检索结果-南通市图书馆

基因组文库构建及其在保护遗传学中的应用前景

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

兽类学报 2005年第1期25卷 86-90页

作者：林翙方盛国浙江大学生命科学学院

基因组文库是进行分子克隆和基因组结构与功能研究的基础。完整的基因组文库的构建 ,使任何DNA片段的筛选和获得成为可能。随着不同克隆载体的相继出现 ,基因组文库也经历了一系列的发展过程。其中 ,BAC文库因其转化效率高、嵌合体少、... 详细信息

基因组文库是进行分子克隆和基因组结构与功能研究的基础。完整的基因组文库的构建 ,使任何DNA片段的筛选和获得成为可能。随着不同克隆载体的相继出现 ,基因组文库也经历了一系列的发展过程。其中 ,BAC文库因其转化效率高、嵌合体少、插入片段易回收 ,以及容载量较大等优点而被广泛应用。近几十年来 ,随着环境的日益恶化、分子遗传学技术的迅速发展 ,以及保护生物学和分子遗传学的不断相互渗透 ,孕育产生了保护遗传学这一分支学科。作为保护遗传学中物种保护策略的重要部分 ,建立濒危野生动植物的基因组文库 ,是保存其种质资源的最为有效的实际手段和方法 ,并能为进一步开展与生殖、疾病和重要经济性状等方面有关的功能基因的研究。

关键词：保护遗传学基因组文库濒危保护生物学分子遗传学技术 DNA片段功能基因经济性状种质资源载量

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鼠李糖乳杆菌LS8基因组文库的构建

中国食品学报 2016年第6期16卷 64-70页

作者：辛红鸿张瑜刘景吕欣西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100

为通过构建基因组文库方法,探究鼠李糖乳杆菌LS8菌株的细菌素编码基因,采用质粒消除方法证明LS8菌株细菌素编码基因位于基因组DNA。在此基础上,提取LS8菌株基因组DNA,采用同尾酶Sau3A1和Bam H1分别酶切基因组DNA,回收250~1 000 bp的片段... 详细信息

为通过构建基因组文库方法,探究鼠李糖乳杆菌LS8菌株的细菌素编码基因,采用质粒消除方法证明LS8菌株细菌素编码基因位于基因组DNA。在此基础上,提取LS8菌株基因组DNA,采用同尾酶Sau3A1和Bam H1分别酶切基因组DNA,回收250~1 000 bp的片段,然后采用T4 DNA连接酶将回收片段与已酶切并去磷酸化后的载体（p Bluescript SK）进行连接,采用Ca Cl2处理法转化大肠杆菌（TOP10）。通过蓝白斑和氨苄抗性筛选,得到阳性克隆1 480个,采用菌液PCR对克隆进行检测。将测序并拼接后所得101条序列在NCBI上比对,发现5个可能的细菌素编码基因。分别设计引物对上述序列进行PCR扩增和测序,为细菌素基因的异源表达奠定基础。

关键词：鼠李糖乳杆菌LS8 基因组文库细菌素

聚合酶链式反应递缩基因组文库以克隆抗生素生物合成基因簇

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海交通大学学报 2009年第1期43卷 5-8页

作者：何云龙朱冬青白林泉邓子新上海交通大学生命科学与技术学院微生物代谢教育部重点试验室上海200240

在克隆阿维菌素(avermectin)生物合成基因簇的过程中,探索出了一条运用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术对链霉菌基因组文库进行递缩法筛选、以克隆抗生素生物合成基因簇的新方法.依次以96孔培养板整板混合质粒、单排混合质粒和单个菌落为... 详细信息

在克隆阿维菌素(avermectin)生物合成基因簇的过程中,探索出了一条运用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术对链霉菌基因组文库进行递缩法筛选、以克隆抗生素生物合成基因簇的新方法.依次以96孔培养板整板混合质粒、单排混合质粒和单个菌落为模板进行PCR扩增,以逐步递缩的方式定位包含目的基因的克隆.结果表明,与传统的菌落原位杂交方法相比,该方法具有简单、快捷、准确率高等优点.

关键词：聚合酶链式反应阿维菌素克隆基因组文库基因簇递缩法

基因组文库及基因小库构建在基因克隆中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第二军医大学学报 2000年第3期21卷 299-300页

作者：张平武邹蓓艳王慧丽孙树汉第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室上海200433 复旦大学遗传所

在基因克隆的方法选择中,构建基因组文库并筛选是克隆完整基因的经典方法, 但构建基因组文库技术复杂,步骤繁琐.若构建的文库不够大,常筛选不到所需的目的基因.因此我们尝试用另一种方法,即在试探性的Southern blot基础上构建基因小库,... 详细信息

在基因克隆的方法选择中,构建基因组文库并筛选是克隆完整基因的经典方法, 但构建基因组文库技术复杂,步骤繁琐.若构建的文库不够大,常筛选不到所需的目的基因.因此我们尝试用另一种方法,即在试探性的Southern blot基础上构建基因小库,从中筛选目的基因,可以大大减少筛库的工作量并提高筛到目的基因的成功率.现以克隆酵母Candida kefyr 的菊粉酶全基因为例将这两种方法加以比较.

关键词：基因组文库基因小库基因克隆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Raji细胞基因组文库的构建与筛选

中南大学学报（医学版） 2008年第3期33卷 185-191页

作者：高建明李小玲李桂源三峡大学医学院病理生理学教研室湖北宜昌443002 中南大学肿瘤研究所长沙410078

目的：构建Raji细胞基因组文库，用EBV DNA探针对文库进行筛选。方法：Raji细胞基因组DNA经BamHI酶切消化后，低熔点琼脂糖回收9～23kb的酶切DNA片段，通过匹配黏性末端与磷酸化的Lambda DASH ⅡBam HI酶切载体臂连接，在体外经包装系... 详细信息

目的：构建Raji细胞基因组文库，用EBV DNA探针对文库进行筛选。方法：Raji细胞基因组DNA经BamHI酶切消化后，低熔点琼脂糖回收9～23kb的酶切DNA片段，通过匹配黏性末端与磷酸化的Lambda DASH ⅡBam HI酶切载体臂连接，在体外经包装系统包装成活的重组噬菌体，测定原始文库与扩增文库的滴度，用同位素标记的EBVDNA探针对Raji细胞基因组文库进行筛选。结果：Raji细胞原始文库与扩增文库的滴度分别为1．8×10^5和2．8×10^8pfu／mL。文库经筛选获得4个阳性克隆，随机挑取1个阳性克隆稀释后铺平板作进一步杂交鉴定，发现所有噬茵斑均有杂交信号，证明该克隆确为阳性克隆。抽提该阳性克隆DNA，进行Bam HI酶切鉴定，证实插入片段的长度为8．5kb。经测序、BLAST序列比对，结果显示插入片段一侧为EBV BamHI W片段，另一侧与人类15号染色体RPl1-665A22克隆高度同源。结论：Raji细胞基因组文库的成功构建，为进一步克隆包含EBV整合位点的细胞基因组序列、探讨EBV整合参与肿瘤发生发展的分子机制奠定了基础。

关键词： Raji细胞基因组文库构建筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

灰树花总DNA的制备及基因组文库的构建

遗传 2004年第5期26卷 711-713页

作者：徐志祥程度李宝健中山大学生命科学院基因工程国家教育部重点实验室广州510275

灰树花是一种珍贵的药用真菌,因为多糖含量较高,较难获得高质量的总DNA,本文提出了一种制备高质量灰树花总DNA及构建灰树花基因组文库的方法。该方法制备的灰树花总DNA,经Sau3AⅠ酶切后,用于构建基因组文库,可得到2×105个转化子/50mg,... 详细信息

灰树花是一种珍贵的药用真菌,因为多糖含量较高,较难获得高质量的总DNA,本文提出了一种制备高质量灰树花总DNA及构建灰树花基因组文库的方法。该方法制备的灰树花总DNA,经Sau3AⅠ酶切后,用于构建基因组文库,可得到2×105个转化子/50mg,平均插入片段为14kb。为下一步克隆灰树花中的基因以及进行其他分子生物学研究奠定了基础。

关键词：灰树花 DNA提取基因组文库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基因组文库的构建和筛选

基因组文库的构建和筛选

作者：智慧天津大学

学位级别：硕士

白色念珠菌是人体内最重要的机会型致病真菌,以二倍体形式存在,没有性别变化,至今尚未发现它的单倍体世代。白念珠菌由于其致病性和双倍体特性,对于研究其生物学特征、基因功能及致病机理产生了很多困难。所以,白色念珠菌的基因组文库... 详细信息

白色念珠菌是人体内最重要的机会型致病真菌,以二倍体形式存在,没有性别变化,至今尚未发现它的单倍体世代。白念珠菌由于其致病性和双倍体特性,对于研究其生物学特征、基因功能及致病机理产生了很多困难。所以,白色念珠菌的基因组文库可以在分子生物学及遗传学方面帮助我们研究白念珠菌的基因功能从而研究其致病机理。在本课题中,我们构建了白念珠菌基因组文库。然后,将白念珠菌基因组文库转入酿酒酵母基因缺失株中筛选我们感兴趣的基因从而研究白念珠菌的基因功能,致病机理及其对药物的敏感程度。在实验室已筛选出的对盐离子敏感的酿酒酵母缺失株的基础上,我们将一个以单拷贝载体为背景的酵母基因组文库转入这些缺失株中,筛选其相对应的基因,及其他可互补这些基因缺陷的基因,从而研究其盐离子耐受性的机制。

关键词：白色念珠菌基因组文库酿酒酵母酿酒酵母基因缺失文库筛选

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基因组文库的构建和池化筛选

生物技术通报 2010年第5期26卷 11-15页

作者：陈献伟娜日苏朱超王会雷娜高剑峰关伟军马月辉中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 石河子大学生命科学学院石河子832003 广西大学动物科学技术学院南宁530004 山西农业大学太谷030801

作为物种保护策略的重要部分,建立濒危畜禽的基因组文库,可有效保存濒危畜禽种质资源。BAC(bacterialartificial chromosome)文库具有高容量、遗传特性稳定和嵌合体少等优点,因而被用于畜禽基因组文库的构建。对BAC文库的构建方法和文... 详细信息

作为物种保护策略的重要部分,建立濒危畜禽的基因组文库,可有效保存濒危畜禽种质资源。BAC(bacterialartificial chromosome)文库具有高容量、遗传特性稳定和嵌合体少等优点,因而被用于畜禽基因组文库的构建。对BAC文库的构建方法和文库池化筛选系统作一综述。

关键词： BAC载体基因组文库池化筛选

尼罗罗非鱼微阵列Fosmid基因组文库的构建及基因筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水产学报 2011年第1期35卷 27-34页

作者：李明辉吴风瑞熊传奇曾圣杨世杰叶凯蒋汶洮孙运侣黄宝锋魏莹莹焦静顾源王德寿西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室

以pCC2FOS为载体构建尼罗罗非鱼Fosmid基因组文库,共挑选115 200个单菌落,保存在300块384孔样品板中,构建4 800个行池、7 200个列池、300个板池和25个超级池,形成微阵列,并对其进行复制备份。该文库插入片段平均长度约为40 kb,覆盖约罗... 详细信息

以pCC2FOS为载体构建尼罗罗非鱼Fosmid基因组文库,共挑选115 200个单菌落,保存在300块384孔样品板中,构建4 800个行池、7 200个列池、300个板池和25个超级池,形成微阵列,并对其进行复制备份。该文库插入片段平均长度约为40 kb,覆盖约罗非鱼基因组的3倍。连续传代实验研究表明,文库具有良好的稳定性。由于构建超级池-板池-行、列池三级池系统形成的微阵列,有助于快速、准确、有效地筛选目的基因,仅需77个PCR反应(超级池25+板池12+行池16+列池24)就能筛选到含有目的基因的一个单克隆,解决了普遍存在的文库筛选难题。通过文库尝试筛选18个与性别分化和生长相关基因,均获得2～5个阳性克隆,说明文库具有较好的实用性。

关键词：尼罗罗非鱼基因组文库微阵列基因筛选