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结直肠癌APC、k-ras、p53基因突变检测

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肿瘤 2006年第3期26卷 282-284页

作者：唐卫中高枫李卫唐宗江广西医科大学第一附属医院大肠肛门病外科南宁530021 广西医科大学医学科学实验中心南宁530021

目的:探讨结直肠癌中APC、k-ras、p53基因突变模式。方法:应用酚/氯仿法提取48例结直肠癌组织及其相应正常黏膜组织的DNA,用聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性分析(SSCP)和DNA测序等方法检测APC基因第15外显子突变密集区(mutation clus... 详细信息

目的:探讨结直肠癌中APC、k-ras、p53基因突变模式。方法:应用酚/氯仿法提取48例结直肠癌组织及其相应正常黏膜组织的DNA,用聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性分析(SSCP)和DNA测序等方法检测APC基因第15外显子突变密集区(mutation cluster region,MCR)区段、k-ras和p53基因的突变。结果:APC、k-ras和p53基因的突变率分别为37.5%(18/48)、43.8%(21/48)和35.4%(17/48)。48例结直肠癌组织中,有42例发生APC、k-ras或p53基因突变,突变率高达87.5%(42/48),其中仅有APC、k-ras或p53 1种基因发生突变的发生率分别为16.7%(8/48)、25.0%(12/48)和20.8%(10/48)。单独1种基因发生突变的总发生率为62.5%(30/48)。APC和p53,APC和k-ras或p53和k-ras 2种基因均有突变的发生率分别为6.3%(3/48)、10.4%(5/48)和4.2%(2/48)。APC、k-ras和p53 3种基因均发生突变的发生率为4.2%(2/48)。2种和3种基因均发生突变的总发生率为25%(12/48)。结论:结直肠癌的发生、发展并不完全遵循由正常结直肠黏膜上皮细胞向腺瘤和侵袭性癌转化的过程中,及依次发生“APC→k-ras→p53→DCC”突变累积这一经典的结直肠癌发生发展模式,可能存在其他结直肠癌发病机制。

关键词：结肠直肠肿瘤 DNA突变分析癌基因肿瘤形成过程基因,APC基因,p53 基因,k-ras

左、右半结肠癌在微卫星不稳定性、k-ras基因突变以及其他临床病理特征方面的差异

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胃肠病学 2019年第7期24卷 400-405页

作者：陈朝旭马欢战淑慧青岛大学医学部附属青岛市市立医院东院消化内科

背景:结肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,左、右半结肠癌的发生机制、生物学行为、基因表达等方面存在明显差异。目的:探讨左、右半结肠癌在临床病理特征、微卫星不稳定性(MSI)、k-ras基因突变等方面的差异。方法:收集2017年6月—2... 详细信息

背景:结肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,左、右半结肠癌的发生机制、生物学行为、基因表达等方面存在明显差异。目的:探讨左、右半结肠癌在临床病理特征、微卫星不稳定性(MSI)、k-ras基因突变等方面的差异。方法:收集2017年6月—2018年6月青岛市市立医院收治的144例术后病理检查确诊为结肠癌患者的资料,采用免疫组化法评估MSI,PCR法检测k-ras基因突变情况。分析左半结肠癌、右半结肠癌的临床病理特征、MSI、k-ras基因突变等的差异。结果:右半结肠癌好发于女性,左半结肠癌好发于男性。右半结肠癌的淋巴结转移、CEA阳性率、MSI发生率明显高于左半结肠癌(Pk-ras基因突变率显著低于左半结肠癌(Pk-ras基因突变与患者性别、淋巴结转移和CEA阳性率有关(Pk-ras基因突变存在不同程度的差异,可为结肠癌的诊断、个体化治疗、预后提供依据。

关键词：左半结肠肿瘤右半结肠肿瘤癌胚抗原微卫星不稳定性基因,k-ras

飞行时间质谱技术在结直肠癌k—ras基因突变检测中的应用

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中华胃肠外科杂志 2013年第1期16卷 80-83页

作者：邢加迪张连海李晶晶李子禹苏向前季加孚北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所胃肠肿瘤微创外科 100142 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所胃肠肿瘤外科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室 100142 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所遗传学实验室 100142

目的探讨MALDI—TOF—MS方法在检测结直肠癌k—ras基因突变中的实际临床价值。方法选取61例结直肠癌患者的肿瘤组织石蜡标本．应用常规测序和基质辅助激光解析／电离时间飞行质谱（MALDI-TOF-MS）两种方法．检测k-ras基因第2号外显子中... 详细信息

目的探讨MALDI—TOF—MS方法在检测结直肠癌k—ras基因突变中的实际临床价值。方法选取61例结直肠癌患者的肿瘤组织石蜡标本．应用常规测序和基质辅助激光解析／电离时间飞行质谱（MALDI-TOF-MS）两种方法．检测k-ras基因第2号外显子中第12及13位密码子的前两位碱基突变情况。结果常规测序法成功完成检测47例（77．0％），而MALDI-TOF-MS法成功检测所有61例标本。常规测序法检测样本总体突变率为30．0％（14／47），MALDI-TOF-MS法检测所有标本的总体突变率为36．1％（22／61）。6例样本常规测序法未检测到突变而质谱法检测到明确突变存在。14例样本经两种方法均检测出突变．且两种方法检测出的突变类型完全一致。2例样本未完成常规测序检测而通过质谱法检测出突变。结论相对常规测序而言，MALDI-TOF-MS法是一种对标本质量要求较低、更敏感的结直肠癌k-ras突变检测方法，有更好地临床价值。

关键词：结直肠肿瘤基因,k-ras 基因突变基质辅助激光解析电离时间飞行质谱

结直肠癌原发灶和对应肝转移灶k-ras基因突变的对比研究

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中华肿瘤防治杂志 2010年第12期17卷 926-929页

作者：冼海兵于洪波张积仁南方医科大学附属珠江医院肿瘤科广东广州510282 山东省肿瘤医院放疗科山东济南250117

目的:观察结直肠癌肝转移的原发灶和对应肝转移灶中k-ras基因的突变情况,比较两者的一致性。方法:从75例结直肠癌肝转移患者的原发灶和对应肝转移灶病理标本中提取肿瘤组织DNA,经聚合酶链反应(PCR)扩增k-ras基因,采用DNA直接测序法检测k... 详细信息

目的:观察结直肠癌肝转移的原发灶和对应肝转移灶中k-ras基因的突变情况,比较两者的一致性。方法:从75例结直肠癌肝转移患者的原发灶和对应肝转移灶病理标本中提取肿瘤组织DNA,经聚合酶链反应(PCR)扩增k-ras基因,采用DNA直接测序法检测k-ras基因的突变情况。结果:有3例因DNA提取质量较差出组。72例中,有24例(33.3%)结直肠癌原发组织中k-ras基因为突变型;23例(31.9%)肝转移灶癌组织中k-ras基因为突变型。24例原发灶k-ras基因为突变型者中,有21例(87.5%)对应的肝转移灶k-ras基因为突变型;46例两者均为野生型。原发灶及对应肝转移灶两者的一致率为93.1%。两者不一致的情况有5例(6.9%)。结论:结直肠癌肝转移的原发灶和对应肝转移灶中k-ras基因的突变情况较为一致,可作为选用分子靶向药物的依据。

关键词：结直肠肿瘤肝肿瘤/继发性基因,k-ras 突变

西妥昔单抗对非小细胞肺癌A549细胞的抗肿瘤效应及其机制探讨

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解放军医学杂志 2013年第9期38卷 738-742页

作者：李瑾昱张国庆焦顺昌温新宇孙胜杰解放军总医院肿瘤内科北京100853

目的探讨西妥昔单抗对k-ras突变的非小细胞肺癌A549细胞的体外生长抑制及凋亡诱导作用。方法采用CCk-8法及流式细胞仪分别检测西妥昔单抗对A549细胞的生长抑制作用及凋亡诱导情况;通过基因芯片检测技术比较西妥昔单抗作用组与对照组k-ra... 详细信息

目的探讨西妥昔单抗对k-ras突变的非小细胞肺癌A549细胞的体外生长抑制及凋亡诱导作用。方法采用CCk-8法及流式细胞仪分别检测西妥昔单抗对A549细胞的生长抑制作用及凋亡诱导情况;通过基因芯片检测技术比较西妥昔单抗作用组与对照组k-ras突变的A549细胞肿瘤相关基因表达的差异。结果西妥昔单抗对k-ras突变的A549细胞具有生长抑制及凋亡诱导作用。西妥昔单抗作用后,有10个基因表达显著上调,9个基因表达显著下调。Real-timePCR检测验证西妥昔单抗作用后STAT1基因及IGFBP3基因表达显著上调。结论西妥昔单抗对k-ras基因突变的肺腺癌A549细胞具有生长抑制及凋亡诱导作用,STAT1和IGFBP3基因表达上调可能与西妥昔单抗对非小细胞肺癌的作用机制相关。

关键词：西妥昔单抗基因,k-ras 寡核苷酸序列分析 STAT1转录因子胰岛素样生长因子结合蛋白质3

HER-2与k-ras在结直肠癌中的表达及意义

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解放军医学杂志 2007年第6期32卷 598-600页

作者：李陈婕羊志辉陈森林周世权莫晔施小六中南大学湘雅第二医院消化内科长沙410011 国防科技大学医院湖南省肿瘤医院病理科

目的检测HER-2和k-ras在结直肠癌中的表达情况,探讨两者在结直肠癌形成中的作用、相互关系以及用于预后评价的价值。方法运用免疫组织化学法检测12例正常结直肠黏膜组织、15例结直肠腺瘤、123例结直肠癌及25例淋巴结转移灶中HER-2和k-RA... 详细信息

目的检测HER-2和k-ras在结直肠癌中的表达情况,探讨两者在结直肠癌形成中的作用、相互关系以及用于预后评价的价值。方法运用免疫组织化学法检测12例正常结直肠黏膜组织、15例结直肠腺瘤、123例结直肠癌及25例淋巴结转移灶中HER-2和k-ras的表达情况。结果HER-2和k-ras的高表达率在结直肠癌分别为67.5%和51.2%,在结直肠腺瘤分别为80.0%和33.3%,而在正常结直肠黏膜组织则分别为33.3%和0。HER-2和k-ras在结直肠癌和结直肠腺瘤中的高表达率均显著高于正常结直肠黏膜组织(Pk-ras的联合高表达率为36.3%。胞膜HER-2高表达率为38.2%,与浸润深度相关。k-ras的高表达与临床病理指标无相关性。在淋巴结转移灶中,HER-2和k-ras的高表达呈正相关(r=0.458,Pk-ras的高表达与预后均无显著相关性(P>0.05)。结论HER-2和k-ras可能与结直肠癌的发生有关,在结直肠癌的发展过程中可能起协同作用。HER-2胞膜的高表达与结直肠癌的侵袭性有关。HER-2和k-ras的高表达与预后均无相关性。

关键词：肿瘤,结直肠基因,HER-2 基因,k-ras 免疫组织化学

甲基化特异性聚合酶链反应检测粪便ppENk基因甲基化对胰腺癌诊断的可行性

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中华消化杂志 2012年第7期32卷 466-468页

作者：卜淑蕊钱家鸣杨红北京协和医院消化科 100730

目的评价甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测粪便ppENk基因高甲基化用于诊断胰腺癌的可行性。方法收集胰腺癌患者24例和对照6例的新鲜粪便标本。采用MSP检测全部粪便标本中ppENk的甲基化状态；采用PCR检测全部粪便标本中野生型ppENk... 详细信息

目的评价甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测粪便ppENk基因高甲基化用于诊断胰腺癌的可行性。方法收集胰腺癌患者24例和对照6例的新鲜粪便标本。采用MSP检测全部粪便标本中ppENk的甲基化状态；采用PCR检测全部粪便标本中野生型ppENk的阳性率。采用PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）检测粪便k-ras的突变情况。将胰腺癌细胞PC3单细胞悬液加入同一健康者粪便标本，MSP法检测ppENk甲基化阳性，计算甲基化阳性时需掺人的胰腺癌细胞的最少数量。结果30份粪便标本的甲基化检出率为0（0／30），非甲基化检出率为10％（3／30），野生型ppENk检出率为6．7％（2／30）；PCR-RFLP可检测出所选10份野生型ppENk阴性的胰腺癌标本中的8份，其中7份有k-ras第12位密码子突变。MSP方法能够检测到粪便中ppENk甲基化条带所需胰腺癌细胞的数量至少为50个／ml。结论采用MSP方法检测胰腺癌患者粪便标本的ppENk基因甲基化状态，尚不能成为筛查和诊断胰腺癌的方法。

关键词：聚合酶链反应多态性,限制性片段长度 DNA甲基化粪便胰腺肿瘤脑啡肽类基因,k-ras 突变

PTEN和k-ras与子宫内膜癌关系的研究进展

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中华肿瘤防治杂志 2011年第15期18卷 1217-1220页

作者：邓开玉田小英怀化医学高等专科学校妇产科教研室湖南怀化418000

目的:总结近年来国内外关于PTEN、k-ras在子宫内膜癌中表达及相互关系的研究进展。方法:应用PubMed及CNkI全文数据库检索系统,以"子宫内膜癌、PTEN和k-ras"为关键词,检索1988-01-2011-06的相关文献,共检索到英文文献457篇,中文文献176... 详细信息

目的:总结近年来国内外关于PTEN、k-ras在子宫内膜癌中表达及相互关系的研究进展。方法:应用PubMed及CNkI全文数据库检索系统,以"子宫内膜癌、PTEN和k-ras"为关键词,检索1988-01-2011-06的相关文献,共检索到英文文献457篇,中文文献176篇。文献纳入标准:1)PTEN及k-ras的生物学特性及作用机制;2)PTEN、k-ras分别在子宫内膜癌中的表达;3)PTEN和k-ras在子宫内膜癌中的共同表达。根据纳入标准符合分析文献26篇。结果:在子宫内膜癌组织中存在PTEN的表达缺失,而且在子宫内膜癌中PTEN突变率(23.5%～55.0%)高。PTEN缺失或突变诱导了细胞持续增殖和恶性转化,促进肿瘤的形成。k-ras的突变往往发生于子宫内膜癌的早期,k-ras基因的表达与其组织学分级及临床分期有关,组织学分级越差、临床分期越晚,k-ras基因的阳性表达率越高。结论:PTEN和k-ras同属于子宫内膜癌的早期分子事件,在子宫内膜癌发生、发展过程中起着协同效应。

关键词：子宫内膜肿瘤基因,PTEN 基因,k-ras 综述文献

被动吸烟对大鼠肺泡上皮细胞结构及p53,k-ras表达的影响

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潍坊医学院学报 2007年第2期29卷 101-103,I0001页

作者：薄其付李若葆王金平李洪先潍坊医学院人体解剖学教研室山东潍坊261042

目的利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察吸烟各时间段Wistar大鼠肺泡结构及肺泡细胞超微结构的变化,分析吸烟对p53,k-ras在肺组织中表达的影响。方法建立大鼠烟雾吸入模型,常规石蜡切片HE染色,光镜观察肺泡结构等变化情况;以半薄切片为指... 详细信息

目的利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察吸烟各时间段Wistar大鼠肺泡结构及肺泡细胞超微结构的变化,分析吸烟对p53,k-ras在肺组织中表达的影响。方法建立大鼠烟雾吸入模型,常规石蜡切片HE染色,光镜观察肺泡结构等变化情况;以半薄切片为指导进行超薄切片、醋酸双铀染色、透射电镜观察肺泡上皮细胞内超微结构的变化情况;免疫组织化学SP法检测吸烟各个设定时期p53,k-ras蛋白的表达情况。所得数据采用SAS软件作统计学处理分析,比较各组间差异程度。结果吸烟可以导致肺泡破裂、肺泡融合、肺大泡、肺实变等一系列肺组织的损害,还可导致线粒体嵴消失、嗜锇性板层小体空泡样变、粗面内质网脱颗粒、高尔基复合体增大等超微结构改变,并随吸烟时间的延长越加严重。p53,k-ras蛋白表达阳性率随吸烟时间的延长而升高(Pk-ras蛋白与吸烟相关性肺癌的发生密切相关。

关键词：蛋白质,p53 基因,k-ras 肺肿瘤免疫组织化学