有重要影响,膳食中可溶性纤维的主要成分是多糖... 详细信息

近年来的研究结果表明,肠道菌群的状态与人体健康水平息息相关,健康的肠道菌群不但对于维持消化系统自身的功能至关重要,也对全身各系统的正常运行具有重要作用。膳食对于肠道菌群的状态具有重要影响,膳食中可溶性纤维的主要成分是多糖物质,这类生物大分子不易被肠道吸收入血,却是肠道菌群中的益生菌生存的重要营养和能量物质,故被称为益生元。天然产物中的多种多糖可以作为益生元而肠道菌群。有效地利用多糖益生元可以为各种疾病的预防和治疗提供新的途径。多糖益生元广泛存在于动物、植物、微生物中,到目前为止,从不同来源的生物中提取的多糖已被广泛用于开发功能性食用甚至药用。天然产物中的多糖作为益生元物质,对于肠道菌群具有促进其生长的功能。然而,来源于不同生物体的多糖,其生物学功能也不尽相同。这些天然多糖具有广谱的生物学效应,如抗肿瘤、抗癌、抗菌、抗氧化、免疫调节等。不同来源的多糖在相对分子质量和聚合物长度上差异很大,所含聚糖的种类和比例不同。因此,阐明组成结构不同的多糖对菌群恢复的情况是否存在差异性具有重要的理论意义和应用价值。本研究所要解决的科学问题,是肠道各种益生菌在利用不同的多糖时是否具有偏好,某种多糖对益生菌的影响是否会进一步改变肠道菌群的结构,甚至影响宿主肠粘膜的状态。随着越来越多的多糖益生元被发现,人们对于其结构与功能之间的关系产生了更多的关注。因此,如果能够将具有特定结构的膳食多糖,与特定肠道细菌建立联系,将有助于针对病人的特定肠道菌群类型,进行精准干预,产生最佳效果。为了验证这一猜想,我们选择了三种不同来源的多糖:来自于海藻的褐藻胶多糖(WP),来自于真菌的茶树菇多糖(ACP),和来自于植物的茯苓多糖(PCP)。采用经典的抗生素诱导菌群失衡模型,探索该三种多糖对于小鼠肠道菌群影响的差异,初步建立多糖影响肠道菌群的构效关系。目的:确定三种多糖对小鼠肠道菌群紊乱具有调节作用,发现干预后肠道菌群改变的特点及其对肠道组织产生的病理学和免疫学影响,建立三种多糖与干预效果的联系。方法:1、采用水提法提取多糖,利用多糖可以溶解于浓度为60%-80%乙醇的原理浓缩多糖。2、将BALb/C小鼠随机分成五组,对照组(NC),自然恢复组(NR),褐藻胶多糖组(WP),茶树菇多糖组(ACP)和茯苓多糖组(PCP)。除对照组不做任何处理外,剩下四组均采用抗生素灌胃的方法制备肠道菌群失衡模型,每天用青霉素按照300mg/Kg剂量早晚灌胃5天,PCR-DGGE检测造模成功后,自然恢复组(NR)和对照组(NC)一样不做任何处理,三种多糖组分别灌胃相应多糖,剂量为每天100mg/Kg,灌胃10天后,将所有小鼠脱颈处死,分别取小鼠粪便、小肠定植菌群和小肠组织用于后续研究。3、小鼠粪便和小肠定植菌群进行提取DNA,一部分进行PCR-DGGE检测不同组别过路菌群和定植菌群变化,找到特异性条带并进行切胶纯化测序操作,一部分DNA进行16s r RNA测序作为验证(生物屏障)。小肠组织进行H&E染色、WB检测紧密连接蛋白表达(机械屏障),IHC染色检测MUC2表达(化学屏障),QPCR检测肠胞壁免疫因子IL-6,IL-10表达(免疫屏障)。结果:1、抗生素处理后PCR-DGGE(Deanturing Gradient Gel Electrophoresis)检测到抗生素处理组与对照组相比较,多样性和丰富度均明显下降,确定肠道菌群失衡模型造模成功。2、三种多糖均上调了小肠MUC2的表达,促进了小肠黏膜屏障的恢复,紧密连接蛋白Occludin和Zo-1表达也均呈现上调趋势。免疫因子IL-6、IL-10表达量也增加。3、变性梯度凝胶DGGE显示三种多糖对菌群失衡小鼠的肠道菌群恢复存在差异性,三种多糖均不同程度地提高了小鼠肠道菌群的丰富度。过路菌的PCR-DGGE图谱对比发现,WP组Blautia(布劳特菌)丰富度增加,ACP组的Parabacteroides(副杆菌)丰富度增加,PCP组的Alistipes(另枝杆菌)丰富度增加。定植菌群的PCR-DGGE图谱对比发现,三种多糖组(lactobacillus)乳酸杆菌属丰富度增加,Klebsiella(克雷伯菌)丰富度明显降低。16s r RNA高通量测序结果显示,三种多糖组布劳特菌属(Lac-Blautia)丰富度均增加,PCP组最为显著;WP组副杆菌属(Por-parabactoides)丰富度增加,PCP组Ver-Akkermansia丰富度有着明显的增加。结论:1、三种多糖均发挥了益生元的作用,提高了肠道菌群的丰富度,促进了肠道屏障的恢复。对益生菌具有促进作用,抑制了有害菌的繁殖。2、褐藻胶多糖对于有益菌副杆菌属(Parabactoides)有促进作用;茶树菇多糖对于有益菌拟杆菌属(Bacteriorides)有促进作用;茯苓多糖对有益菌Ver-Akkermansia有促进作用。

关键词：肠道菌群褐藻胶多糖茶树菇多糖茯苓多糖复合益生元

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复合益生元润肠通便及在压片糖果中的应用

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食品工业 2024年第6期 118-123页

作者：陈又铭李宁高学秀曹建帮宁占国赵战利山东星光首创生物科技有限公司

以低聚果糖为原料制备复合益生元,采用小鼠模型,对复合益生元的润肠通便效果进行研究,结果表明,不同剂量组小鼠墨汁推进率均有明显增加,小鼠首便时间缩短,其中,中、高剂量组小鼠的粪便粒数与模型对照组相比分别提高了2.1和2.2倍,粪便质... 详细信息

以低聚果糖为原料制备复合益生元,采用小鼠模型,对复合益生元的润肠通便效果进行研究,结果表明,不同剂量组小鼠墨汁推进率均有明显增加,小鼠首便时间缩短,其中,中、高剂量组小鼠的粪便粒数与模型对照组相比分别提高了2.1和2.2倍,粪便质量与模型对照组分别提高了2.3和2.9倍,证明复合益生元对小鼠的润肠通便效果显著,且服用期间无腹胀、腹泻等不良现象,绿色安全。以复合生元为原料制备压片糖果,对产品的配方进行优化,结果表明,在复合益生元添加量75%、赤藓糖醇添加量10%、草莓粉添加量10%、柠檬酸添加量0.3%、食用香精和硬脂酸镁添加量4.7%的条件下感官评分最优,按照国家标准要求检测压片糖果感官、理化及微生物等指标,全部合格。

关键词：复合益生元低聚果糖低聚异麦芽糖低聚半乳糖通便压片糖果

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复合益生元联合复合益生菌治疗榆林市变应性鼻炎的临床研究

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延安大学学报(医学科学版) 2024年第2期 51-55页

作者：白乐牛艳柳林整西安交通大学第一附属医院榆林医院延安大学第二附属医院榆林市第一医院

目的评价复合益生元与复合益生菌联用治疗榆林市变应性鼻炎的临床疗效及其安全性。方法按照自愿报名、随机筛选原则，将符合纳入标准的280例变应性鼻炎患者，按照单双号分为对照组和研究组（各140例）。本研究治疗时间为90 d，延长安... 详细信息

目的评价复合益生元与复合益生菌联用治疗榆林市变应性鼻炎的临床疗效及其安全性。方法按照自愿报名、随机筛选原则，将符合纳入标准的280例变应性鼻炎患者，按照单双号分为对照组和研究组（各140例）。本研究治疗时间为90 d，延长安全观察期30 d。对照组给予复合益生元模拟制剂（（30 g/次、2次/d）+复合益生菌模拟制剂（4 g/次、2次/d）；研究组给予复合益生元（30 g/次、2次/d）+复合益生菌（4 g/次、2次/d）。分别于治疗前、治疗第45天及第90天记录两组受试者的变应性鼻炎症状总分（total nasal symptom score,TNSS评分），通过终点分和基线分之间的差值对比研究组与对照组的临床疗效，并观察其用药安全情况。结果研究组治疗前症状评分均值为（7.60±2.10）分，经过90 d治疗后均值为（1.28±3.24）分，评分下降均值为（-5.83±3.82）分，优于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。结论使用复合益生元与复合益生菌联用的研究组症状改善明显优于对照组。依据各期评价显示该微生态制剂起效过程较长，且改善效果随时间推移逐步加大。除正常肠道改善伴随的轻症腹胀、腹泻外，无其他与干预剂相关的不良事件，表明其具有良好的安全性。

关键词：复合益生元复合益生菌变应性鼻炎

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