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壁虎多肽混合物对肝癌SMMC7721细胞增殖及其自噬的影响

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中国临床药理学杂志 2017年第9期33卷 798-801页

作者：靳颖刘玲段冷昕郭梦丽段一梦王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室河南洛阳471000

目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人肝癌SMMC7721细胞自噬的影响。方法取对数生长期细胞种板,用不同质量浓度的GPM(0,0.04,0.06,0.09,0.14,0.20,0.30,0.45 mg·m L^(-1))处理SMMC7721细胞24 h,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,根据MTT... 详细信息

目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人肝癌SMMC7721细胞自噬的影响。方法取对数生长期细胞种板,用不同质量浓度的GPM(0,0.04,0.06,0.09,0.14,0.20,0.30,0.45 mg·m L^(-1))处理SMMC7721细胞24 h,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,根据MTT结果,分别作为正常组(0)、低中高3个质量浓度(GPM:0.1,0.15,0.22 mg·m L^(-1))实验组,对照组(西罗莫司40μg·m L^(-1))。经单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察不同质量浓度GPM对SMMC7721细胞自噬的影响;免疫组化法检测细胞内Beclin1及LC3表达的变化;免疫印迹法检测细胞自噬标志物Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果 GPM可抑制SMMC7721细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24 h后其IC50值为0.16 mg·m L^(-1)。GPM处理SMMC7721细胞6 h后,在胞质中可见大量自噬小泡的形成,在显微镜下呈亮绿色荧光。正常组、对照组、低中高3个质量浓度实验组Beclin1阳性细胞数占总细胞数的百分比分别为(15.70±0.26)%,(63.47±0.54)%,(17.09±0.37)%,(70.66±0.56)%,(78.48±0.68)%;与正常组相比,对照组与中高2个质量浓度实验组差异有统计学意义(均P壁虎多肽混合物能够影响人肝癌SMMC7721细胞自噬现象的发生,可能通过诱导其自噬而使细胞死亡。

关键词：壁虎多肽混合物 SMMC7721细胞自噬

壁虎多肽混合物对人食管癌EC109细胞生长的抑制作用

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中国临床药理学杂志 2013年第8期29卷 602-604页

作者：徐新丽王建刚李瑞芳李世朋邱相君段冷昕河南科技大学医学院药理学与分子生物学重点实验室河南洛阳471003

目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人食管癌EC109细胞的生长抑制作用及其机制。方法用MTT法检测GPM对细胞增殖的影响;Hoechst 33258荧光染色法观察GPM对细胞形态的影响;免疫细胞化学技术检测细胞内Bcl-2、Caspase-3的表达。结果 GPM抑制了E... 详细信息

目的研究壁虎多肽混合物(GPM)对人食管癌EC109细胞的生长抑制作用及其机制。方法用MTT法检测GPM对细胞增殖的影响;Hoechst 33258荧光染色法观察GPM对细胞形态的影响;免疫细胞化学技术检测细胞内Bcl-2、Caspase-3的表达。结果 GPM抑制了EC109细胞的生长,作用呈时间和剂量依赖性。GPM作用24 h,EC109细胞出现明显的凋亡,且Bcl-2表达降低而Caspase-3表达增高。结论 GPM可以抑制人食管癌EC109细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与GPM降低食管癌EC109细胞Bcl-2表达而增加Caspase-3表达有关。

关键词：壁虎多肽混合物食管癌细胞凋亡 Bcl-2 Caspase-3

壁虎多肽混合物对人非小细胞肺癌H1299细胞增殖和凋亡的影响

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中国药业 2024年第17期33卷 61-65页

作者：姚志新刘嘉欣朱桂芬黄慧贤陈少娜广州中医药大学第一附属医院·广东省中医临床研究院广东广州510405

目的探讨壁虎多肽混合物(GPM)对人非小细胞肺癌H1299细胞增殖和凋亡的影响。方法实验设正常对照组(等体积基础培养液)和GPM高、低剂量组(20,10 mg/mL),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚... 详细信息

目的探讨壁虎多肽混合物(GPM)对人非小细胞肺癌H1299细胞增殖和凋亡的影响。方法实验设正常对照组(等体积基础培养液)和GPM高、低剂量组(20,10 mg/mL),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法和免疫印迹(Western blot)法检测B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)mRNA及蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,GPM高、低剂量组H1299细胞存活率均显著降低(P<0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),PI3K和Bax mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论GPM能抑制H1299细胞的增殖,其作用机制可能与调控PI3K,Bax,Bcl-2 mRNA及蛋白的表达相关。

关键词：壁虎多肽混合物非小细胞肺癌磷脂酰肌醇-3-激酶 B-细胞淋巴瘤因子2 Bcl-2关联X蛋白

壁虎多肽混合物抑制HepG2肿瘤细胞生长和作用机制初探

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壁虎多肽混合物抑制HepG2肿瘤细胞生长和作用机制初探

第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议

作者：王建刚徐新丽葛文静段冷昕刘玲李瑞芳河南科技大学医学院药理学教研室

＜正＞目的研究体外对壁虎多肽混合物抑制肿瘤细胞生长及其机制进行初步探究。方法采用MTT法检测壁虎多肽混合物HepG2细胞体外培养的抑制作用;倒置显微镜下观察壁虎多肽混合物（0-0.3mg/mL）作用HepG2细胞24h后形态的变化;Hoechst33258... 详细信息

＜正＞目的研究体外对壁虎多肽混合物抑制肿瘤细胞生长及其机制进行初步探究。方法采用MTT法检测壁虎多肽混合物HepG2细胞体外培养的抑制作用;倒置显微镜下观察壁虎多肽混合物（0-0.3mg/mL）作用HepG2细胞24h后形态的变化;Hoechst33258荧光染色法观察HepG2细胞的凋亡变化;Caspase活性测试检测HepG2细胞caspase-3与caspase-9蛋白活性的变化;Western blot检测壁虎多肽混

关键词：肝肿瘤壁虎多肽混合物药理作用细胞生长分子机制

来源： cnki会议评论

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壁虎多肽的制备及其抗肿瘤机制研究

壁虎多肽的制备及其抗肿瘤机制研究

作者：徐新丽河南科技大学

学位级别：硕士

目的：本研究是从壁虎醇提物（Gecko ethanol extract，GEE）中提取出壁虎多肽混合物（Gecko peptides mixture, GPM），并在体外对壁虎多肽混合物抑制肿瘤细胞生长及其机制进行初步探究。方法：将壁虎醇提物用蒸馏水配置成浓度为50mg... 详细信息

目的：本研究是从壁虎醇提物（Gecko ethanol extract，GEE）中提取出壁虎多肽混合物（Gecko peptides mixture, GPM），并在体外对壁虎多肽混合物抑制肿瘤细胞生长及其机制进行初步探究。方法：将壁虎醇提物用蒸馏水配置成浓度为50mg/mL的溶液，经G-25葡聚糖凝胶柱层析后回收各峰溶液，冷冻干燥后对其进行活性筛选，具有抗肿瘤活性的成分即为壁虎多肽混合物;用Bradford法检测壁虎多肽混合物的蛋白含量。体外培养食管癌EC109和肝癌HepG2细胞，采用MTT法检测壁虎多肽混合物对EC109和HepG2细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察壁虎多肽混合物(0-0.3mg/mL)作用EC109和HepG2细胞24h后形态的变化;Hoechst33258荧光染色法观察壁虎多肽混合物作用24h后EC109和HepG2细胞的凋亡变化;免疫组化法观察壁虎多肽混合物作用EC109细胞24h后caspase-3及Bcl-2的蛋白表达情况;caspase活性测试检测壁虎多肽混合物作用HepG2细胞24h后caspase-3与caspase-9蛋白活性的变化;Western blot检测壁虎多肽混合物作用于HepG2细胞24h后caspase-3，caspase-9，AIF与Cyt c蛋白表达的变化。结果：经G-25葡聚糖凝胶柱层析后，可将壁虎醇提物分为4个峰，活性检测后发现峰A具有显著的抗肿瘤活性，即为壁虎多肽混合物;Bradford法检测壁虎多肽混合物的蛋白含量为43.9%。壁虎多肽混合物在体外对EC109和HepG2细胞的增殖有显著的抑制作用，随着时间的增加与剂量的增大，抑制作用更明显。0.1mg/mL、0.15mg/mL、0.2mg/mL、0.25mg/mL、0.3mg/mL壁虎多肽混合物处理这两种肿瘤细胞24h、48h、72h后，EC109细胞半数抑瘤率IC50分别为0.317mg/mL、0.227mg/mL、0.183mg/mL，HepG2细胞半数抑瘤率IC50分别0.154mg/mL、0.133mg/mL、0.051mg/mL。壁虎多肽混合物作用这两种细胞24h后，倒置显微镜下观察可见，与阴性对照组相比，给药组细胞数目减少，变圆、皱缩，体积减小，且随着剂量的增加，脱壁的细胞增多。壁虎多肽混合物作用EC109，HepG2细胞24h后，Hoechst33258荧光染色结果显示给药组出现染色质固缩、致密、荧光增强等明显的凋亡形态，且与低剂量组相比，高剂量组细胞凋亡更加明显。壁虎多肽混合物作用EC109细胞24h后，免疫组化结果显示经药物处理后，凋亡蛋白Bcl-2表达降低、caspase-3表达增高，与阴性对照组相比，差异均具有统计学意义（P壁虎多肽混合物作用HepG2细胞24h后，凋亡蛋白caspase-3，caspase-9活性增强，呈现浓度依赖性;AIF和Cyt c从线粒体中释放到胞浆中，蛋白表达增加，caspase-3，caspase-9蛋白表达升高。结论：壁虎多肽混合物在体外可抑制肿瘤细胞的增殖，并诱导其凋亡，其机制可能与激活线粒体途径有关。

关键词：壁虎多肽混合物抗肿瘤凋亡线粒体途径