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白细胞介素24基因工程蛋白的研究进展

军事医学 2015年第10期39卷 797-801页

作者：张耀马群风张驰史亦南江红北京交通大学理学院生命科学与生物工程研究院北京100044 军事医学科学院附属医院胸外科北京100071

白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)能在体内外特异性地抑制多种肿瘤细胞增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有影响,在肿瘤治疗方面具有诱人前景。以腺病毒为载体的基因工程疗法自身的局限性限制了IL-24的临床应用,而蛋白药物与... 详细信息

白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)能在体内外特异性地抑制多种肿瘤细胞增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞没有影响,在肿瘤治疗方面具有诱人前景。以腺病毒为载体的基因工程疗法自身的局限性限制了IL-24的临床应用,而蛋白药物与之相比具有无可比拟的优势。该文阐述了IL-24基因工程蛋白的研究进展。

关键词：白细胞介素类基因工程蛋白肿瘤细胞增殖细胞凋亡

基因工程蛋白金葡菌-溶血素的纯化及活性检测

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基因工程蛋白金葡菌-溶血素的纯化及活性检测

TRAIL分子胞外区基因工程蛋白的制备与鉴定

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：张海燕马卫明杨宏军王长法何洪彬曹永芝山东农业大学动物科技学院山东省农业科学院奶牛研究中心

【目的】分离纯化基因工程重组蛋白金黄色萄萄球菌溶血素(-hemolysin,HL)并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础.【方法】对含pET32a- -HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达,诱导成功之后,将重组菌BL21(DE3)培养物用超声波裂解,并用凝胶过... 详细信息

【目的】分离纯化基因工程重组蛋白金黄色萄萄球菌溶血素(-hemolysin,HL)并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础.【方法】对含pET32a- -HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达,诱导成功之后,将重组菌BL21(DE3)培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用Bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活.【结果】纯化产物在SDS-PAGE电泳中53 ku处呈现出单一清晰带,达电泳级纯度.纯化产物含量约为0.1277mg/mL,溶血比活为8 192HU/mg.【结论】成功获得了金黄色萄萄球菌HL,且所获的HL具有良好的溶血活性.

关键词：溶血素金黄色葡萄球菌溶血活性基因工程蛋白原核表达

来源： cnki会议评论

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中国实验诊断学 2003年第6期7卷 477-479页

作者：路丽明李宁丽沈佰华王利余奇文聂红张继英柏峻张冬青上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

目的　制备人TRAIL配体胞外区基因工程蛋白。方法　应用RT PCR技术从激活的人外周血淋巴细胞总RNA中扩增TRAIL配体胞外区cDNA ,克隆入PCR2 .1 载体 ,测序验证后用基因重组法构建了TRAIL配体胞外区和组氨酸盒的原核表达质粒pQE hTRAIL。... 详细信息

目的　制备人TRAIL配体胞外区基因工程蛋白。方法　应用RT PCR技术从激活的人外周血淋巴细胞总RNA中扩增TRAIL配体胞外区cDNA ,克隆入PCR2 .1 载体 ,测序验证后用基因重组法构建了TRAIL配体胞外区和组氨酸盒的原核表达质粒pQE hTRAIL。将重组质粒转入大肠杆菌M15中表达 ,经 1mmol LIPTG在 37℃条件下诱导 4h ,亲和层析柱纯化。用SDS -PAGE电泳和Westernblot鉴定表达产物。结果　所表达融合蛋白为人TRAIL配体胞外区分子 ,分子量 30kD。表达量约为 2mg ml。结论　人TRAIL配体胞外区在大肠杆菌中得到良好表达 ,为深入研究TRAIL配体分子在肿瘤与自身免疫病中的可能应用提供了材料。

关键词： TRAIL分子胞外区基因工程蛋白制备鉴定

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因工程蛋白α-溶血素的纯化及其活性检测

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重组人血管内皮抑制素(rh-Endostatin)大肠杆菌表达体系发酵条件的优化

中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会、中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会

作者：张海燕马卫明杨宏军王长法何洪彬曹永芝山东农业大学动物科技学院山东省农业科学院奶牛研究中心

对含pET32a-α-HL质粒的BL21（DE3）进行诱导表达,诱导成功之后,将重组菌BL21（DE3）培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用Bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活。实验结果表明... 详细信息

对含pET32a-α-HL质粒的BL21（DE3）进行诱导表达,诱导成功之后,将重组菌BL21（DE3）培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用Bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活。实验结果表明,纯化产物在SDS-PAGE电泳中53ku处呈现出单一清晰带,达电泳级纯度。纯化产物含量约为0.1277mg/mL,溶血比活为8192HU/mg。

关键词： α-溶血素金黄色葡萄球菌溶血活性基因工程蛋白原核表达

来源： cnki会议评论

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生物工程学报 2005年第4期21卷 662-666页

作者：常国栋李壮林秦加阳马翠卿罗永章许平山东大学微生物技术国家重点实验室济南250100 清华大学生物系北京100084

优化了重组人血管内皮抑制素的***表达体系的发酵条件。利用***表达体系得到了较高的产量,在9h左右的发酵周期内达到OD600值140,包涵体蛋白产量为3g/L。主要优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG... 详细信息

优化了重组人血管内皮抑制素的***表达体系的发酵条件。利用***表达体系得到了较高的产量,在9h左右的发酵周期内达到OD600值140,包涵体蛋白产量为3g/L。主要优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)的终浓度、诱导时间、培养温度、补料控制方法等条件,并且在诱导后提高培养温度到40℃,在非常短的培养周期内达到了高密度培养的目的。利用***表达,继而通过复性获得有活性的重组人血管内皮抑制素,成本低、生产过程稳定可控、得到的蛋白性质稳定,符合工业生产的需要。

关键词：重组人血管内皮抑制素异丙基-β-D-硫代半乳糖苷大肠杆菌基因工程蛋白高密度培养肿瘤

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长效蛋白药物研究进展

生物产业技术 2009年第3期 46-51页

作者：吴军马清钧军事医学科学院生物工程研究所北京100071

基因工程蛋白和多肽药物是第一代基因工程药物的主体，已广泛应用于临床，但这类药物的血浆半衰期一般只有数十分钏至数小时，疾病治疗时往往需要反复频繁注射，

关键词：基因工程蛋白长效药物融合修饰

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疟原虫红前期的肽亚单位疫苗

国外医学（寄生虫病分册） 2004年第2期31卷 71-73页

作者：王琼安桂珍天津医科大学寄生虫学教研室天津市300070

用射线致弱的子孢子实验性免疫动物和人可诱导抗疟疾感染免疫力 ,表明了研制有效疟疾疫苗的可行性。由于缺乏体外培养系统 ,大量应用射线致弱的子孢子做疫苗是不可行的。含有不同抗原表位的合成肽亚单位疫苗可作为替代品。目前 ,表达子... 详细信息

用射线致弱的子孢子实验性免疫动物和人可诱导抗疟疾感染免疫力 ,表明了研制有效疟疾疫苗的可行性。由于缺乏体外培养系统 ,大量应用射线致弱的子孢子做疫苗是不可行的。含有不同抗原表位的合成肽亚单位疫苗可作为替代品。目前 ,表达子孢子和 /或肝期T、B细胞表位的亚单位疫苗已用于实验动物 ,它们具有很强的免疫原性且能诱导抗体和CD4 + 、CD8+ T细胞介导的保护性免疫。

关键词：疟原虫肽亚单位疫苗红前期保护性免疫体液免疫细胞免疫基因工程蛋白多抗原肽

Roche公司和Ambrx公司在蛋白和肽方面合作

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国外药讯 2006年第5期 38-38页

作者：王卫（摘）

按照一项新的合作安排，Roche公司正在获得美国Ambrx公司的蛋白和肽工程专门技术。Ambrx公司拥有能用新氨基酸构建基因工程蛋白的技术，能生物合成具有新物理、化学和药理学特性的蛋白。在第一阶段，Roche公司和Amhrx公司将采用这项技... 详细信息

按照一项新的合作安排，Roche公司正在获得美国Ambrx公司的蛋白和肽工程专门技术。Ambrx公司拥有能用新氨基酸构建基因工程蛋白的技术，能生物合成具有新物理、化学和药理学特性的蛋白。在第一阶段，Roche公司和Amhrx公司将采用这项技术合成新的聚乙二醇化干扰素α分子，后者将比现在销售的产品更有效或更安全。

关键词： Roche公司基因工程蛋白合作肽生物合成药理学特性聚乙二醇化干扰素α 氨基酸