检索结果-南通市图书馆

湖北医科大学学报 1997年第1期18卷 24-25,33页

作者：苏应斌莫道君戴天力基础医学院病毒研究所分子生物室

直接用煮沸的细菌裂解液中的ＤＮＡ作ＰＣＲ模板，扩增效果与用酚／氯仿抽提纯化的质粒ＤＮＡ作模板的结果一致，缩短了实验时间。利用简单材料回收酶切片段，省去了有机溶剂反复抽提和沉淀的步骤，回收率达到９０％，效果很好。

关键词： PCR模板制备 DNA 细菌裂解波基因增强

差示PCR等方法诊断神经母细胞瘤的N－myc扩增

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国外医学（儿科学分册） 1995年第3期22卷 136-140页

作者：杨朝晖中国医科大学第二临床学院

最近对神经母细胞瘤（ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＮＢ）的Ｎ－ｍｙｃ癌基固扩增研究较深入。Ｎ－ｍｙｃ扩增对ＮＢ的发生、预后有着很重要作用。常规使用的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析法较为复杂，随着分子生物学的发展，差示聚合酶链... 详细信息

最近对神经母细胞瘤（ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＮＢ）的Ｎ－ｍｙｃ癌基固扩增研究较深入。Ｎ－ｍｙｃ扩增对ＮＢ的发生、预后有着很重要作用。常规使用的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析法较为复杂，随着分子生物学的发展，差示聚合酶链反应（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，Ｄ－ＰＣＲ）成为分析基因扩增的手段之一。它根据内参照原理使常规ＰＣＲ法克服了不能定量的局限性，并且具有简便、快速、灵敏和准确等优点，适于临床应用。

关键词：神经母细胞瘤癌基因聚合酶链反应基因增强

赤红球菌位点2蛋白酶类似蛋白的功能表征与转录组学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

赤红球菌位点2蛋白酶类似蛋白的功能表征与转录组学分析

作者：吴金芳江西师范大学

学位级别：硕士

位点2蛋白酶(Site-2 protease,简称S2P)广泛分布在细菌中,参与调控细菌的各种生理功能,包括保持膜的完整性、形成芽孢、合成脂质、产生信息素和调节毒性基因表达等,因此深入探讨各种细菌的S2P的功能,对于进一步理解细菌的各种生理功能... 详细信息

位点2蛋白酶(Site-2 protease,简称S2P)广泛分布在细菌中,参与调控细菌的各种生理功能,包括保持膜的完整性、形成芽孢、合成脂质、产生信息素和调节毒性基因表达等,因此深入探讨各种细菌的S2P的功能,对于进一步理解细菌的各种生理功能具有重要的科学意义。目前赤红球菌中关于S2P蛋白酶的研究鲜有报道。在Rhodococcus ruber SD3(简称*** SD3)的蛋白质组学研究中发现在苯酚胁迫下,S2plp(S2P-like protein)蛋白的表达量在所有蛋白中上调最高,本论文将研究S2plp蛋白的生物学功能。主要研究内容和结果如下:1、利用生物信息学方法分析s2plp基因,发现该基因编码的蛋白由252个氨基酸组成,分子式为CH NOS,分子量为26.335 k Da,理论等电点为10.96,该蛋白稳定性高、疏水性较强。结构分析结果表明S2plp蛋白无信号肽和二硫键并包含6段跨膜区,同源比对和进化树分析推测S2plp属于M50超家族成员。采用Robetta综合法对S2plp的三级结构进行了预测,通过蛋白互作预测到S2plp蛋白可能参与细胞膜上的信号转导与物质转运。2、通过实时荧光定量PCR技术检测s2plp基因在苯酚、正己烷等有机溶剂胁迫下的表达情况,结果显示与未经有机溶剂胁迫的菌株相比,s2plp基因的表达量在苯酚、正己烷、正庚烷、异辛烷、环己烷、苯以及乙腈的胁迫下均发生了上调。此外,实验还通过设置苯酚浓度梯度来研究s2plp基因表达水平与有机溶剂浓度的相关性。结果表明当苯酚浓度提高之后,s2plp基因的表达水平也会发生上调。3、构建p NV18-s2plp-s2plp重组质粒,并将其电转至*** SD3菌株中,获得s2plp基因增强型菌株。利用实时荧光定量PCR技术,以野生型*** SD3为对照,检测增强株中s2plp的基因表达水平,结果显示s2plp基因增强株中的s2plp表达量上调至野生型*** SD3的248.52倍。在异辛烷、正己烷等多种有机溶剂胁迫培养时发现s2plp基因增强株的生长优势较野生型*** SD3菌株明显。推测s2plp基因对*** SD3的有机溶剂耐受性具有一定的促进作用。4、采用高通量测序技术对s2plp基因增强株与野生型*** SD3菌株进行转录组学测序,共注释到了4846个unigene。以野生型*** SD3菌株为参照,在苯酚胁迫下,以p-adjust基因,其中8个基因功能未知,已知功能的基因主要集中DNA修复、错配以及重组中。结合前期对*** SD3的有机溶剂耐受性的研究,考虑s2plp基因能够促进赤红球菌在有机溶剂对细胞DNA损伤的修复,进而使得增强型菌株能够更好地适应有机溶剂胁迫环境,但其他差异基因功能未知,s2plp在赤红球菌有机溶剂耐受中的具体作用还有待进一步的研究。转录组学的这些结果将为今后深入开展*** SD3的有机溶剂耐受性机制研究奠定理论基础。本研究通过实时荧光定量PCR技术、基因增强技术与转录组学分析,发现S2plp蛋白对*** SD3的有机溶剂耐受性起到了一定的促进作用。通过分析S2plp的生物学功能,为进一步揭示*** SD3中该蛋白所涉及的信号转导途径奠定基础,同时为*** SD3的遗传重塑提供潜在的分子靶标。

关键词：赤红球菌位点2蛋白酶基因增强荧光定量PCR 转录组测序

PHA合成菌Pseudomonas ***4502的发酵条件与合成特性研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

作者：杨家鑫长春理工大学

学位级别：硕士

聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHAs)是具有生物相容性、生物可降解性,其可以代替石油化工塑料的一类天然高分子物质。除了作为可降解生物塑料的添加剂之外,在食品、再生医疗、制药等领域也具有广阔的应用前景。然而,PHAs的生... 详细信息

聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHAs)是具有生物相容性、生物可降解性,其可以代替石油化工塑料的一类天然高分子物质。除了作为可降解生物塑料的添加剂之外,在食品、再生医疗、制药等领域也具有广阔的应用前景。然而,PHAs的生产过程存在发酵成本较高、商品化的PHAs类型有限等问题,阻碍了此类生物高分子的进一步应用开发。本研究主要对具有PHA合成能力的耐热假单胞菌Pseudomonas ***4502的培养条件进行了优化,分析其作为PHA生产菌株的可能性,并在分子水平方面探讨了该菌株与PHA合成的相关基因对其PHA合成影响。首先,Pseudomonas ***4502的优化结果表明,该菌株分别以1%(w/v)辛酸钠和1%(w/v)甘油为碳源,1%(w/v)尿素为氮源,在45℃,pH 8.0的培养条件下,可获得粘稠的固体产物约为0.26 g/L。GC-MC、H-NMR的结果表明,以辛酸钠为碳源合成产物为3-羟基辛酸(3HO)、3-羟基癸酸(3HD)和3-羟基十二烷酸(3HDD)的中长链混合聚酯;以甘油为碳源合成产物为3-羟基癸酸(3HD)和3-羟基十二烷酸(3HDD)的中长链混合聚酯。以辛酸钠为碳源合成产物的分子量为3298 Da,分散度为4.56;以甘油为碳源合成产物的分子量为3105 Da,分散度为4.61。其次,在分子水平上,利用基因工程技术将强启动子tac插入该菌株的PHA合成酶基因phaC1和phaC2的上游,构建了重组菌株Pseudomonas ***4502+tac-phaC1和Pseudomonas ***4502+tac-phaC2。通过尼罗红染色法荧光检测、实时定量荧光PCR、H-NMR、GC-MS等方法,探讨了强启动子tac基因对phaC基因的转录水平和合成PHA产量、结构以及性质的影响。结果表明,以1%辛酸钠(w/v)为碳源,与野生株对比,重组株+tac-phaC1和+tac-phaC2提高了phaC基因的转录水平;三株菌株的PHAs合成产量分别为0.26 g/L(野生型)、0.13 g/L(+tac-phaC1)和0.40 g/L(+tac-phaC2)。三株菌种合成PHAs的组成均为含有中长链3HO、3HD和3HDD的具有良好热性能的混合聚酯。合成聚酯的分子量和分散度分别为3298 Da、4.56(野生型),4965 Da、2.67(+tac-phaC1),5480 Da、2.52(+tac-phaC2)。差示扫描量热法(DSC)和热重分析(TG)结果表明,三种菌株合成的PHAs的熔融温度均在60～65℃范围内,玻璃化转变温度T均在-38.4～-40.9℃范围内,均具有MCL-PHA低熔融性质;对比野生型的分解温度356.7℃,重组株菌的分解温度有所提高,分别为365.1℃、371.4℃。这些结果说明重组菌株合成PHA的热稳定性比野生型合成PHA的热稳定性好。最后,利用抗性插入法敲除了Pseudomonas ***4502的降解酶phaZ基因,构建了敲除株Pseudomonas ***4502?phaZ。利用尼罗红荧光染色发光、实时定量荧光PCR、H-NMR、GC-MS等方法,探讨了敲除降解酶phaZ基因对合成酶相关基因的转录水平和合成PHA产量、结构及性质的影响。结果表明,以1%(w/v)辛酸钠为碳源,对比野生型菌株,敲除株Pseudomonas ***4502?phaZ,降低了phaZ基因的转录水平,同时提高了phaC基因的转录水平;敲除株Pseudomonas ***4502?phaZ的PHA合成量为0.32 g/L,比野生型高出0.06 g/L,合成PHA的组成单体与野生型菌株的结果一致。敲除株Pseudomonas ***4502?phaZ产物的分子量为7675 Da,分散度为2.604。DSC和TG结果表明敲除株合成的PHA熔融温度为63.94℃,玻璃化温度为-36.69℃,分解温度为366.68℃,与野生型产物对比,分子量明显增加,分散性明显降低,Tg和Tm均降低,分解温度明显提高,具有低熔融温度和良好的热性能。本研究的研究结果为Pseudomonas ***4502利用廉价的碳源降低PHA合成成本,为其在分子水平上提高PHA合成能力提供了基础数据,并为其它PHA合成菌的相关研究提供参考。

关键词：聚羟基脂肪酸酯微生物条件优化基因增强基因敲除 PHA合成

共同引物PCR/RFLP方法对直肠癌组织中人乳头瘤病毒的检测及分型

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

湖北医科大学学报 1998年第3期19卷 193-196页

作者：张秋萍邓涛宗润芝于皆平罗和生

为探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）与直肠癌的关系，应用共同引物聚合酶链式反应扩增ＨＰＶ高保守区Ｌ１区序列，扩增产物经限制性内切酶ＤｄｅＩ，ＸｂａＩ，ＡｃｃＩ，ＰｓｔＩ酶切后，进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），可对Ｈ... 详细信息

为探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）与直肠癌的关系，应用共同引物聚合酶链式反应扩增ＨＰＶ高保守区Ｌ１区序列，扩增产物经限制性内切酶ＤｄｅＩ，ＸｂａＩ，ＡｃｃＩ，ＰｓｔＩ酶切后，进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），可对ＨＰＶ６，１１，１６，１８等常见的型别进行快速检测及鉴定。用该法对１１２例直肠癌和６３例正常直肠粘膜组织中ＨＰＶ进行检测。结果：直肠癌ＨＰＶ检出率（１８．７５％）与正常直肠粘膜（７．９３％）差异无显著性（Ｐ＞０．０５），但直肠癌ＨＰＶ１６检出率（１６．０７％）高于正常直肠粘膜（１．５８％），差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１），表明ＨＰＶ１６可能与直肠癌的发生有密切关系，是直肠癌的高危致癌因素。该检测系统敏感性高，可检出每个二倍体细胞内０．１拷贝的ＨＰＶ１６ＤＮＡ，操作简便，适用于大批量标本ＨＰＶ的筛检。

关键词：乳头瘤病毒基因增强 PCR/RFLP 直肠肿瘤

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物科技的重要性和前景

中国外资 1999年第12期 112-116页

作者：贺利得杜邦公司

生物科学领域的发展速度的确相当惊人。生物科技研究最为基础的单位是“序列基因配对(sequenced base pairs)”。至1982年,研究者所完成的配对数量约为680000对,到今年年底,这一数目将超过26亿,换句话说,我们在基础知识方面,已提高了400... 详细信息

生物科学领域的发展速度的确相当惊人。生物科技研究最为基础的单位是“序列基因配对(sequenced base pairs)”。至1982年,研究者所完成的配对数量约为680000对,到今年年底,这一数目将超过26亿,换句话说,我们在基础知识方面,已提高了4000倍。但是,研究的深入,也引起了公众的争论,有关生物科技的文章和新闻报道日益增多。目前大多数的讨论都聚集在生物科技最有争议的方面:一种所谓经过基因改造的生物(GMO,genetically modified organism)。

关键词：生物科技杜邦公司重要性益处配对数基因增强科学工具未来世界基因改造人类需要

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

消化系肿瘤

国外科技资料目录（医药卫生） 2002年第7期 157-158页

0226801 进行当中的临床试验/Ga-landiuk S//Dig Surg.-2001,18(4).-339～348 医科图0226802 腹膜后骨骼外骨肉瘤/van Ri-jswijk C S//J Clin Pathol.-2001,54(1).-77～78

关键词：临床试验医科骨肉瘤消化系肿瘤腹膜后骨骼基因增强肿瘤形成组织病理鉴别诊断

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

美发现植物抗寒基因

园林科技 1998年第3期 47-47页

美国科学家最近发现一种植物抗寒开关基因,能启动植物的防御机制,抵御寒潮的袭击。密执安州立大学的迈克尔·托马肖及其同事在研究芥子植物的近亲植物时发现了这种名叫 CBFI 的基因,它能开启另一种基因 COR。

关键词：植物抗寒防御机制动植物开关基因芥子植物基因增强科学家抗寒基因州立大学寒潮

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

基因编辑：滑向优生学？

哲学探索

哲学探索 2022年第2期 79-94页

作者：达维德·巴蒂斯蒂曲扬英苏布里亚大学医疗伦理中心山东大学哲学与社会发展学院

本文讨论基因编辑的伦理辩论中一种经验主义版本的滑坡论证。按照滑坡论证，允许编辑胚胎的种系必然导致应受到道德谴责的事情，比如新形式的强制优生学。本文从滑坡论证的视角考察传统的和自由主义的人类强化与优生学，探讨基因编辑滑... 详细信息

本文讨论基因编辑的伦理辩论中一种经验主义版本的滑坡论证。按照滑坡论证，允许编辑胚胎的种系必然导致应受到道德谴责的事情，比如新形式的强制优生学。本文从滑坡论证的视角考察传统的和自由主义的人类强化与优生学，探讨基因编辑滑向优生学的实际可能性。本文首先从历史的角度考察传统优生学，结论是传统优生学是道德上卑劣的，但基因编辑并不可能滑向它。进而探讨哈贝马斯和桑德尔对自由主义优生学以及人类强化的批评，并这样回应：尽管我们不可能拒绝所有形式的基因增强，但由于自由主义优生学不满足正义、无害、非工具化的原则，因而应被视为道德上不可接受的，但是滑向自由主义优生学比滑向传统优生学更有可能。本文探讨这样一种策略：我们可以接受一些对胚胎种系的基因编辑，同时避免落入滑坡论证所预示的陷阱。即使有滑向危险后果的可能性，滑坡论证也不能给出禁止在医疗与人类强化领域应用基因编辑技术的决定性理由。

关键词：滑坡论证基因编辑传统优生学自由主义优生学基因增强

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤免疫学与血清学

国外科技资料目录（医药卫生） 1997年第12期 116-116页

9744921 导入粘附分子、细胞因子基因增强肿瘤免疫[日]/加藤和则//医学の南ゆみ.-1996,179(2).-123 医科图9744922 类肉瘤病炎症处功能性 T 细胞亚群[日]/津田富康//医学のぁゆみ.一1996,178(1).-81 医科图9744923 人癌胚抗原的 T 细胞... 详细信息

9744921 导入粘附分子、细胞因子基因增强肿瘤免疫[日]/加藤和则//医学の南ゆみ.-1996,179(2).-123 医科图9744922 类肉瘤病炎症处功能性 T 细胞亚群[日]/津田富康//医学のぁゆみ.一1996,178(1).-81 医科图9744923 人癌胚抗原的 T 细胞介导免疫:"游向上游"的例子/Mitchell M S//JNat Cancer Inst.-1995,87(13).-949951

关键词：癌胚抗原基因增强粘附分子细胞因子肿瘤免疫学细胞亚群细胞介导免疫类肉瘤病功能性医学