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新型手性双核Salen锰(III)配合物对咪唑、吡啶类客体的分子识别研究

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化学学报 2003年第12期61卷 1969-1975页

作者：胡国航阮文娟高峰朱志昂南开大学化学系天津300071

合成并表征了新型手性双核Salen配体 1及其锰 (III)配合物 2 (主体 2 ) .用紫外 -可见光谱滴定法研究了主体 2与四种咪唑类、四种吡啶类客体在CHCl3 中的分子识别行为 .实验结果表明 :对咪唑类客体的缔合常数按K (Im) >K (2 MeIm) >K (... 详细信息

合成并表征了新型手性双核Salen配体 1及其锰 (III)配合物 2 (主体 2 ) .用紫外 -可见光谱滴定法研究了主体 2与四种咪唑类、四种吡啶类客体在CHCl3 中的分子识别行为 .实验结果表明 :对咪唑类客体的缔合常数按K (Im) >K (2 MeIm) >K (N MeIm) >K (EtMeIm)顺序递减 ;吡啶类顺序为K (PyO) >K (4 PhPyO) >K (DMAP) >K (Py) ,配位数n值均为 2 .测定了识别过程的ΔrH m ,ΔrS m ,发现此类反应为放热、熵减小的过程 ,反应体系中存在焓熵补偿关系 .与单核的Salen锰 (III)配合物 3 (主体 3 )进行比较 ,除EtMeIm与 3的配位数为 1外 ,其他咪唑类客体的配位数均为 2 .就与客体的缔合能力而言 ,主体 2比 3大 .用圆二色光谱 (CD)研究了主 -客体的分子识别行为 .

关键词：手性双核锰(Ⅲ)配合物催化剂咪唑吡啶分子识别圆二色光谱

4-硫-5-碘尿苷的合成及其与人血清白蛋白间的相互作用

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发光学报 2013年第3期34卷 361-368页

作者：王健郑学仿曹洪玉张晓辉大连大学环境与化学工程学院辽宁大连116622 辽宁省生物有机化学重点实验室辽宁大连116622

基于硫碱基(thio-base)的易烷基化、易氧化、强紫外长波(UVA)吸收等独特的性质,以及核苷类化合物的抗肿瘤活性,设计合成了一种新化合物4-硫-5-碘尿苷,通过NMR、IR、UV、MS对其结构进行了表征。在模拟生理条件下,利用荧光光谱法、紫外-... 详细信息

基于硫碱基(thio-base)的易烷基化、易氧化、强紫外长波(UVA)吸收等独特的性质,以及核苷类化合物的抗肿瘤活性,设计合成了一种新化合物4-硫-5-碘尿苷,通过NMR、IR、UV、MS对其结构进行了表征。在模拟生理条件下,利用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法以及圆二色谱法研究了4-硫-5-碘尿苷与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明,4-硫-5-碘尿苷对HSA荧光具有静态猝灭作用。运用Stern-Volmer方程计算了体系的猝灭常数,利用Lineweaver-Burk方程计算了二者的结合常数,并且确定了4-硫-5-碘尿苷与HSA之间的主要作用力类型为疏水作用力,根据能量转移理论求得4-硫-5-碘尿苷与HSA的结合距离及能量转移率。此外,通过圆二色谱法考察了4-硫-5-碘尿苷对HSA作用前后的构型结构的影响。

关键词： 4-硫-5-碘尿苷人血清白蛋白核苷荧光光谱圆二色光谱

4-硫胸苷的合成及其与人血清白蛋白的相互作用

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发光学报 2013年第1期34卷 104-110页

作者：银鸿雁郑学仿曹洪玉张晓辉大连大学环境与化学工程学院辽宁大连116622 大连大学辽宁省生物有机化学重点实验室辽宁大连116622

基于含硫核苷类化合物的光敏性和核苷类化合物对肿瘤细胞有特殊的亲和力以及核苷类化合物的抗肿瘤活性,设计合成了4-硫胸苷,并通过NMR、UV、MS对其结构进行了表征。利用荧光光谱考察了4-硫胸苷与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。实验结果... 详细信息

基于含硫核苷类化合物的光敏性和核苷类化合物对肿瘤细胞有特殊的亲和力以及核苷类化合物的抗肿瘤活性,设计合成了4-硫胸苷,并通过NMR、UV、MS对其结构进行了表征。利用荧光光谱考察了4-硫胸苷与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。实验结果表明:4-硫胸苷对人血清白蛋白(HSA)体系的猝灭是由于他们相互作用形成复合物而导致的静态猝灭。通过计算得出其结合常数分别为3.46×104,3.91×104,4.31×104L·mol-1,并测定了不同温度下的热力学参数。结果表明,4-硫胸苷与人血清白蛋白之间的主要作用力类型为疏水作用力。另外,通过圆二色光谱考察了4-硫胸苷对人血清白蛋白二级结构的影响,结果表明,4-硫胸苷对人血清白蛋白的二级结构基本没有影响。

关键词： 4-硫胸苷人血清白蛋白核苷荧光光谱圆二色光谱

大黄酸铜(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白的相互作用

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高等学校化学学报 2011年第6期32卷 1277-1283页

作者：赵芳梁慧程惠王军赵文慧石河子大学化学化工学院新疆兵团化工绿色过程重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地石河子832003 新疆医科大学药学院乌鲁木齐830054

采用荧光光谱法、紫外光谱法和圆二色光谱法并结合电化学方法,研究了大黄酸铜配合物与牛血清白蛋白之间的相互作用.结果表明,大黄酸铜配合物能显著猝灭牛血清白蛋白的内源荧光并以静态猝灭为主;计算了298和309 K温度下的结合常数和结合... 详细信息

采用荧光光谱法、紫外光谱法和圆二色光谱法并结合电化学方法,研究了大黄酸铜配合物与牛血清白蛋白之间的相互作用.结果表明,大黄酸铜配合物能显著猝灭牛血清白蛋白的内源荧光并以静态猝灭为主;计算了298和309 K温度下的结合常数和结合位点,热力学参数和大黄酸铜配合物的电化学行为说明大黄酸铜配合物与牛血清白蛋白之间具有较强的疏水作用力;依据F rster的偶极-偶极非辐射能量转移理论,计算出大黄酸铜在蛋白质中的结合位置与色氨酸残基间的距离为3.21 nm,表明大黄酸铜的部分片段能够插入蛋白质分子内部;探讨了大黄酸铜配合物对牛血清白蛋白构象的影响.

关键词：大黄酸铜牛血清白蛋白荧光光谱紫外光谱圆二色光谱

热诱导潜在食物中毒威胁源重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素去折叠及聚合过程

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食品科学 2021年第21期42卷 32-45页

作者：刘骥田万帆唐俊妮陈娟赵燕英于基成西南民族大学食品科学与技术学院四川成都610041 西南民族大学畜牧兽医学院四川成都610041 大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室辽宁大连116600

热失活工艺是降低加工食品中潜在的细菌和毒素含量的有效手段。M型金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxins M,SEM)归属于V型超抗原,具有较弱的催吐活性,是一种潜在的金黄色葡萄球菌所致食物中毒威胁源。本研究利用圆二色光... 详细信息

热失活工艺是降低加工食品中潜在的细菌和毒素含量的有效手段。M型金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxins M,SEM)归属于V型超抗原,具有较弱的催吐活性,是一种潜在的金黄色葡萄球菌所致食物中毒威胁源。本研究利用圆二色光谱、荧光光谱、变性/活性聚丙烯酰胺凝胶电泳监测重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素(recombinant staphylococcal enterotoxin M,rSEM)热诱导变性过程。结果表明,在低于40℃时,rSEM具有富含α-螺旋(17%)、β-折叠(32%)、转角(21%)的天然折叠态结构,分子表面唯一的121号色氨酸残基位于β-掌型结构域中相对疏水的环境中。随着温度从42℃升高到55℃,rSEM二级结构中减少的α-螺旋含量被增加的β-折叠/转角含量所弥补,蛋白质分子之间聚集状态未发生明显改变,最大荧光发射波长明显蓝移,同时350 nm和340 nm波长处的荧光强度比表现出反S型曲线,说明42~55℃温和加热可导致另一种形式的rSEM折叠中间态(intermediate state,IS)形成。在55~90℃温度范围内,rSEM二级结构基本维持稳定。与此同时,当加热温度从65℃升高至80℃时,350 nm与340 nm波长处的荧光发射强度比并未显示出蛋白处于完全变性状态,说明在加热过程中rSEM二级结构基本维持稳定,而三级结构具有较大动态变化的可能性,这可能与β-掌型结构域可以通过诱导契合结合具有不同构象的主要组织性相容复合体等位基因产物有关系。此外,在70℃乃至更高的温度,rSEM的聚集程度明显增加并且在90℃时达到最大。综上,rSEM中间态形成、聚合体产生以及稳定的β-折叠/转角结构是该蛋白在高温下依然保持热稳定性的基础。通过对rSEM热诱导去折叠过程的研究有助于阐明rSEM耐热机理,未来利用该方法对其他各类金葡菌肠毒素热失活机制进行类似研究将利于食品安全性生产工艺过程的改善。

关键词： M型金黄色葡萄球菌肠毒素圆二色光谱荧光光谱变性/活性聚丙烯酰胺凝胶电泳热失活

铜在铜蛋白azurin分子构象及其促口腔肿瘤细胞凋亡中的作用

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高技术通讯 2007年第2期17卷 185-190页

作者：王云虹柏小丽钟金王正平张洪杰高锦中国科学院生物物理研究所分子生物学中心北京100101 哈尔滨工程大学化工学院哈尔滨150001

为了解铜对铜蓝蛋白azurin的构象和细胞毒性的影响，用重组表达的azurin作为研究材料，对结合铜的holo—azurin和除去铜的ado—azurin采用紫外、荧光和圆二色光谱进行了对比研究，其特征性变化为：去除铜离子后，该蛋白的紫外吸收光谱在... 详细信息

为了解铜对铜蓝蛋白azurin的构象和细胞毒性的影响，用重组表达的azurin作为研究材料，对结合铜的holo—azurin和除去铜的ado—azurin采用紫外、荧光和圆二色光谱进行了对比研究，其特征性变化为：去除铜离子后，该蛋白的紫外吸收光谱在628nm的吸收峰消失，圆二色光谱出现轻微改变。采用两株p53呈阳性表达的中国人口腔癌细胞株Acc2和Acc3为研究对象，经四唑盐（MTT）比色法和流式细胞仪分析发现，azurin具有抑制上述肿瘤细胞株的生长，并促进肿瘤细胞凋亡的作用，而脱铜后的apo—azurin抗肿瘤活性降低。

关键词：铜 azurin apo—azurin 紫外光谱荧光光谱圆二色光谱细胞凋亡

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铜离子与SALI3-2蛋白的相互作用

高等学校化学学报 2013年第1期34卷 128-134页

作者：唐玉林高占徐宏贺建芝董一含郑易之深圳市微生物基因工程重点实验室深圳大学生命科学学院深圳518060 深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室

用1/2 MS固体培养基培养拟南芥幼苗,研究了CuCl2对转Sali3-2基因植株生长的影响,发现转基因植株Sali3-2的表达可提高其耐受Cu2+胁迫的能力.进一步克隆Sali3-2基因,表达并纯化了缺失信号肽的SALI3-2蛋白.利用固定金属离子亲和色谱(IMAC)... 详细信息

用1/2 MS固体培养基培养拟南芥幼苗,研究了CuCl2对转Sali3-2基因植株生长的影响,发现转基因植株Sali3-2的表达可提高其耐受Cu2+胁迫的能力.进一步克隆Sali3-2基因,表达并纯化了缺失信号肽的SALI3-2蛋白.利用固定金属离子亲和色谱(IMAC)分析发现,Cu2+能够与SALI3-2蛋白结合.通过荧光光谱及圆二色光谱(CD)进一步研究了Cu2+与SALI3-2蛋白间的键合机理.结果表明,Cu2+可引起SALI3-2蛋白内源性荧光猝灭,其猝灭机制为静态猝灭;Cu2+与SALI3-2蛋白的结合常数为8.89×106,结合位点数为***分析显示,Cu2+与SALI3-2蛋白的结合未使SALI3-2蛋白二级结构发生明显改变.由此推测,在高浓度铜离子胁迫下,SALI3-2蛋白通过结合一定数量的Cu2+使蛋白的构象发生改变,这可能是SALI3-2蛋白的表达使植物耐受Cu2+胁迫能力提高的分子机制之一.

关键词：铜离子 SALI3-2蛋白金属离子亲和层析荧光光谱圆二色光谱

Rugulosin对N-Hsp90的抑制与结合作用

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高等学校化学学报 2011年第1期32卷 88-94页

作者：陈俊杰易玉婷于淼薛少龙熊茜茜贺晓萌张连茹厦门大学生命科学学院厦门361005

研究表明,来源于真菌的Rugulosin对热休克蛋白90(Hsp90)的三磷酸腺苷酶(ATPase)活性有较强的抑制作用.本文通过Western Blot实验发现,Rugulosin对Hsp90的客户蛋白Akt和Raf-1具有一定的降解作用.进一步应用荧光、ForteBio Octet、圆二色... 详细信息

研究表明,来源于真菌的Rugulosin对热休克蛋白90(Hsp90)的三磷酸腺苷酶(ATPase)活性有较强的抑制作用.本文通过Western Blot实验发现,Rugulosin对Hsp90的客户蛋白Akt和Raf-1具有一定的降解作用.进一步应用荧光、ForteBio Octet、圆二色和紫外-可见吸收等波谱法研究Rugulosin与Hsp90 N端的ATP结合结构域(N-Hsp90)的相互作用机制发现,Rugulosin与N-Hsp90之间存在较强的相互作用,二者通过氢键等作用力形成静态复合物,二者间的距离约为3.4 nm.其解离常数KD由荧光实验和ForteBio Octet实验计算,分别为22.4和85.9μmol/L;Rugulosin使N-Hsp90的α-螺旋含量由15.0%降至11.6%;紫外-可见吸收光谱实验结果同样表明,Rugulosin使N-Hsp90的二级结构发生了改变.该研究对于Rugulosin的进一步开发以及将其作为分子探针进行与Hsp90相关的信号通路的研究具有重要的意义.

关键词： Rugulosin Hsp90 荧光光谱圆二色光谱表面等离子体共振

新型Salen型配合物的合成和表征及轴向配位热力学

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物理化学学报 2010年第5期26卷 1195-1201页

作者：郭莉芹史秀丽阮文娟张晓红朱志昂南开大学化学学院天津300071

采用金属模板法合成了四个新型Salen型单、双核金属配合物,并用元素分析、核磁共振(1HNMR)、电喷雾质谱(ESI-MS)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)等手段进行了表征.使用紫外-可见(UV-Vis)光谱滴定法和圆二色(CD)光谱研究了主体金属镍配合物... 详细信息

采用金属模板法合成了四个新型Salen型单、双核金属配合物,并用元素分析、核磁共振(1HNMR)、电喷雾质谱(ESI-MS)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)等手段进行了表征.使用紫外-可见(UV-Vis)光谱滴定法和圆二色(CD)光谱研究了主体金属镍配合物与咪唑类含氮小分子的轴向配位反应热力学性质.结果表明:主体与咪唑(Im)和N-甲基咪唑(N-MeIm)的配位数是2,而与2-Et-4-MeIm和2-MeIm的配位数是1;轴配体系的热力学数据显示主体与咪唑类配体的平衡常数按K苓(Im)>K苓(N-MeIm)>K苓(2-Et-4-MeIm)>K苓(2-MeIm)顺序依次减小;测得的△rHm苓和△rSm苓数据表明该轴向配位反应为放热、熵增加过程.

关键词：金属模板法新型Salen型配合物合成表征轴向配位热力学圆二色光谱