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甘草增强免疫的物质基础及其作用机制研究进展

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中草药 2021年第6期52卷 1844-1850页

作者：王钧楠周永峰崔园园马艳芹张萍华国栋解放军总医院第五医学中心北京100039 北京中医药大学中药学院北京102488 成都中医药大学药学院四川成都611137 北京中医药大学东直门医院北京100700

人体的免疫功能是维持身体健康的重要生理性功能,在免疫系统的功能受损或低下时,会对人的身体健康产生严重影响。甘草作为一种补益类中药,有补脾益气之功,对人体的免疫功能具有增强作用,在开发成免疫增强新药方面具有独特优势和发展潜... 详细信息

人体的免疫功能是维持身体健康的重要生理性功能,在免疫系统的功能受损或低下时,会对人的身体健康产生严重影响。甘草作为一种补益类中药,有补脾益气之功,对人体的免疫功能具有增强作用,在开发成免疫增强新药方面具有独特优势和发展潜力。通过对近期国内外甘草免疫增强作用的相关文献进行收集和整理,从所含化合物的结构特点、分类及药理作用等方面阐述了甘草增强免疫的物质基础,并以甘草的药效成分为基础综述了甘草促进免疫细胞增殖、影响体内细胞因子和抗体水平以及调控相关酶表达等增强免疫的分子机制,以期为免疫增强药物的研发提供新的思路,为甘草免疫作用的进一步研究提供参考。

关键词：甘草增强免疫物质基础分子机制细胞因子

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杜仲不同炮制品增强免疫作用比较

中国中药杂志 1997年第10期22卷 598-601页

作者：朱宇红郝武常李兴华西安医科大学第二临床医学院陕西省药品检验所

比较了杜仲及其不同炮制品增强免疫的作用，结果表明：杜仲炮制后作用明显增强，不同炮制品之间作用强度无明显差异。

关键词：杜仲炮制增强免疫

增强免疫功能复方筛选及黑晶复方颗粒成型工艺研究

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增强免疫功能复方筛选及黑晶复方颗粒成型工艺研究

作者：王晨北京中医药大学

学位级别：硕士

人体免疫系统是护卫机体免受外界病邪侵害的重要屏障。免疫功能受到损害时,人体就呈现出病态的情况。越来越多的研究表明,多数恶性肿瘤的发病原因与免疫功能受损有着密不可分的联系。在当今社会中,越来越多的因素影响着人体的免疫能力,... 详细信息

人体免疫系统是护卫机体免受外界病邪侵害的重要屏障。免疫功能受到损害时,人体就呈现出病态的情况。越来越多的研究表明,多数恶性肿瘤的发病原因与免疫功能受损有着密不可分的联系。在当今社会中,越来越多的因素影响着人体的免疫能力,人体的自然老化、环境污染、各种因素导致的亚健康状态等都会对机体的免疫功能产生损害。近年来,人们对生活质量要求的增加,增强免疫的保健产品随之受到关注,尤其是以中药复方为基础的产品逐渐成为研发热点。本论文通过药理实验对7组复方进行筛选,筛选出具有增强免疫功效的复方组合,并对其进行提取、制粒工艺考察,对所制得的复方颗粒剂建立质量评价标准体系,为后续产品申报提供资料依据。本文具体的研究结果如下:复方筛选:本论文依照《保健食品检验与评价技术规范》(2003版),采用正常雄性BALB/c小鼠进行相关免疫实验。小鼠分为空白对照组、阳性药物组(香菇多糖胶囊内容物)、复方1组、复方2组、复方3组、复方4组、复方5组、复方6组、复方7组,分别给予对应药液,灌胃30天后取材,测定相关指标。以小鼠体液免疫中血清溶血素水平及单核-巨噬细胞吞噬能力为判定标准,筛选出复方3具有较为明显的增强免疫功能的作用,其可使正常小鼠血清溶血素水平提升78.60%,单核-巨噬细胞吞噬能力增强约49.55%左右。因此,将此复方开发为增强免疫的产品,并将复方3命名为黑晶复方,用于后续研究。提取工艺:本论文以水为提取溶剂,采用热回流提取法对黑晶复方的提取工艺进行考察。选取黑晶复方中总多糖的含量、总黄酮的含量以及出膏率为检测指标;用层次分析法计算三个指标的综合评分。将综合评分作为提取工艺筛选的判断指标,对提取时间、提取次数、料液比进行正交实验考察。最终筛选出的黑晶复方的最佳提取工艺为10倍量的水,提取2次,每次0.5小时。对提取工艺进行工艺验证实验,RSD值为1.520%,小于3%,表明此工艺稳定可行,重现性良好。制粒工艺:本论文选取颗粒剂为黑晶复方的产品剂型。通过对无水乳糖、药用糊精、微晶纤维素以及可溶性淀粉四种辅料所制颗粒的成型率、吸湿率、溶解率及其综合评分的考察,用综合评分为98.9分的无水乳糖及成型率为99.3%的药用糊精进行混合制得的混合辅料为黑晶复方颗粒的填充剂。并通过单因素-正交实验对混合辅料中无水乳糖与药用糊精的配比(g/g)、药辅比(g/g)、乙醇浓度(%)、乙醇用量(v)进行筛选,最终确定黑晶复方颗粒的最佳制粒工艺为:采用无水乳糖与药用糊精以7:3的比例配制的混合辅料,药辅比为1:1.8,以0.5倍量用量的65%乙醇为粘合剂。采用上述制粒工艺制得三批次颗粒进行外观性状以及颗粒剂的相关项目检查,均符合国家规定。质量标准:本论文根据保健食品研发与审评的意见要求,建立颗粒剂定性鉴别与定量鉴别的标准。在定性鉴别中,以《中国药典》(2015版)为蓝本,建立了适合黑晶复方颗粒中黄精、大枣、陈皮、甘草的薄层鉴别方法。其具有便于操作,方法稳定可行等特点。在定量鉴别中,以颗粒中总多糖、总黄酮为标志性成分,并通过正交实验,筛选出适合黑晶复方颗粒的超声提取工艺,并结合紫外-分光光度法进行标志性成分含量检测。最终,建立起黑晶复方颗粒标志性成分含量测定方法。通过该方法测定三批次黑晶复方颗粒的标志性成分总多糖与总黄酮的含量分别为0.8129 mg·mg-1和0.0109 mg·mg-1,为今后企业制定相关标准提供数据依据。本论文的特色与创新为以下几点:(1)本论文通过药理实验筛选出一个具有增强免疫能力的中药复方。(2)本论文利用正交实验结合层次分析法,以复方浸膏粉中总多糖、总黄酮含量以及出膏率为检测指标,通过进行综合评分,优化出黑晶复方的最佳提取工艺。通过单因素-正交实验,筛选出黑晶复方的最佳制粒工艺。(3)本论文建立了适合黑晶复方颗粒的质量控制体系,为黑晶复方颗粒的安全性、有效性提供质量保证。

关键词：黑晶复方制备工艺质量标准增强免疫

基于斑马鱼模型水合橙皮内酯增强免疫作用及基于网络药理学机制探讨

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药物评价研究 2024年第7期47卷 1513-1519页

作者：于子翔吕婧刘璐张冠群张彬高燕赵渤年山东中医药大学药物研究院国家中医药管理局高水平重点学科-中药药剂学黄河流域特色中药生态保护和高质量发展协同创新中心山东济南250355

目的基于模式生物斑马鱼结合网络药理学,研究枳壳的活性成分水合橙皮内酯增强免疫作用及作用机制。方法建立2种斑马鱼免疫低下模型:以雷帕霉素建立尾部中性粒细胞数目减少模型,以酒石酸长春瑞滨建立静脉血管中巨噬细胞荧光强度减弱模型... 详细信息

目的基于模式生物斑马鱼结合网络药理学,研究枳壳的活性成分水合橙皮内酯增强免疫作用及作用机制。方法建立2种斑马鱼免疫低下模型:以雷帕霉素建立尾部中性粒细胞数目减少模型,以酒石酸长春瑞滨建立静脉血管中巨噬细胞荧光强度减弱模型,检测水合橙皮内酯(10、20、50、100、200μg·mL^(-1))各给药组斑马鱼尾部中性粒细胞数目、斑马鱼尾部静脉血管中巨噬细胞荧光强度,计算中性粒细胞增长率和巨噬细胞改善率。基于网络药理学预测水合橙皮内酯增强免疫作用的机制,使用Pharm Mapper、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)进行水合橙皮内酯靶点筛选,运用Gene Cards数据库和OMIM数据库检索增强免疫相关靶点,运用Venny2.1将上述两组靶点取交集后导入String数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析,进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,在Cytoscape3.9.1软件中构建水合橙皮内酯的增强靶点PPI网络,并以节点度值的中位数筛选关键靶点。结果与模型组相比,水合橙皮内酯可显著增加斑马鱼尾部中性粒细胞数目(P免疫力低下作用,呈剂量相关性。水合橙皮内酯增强免疫的作用机制可能与AKT1、EGFR、SRC、MMP9、ESR1等关键靶点及PI3K-Akt、Rap1、AGE-RAGE等信号通路有关。结论水合橙皮内酯具有增强免疫作用,可能通过调控PI3K-Akt、Rap1、AGE-RAGE等信号通路发挥作用。

关键词：水合橙皮内酯枳壳增强免疫斑马鱼模型网络药理学

基于网络药理学和实验验证探究黄精增强免疫功能的作用机制

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世界中医药 2024年第12期19卷 1730-1736页

作者：岳珠珠石双慧张婧秋魏晓彤姜明瑞王梦琳王志成王慧楠阮意丹王英姿北京中医药大学中药学院北京102488

目的:探究黄精增强免疫功能的作用机制。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集黄精活性成分,通过SwissTargetPrediction数据库获得对应靶点基因。使用GeneCards、DrugBank数据库筛选免疫抑制(IS)相关靶点基因,并通过Venn... 详细信息

目的:探究黄精增强免疫功能的作用机制。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集黄精活性成分,通过SwissTargetPrediction数据库获得对应靶点基因。使用GeneCards、DrugBank数据库筛选免疫抑制(IS)相关靶点基因,并通过Venny数据库获得与黄精靶点基因的交集基因。使用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,使用Cytoscape软件构建“黄精-有效成分-靶基因-免疫抑制”网络,利用Metascape数据库对交集基因进行基因本体(GO)富集分析以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,使用分子对接对有效成分和靶点进行验证。体外细胞试验采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞模型,通过MTT法检测不同浓度黄精提取物对细胞的毒性反应;采用Griess法检测黄精提取物对细胞中一氧化氮(NO)的影响。结果:经过筛选,ESR1、SRC、IGF1R、PTGS1、PTGS2等均参与了多个关键生物过程和关键通路。GO富集表明,细胞活化、炎症反应、细胞对应激的反应等为主要生物过程;KEGG富集表明,糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、AMPK、核因子κB信号通路等是关键通路。分子对接结果显示有效成分与核心靶点对接结果良好。体外试验结果显示,与LPS组比较,50,200,800μg/mL的黄精提取物组RAW264.7细胞中NO生成量均显著降低(均P增强免疫功能的ESR1、SRC等作用靶点和AMPK、核因子κB等信号通路,并结合Griess法表明黄精可通过调控炎症模型RAW264.7细胞NO的释放来发挥免疫作用。

关键词：网络药理学黄精增强免疫有效成分靶点 RAW264.7细胞作用机制

灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物增强免疫作用研究

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中药材 2022年第5期45卷 1247-1252页

作者：王权杨婉纯凌莉何贡云张胜杰耿海局陈健文中山大学药学院广东广州510006

目的:考察灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物对正常小鼠免疫功能的影响。方法:480只SPF级Balb/c小鼠,随机分到8个试验中,分别从细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性及生化水平考察灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物对小鼠免疫功... 详细信息

目的:考察灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物对正常小鼠免疫功能的影响。方法:480只SPF级Balb/c小鼠,随机分到8个试验中,分别从细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性及生化水平考察灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物对小鼠免疫功能的影响,每个试验随机分为5组,每组12只。分别为:空白对照组、金水宝胶囊组及灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物低、中、高剂量组。每天灌胃给药1次,持续30 d。喂食结束后,检测各指标。结果:细胞免疫方面:二硝基氟苯诱导小鼠DTH耳肿胀法试验结果为阳性,ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验结果为阴性,灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物低、中剂量组CD8^(+)细胞比例降低,CD4^(+)/CD8^(+)升高。体液免疫方面:血清溶血素为阳性结果,抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)为阳性结果。单核-巨噬细胞功能方面:小鼠碳廓清为阴性结果,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞为阳性结果。NK细胞活性检测为阳性结果。灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物中、高剂量组小鼠IgM、IgA、TNF-α水平显著升高,高剂量组IgG显著升高。结论:灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物具有增强免疫功能的作用,其机制可能与增强体液免疫作用及部分细胞免疫作用有关。

关键词：灵芝提取物蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉富硒酵母增强免疫

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大蒜多糖及其硫酸化衍生物的抗病毒和增强免疫活性的比较

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大蒜多糖及其硫酸化衍生物的抗病毒和增强免疫活性的比较

作者：倪翔南京农业大学

学位级别：硕士

近年来医学研究发现,通过分子修饰可提高中药成分的生物活性,并能产生许多新的药用价值。一些天然多糖经过硫酸化修饰后得到了用途更为广泛的多糖衍生物,具有了或增强了原来不具有或活性很弱的生物活性。大蒜多糖本身具有抗病毒,增强免... 详细信息

近年来医学研究发现,通过分子修饰可提高中药成分的生物活性,并能产生许多新的药用价值。一些天然多糖经过硫酸化修饰后得到了用途更为广泛的多糖衍生物,具有了或增强了原来不具有或活性很弱的生物活性。大蒜多糖本身具有抗病毒,增强免疫,抗氧化等方面的作用,为了追踪大蒜多糖抗病毒和增强免疫的活性部位,并且研究硫酸化修饰提高其抗病毒和增强免疫活性的可能性,本研究先采用柱层析法分级大蒜多糖,测定它们的体外抗病毒和增强免疫的活性,筛选出效果较好的多糖,进一步进行硫酸化修饰,比较其修饰前后抗病毒和增强免疫活性的变化。试验分为以下五个部分：试验1、大蒜多糖的提取和纯化采用热水浸提法从大蒜中提取大蒜粗多糖(GPSc),经过Sevage法除蛋白后得到去蛋白的大蒜多糖(GPSp),经DEAE-52纤维素柱分离得到中性大蒜多糖(GPSpl)和两种酸性多糖(GPSp2和GPSp3),用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝测定各多糖的糖含量和蛋白含量。结果表明,GPSc的提取率最高,达7.24%,糖和蛋白含量分别为68.35%和2.7%;GPSp的得率明显降低,为3.31%,糖含量升高,达91.2%,蛋白含量降低,为1.2%;GPSp1为中性多糖,得率进一步降低,为2.2%,糖含量最高,达95.83%;GPSp2和GPSp3的得率最低,分别为0.17%和0.16%,糖含量分别为86.03%和33.7%,蛋白含量分别为0.85%和4.9%。试验2、大蒜多糖抗病毒活性部位的体外筛选首先测定GPSc、GPSp以及三种分级多糖GPSpl、GPSp2、GPSp3对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度,然后取安全浓度范围内5个浓度的5种多糖与鸡新城疫病毒(NDV)以3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒混合感作后加)加入到培养成单层的CEF中,用MTT法测定NDV感染CEF能力的变化。结果表明,先加多糖时,GPSc在0.78～1.56μg·mL-1、GPSp在3.125～12.5μg·mL-1能抑制显著NDV感染CEF(P增强免疫活性部位的体外筛选取安全浓度范围内5个浓度的5种多糖加入到培养的鸡外周血淋巴细胞中,用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化(细胞A570值和淋巴细胞增殖率)。结果显示,单独作用时,GPSc和GPSp在0.78～6.25μg·mL-1、GPSp1在0.78～1.56μg·mL-1的细胞A570值显著大于细胞对照组(P增强免疫活性的最佳部位。试验4、大蒜多糖的硫酸化修饰以产物量、糖含量和取代度(DS)为指标对大蒜多糖硫酸化修饰的主要条件试剂配比、反应温度和反应时间进行三因素三水平正交试验。结果表明,试剂配比对产物量影响较大,当氯磺酸-吡啶为1：4时,产物量最高;反应温度对糖含量和取代度影响较大,在45℃时糖含量最高,随温度上升糖含量逐渐下降;而取代度在45℃时最小,随温度的升高逐渐增高。试验5、硫酸化大蒜多糖抗病毒活性的体外比较首先测定正交实验所得9个硫酸大蒜化多糖(sGPSs)对CEF的安全浓度,然后以sGPSs和GPSp为比较对象,取安全浓度范围的5个浓度的9种硫酸化大蒜多糖和未修饰的GPSp与鸡新城疫病毒以3种加药方式加入到培养成单层的CEF中,用MTT法测定NDV感染CEF能力的变化。结果显示,先加多糖时,GPSp、sGPS5和sGPS6在3.125μg/ml能显著抑制NDV病毒感染CEF(P<0.05), sGPS5组的病毒抑制率最高;后加多糖时,除sGPSl和sGPS2外,其余7组sGPS在一定浓度范围均能显著抑制NDV感染CEF(P<0.05),sGPS5和sGPS6组的病毒抑制率最高

关键词：大蒜多糖(GPS) 活性部位抗病毒增强免疫硫酸化修饰

中药苦芪超微粉增强免疫及治疗犬细小病毒感染的效果观察

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畜牧与兽医 2020年第6期52卷 142-146页

作者：邢玉娟庄彩云王建国邱树磊刘运镇陈玉库杨帆刘益曹希敏江苏农牧科技职业学院江苏泰州225300 内蒙包头市九原区动物疫病预防控制中心内蒙古包头014060 山东省威海市环翠区动物疫病预防控制中心山东威海264200

为了探讨中药苦芪超微粉对机体免疫功能及犬细小病毒感染的治疗效果的影响,以小鼠为模型,将60只昆明小鼠随机均分为苦芪超微粉高、中、低剂量组(40,20,10 mL/kg)、药物对照组(黄芪多糖口服液,10 mL/kg)、模型组和空白对照组6个组,1~4组... 详细信息

为了探讨中药苦芪超微粉对机体免疫功能及犬细小病毒感染的治疗效果的影响,以小鼠为模型,将60只昆明小鼠随机均分为苦芪超微粉高、中、低剂量组(40,20,10 mL/kg)、药物对照组(黄芪多糖口服液,10 mL/kg)、模型组和空白对照组6个组,1~4组每天灌胃给药1次,模型组和空白对照组灌胃给予与药物对照组等剂量生理盐水;连续5 d后,1~5组腹腔注射环磷酰胺(40 mg/kg),空白对照组腹腔注射生理盐水(40 mg/kg),连续2 d,末次注射给药后,脱颈椎处死小鼠,测定胸腺指数、脾指数及脾淋巴细胞增殖率;进一步将49~55日龄自然感染的田园犬随机分成6组,分别为苦芪超微粉高、中、低剂量组,药物对照组,模型组,空白对照组,连续口服给药5 d,给药后观察7 d;统计各组有效率、死亡率和治愈率。结果显示:苦芪超微粉高、中、低剂量组均能显著增加免疫低下小鼠的胸腺指数和脾脏淋巴细胞的转化率(P<0.05),高、中剂量组能显著增加脾指数(P<0.05);高、中剂量组治疗犬细小病毒感染的有效率、治愈率最高。

关键词：苦芪超微粉增强免疫犬细小病毒感染攻毒保护

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食物中增强免疫功能有效成分的研究进展

食品工业 2000年第4期21卷 38-39页

作者：阎磊上海梅林正广和(集团)有限公司 200082

增强免疫功能是保健食品中最重要的功能之一。对于基础研究和应用开发，其中最关键的是筛选和确定食物中具有增强免疫功能的生理活性的有效成分。本文对这方面的研究成果作一阐述。

关键词：增强免疫保健食品有效成分应用研究