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圆二色光谱研究Ni^(2+)诱导血清白蛋白构象变化

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广西师范大学学报（自然科学版） 2008年第3期26卷 57-60页

作者：郑婷王卓渊侯若冰沈星灿广西师范大学化学化工学院广西桂林541004

在生理条件(pH7.43)下,采用时间扫描圆二色光谱(CD)研究了Ni2+诱导人血清白蛋白(HSA)或牛血清白蛋白(BSA)产生的构象变化。拟合计算远紫外CD光谱,结果表明,血清白蛋白在结合Ni2+过程中产生了鲜见的N→R态和R→T态两步构象变化。在结合... 详细信息

在生理条件(pH7.43)下,采用时间扫描圆二色光谱(CD)研究了Ni2+诱导人血清白蛋白(HSA)或牛血清白蛋白(BSA)产生的构象变化。拟合计算远紫外CD光谱,结果表明,血清白蛋白在结合Ni2+过程中产生了鲜见的N→R态和R→T态两步构象变化。在结合的最初几分钟,血清白蛋白中的部分α-螺旋结构分别转变为了β-折叠、β-转角和无规卷曲,其含量从66%(N态)降低到约64%(R态)。随后发生了相反的变化,达到结合平衡时,α-螺旋结构含量上升到68.7%(T态)。近紫外CD光谱结果表明,血清白蛋白在结合Ni2+的过程中,二硫键及芳香氨基酸残基附近的微环境发生了缓慢扰动。CD光谱观察到该构象变化持续约3 h才达到平衡。对Ni2+诱导血清白蛋白产生两步构象变化的生理意义做了讨论,推测该构象变化能暴露结合位点,提供合适的立体配位空间,有助于血清白蛋白结合Ni2+。

关键词：构象变化血清白蛋白圆二色光谱 Ni^2+

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圆二色光谱及其在药物研究方面的应用

光谱实验室 2007年第5期24卷 877-885页

作者：于海英程秀民王晓坤山东大学药学院分析测试中心

对圆二色光谱技术在手性化合物分析中的应用进展进行综述,简单介绍了圆二色光谱的原理和特点,着重阐述了圆二色光谱在药物研究领域中的应用,初步探讨了HPLC-CD联用在该领域的应用。

关键词：圆二色光谱药物研究应用

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圆二色光谱预测蛋白质二级结构组成方法评析

圆二色光谱预测蛋白质二级结构组成方法评析

作者：林凯蕾复旦大学

学位级别：硕士

由于蛋白质承载了生命体的各种信息和功能,所有的生命活动都离不开蛋白质以及它们之间的相互作用的参与,同时药物研究也越来越倾向于在分子水平研究药物与蛋白质之间的相互作用。在这个大背景下,蛋白质构象的研究工作变得越来越重要。... 详细信息

由于蛋白质承载了生命体的各种信息和功能,所有的生命活动都离不开蛋白质以及它们之间的相互作用的参与,同时药物研究也越来越倾向于在分子水平研究药物与蛋白质之间的相互作用。在这个大背景下,蛋白质构象的研究工作变得越来越重要。圆二色性的存在使通过具有光学活性物质的圆偏振光变为椭圆偏振光,且在特定吸收波长处出现。遵循这一原理设计的CD光谱仪可以测定光学活性物质的CD光谱,通过CD谱图可以进一步研究该光学活性物质的立体构型。蛋白质的肽键在检测波长为190～250nm之间的区间内有圆二色性,蛋白的CD光谱图可以反映蛋白质二级结构的变化。由于蛋白的CD光谱具有对蛋白样品性状要求较低、实验速度较快、重复性好等优点,使CD光谱法成了人们研究蛋白质构象的常用方法。随着X射线衍射等技术的进步,蛋白数据库(Protein Data Bank)中蛋白结构数据越来越丰富,通过比较发现CD光谱在估算蛋白质二级结构组成中存在较大误差,因此对该方法的质疑越来越强烈。误差产生的原因可能是取得蛋白质CD光谱时的化学环境、仪器条件等影响,也可能是计算拟合方法使用不当,被测蛋白与参考蛋白类型未一致等因素。这些可能的原因使用CD光谱预测蛋白质二级结构组成方法产生较大的误差。为了系统评价CD光谱估算蛋白质二级结构方法的可信度,本研究选用了蛋白数据库中已有结构数据的七种蛋白：血红蛋白、溶菌酶、肌红蛋白、胰蛋白酶等,进行了两方面研究,一是改变实验条件收集CD谱,以系统确定CD光谱的收集条件;二是收集了所研究蛋白的红外光谱,并将CD光谱多种计算方法算得的二级结构数据、红外光谱估算的二级结构数据及蛋白数据库中的二级结构数据进行了比对,并由此评析了CD光谱计算蛋白质二级结构的方法学。本研究得到以下几个结论：一、CD光谱的合适收集条件是：稳定的室温条件;适当的浓度范围;紫外区透过性佳的缓冲溶液;低盐浓度;适当的测定参数。二、在计算蛋白质二级结构时,CD光谱的平均误差为50%以上,红外光谱的误差平均为10%,红外光谱方法要大大好于CD光谱方法。三、CD方法测定蛋白质二级结构局限性较大,用CD光谱方法计算蛋白质的二级结构只有在某些特定条件下方可实施,如α-螺旋为主的蛋白,溶液体系中干扰物质要少等。实验发现,用CD光谱直接用于预测蛋白质二级结构组成的结果误差太大,圆二色光谱法是一种被广泛错误的应用于蛋白质二级结构组成预测的实验方法。

关键词：圆二色光谱傅里叶红外光谱蛋白质二级结构

变性剂和缓冲系统对适冷蛋白酶MCP-01和中温蛋白酶BP-01构象影响的圆二色光谱分析

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山东大学学报（理学版） 2013年第1期48卷 23-29,42页

作者：何海伦陈秀兰山东大学微生物技术国家重点实验室山东济南250100

运用圆二色(CD)光谱分析了适冷蛋白酶MCP-01和中温蛋白酶BP-01的二级结构。与BP-01相比,MCP-01具有较低的α螺旋含量和较高的无规则卷曲,表明适冷蛋白酶MCP-01的结构可能具有较高的柔性和较低的稳定性。测定MCP-01和BP-01的变性温度表明... 详细信息

运用圆二色(CD)光谱分析了适冷蛋白酶MCP-01和中温蛋白酶BP-01的二级结构。与BP-01相比,MCP-01具有较低的α螺旋含量和较高的无规则卷曲,表明适冷蛋白酶MCP-01的结构可能具有较高的柔性和较低的稳定性。测定MCP-01和BP-01的变性温度表明,MCP-01的变性温度比BP-01低10.7℃。测定了变性剂盐酸胍(GuHCl)、2,2,2-三氟乙醇(TFE)对MCP-01和BP-01结构的影响。盐酸胍使MCP-01和BP-01变构的浓度分别为1.0 mol/L和3.0 mol/L,TFE造成MCP-01和BP-01开始变构的含量分别为20%和30%。这表明,与中温酶相比,变性剂在较低浓度下就可使适冷酶变构,从而造成活性的丧失。检测了两种蛋白酶在保温过程中构象的变化情况。不同缓冲系统明显影响MCP-01的构象稳定性,MCP-01在不同缓冲液中构象稳定性为:碳酸缓冲液

关键词：适冷蛋白酶中温蛋白酶圆二色光谱构象

基于手性金纳米粒子圆二色光谱法识别与检测银离子

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厦门大学学报（自然科学版） 2016年第4期55卷 601-605页

作者：韦克毅王猛杜宇蔡波江云宝云南中烟工业有限责任公司技术中心云南昆明650231 厦门大学化学化工学院福建厦门361005

采用液相制备方法获得具有光学活性的手性金纳米粒子,通过吸收光谱和圆二色光谱及高分辨透射电镜对手性金纳米粒子进行表征.利用圆二色光谱法建立手性金纳米粒子对Ag^+选择性识别方法,结果表明手性金纳米粒子对Ag^+响应时间仅需12min,... 详细信息

采用液相制备方法获得具有光学活性的手性金纳米粒子,通过吸收光谱和圆二色光谱及高分辨透射电镜对手性金纳米粒子进行表征.利用圆二色光谱法建立手性金纳米粒子对Ag^+选择性识别方法,结果表明手性金纳米粒子对Ag^+响应时间仅需12min,手性金纳米粒子能够从13种常见金属离子中选择性识别Ag^+,并对多种常见金属离子具有较好的抗干扰能力,检测灵敏度高并且具有良好的重现性.所建立标准曲线线性范围为0.2~30μmol/L,线性相关系数R^2=0.995(n=15),Ag+的检测限为0.2μmol/L;为环境水样中Ag^+的识别和检测提供了一种简单、精确、快速、环境友好的新方法.

关键词：手性金纳米粒子圆二色光谱识别检测 Ag+

应用圆二色光谱研究电场对α-淀粉酶二级结构的影响

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分析测试学报 2006年第4期25卷 24-26,31页

作者：姚占全敖敦格日勒许强杨体强内蒙古大学理工学院

α-淀粉酶被不同强度的电场作用,用圆二色光谱(CD)研究不同强度的电场对α-淀粉酶二级结构的影响。结果表明:不同强度的电场对α-淀粉酶的α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规卷曲相对含量的影响程度不同;电场作用具有使α-淀粉酶的二级结... 详细信息

α-淀粉酶被不同强度的电场作用,用圆二色光谱(CD)研究不同强度的电场对α-淀粉酶二级结构的影响。结果表明:不同强度的电场对α-淀粉酶的α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规卷曲相对含量的影响程度不同;电场作用具有使α-淀粉酶的二级结构由α-螺旋、无规卷曲向β-折叠及β-转角转化的趋势。研究结果对解释电场处理种子生物效应具有重要意义。

关键词：电场 α-淀粉酶圆二色光谱二级结构

聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯嵌段共聚物的圆二色光谱分析

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分析试验室 2006年第8期25卷 112-115页

作者：王琴梅滕伟张静夏潘仕荣中山大学附属一院人工心研究室中山大学附属光华口腔医学院广州510060 中山大学基础医学院化学教研室广州510080

用三乙胺和双端氨基聚乙二醇分别引发经酯化、环化等处理的谷氨酸开环聚合制备聚谷氨酸苄酯(PBLG)和聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯嵌段共聚物(PBLG-PEG-PBLG,GEG)。采用圆二色光谱对聚合物溶液的旋光性进行分析,以确定共聚物中PBL... 详细信息

用三乙胺和双端氨基聚乙二醇分别引发经酯化、环化等处理的谷氨酸开环聚合制备聚谷氨酸苄酯(PBLG)和聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯嵌段共聚物(PBLG-PEG-PBLG,GEG)。采用圆二色光谱对聚合物溶液的旋光性进行分析,以确定共聚物中PBLG嵌段的构型和含量。结果表明,均聚物和共聚物中的PBLG嵌段都以α-螺旋构型存在,中间的PEG不扰乱其构型,通过聚合物的圆二色性(circular dichroism,CD)计算出的PBLG嵌段含量与核磁共振(nuclearmagnetic resonance,NMR)所得结果基本一致。

关键词：聚谷氨酸苄酯-聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯嵌段共聚物圆二色光谱旋光性

傅里叶变换红外光谱与圆二色光谱表征磷脂酶D二级结构的比较

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光谱实验室 2010年第2期27卷 481-485页

作者：史苏佳曹栋童军茂张永刚江南大学理学院石河子大学食品学院新疆石河子市832003 江南大学食品学院江苏省无锡市214122

报道了傅里叶变换红外光谱与圆二色光谱光学信息表征蛋白质二级结构的比较,研究表明傅里叶变换红外光谱与圆二色光谱光学信息表征蛋白质二级结构时,要注意缓冲体系的选择,磷酸盐缓冲液比醋酸盐缓冲液更适合使用,利用FTIR与CD光谱信息表... 详细信息

报道了傅里叶变换红外光谱与圆二色光谱光学信息表征蛋白质二级结构的比较,研究表明傅里叶变换红外光谱与圆二色光谱光学信息表征蛋白质二级结构时,要注意缓冲体系的选择,磷酸盐缓冲液比醋酸盐缓冲液更适合使用,利用FTIR与CD光谱信息表征蛋白质二级结构,两者的数据吻合较好。

关键词：傅里叶变换红外光谱圆二色光谱蛋白质二级结构

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重组人神经红蛋白的圆二色光谱研究

科学通报 2006年第13期51卷 1524-1528页

作者：赵超李连之王莉冀海伟聊城大学化学化工学院聊城252059

神经红蛋白(neuroglobin,NGB)是近期在人和其他脊椎动物脑中发现的一种新颖的血红素蛋白.利用远紫外圆二色(CD)光谱的方法,研究了NGB的浓度、溶剂性质、溶液pH值以及温度对NGB二级结构的影响.结果表明,NGB浓度小于10μmol/L时,它主要以... 详细信息

神经红蛋白(neuroglobin,NGB)是近期在人和其他脊椎动物脑中发现的一种新颖的血红素蛋白.利用远紫外圆二色(CD)光谱的方法,研究了NGB的浓度、溶剂性质、溶液pH值以及温度对NGB二级结构的影响.结果表明,NGB浓度小于10μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,浓度大于10μmol/L时,随着浓度的增大其α-螺旋含量逐渐减少,当浓度达到40μmol/L后基本不再变化,可能是由于NGB在浓度较高时其分子间可以形成二硫键以及蛋白分子间可相互聚集所造成的.NGB在醇中的α-螺旋含量比在水中稍有增加,也表明NGB对醇类溶剂具有较高的稳定性.在酸性或碱性溶液中,NGB的二级结构都有不同程度的破坏.随着温度的逐渐升高,NGB的α-螺旋含量逐渐减少,但温度高达110℃时仍有16.8%的α-螺旋存在,说明NGB具有高热稳定性.

关键词：神经红蛋白圆二色光谱二级结构稳定性