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中华肿瘤防治杂志 2023年第14期30卷 843-851页

作者：王琳高松涛祁佩红张红伟孙晓燕单国用河南中医药大学第五临床医学院(郑州人民医院放疗科) 河南郑州450000 河南中医药大学第五临床医学院(郑州人民医院放射科) 河南郑州450000

目的探讨环状RNAcircwhsc1在结肠癌发生发展过程中的作用及其相关分子机制。方法选取2017-01-01-2021-01-31郑州人民医院病理确诊为结肠癌的60例患者癌及癌旁组织(距癌旁≥5cm),按照circwhsc1表达水平将患者分为高表达组(≥3.44,33例)... 详细信息

目的探讨环状RNAcircwhsc1在结肠癌发生发展过程中的作用及其相关分子机制。方法选取2017-01-01-2021-01-31郑州人民医院病理确诊为结肠癌的60例患者癌及癌旁组织(距癌旁≥5cm),按照circwhsc1表达水平将患者分为高表达组(≥3.44,33例)与低表达组(circwhsc1表达与患者预后生存的关联性。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测circwhsc1、miR-142-3p和RAC1的表达;采用蛋白质印迹法、CCK-8和Transwell检测其蛋白的表达、细胞的增殖和转移能力;双荧光素酶报告基因和RT-PCR验证circwhsc1、miR-142-3p和RAC1三者之间的作用关系。结果circwhsc1在结肠癌患者癌组织(3.74±1.60)中的表达高于癌旁组织(1.07±0.58),t=7.572,P1;与circwhsc1低表达组相比,circwhsc1高表达组结肠癌患者的生存时间缩短,χ^(2)=12.321,P1。结肠癌细胞系HCT116的circwhsc1表达量最高,F=29.380,P1。敲低circwhsc1可抑制HCT116细胞的增殖(t=12.775,P1)、迁移(t=46.973,P1)和侵袭能力(t=40.935,P1)。双荧光素酶报告基因显示,circwhsc1与miR-142-3p具有靶向关系,而敲低circwhsc1可增加HCT116细胞中miR-142-3p表达水平,t=17.705,P1。在敲低circwhsc1基础上应用miR-142-3p抑制剂则可以增强HCT116细胞的增殖(t=7.304,P=0.002)、迁移(t=16.049,P1)和侵袭能力(t=14.994,P1)。miR-142-3p在结肠癌患者癌组织中的表达低于癌旁组织,t=12.599,P1。双荧光素酶报告基因实验证实,RAC1为miR-142-3p的靶基因,过表达miR-142-3p可抑制HCT116细胞中RAC1蛋白表达水平(t=25.162,P1),并且发现,在敲低circwhsc1基础上过表达RAC1同样可以增强HCT116细胞的增殖(t=7.658,P=0.002)、迁移(t=62.626,P1)和侵袭能力(t=58.596,P1)。RAC1在结肠癌患者癌组织中的表达同样高于癌旁组织(t=14.873,P1),敲低circwhsc1可在抑制HCT116细胞中RAC1表达的同时,抑制其下游PAK1蛋白RAC1、PAK1及p-PAK1的表达和激活,t值分别为7.506、15.588和6.795,P值分别为0.001、1和0.002。结论circwhsc1可能通过调控miR-142-3p/RAC1/PAK1轴参与结肠癌的发生过程,为未来临床结肠癌早期诊断和治疗提供新的靶点。

关键词：结肠癌基因,circwhsc1 基因,miR-142-3p RAC1/PAK信号通路

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