检索结果-南通市图书馆

固定化细胞提高热带假丝酵母菌的噻吩耐受性及降解效率

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精细石油化工 2020年第2期37卷 67-71页

作者：傅悦张雪晴李飞刘安张朝正工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院天津300457

利用固定化细胞技术提高热带假丝酵母降解高浓度噻吩的效率,考察了固定化包埋的载体类型及固定化的方法,优化了固定化微球降解噻吩的实验条件。实验结果表明:用2%的海藻酸钠固定化热带假丝酵母,微球表面可形成一层致密的薄膜,将大量细... 详细信息

利用固定化细胞技术提高热带假丝酵母降解高浓度噻吩的效率,考察了固定化包埋的载体类型及固定化的方法,优化了固定化微球降解噻吩的实验条件。实验结果表明:用2%的海藻酸钠固定化热带假丝酵母,微球表面可形成一层致密的薄膜,将大量细胞包埋在微球里,菌体密度达到5×1010 CFU/g微球;噻吩降解实验中较佳条件为:微球接种量7 g/100 mL、培养基初始pH 8.5~9.0、培养温度30℃。在500 mg/L噻吩的培养液中,培养16 h时降解可达62.3%。

关键词：噻吩生物降解固定化细胞培养条件优化热带假丝酵母

固定化细胞拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯的研究

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微生物学报 2018年第9期58卷 1672-1682页

作者：张利坤肖延铭钱敏帆严燕兵李敬亚长兴制药股份有限公司工业生物催化与转化浙江省工程研究中心浙江长兴313100 郑州大学化学与分子工程学院河南郑州450001

【目的】筛选鉴定一株产酯酶用于选择性拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯的菌株,利用该菌株固定化细胞催化拆分外消旋底物。【方法】通过富集培养、罗丹明B平板初筛及复筛培养获得一株选择性拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙... 详细信息

【目的】筛选鉴定一株产酯酶用于选择性拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯的菌株,利用该菌株固定化细胞催化拆分外消旋底物。【方法】通过富集培养、罗丹明B平板初筛及复筛培养获得一株选择性拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯的菌株,通过对其形态、生理生化特征及16S r DNA序列分析,确立该菌株系统发育地位。优化了利用硅藻土-戊二醛吸附交联法对该菌体细胞固定化的条件,研究固定化细胞催化性质及操作稳定性。【结果】该菌为革兰氏阴性菌,鉴定其为甲基球状菌属(Methylopila)。固定化体系最优条件:聚乙烯亚胺0.15%(V/V),戊二醛0.2%(V/V),硅藻土6 g/L,菌体质量浓度100 g/L。与游离细胞相比,固定化细胞最适p H由8.0变为8.5,最适温度由35°C变为40°C,p H稳定性和温度稳定性都有所提高。Cu^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)能促进酶活,Zn^(2+)、Fe^(2+)抑制酶活。固定化细胞的有机溶剂耐受性较游离细胞有所提高。动力学分析细胞固定化后Km值变大,底物亲和力降低。利用固定化细胞水解(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯,底物浓度200 g/L,反应20 h,保留构型为S型,得率47.8%,对映体过量值ees为99.4%,重复使用12次后仍保留初始酶活的80%以上。【结论】开发了利用Methylopila sp.cxzy-L013固定化细胞择性拆分(R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯的工艺,该工艺具有良好的工业应用前景。

关键词： (R,S)-α-乙基-2-氧-1-吡咯烷乙酸甲酯生物催化菌种筛选固定化细胞酯酶

固定化细胞处理三苯甲烷类染料废水的实验研究

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固定化细胞处理三苯甲烷类染料废水的实验研究

作者：李晶莹中国矿业大学

学位级别：硕士

三苯甲烷类染料是应用范围最广的染料之一,产生了大量毒性强、色度高、含难降解污染物的废水,带来较大的环境污染。固定化细胞技术能够提高单位体积内细胞浓度高、环境适应性强、反应速度快、可回收利用,弥补微生物法的不足,从而有效处... 详细信息

三苯甲烷类染料是应用范围最广的染料之一,产生了大量毒性强、色度高、含难降解污染物的废水,带来较大的环境污染。固定化细胞技术能够提高单位体积内细胞浓度高、环境适应性强、反应速度快、可回收利用,弥补微生物法的不足,从而有效处理三苯甲烷类染料废水。本文通过固定化细胞处理三苯甲烷类染料废水。以孔雀石绿和结晶紫作为污染物,筛选出孔雀石绿和结晶紫的优势降解菌,优化固定化条件,分析环境因素对游离菌和固定化细胞降解能力的影响,并比较固定化前后差异,探索实际应用中固定化细胞技术对三苯甲烷类染料废水的处理效果。主要研究成果如下:(1)通过孔雀石绿和结晶紫降解菌的筛选,从南湖河流底泥中分离纯化出孔雀石绿优势降解菌M1和结晶紫优势降解菌C2。通过实验发现,M1在5天内对孔雀石绿的降解率达81.47%,C2在15天内对结晶紫的降解率为37.92%。(2)在不同环境条件下对孔雀石绿和结晶紫降解发现,温度、pH、底物初始浓度一定程度上影响孔雀石绿和结晶紫的降解。M1降解孔雀石绿在30℃时最佳,当pH在5,孔雀石绿低于30mg/L的条件下M1降解能力较好。C2在20℃0℃时降解结晶紫效果较好,适合中性至碱性环境降解结晶紫,且在pH=7时降解效果最好,此外在结晶紫初始浓度为10 mg/L的条件下降解最快。(3)通过正交实验比较固定化细胞颗粒的机械强度、传质性能和对孔雀石绿的降解率,综合比较后最终确定聚乙烯醇和海藻酸钠浓度在8%和2%时,在浓度为6%氯化钙溶液中交联18h,所得的固定化细胞颗粒性能最好。(4)通过固定化细胞颗粒在不同条件下对孔雀石绿和结晶紫的降解,并和游离菌比较发现,固定化细胞颗粒的降解效果比游离菌好。温度对固定化细胞颗粒降解孔雀石绿和结晶紫的影响较小。固定化细胞颗粒降解孔雀石绿和结晶紫的pH范围比较宽广。初始浓度变化对固定化细胞颗粒降解孔雀石绿和结晶紫影响极为明显。(5)孔雀石绿和结晶紫在不同条件下的生物降解过程符合一级降解动力学方程。温度、pH和底物初始浓度对孔雀石绿和结晶紫降解的影响有显著性。该论文有图46幅,表29个,参考文献104篇。

关键词：三苯甲烷类染料孔雀石绿结晶紫固定化细胞降解动力学

壳聚糖-聚乙烯醇固定化细胞在生物转化合成烟酸中的应用

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化工进展 2019年第5期38卷 2413-2420页

作者：龙华龚劲松刘清华李自云史劲松许正宏山东昆达生物科技有限公司山东临沂276400 糖化学与生物技术教育部重点实验室江南大学药学院江苏无锡214122

传统的腈水解酶游离催化剂在腈类化合物生物转化过程中存在易失活、稳定性低、重复利用率不高等特点,本研究采用复合固定方式对基因工程腈水解酶进行固定化以期提升其应用性能。通过固定化壳聚糖和聚乙烯醇(PVA)作为包埋材料,获得了具... 详细信息

传统的腈水解酶游离催化剂在腈类化合物生物转化过程中存在易失活、稳定性低、重复利用率不高等特点,本研究采用复合固定方式对基因工程腈水解酶进行固定化以期提升其应用性能。通过固定化壳聚糖和聚乙烯醇(PVA)作为包埋材料,获得了具有高机械强度和酶活性的固定化细胞。初步探究了固定化聚乙烯醇和壳聚糖的浓度及固定剂的优选条件,分别为80g/L的PVA、40g/L的壳聚糖及60g/L三聚磷酸钠的饱和硼酸溶液;与游离细胞相比,固定化细胞的热稳定性和贮藏稳定性均显著提高,可增加约2倍;在525min的转化时间内,采用底物流加模式可转化合成烟酸208g/L。本文为复合固定化催化剂在腈化合物生物转化及烟酸合成中的应用奠定了坚实基础。

关键词：固定化细胞生物转化腈水解酶腈化合物

固定化酶/细胞用于功能糖生物制造的研究进展

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食品研究与开发 2022年第16期43卷 180-189页

作者：张佳旭储子仪吴振华石家福天津大学环境科学与工程学院天津300072

功能糖具有热量低、改善肠道菌群、防龋齿、降血糖等特殊功效,在我国消费量占比约24%。因此,发展功能糖绿色制造技术,对人民生命健康和国民经济发展有重要意义。为解决采用生物法合成功能糖过程中酶或细胞难以循环利用、稳定性差的问题... 详细信息

功能糖具有热量低、改善肠道菌群、防龋齿、降血糖等特殊功效,在我国消费量占比约24%。因此,发展功能糖绿色制造技术,对人民生命健康和国民经济发展有重要意义。为解决采用生物法合成功能糖过程中酶或细胞难以循环利用、稳定性差的问题,诸多固定化技术被开发应用于功能糖生物制造。该文系统介绍用于合成功能糖的固定化酶和固定化细胞技术,以期为绿色生物制造关键技术的研发和推广提供参考。

关键词：功能糖固定化酶固定化细胞生物制造生物合成

固定化细胞酶法拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸

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高等学校化学学报 2010年第8期31卷 1560-1563页

作者：熊吉滨刘均忠刘茜焦庆才南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室南京210093

利用氨基酰化酶固定化细胞酶法拆分了N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸.考察了温度、pH值、底物浓度、金属离子和拆分时间对酶促反应的影响.确定了氨基酰化酶固定化细胞手性拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸的最佳工艺条件为pH=7.0、反应温度50... 详细信息

利用氨基酰化酶固定化细胞酶法拆分了N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸.考察了温度、pH值、底物浓度、金属离子和拆分时间对酶促反应的影响.确定了氨基酰化酶固定化细胞手性拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸的最佳工艺条件为pH=7.0、反应温度50℃及底物浓度500mmol/L.10-4mol/L的Co2+和Mg2+对氨基酰化酶有显著激活作用,Cu2+和Zn2+对酶促反应有明显抑制作用.在最佳条件下,氨基酰化酶固定化细胞对N-乙酰-L-3-甲氧基丙氨酸的摩尔转化率达96%.

关键词：氨基酰化酶 D,L-3-甲氧基丙氨酸固定化细胞手性拆分

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固定化细胞催化蒎烯环氧化反应的研究

固定化细胞催化蒎烯环氧化反应的研究

作者：涂林广西大学

学位级别：硕士

经α-蒎烯环氧化反应得到的α-环氧蒎烷作为合成香料中间体可以合成许多具有特殊功能且价格昂贵的香料或精细化学品。目前工业生产使用的化学法虽然反应迅速,但副反应多、污染重、腐蚀设备。以酶作为催化剂的生物法反应温和、绿色环保... 详细信息

经α-蒎烯环氧化反应得到的α-环氧蒎烷作为合成香料中间体可以合成许多具有特殊功能且价格昂贵的香料或精细化学品。目前工业生产使用的化学法虽然反应迅速,但副反应多、污染重、腐蚀设备。以酶作为催化剂的生物法反应温和、绿色环保且具有高选择性,但酶分离纯化以及酶固定化过程成本较高且易失去酶活。而以固定化细胞作为催化剂可以免去酶的提纯与纯化工序,在减小酶活损失的同时能够大幅降低生产成本,是一个新的研究方向。本论文通过比较7种不同来源的产脂肪酶菌种催化性能,选用酶活较高的Rhizopus oryzae CGMCC 3.5040细胞进行催化α-蒎烯的环氧化反应合成2,3-环氧蒎烷的工艺研究。利用单因素试验法及正交试验法对Rhizopus oryzae CGMCC 3.5040的产酶培养条件、全细胞催化α-蒎烯环氧化反应条件进行了优化,并选择了聚氨酯泡沫作为固定化细胞载体材料对Rhizopus oryzae CGMCC 3.5040细胞进行了固定化,以提高细胞在蒎烯环氧化反应的重复利用性,主要研究结果如下:1、在7株产胞内脂肪酶菌种中,米根霉Rhizopus oryzae CGMCC3.5040所产胞内脂肪酶酶活最高,可达到7.286 U/m L。经测定,其全细胞催化蒎烯环氧化反应的转化率为73.1%,收率为69.7%,表明用米根霉Rhizopus oryzae CGMCC3.5040全细胞用于催化蒎烯环氧化反应可行。2、经发酵培养条件优化,R.oryzae 3.5040产胞内酶活能达到24.00 U/m L,相比于优化前酶活提高了3.29倍。3、实验表明,在由甲苯作为有机溶剂、HO作为氧供体、正辛酸作为酰基供体、柠檬酸钠作为束酸剂的有机-水双相体系中,R.oryzae 3.5040全细胞能催化蒎烯环氧化反应,其转化率能达到97.9%,收率可达85.4%。而在有机单相体系中,全细胞催化蒎烯环氧化反应却难以进行。4、选择了3种疏水性材料:大孔吸附树脂DM-130、聚氨酯泡沫、丝瓜络作为固定化材料,利用吸附法对R.oryzae 3.5040细胞进行固定化,比较了其固定化效果,结果表明,聚氨酯泡沫更适合作为固定R.oryzae 3.5040细胞的材料。在固定化时间为36 h、聚氨酯泡沫添加量1.5 g时制备的固定化细胞比活达到308.7 U/g固定化细胞。固定化细胞的重复利用性实验表明,在循环使用7次以后其转化率仍接近50%,相比一些文献报道的固定化酶催化蒎烯环氧化反应可循环次数要高,可成为替代酶催化蒎烯环氧化的一条路径。

关键词：米根霉固定化细胞 α-蒎烯烯烃环氧化反应脂肪酶工艺优化

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固定化细胞技术应用进展

浙江化工 2020年第3期51卷 10-13页

作者：吴天飞潘建洪方从申陈凯张钟鑫台州仙琚药业有限公司浙江台州317016

固定化细胞较游离细胞具有良好的环境耐受性,使其在工业生产及环境保护等领域具有广泛的应用前景。介绍了固定化技术在环境治理、食品发酵、能源开发以及药物制备等领域的最新应用进展。

关键词：固定化细胞环境食品能源制药

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固定化细胞转化阿糖尿苷合成阿糖腺苷

中国医药工业杂志 2013年第6期44卷 564-567,575页

作者：刘国生焦璐邢善涛张建璀曹倩河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 新乡拓新生化科技有限公司河南新乡453000

采用聚乙烯醇、卡拉胶和聚丙烯酰胺为混合载体固定化埃希菌AEM0812细胞。以8.0%聚乙烯醇、1.0%卡拉胶和10%聚丙烯酰胺作为载体,菌体浓度为30%,在pH 7.0、含4.0%氯化钾的饱和硼酸溶液(成型剂)中处理36 h,得相对酶活力为98.17%且较稳定的... 详细信息

采用聚乙烯醇、卡拉胶和聚丙烯酰胺为混合载体固定化埃希菌AEM0812细胞。以8.0%聚乙烯醇、1.0%卡拉胶和10%聚丙烯酰胺作为载体,菌体浓度为30%,在pH 7.0、含4.0%氯化钾的饱和硼酸溶液(成型剂)中处理36 h,得相对酶活力为98.17%且较稳定的颗粒型固定化细胞,用来催化转化阿糖尿苷合成阿糖腺苷,在54℃、pH 6.5和缓冲液离子浓度120 mmol/L的最适条件下,阿糖尿苷的转化率为68%。固定化细胞连续5次反应的平均转化率约54.3%。

关键词：阿糖腺苷生物合成阿糖尿苷固定化细胞