检索结果-南通市图书馆

微球载体固定化纤维素酶的反应动力学模型研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 2005年第5期21卷 799-803页

作者：周建芹陈实公朱忠奎苏州大学药学院苏州215007 合肥工业大学生物与食品工程学院合肥230009 苏州大学机电工程学院苏州215021

建立了固定化纤维素酶的反应动力学模型,该模型以米氏方程为基础并考虑了产物竞争性抑制的影响。在此模型的基础上进行模拟,系统研究了产物竞争性抑制、内扩散限制、溶液中的宏观底物浓度、载体大小等因素对球形载体内部的底物、产物浓... 详细信息

建立了固定化纤维素酶的反应动力学模型,该模型以米氏方程为基础并考虑了产物竞争性抑制的影响。在此模型的基础上进行模拟,系统研究了产物竞争性抑制、内扩散限制、溶液中的宏观底物浓度、载体大小等因素对球形载体内部的底物、产物浓度分布和效率因子的影响。产物竞争性抑制的存在将增加载体颗粒内的底物浓度,对效率因子的影响较小。底物内扩散系数或者反应体系中底物浓度增大时,载体颗粒内的底物浓度和效率因子都将增大。载体粒径增大,载体颗粒内的底物浓度和效率因子均减小。

关键词：固定化纤维素酶动力学模型内扩散限制效率因子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

固定化纤维素酶的制备及其性质研究

固定化纤维素酶的制备及其性质研究

作者：陈实公合肥工业大学

学位级别：硕士

固定化酶作为现代生物工程技术的重要组成部分之一,在工业、医学、分析与分离技术以及化学合成等领域有着广泛的用途。本文从固定化酶的载体、固定化纤维素酶的制备方法和性质以及固定化纤维素酶反应动力学模型等方面进行了研究。选择... 详细信息

固定化酶作为现代生物工程技术的重要组成部分之一,在工业、医学、分析与分离技术以及化学合成等领域有着广泛的用途。本文从固定化酶的载体、固定化纤维素酶的制备方法和性质以及固定化纤维素酶反应动力学模型等方面进行了研究。选择淀粉接枝丙烯腈、丙烯酰胺聚合物为载体,用物理吸附法固定化纤维素酶,同时以对-β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)为载体活化剂,采用重氮化法共价结合固定化纤维素酶。实验以酶活力、比活力、蛋白载量和活力回收为指标,探讨了给酶量、反应pH值、反应时间、离子强度等因素对固定化纤维素酶的影响。通过游离酶、吸附法固定化酶和共价结合法固定化酶性质的比较,系统研究了固定化酶的酶学性质,包括最适pH值、最适温度、米氏常数、热稳定性、重复使用稳定性和储存稳定性等方面,固定化纤维素酶性质的实验结果表明:固定化酶的最适反应PH值为6.6,最适反应温度为50℃,吸附法固定化酶的Km为0.208g/L,共价结合法固定化酶的Km为0.135g/L。固定化酶的热稳定性、重复使用稳定性和储存稳定性都有很大的提高。建立了固定化纤维素酶反应动力学模型,在此基础上系统研究了席勒模数、产物竞争性抑制、体系宏观底物浓度等因素对球形载体内部底物分布的影响,并讨论了各因素对固定化纤维素酶效率因子的影响。本文的研究工作为以后进一步开发适用于工业生产、性能优良的固定化酶以及研究固定化酶酶促反应过程提供了必要的实验和理论基础。

关键词：淀粉接枝聚合物固定化纤维素酶吸附共价偶联效率因子

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

氨基化硅胶载体固定化纤维素酶的研究

生物技术通报 2010年第3期26卷 196-198页

作者：刘志良杨敏丽宁夏大学能源化工重点实验室银川750021

用硅胶作载体,戊二醛作交联剂,制备了固定化的纤维素酶。对制备固定化纤维素酶的偶联剂浓度、pH、给酶量3个影响因素进行了研究,通过正交试验优化得出最佳的固定化条件:交联剂戊二醛浓度为1%,固定化pH值为5,固载量为每克载体100mg纤维... 详细信息

用硅胶作载体,戊二醛作交联剂,制备了固定化的纤维素酶。对制备固定化纤维素酶的偶联剂浓度、pH、给酶量3个影响因素进行了研究,通过正交试验优化得出最佳的固定化条件:交联剂戊二醛浓度为1%,固定化pH值为5,固载量为每克载体100mg纤维素酶。

关键词：固定化纤维素酶戊二醛氨基化硅胶

咪唑类离子液体辅助固定化纤维素酶降解小麦秸秆试验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医（下半月） 2017年第10期 208-210页

作者：詹长娟王翼王华徐伟刘加伟南京理工大学泰州科技学院环境与制药工程学院江苏泰州225300

为了研究咪唑类离子液体在固定化纤维素酶降解小麦秸秆中的作用,试验采用小麦秸秆为原料,经离子液体预处理后,用壳聚糖固定的纤维素酶进行降解,计算产糖量。结果表明:0.25 g小麦秸秆(60目)用5 mL 1,3-二甲基咪唑磷酸二甲酯盐([Mmim]DMP... 详细信息

为了研究咪唑类离子液体在固定化纤维素酶降解小麦秸秆中的作用,试验采用小麦秸秆为原料,经离子液体预处理后,用壳聚糖固定的纤维素酶进行降解,计算产糖量。结果表明:0.25 g小麦秸秆(60目)用5 mL 1,3-二甲基咪唑磷酸二甲酯盐([Mmim]DMP)60℃超声处理30 min后,加入20 mL p H值4.8的柠檬酸缓冲液及固定化酶3.5 g,酶解温度为50℃,酶解时间为15 h,酶降解小麦秸秆产糖量最高,平均为2.76%。说明使用[Mmim]DMP预处理小麦秸秆可使固定化纤维素酶降解小麦秸秆的产糖量明显提高。

关键词：小麦秸秆咪唑离子液体固定化纤维素酶壳聚糖

纳米磁性微粒固定化纤维素酶及水解秸秆的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

江西师范大学学报（自然科学版） 2011年第6期35卷 574-578页

作者：李咏兰吕桂芬弓剑邱广亮内蒙古师范大学生命科学与技术学院内蒙古呼和浩特010022

采用共沉淀法制备出纳米聚乙二醇磁性微粒,扫描电镜观察表明微粒呈近似球形、表面粗糙,粒径均匀(100～200 nm),无磁场下稳定分散于水中,有磁场时迅速沉降.以戊二醛为交联剂,采用吸附交联法将纤维素酶固载到纳米磁性微粒上,制备出磁性固... 详细信息

采用共沉淀法制备出纳米聚乙二醇磁性微粒,扫描电镜观察表明微粒呈近似球形、表面粗糙,粒径均匀(100～200 nm),无磁场下稳定分散于水中,有磁场时迅速沉降.以戊二醛为交联剂,采用吸附交联法将纤维素酶固载到纳米磁性微粒上,制备出磁性固定化纤维素酶,考查了不同固定化条件对固定化酶的影响,确定最佳固定化条件为:0.2 g微粒,20 mg纤维素酶,0.15%戊二醛.动力学研究表明磁性固定化纤维素酶的最适温度为50℃,最适pH值为4.5,表观米氏常数Km和最大反应速度Vmax分别为Km=4.48 mg/mL,Vmax=2.38 mg/(mL h 1).稳定性试验表明磁性固定化纤维素酶较游离酶热稳定性有所提高,pH值稳定性增加,磁性固定化酶连续使用10批次后,其活性仍可保持59%.磁性固定化纤维素酶对盐酸、液氨/硫氰酸氨预处理后的玉米秸秆及滤纸水解得糖率分别为23.6%、20.9%和32.0%.

关键词：纳米磁性微粒固定化纤维素酶转化率纤维素水解

聚氨酯泡沫固定化纤维素酶制备京尼平及其体外抗肿瘤活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

聚氨酯泡沫固定化纤维素酶制备京尼平及其体外抗肿瘤活性

作者：王璐东北林业大学

学位级别：硕士

京尼平是一种环烯醚萜类化合物,是一种毒性较低的生物交联剂,它不仅可以与氨基酸等作用制备生物材料,而且还具有保肝、降血糖、降血压等多种药理作用。京尼平苷是京尼平主要的制备原料,京尼平苷来源广泛,且在如杜仲、栀子等植物中含量较... 详细信息

京尼平是一种环烯醚萜类化合物,是一种毒性较低的生物交联剂,它不仅可以与氨基酸等作用制备生物材料,而且还具有保肝、降血糖、降血压等多种药理作用。京尼平苷是京尼平主要的制备原料,京尼平苷来源广泛,且在如杜仲、栀子等植物中含量较高,并且也具有多种药理活性,其中的抗肿瘤活性已被多次报道。由于京尼平是京尼平苷的苷元,具有与京尼平苷相同的母核结构,在体内酶的作用下代谢为京尼平,发生作用,而其抗肿瘤活性报道较少。故本试验在利用新型聚氨酯泡沫固定化纤维素酶制备京尼平的基础上,检测纯化后的京尼平对三种肿瘤细胞的半数致死率,为京尼平应用于抗肿瘤作用提供了一定的依据。同时,聚氨酯泡沫材料是一种原料方便易得、制备方法简单、使用效果良好的多功能材料,其中的聚氨酯软泡以及部分半硬质泡是负载酶类等催化剂的理想材料。而自然界中的纤维素酶来源丰富,资源较多,但利用率差,浪费严重。故本文应用适宜的聚氨酯泡沫材料负载纤维素酶,将该固定化纤维素酶应用于京尼平的制备反应中,可以多次使用,催化京尼平生成反应的进行,同时也大幅提高了纤维素酶的使用效率。本文的主要研究内容和结果如下:1.通过中心复合设计优化法确定了聚氨酯泡沫载体制备的最佳条件,并对制备的固定化纤维素酶的理化性质、重复使用情况、酶动力学参数等进行了检测,其主要检测结果如下:(1)通过中心复合设计优化法制备并优化出的最佳原料用量为:去离子水用量1.62%,聚醚改性硅油用量 0.35%,PEG400 用量 54.26%、MDI用量 43.41%,DBTDL用量0.35%,PEG400/MDI=1.250,在最佳条件下制备的聚氨酯泡沫载体单位体积吸水量的平均值为3.8247 g/cm3。最大载酶率为27.12%。(2)理化性质检测结果显示,纤维素酶被成功负载于聚氨酯泡沫内部,固定化纤维素酶与聚氨酯泡沫载体相比平均孔径改变不大,但孔径分布有所变宽,其横断面外观亦有所改变,XRD、DSC检测结果显示固定化纤维素酶与其相应的聚氨酯泡沫载体均为无定形态。2.探索了固定化纤维素酶最适反应条件、动力学参数以及其循环使用情况。结果为:固定化纤维素酶最佳反应温度为45℃,最适pH=5.5,反应时间成大于等于75 min;游离纤维素酶最佳反应温度为45℃,最适pH=4.5,反应时间应大于等于 65 min。在上述条件下进行循环酶促反应7次后,其酶活为6274.78±294.91 U/g。本文主要通过米氏方程和双倒数作图法对游离纤维素酶和固定化纤维素酶的酶动力学参数进行检测,检测结果为游离酶Y1=0.0557X1+0.0843,R2=0.9374,Kml=0.6613,Vmax1=11.8624;聚氨酯泡沫固定化纤维素酶Y2=0.1991X2+0.1429,R2=0.9153,Km2=1.3933,Vmax2=6.9979。3.在最适温度和pH条件下,对该固定化纤维素酶酶促京尼平苷生成京尼平反应的时间历程、动力学参数、以及循环使用次数进行了检测,检测结果为:在缓冲液pH=5.5,反应温度为45℃的条件下,京尼平生成反应的反应时间应≥75 min。通过米氏方程和双倒数作图法得到固定化纤维素酶在该反应中的酶动力学参数,其检测结果为Lineweaver-Burk 拟合曲线为 Y=2.4660x-0.7660,R2=0.9337,Km=3.2193,Vmax=1.3054。固定化纤维素酶在京尼平生成反应中重复使用7次,京尼平苷的转化率为40.60%。对生成的京尼平粗品进行了纯化,获得了纯度为98.34%的高纯度京尼平。4.利用肝癌细胞株HepG2、乳腺癌细胞株MCF-7和肺癌细胞株A549采用MTT实验方法对京尼平苷和京尼平的体外抗肿瘤活性进行了实验,结果表明京尼平苷和京尼平对HepG2细胞、MCF-7细胞和A549细胞均有显著的抑制作用,其中京尼平苷对上述三种细胞的半数致死率分别为:400 μM、5 μM、155.51 μM;京尼平对上述三种细胞的半数致死率分别为:800 μM、25 μM、274.06μM。

关键词：京尼平京尼平苷聚氨酯纤维素酶固定化纤维素酶抗肿瘤

非碱溶性黑木耳多糖作为固定化纤维素酶载体的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

非碱溶性黑木耳多糖作为固定化纤维素酶载体的研究

作者：麻炳辉哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

真菌多糖具有多种生物功能,是目前生物化学领域研究的热点之一。另外,真菌多糖由于具有结构多样性和良好的吸附能力,还是一类优良的天然高分子材料。固定化酶兼具酶的催化活性和可循环使用性,在化工、临床医药和生物传感器方面有广泛应... 详细信息

真菌多糖具有多种生物功能,是目前生物化学领域研究的热点之一。另外,真菌多糖由于具有结构多样性和良好的吸附能力,还是一类优良的天然高分子材料。固定化酶兼具酶的催化活性和可循环使用性,在化工、临床医药和生物传感器方面有广泛应用。本论文研究了非碱溶性黑木耳多糖的制备及以其为载体固定化纤维素酶,为其进一步的应用开发提供实验依据。非碱溶性黑木耳多糖的提取采用超声波辅助溶剂浸提的方法,用溶剂将可溶性成分除去,即得到非碱溶性黑木耳多糖。通过单因素试验确定了最佳提取条件为0.1mol/L氢氧化钠溶液、超声波功率为160W、固液比1/100,由正交试验得出的最适提取条件为颗粒度选择d≤0.12mm、温度100℃、时间2h。最终非碱溶性黑木耳多糖得率为49.5%。采用戊二醛交联法和共价结合法制备了固定化纤维素酶,酶活力分别为游离酶活力的49%和15%。交联法固定化纤维素酶主要分析了交联过程中戊二醛浓度和交联时间对酶活力的影响,确定了最佳交联条件为10%戊二醛室温下交联1h,并研究了固定化酶的pH值稳定性和温度稳定性以及米氏常数和可循环性,发现固定化酶的pH值稳定性和温度稳定性较游离酶有所提高,可重复利用8次以上。对载体多糖进行了丙烯酸接枝,接枝产物作载体时酶活力回收低于交联法固定化酶。本论文的研究一方面提高了黑木耳的利用价值,另一方面以非碱溶性黑木耳多糖为载体进行的固定化纤维素酶和多糖改性的研究在国内外还未有报道,本课题的研究结果将对固定化酶的制备有一定的参考价值。

关键词：非碱溶性黑木耳多糖溶剂浸提法固定化纤维素酶交联

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

改性海藻酸复合凝胶固定化纤维素酶的研究

改性海藻酸复合凝胶固定化纤维素酶的研究

作者：朱丽娜哈尔滨理工大学

学位级别：硕士

酶固定化技术因克服了游离酶的不稳定、分离难以及不易操作等缺点，广泛应用于生物工程与技术、化学应用以及医学领域。载体的选择是决定固定化酶优劣的主要因素。在有机高分子水凝胶中，海藻酸凝胶以较好的亲水性、生物相容性和网络结... 详细信息

酶固定化技术因克服了游离酶的不稳定、分离难以及不易操作等缺点，广泛应用于生物工程与技术、化学应用以及医学领域。载体的选择是决定固定化酶优劣的主要因素。在有机高分子水凝胶中，海藻酸凝胶以较好的亲水性、生物相容性和网络结构等特点而成为酶固定化最常用的水溶性有机载体之一。拟薄水铝石和纳米氧化铝都具有比表面积大、吸附性高及机械性能好等优点，作为无机组分，以海藻酸凝胶为基体形成复合凝胶材料作为固定化酶载体，可以改善单一海藻酸凝胶的机械强度差、寿命短和传质阻力大等缺点，为酶提供了适宜的微环境，从而提高固定化酶的性能。本文分别以拟薄水铝石和纳米氧化铝为无机组分，改性海藻酸凝胶，分别通过物理掺杂、共价交联和涂覆无机凝胶层三种方法，制备出三种类型的复合凝胶：（1）分别将纳米氧化铝和拟薄水铝石物理掺杂于海藻酸网络中，通过静电吸附作用，制备出两种吸附型复合凝胶;（2）利用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化海藻酸凝胶上的羧基，以修饰在纳米氧化铝上的KH550为偶联剂，共价交联制备交联型复合凝胶;（3）将拟薄水铝石胶体涂覆于已成型的海藻酸凝胶表面，制备出涂覆型复合凝胶。采用红外、动态热机械分析以及BET比面积测试等多种手段对复合凝胶进行表征，比较不同的制备方式对所得复合凝胶的物理化学性质的影响。通过对复合凝胶溶胀率的测定，探讨了其溶胀机制。以羧甲基纤维素钠（CMC）为底物，考察了复合凝胶的扩散性质。研究表明，三类复合凝胶较海藻酸凝胶的力学性能、抗溶胀性能和扩散性能均有明显的改善，只有涂覆凝胶的有效扩散系数略有降低。根据不同掺杂量的复合凝胶对CMC在凝胶中扩散系数的影响，确定无机粒子的最佳掺杂量：吸附型凝胶海藻酸-拟薄水铝石的最佳掺杂量为17.5%、海藻酸-氧化铝为3g/L以及交联型复合凝胶为7g/L。以三类复合凝胶和海藻酸凝胶为纤维素酶的固定化载体，分别考察了各固定化酶的包埋率、酶活性、最适条件、稳定性以及酶促反应动力学性质等。结果表明，三类复合凝胶的酶包埋率都有不同程度的提高，其中交联型和涂覆型复合凝胶的包埋率较高，分别为85.5%和89.7%，远远高于海藻酸凝胶的61.4%。由于复合凝胶能够为纤维素酶提供更为适宜的微环境，酶的活性和稳定性都有了显著提高，其中交联型复合凝胶中的酶活性和稳定性最高。

关键词：海藻酸纳米氧化铝拟薄水铝石 CMC 固定化纤维素酶

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

磁性镁铝水滑石固定化纤维素酶降解MXC

磁性镁铝水滑石固定化纤维素酶降解MXC

作者：朱立中上海应用技术学院

学位级别：硕士

甲氧滴滴涕(MXC)作为杀虫剂,已被广泛应用。它具有抗生物降解性,容易在环境中积累,是一种重要的环境激素污染物。据研究表明,甲氧滴滴涕还通过食物进入人体内,并在体内累积,达到一定量时,便会损坏人体各项功能因此对MXC的毒性研究迫在眉... 详细信息

甲氧滴滴涕(MXC)作为杀虫剂,已被广泛应用。它具有抗生物降解性,容易在环境中积累,是一种重要的环境激素污染物。据研究表明,甲氧滴滴涕还通过食物进入人体内,并在体内累积,达到一定量时,便会损坏人体各项功能因此对MXC的毒性研究迫在眉睫,受到了各国的广泛关注。纤维素内切酶是一种高效的催化剂,常用来降解农药,此外还广泛应用在生物、食品、环境、化学等多个领域。但由于其不稳定性且容易失活,影响了其广泛应用,但可以通过固定化酶来提高它的稳定性和重复利用率。本文对层状材料镁铝水滑石固定化纤维素酶降解MXC进行了研究。我们首先采用了共沉淀法合成了针状纳米镁铝水滑石,颗粒大小10nm左右。然后又以FeCl3·6H2O和FeCl2·4H2O为铁源,NaOH为沉淀剂,PEG-4000为表面活性剂,合成了水基磁流体Fe304,然后再以镁铝水滑石为模板,将磁性基质Fe304插层组装到镁铝水滑石当中,得到磁性镁铝水滑石磁性。以合成的磁性镁铝水滑石为载体,以戊二醛为交联剂固定化纤维素酶。研究了各个因素对固定化酶活力的影响。实验表明：0.1g磁性镁铝水滑石,先进行氨基化,然后将载体加入5 mL浓度为5%戊二醛水溶液中,室温振荡6 h,离心分离,再将载体加入到5 mLpH为5.5,浓度为0.8g/L的纤维素酶液中,45℃振荡8 h,离心分离,用缓冲溶液洗涤载体,得到固定化酶,这样的固定酶活力较高。在MXC浓度为20mg/L,溶液pH值为6.0,温度为50℃,AOT的浓度为5g/L,,振荡时间为10h时,固定化纤维素酶降解MXC的效果最好。ABTS的加入促进了固定化酶对MXC的降解,MXC的降解效率提高了5%左右。连续多次使用后,仍保持23%的降解率。在不同反应时间和温度下,根据降解结果可知,自由酶和固定酶降解反应活化能分别为44.53 KJ/mol和38.32 KJ/mol,反映了固定酶有利于MXC的降解。

关键词：镁铝水滑石固定化纤维素酶降解 MXC