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猪塞内卡谷病毒和圆环病毒2型嵌合病毒样颗粒疫苗的制备与抗体检测

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中国兽医杂志 2021年第8期57卷 27-31,37页

作者：何至远吴冬荀张贺楠王飞吴珊珊刘昕泽肖进中牧实业股份有限公司北京丰台100070 中国农业大学动物科学技术学院北京海淀100193

为了防控猪场塞内卡谷病毒(SVV)和圆环病毒2型(PCV2)的混合感染,本试验建立了一种猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗的制备方法并进行抗体检测。试验将猪SVV P 1基因部分VP 3序列替换为PCV2 ORF 2基因C端部分多肽序列,利用杆状病毒表达系... 详细信息

为了防控猪场塞内卡谷病毒(SVV)和圆环病毒2型(PCV2)的混合感染,本试验建立了一种猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗的制备方法并进行抗体检测。试验将猪SVV P 1基因部分VP 3序列替换为PCV2 ORF 2基因C端部分多肽序列,利用杆状病毒表达系统获得表达猪SVV、PCV2嵌合重组蛋白的重组杆状病毒,将病毒培养物纯化,经蛋白检测及电镜观察确定成功构建猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒(大小约30 nm)。结果表明,制备的猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗可使试验猪同时产生针对猪SVV和PCV2的特异性抗体,充分显示出其作为一种针对猪场SVV和PCV2合并感染的安全有效疫苗的前景。

关键词：猪塞内卡谷病毒圆环病毒2型嵌合病毒样颗粒疫苗杆状病毒表达系统

猪伪狂犬病、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合症、圆环病毒2型的相关性研究

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华南农业大学学报 2009年第2期30卷 94-96页

作者：黄庭汝孙彦伟宋长绪陈平洁广东省农业科学院畜牧研究所广东广州510640 广东省动物防疫监督总所广东广州510230 广东省农业科学院兽医研究所广东广州510640

2003—2004年对广东省猪伪狂犬病(PR)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)、圆环病毒2型(PCV2)病原或野毒抗体调查发现,当前猪场这4种病的混合感染严重.对PR、PCV2、PRRS、CSF的动态流行情况进行相关性分析,结果表明:PR与PCV2之间存... 详细信息

2003—2004年对广东省猪伪狂犬病(PR)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)、圆环病毒2型(PCV2)病原或野毒抗体调查发现,当前猪场这4种病的混合感染严重.对PR、PCV2、PRRS、CSF的动态流行情况进行相关性分析,结果表明:PR与PCV2之间存在较强的正相关性(P=0.012),相关系数为0.648,互谱图显示,PR与PCV2之间存在同时发生的关系.PCV2与CSF存在较弱的相关性,它们的互谱图表现为:PCV2的流行会微弱影响着未来7个月(负相关)、4个月(正相关)时CSF的流行情况,但这种影响是不显著的(P>0.05).

关键词：猪伪狂犬病猪瘟猪繁殖与呼吸综合症圆环病毒2型相关性分析互谱分析

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猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及应用

中国动物检疫 2006年第11期23卷 33-34页

作者：谢俊良杨增岐赵华田小艳西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

根据Genbank中PCV2全基因组序列设计了扩增片段大小为262bp的引物P1/P2,建立了检测猪圆环病毒2型PCR方法。引物对P1/P2从PCV2阳性病毒感染基因组中扩增出特异性条带的最低DNA含量为10-9ng/mL(约100个PCV2病毒)。用该方法对陕西和甘肃的... 详细信息

根据Genbank中PCV2全基因组序列设计了扩增片段大小为262bp的引物P1/P2,建立了检测猪圆环病毒2型PCR方法。引物对P1/P2从PCV2阳性病毒感染基因组中扩增出特异性条带的最低DNA含量为10-9ng/mL(约100个PCV2病毒)。用该方法对陕西和甘肃的103份临床发病猪的肺脏和淋巴结样品进行检测,结果有68份样品检测出阳性,阳性率为66%。

关键词：圆环病毒2型 PCR 建立应用

规模化猪场猪瘟猪伪狂犬病猪圆环病毒2型感染的血清学调查

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中国兽医杂志 2004年第7期40卷 18-19页

作者：刘道新谈志祥邱立新邱伯根鲁杏华任凤梅邓国强湖南省兽医总站湖南长沙410007

近年来,笔者对全省范围内193个规模化猪场进行了血清学调查,现将猪瘟(HC)、猪伪狂犬病(PR)和猪圆环病毒2型(PCV2)感染情况报道如下.

关键词：猪瘟伪狂犬病圆环病毒2型血清学鉴别诊断

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猪圆环病毒2型的分离与鉴定

中国兽医杂志 2004年第2期40卷 14-18页

作者：吕艳丽杨汉春郭鑫陈艳红查振林中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室北京海淀100094

利用 PCR方法 ,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征 (PMWS)的自然病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的猪圆环病毒 2型 (Porcine Circovirus type 2 ,PCV 2 )的 DNA片段 ,并用限制性内切酶对 PCR产物进行了酶切鉴定。将经 PCR扩增和酶切... 详细信息

利用 PCR方法 ,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征 (PMWS)的自然病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的猪圆环病毒 2型 (Porcine Circovirus type 2 ,PCV 2 )的 DNA片段 ,并用限制性内切酶对 PCR产物进行了酶切鉴定。将经 PCR扩增和酶切鉴定为 PCV2阳性的组织样品匀浆液接种到无 PCV污染的 PK15细胞中传代 ,经间接免疫荧光检查 ,在接毒细胞内观察到了特异性免疫荧光 ;用接毒细胞制备超薄切片 ,在电镜下观察到了直径大约为 17nm的圆形病毒样粒子和大量不同形态的胞浆内包涵体。由此表明分离出的病毒为猪圆环病毒 2型。

关键词：猪圆环病毒2型分离鉴定多系统衰竭综合征淋巴结脾脏

猪圆环病毒2型ORF2重组蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国兽医学报 2011年第2期31卷 165-168页

作者：敬晓棋吴发兴元永平陈德坤西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 榆林学院生命科学研究中心陕西榆林719000 中国动物卫生与流行病学中心动物流行病学监测室山东青岛266032

为制备圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)ORF2重组蛋白单抗,以纯化复性的ORF2重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经ELISA筛选出了3株分泌PCV2ORF2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名... 详细信息

为制备圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)ORF2重组蛋白单抗,以纯化复性的ORF2重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经ELISA筛选出了3株分泌PCV2ORF2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7。3株细胞的培养上清中抗体效价分别为1∶3 125、1∶3 125、1∶15 625,小鼠腹水效价分别为1∶390 000、1∶390 000、1∶1 950 000;Western blot显示,3株单克隆抗体均能与PCV2 ORF2重组发生特异性反应;辣根过氧化酶偶联4G8F7制成的酶标单抗,测定结果显示其最佳工作浓度为1∶2 000。结果表明本研究利用体外重组表达PCV2 ORF2融合蛋白制成的杂交瘤能够稳定分泌效价高、特异性强的单克隆抗体。

关键词：圆环病毒2型 ORF2 重组蛋白单克隆抗体

猪圆环病毒2型CC株ORF3基因序列分析及真核表达

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中国兽医杂志 2012年第5期48卷 29-32页

作者：黄文明徐廷川张亮权张得玉张民泽张桂红华南农业大学兽医学院广东广州510642

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)的核酸序列,设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中扩增出了ORF3基因,将其克隆到高效真核表达载体pEGFP-N2中,筛选出含有ORF3基因的重组质粒,命名为pEGFP-N2... 详细信息

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)的核酸序列,设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中扩增出了ORF3基因,将其克隆到高效真核表达载体pEGFP-N2中,筛选出含有ORF3基因的重组质粒,命名为pEGFP-N2-ORF3。对此重组质粒进行测序分析,结果表明,克隆的ORF3基因与其他PCV2的ORF3核苷酸序列相似性为96.2%-99.0%,氨基酸序列同源性为90.5%～98.1%。将重组质粒纯化后转染COS-7细胞,用PCR方法扩增出了特征性的基因片段,并采用特异性单抗进行间接免疫荧光,结果转染pEGFP-N2-ORF3重组蛋白在细胞核和细胞浆中均有表达,尤其在细胞核中表达量较高,且对细胞有一定的毒性。本研究为进一步探讨ORF3的结构和功能提供理论依据。

关键词：圆环病毒2型 ORF3 序列分析真核表达

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猪圆环病毒2型和猪链球菌混合感染的诊治

中国畜牧兽医 2009年第12期36卷 132-134页

作者：吴玉臣郭爽阴正兴唐光武刘光辉郑州牧业工程高等专科学校郑州450011 河南农业大学郑州450002 河南省动物疫病预防控制中心郑州450008

2009年6月,河南省许昌某猪场出现猪圆环病毒2型和猪链球菌混合感染的疑似病例,临床主要表现为体温升高、呼吸困难、体表瘀血等症状;剖检变化为淋巴结水肿、脑膜炎和关节炎、急性炎性脾肿等。笔者通过对其临床症状、剖检变化和实验室检... 详细信息

2009年6月,河南省许昌某猪场出现猪圆环病毒2型和猪链球菌混合感染的疑似病例,临床主要表现为体温升高、呼吸困难、体表瘀血等症状;剖检变化为淋巴结水肿、脑膜炎和关节炎、急性炎性脾肿等。笔者通过对其临床症状、剖检变化和实验室检测结果进行综合分析,确诊为猪圆环病毒2型和猪链球菌的混合感染。笔者对防制措施也进行了初步阐述,希望为今后该类疾病感染的诊断与治疗提供借鉴。

关键词：猪圆环病毒2型链球菌混合感染

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猪圆环病毒2型的血清流行病学调查

中国畜牧兽医 2010年第1期37卷 182-183页

作者：李龙张奎重庆武隆县畜牧局重庆408500 四川自贡市大安区畜牧局自贡643010

从重庆武隆县猪场及农村散养户采集猪血清286份,用ELISA检测试剂盒对PCV-2抗体进行了检测,结果发现,PCV-2抗体阳性率为79.0%,其中断奶仔猪、育肥猪、经产母猪、种公猪的抗体阳性率分别为76.6%、74.2%、86.2%、82.1%,表明在重庆武隆地区P... 详细信息

从重庆武隆县猪场及农村散养户采集猪血清286份,用ELISA检测试剂盒对PCV-2抗体进行了检测,结果发现,PCV-2抗体阳性率为79.0%,其中断奶仔猪、育肥猪、经产母猪、种公猪的抗体阳性率分别为76.6%、74.2%、86.2%、82.1%,表明在重庆武隆地区PCV-2感染已普遍存在。

关键词：猪圆环病毒2型流行病学调查酶联免疫吸附试验