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回药爱康方含药血清对肺癌A549细胞凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2014年第10期20卷 146-150页

作者：马科马治国周慧边静武震张丽娜周丽萍姬秀娥宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学附属银川市中医医院银川750001 宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学总医院银川750004

目的:探讨回药爱康方(HAKF)含药血清对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、爱康方低、中、高剂量组、环磷酰胺(CTX)组、回药爱康方低、中、高剂量分别联合环磷酰胺化疗组,药物低、中、高剂量15.0,30.0,45.0 g·kg... 详细信息

目的:探讨回药爱康方(HAKF)含药血清对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、爱康方低、中、高剂量组、环磷酰胺(CTX)组、回药爱康方低、中、高剂量分别联合环磷酰胺化疗组,药物低、中、高剂量15.0,30.0,45.0 g·kg-1,连续灌胃15 d,麻醉后心脏取血,制备含药血清。培养细胞,将细胞分为实验组和对照组,实验组分别给予含5%,10%,20%3个体积分数的相应各组含药血清,对照组给予等体积分数的对照组大鼠血清,培养24,48,72 h后采用Annexin-VFITC/PI双染法测定各组含药血清对A549细胞凋亡的影响。结果:与对照组比较,各时段5%,10%,20%浓度含药血清可提高A549的凋亡率(P回药爱康方低、中、高剂量含药血清对细胞的凋亡率的提高程度小于CTX(P回药爱康方低剂量联合环磷酰胺血清提高细胞的凋亡率大于单纯CTX(P爱康方中剂量和高剂量血清组,72 h与24 h比较,两组A549细胞的凋亡率均升高(P回药爱康方可诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡,且有一定的剂量和时间依赖性。

关键词：回药爱康方含药血清 A549细胞凋亡

回药爱康方抗C57小鼠肺癌转移及影响bcl-2的表达

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肿瘤防治研究 2012年第7期39卷 769-772页

作者：马科马治国龙一梅周丽萍楚国庆边静周慧宁夏医科大学中医学院内科教研室银川750004 宁夏医科大学附属中医医院内科宁夏医科大学附属总医院中医科

目的观察回药爱康方对C57小鼠Lewis肺癌细胞转移的影响,并检测各组小鼠瘤组织bcl-2的表达。方法将55只C57荷瘤小鼠随机分为荷瘤模型组,环磷酰胺(CTX)组,回药爱康方低剂量组、回药爱康方低剂量加化疗组、回药爱康方高剂量加化疗组。治疗... 详细信息

目的观察回药爱康方对C57小鼠Lewis肺癌细胞转移的影响,并检测各组小鼠瘤组织bcl-2的表达。方法将55只C57荷瘤小鼠随机分为荷瘤模型组,环磷酰胺(CTX)组,回药爱康方低剂量组、回药爱康方低剂量加化疗组、回药爱康方高剂量加化疗组。治疗后,观察各组小鼠肺表面转移灶和bcl-2蛋白的表达情况。结果 (1)肺转移灶的变化:与荷瘤模型组比较,其余各组小鼠肺转移灶差异有统计学意义(P回药爱康方有抗小鼠肺癌转移和降低bcl-2表达的作用。

关键词：回药爱康方 lewis肺癌 bcl-2蛋白

回药爱康方对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞PCNA、SIL-2R表达的影响

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辽宁中医杂志 2016年第7期43卷 1515-1518,I0003页

作者：姬秀娥马科马治国周丽萍孙媛宁夏医科大学宁夏银川750004 宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学附属回医中医医院宁夏吴忠751100 宁夏医科大学附属中医医院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院中医科宁夏银川750004

目的:免疫细胞化学法检测不同组小鼠含药血清作用对肿瘤组织中PCNA的影响;ELISA方法检测鼠外周血s IL-2R。方法:小鼠自接种瘤株细胞24 h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为:1回药爱康方高剂量组(AKH);2荷瘤模型组(对照组);3回药... 详细信息

目的:免疫细胞化学法检测不同组小鼠含药血清作用对肿瘤组织中PCNA的影响;ELISA方法检测鼠外周血s IL-2R。方法:小鼠自接种瘤株细胞24 h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为:1回药爱康方高剂量组(AKH);2荷瘤模型组(对照组);3回药爱康方中剂量组(AKM);4单纯化疗药组(CTX组);5回药爱康方中剂量组加化疗组(AKM+CTX);6回药爱康方低剂量加化疗药组(AKL+CTX);7回药爱康方低剂量组(AKL);8回药爱康方高剂量加化疗药组(AKH+CTX)。结果:与模型组比较高、中、低、高+环磷酰胺、中+环磷酰胺、低+环磷酰胺,组织中PCNA的表达都降低,差异具有显著统计学意义(P回药爱康方高中低剂量以及高中低剂量与环磷酰胺联合用药可以通过调节PCNA以及Sil-2的表达来抑制肿瘤细胞的增殖,对临床使用提供了更为可靠的实验依据。

关键词：回药爱康方非小细胞肺癌 EGFR NF-κb

回药爱康方含药血清抑制Lewis肺癌细胞增殖和诱导凋亡的研究

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肿瘤防治研究 2013年第12期40卷 1114-1118页

作者：马科周慧边静武震马治国周丽萍宁夏医科大学中医学院内科教研室银川750004 宁夏医科大学靖边县中医院内科靖边县妇幼保健院宁夏医科大学附属银川市中医医院内科宁夏医科大学附属总医院中医科

目的观察回药爱康方(HAKF)含药血清对Lewis肺癌细胞(LLC)增殖抑制作用,探讨回药爱康方抗Lewis肺癌的作用机制。方法采用血清药理学方法,用SD大鼠分为健康对照(NS)组,爱康方低剂量(AKL)组,爱康方中剂量(AKM)组,爱康方高剂量(AKH)组,环磷... 详细信息

目的观察回药爱康方(HAKF)含药血清对Lewis肺癌细胞(LLC)增殖抑制作用,探讨回药爱康方抗Lewis肺癌的作用机制。方法采用血清药理学方法,用SD大鼠分为健康对照(NS)组,爱康方低剂量(AKL)组,爱康方中剂量(AKM)组,爱康方高剂量(AKH)组,环磷酰胺(CTX)组,爱康方低剂量联合环磷酰胺(AKL+CTX)组,爱康方中剂量联合环磷酰胺(AKM+CTX)组,爱康方高剂量联合环磷酰胺(AKH+CTX)组,共8组,制备含药血清,用各组含药血清培养LLC细胞,采用MTT法测各组血清对LLC增殖的影响,流式细胞(FCM)Annen V-FITC/PI标记法检测细胞凋亡率。结果回药爱康方含药血清能够抑制LLC增殖,且呈剂量和时间依赖性,爱康方高剂量组20%含药血清作用72 h抑制率达26.92%,高剂量联合CTX抑制率最高达54.71%;与对照组比较,各组血清均具诱导LLC细胞凋亡的作用,并与剂量和时间呈正相关,爱康方高剂量联合CTX作用最强,作用72 h时,细胞凋亡率下降,而坏死率升高。结论回药爱康方可抑制Lewis肺癌细胞增殖,并诱导其凋亡,爱康方可以增强环磷酰胺对细胞的抑制作用。

关键词：回药爱康方含药血清 Lewis细胞凋亡

回药爱康方含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响

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时珍国医国药 2015年第3期26卷 556-559页

作者：张志文戴永福马科周慧姬秀娥孙媛宁夏盐池县人民医院盐池751500 宁夏医科大学附属回医中医院 751100 宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏银川750004

目的探讨回药爱康方(AKR)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响。方法将80只大鼠分为8组,每组10只:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKRL、AKRM、AKRH)组,环磷酰胺(CTX)组,回药爱康方低、中、高剂量联... 详细信息

目的探讨回药爱康方(AKR)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白表达的影响。方法将80只大鼠分为8组,每组10只:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKRL、AKRM、AKRH)组,环磷酰胺(CTX)组,回药爱康方低、中、高剂量联合环磷酰胺(AKRL/AKRM/AKRH+CTX)组。制备含药血清。MTT法检测各组含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖的影响,免疫细胞化学法检测细胞Bcl-2以及p53蛋白的表达。结果和NS组比较,回药爱康方对SK-MES-1细胞生长增殖有抑制作用(P回药爱康方高剂量联合CTX组的抑制率最高(P药血清作用下,和NS组相比,各实验组细胞的IOD值逐渐减小,差异有统计学意义(P药血清各实验组IOD值低于5%、10%浓度的含药血清组(P药血清干预细胞72h,各实验组的阳性表达逐渐减弱,IOD值较低(P回药爱康方可以降低人肺鳞癌SK-MES-1细胞Bcl-2和p53蛋白的表达,抑制SK-MES-1细胞增殖。

关键词：回药爱康方含药血清人肺鳞癌SK-MES-1细胞 Bcl-2 p53

回药爱康方对Lewis肺癌小鼠mtp53和Bcl-2表达影响的实验研究

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回药爱康方对Lewis肺癌小鼠mtp53和Bcl-2表达影响的实验研究

作者：马治国宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的探讨回药爱康方对Lewis肺癌小鼠瘤细胞生长的抑制作用及对突变型p53（mtp53）、Bcl-2蛋白表达的影响。方法将55只Lewis肺癌荷瘤C57BL/6J小鼠分为荷瘤模型组、环磷酰胺（CTX）组、回药爱康方低剂量组、回药爱康方低剂量+CTX组、回药... 详细信息

目的探讨回药爱康方对Lewis肺癌小鼠瘤细胞生长的抑制作用及对突变型p53（mtp53）、Bcl-2蛋白表达的影响。方法将55只Lewis肺癌荷瘤C57BL/6J小鼠分为荷瘤模型组、环磷酰胺（CTX）组、回药爱康方低剂量组、回药爱康方低剂量+CTX组、回药爱康方高剂量+CTX组，共5组。观察肺癌小鼠的一般生活状况;计算各组小鼠平均瘤体质量及抑瘤率;计算各组小鼠免疫器官脾脏、胸腺指数;电镜下观察各组肿瘤细胞超微结构的改变;光镜下观察各组小鼠瘤细胞形态改变，免疫组化法检测各组Lewis肺癌细胞mtp53、Bcl-2蛋白的表达。结果1、小鼠一般状态荷瘤模型组小鼠瘦小，簇团，毛色干燥，腋下瘤体明显;CTX组小鼠毛色晦暗，精神萎靡，运动迟缓，饮食量小;回药爱康方组小鼠皮毛较光滑，精神状态一般，运动稍迟缓;回药爱康方低剂量+CTX组与单纯的爱康方组相似;回药爱康方高剂量+CTX组：皮毛光滑，精神状态良好，运动灵活，腋下瘤体不明显。2、抑瘤率治疗后各组Lewis肺癌小鼠瘤体均有不同程度减小：回药爱康方组高剂量+CTX组抑瘤率最好（71%），单纯回药爱康方组为39.62%，CTX组为34.29%。与对照组比较（P回药爱康方对肺癌小鼠免疫器官的影响与CTX组比较，其余四组的肺癌小鼠脾脏指数和胸腺指数均有统计学差异(P回药爱康方组肿瘤细胞变小，变圆，细胞周围未见炎症反应;回药爱康方组高剂量+CTX组与单纯爱康方组镜下大体相同，但可见到较多量的凋亡细胞和大片坏死。电镜下观察：荷瘤模型组瘤细胞呈圆形或多角形，细胞表面能见到许多微绒毛或粗糙不齐状，核呈不规则形，有切迹，核仁明显，有多个核仁，线粒体发达可见;CTX组肿瘤细胞核碎裂，呈坏死表现;爱康方组瘤细胞体积变小，细胞器肿胀、出现空泡现象，核轻度固缩，聚集在核膜下;回药爱康方高剂量+CTX组肿瘤细胞核固缩明显，染色质凝聚，聚集在核膜下，线粒体、内质网等肿胀，有空泡状结构，并可凋亡小体。5、免疫组织化学检测结果mtp53主要定位于细胞核，部分胞浆也有淡染，Bcl-2定位于细胞浆上。治疗后实验组mtp53、Bcl-2表达均降低，与对照组相比较以回药爱康方高剂量+CTX组效果明显（P回药爱康方能提高肺癌小鼠的生活质量，以高剂量合化疗组最佳;2、回药爱康方有抑制Lewis肺癌细胞生长的作用，高剂量协同化疗抑瘤效果明显;3、回药爱康方协同化疗在一定程度上能减轻化疗药物对小鼠免疫器官损伤的作用，体现良好的减毒增效作用;4、回药爱康方能降低mtp53和Bcl-2蛋白的表达，可能是其抗肺癌作用途径之一;5、回药爱康方抗癌机制的深入研究，可能会成为回医药在防治肿瘤等疑难杂症方面的动物实验的研究基础。

关键词：回药爱康方 Lewis肺癌细胞 mtp53 Bcl-2蛋白实验研究

定量PCR和Western blot结合检测回药爱康方对肺癌细胞EGFR、NF-κB的表达影响

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中华中医药学刊 2016年第12期34卷 2831-2835,I0018页

作者：马科陈丽军姬秀娥戴永福陈文孙媛林颖宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学附属回医中医医院宁夏银川751100 宁夏医科大学总院内分泌科宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏银川750004

目的:探讨定量PCR和Western blot结合检测对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞表皮生长因子受体(EGFR)、NF-κB表达影响,观察该方对调节癌细胞信号转导作用机制。方法:小鼠自接种瘤株细胞24 h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为:1回药高剂量... 详细信息

目的:探讨定量PCR和Western blot结合检测对Lewis肺癌C57小鼠瘤细胞表皮生长因子受体(EGFR)、NF-κB表达影响,观察该方对调节癌细胞信号转导作用机制。方法:小鼠自接种瘤株细胞24 h后称重、编号,随机分为8组,每组5只,分别为:1回药高剂量组(AKH);2荷瘤模型组(对照组);3回药中剂量组(AKM);4单纯化疗药组(CTX组);5回药中剂量组加化疗组(AKM+CTX);6回药低剂量加化疗药组(AKL+CTX);7回药低剂量组(AKL);8回药高剂量加化疗药组(AKH+CTX)。采用RT-PCR和western blot方法检测小鼠组织样本中EGFR、NF-κBm RNA转录水平和蛋白质表达的变化情况。结果:实时荧光定量PCR结果显示:与模型组小鼠比较,给予回药爱康方,高、中、低剂量干预后,小鼠瘤细胞中EGFR m RNA表达水平显著下调(P0.05),给予回药爱康方,高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX后,小鼠瘤细胞中EGFR表达水平显著下调(P回药爱康方高、中、低剂量干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR、NF-κB蛋白表达水平无统计学差异性(P>0.05),给予回药爱康方高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX干预后,Lewis肺癌C57小鼠EGFR蛋白表达水平显著下调、NF-κB蛋白表达水平显著上调(P回药爱康方高、中、低与回药开康方高+CTX、中+CTX、低+CTX、CTX均对EGFRm RNA的表达水平有影响,仅低剂量对NF-κBm RNA的表达水平无影响,同时回药爱康方高、中、低剂量均对EGFR、NF-κB蛋白表达无影响。

关键词： PCR Western blot 回药爱康方 EGFR NF-κb

回药爱康方含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖及周期的影响

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宁夏医科大学学报 2014年第3期36卷 241-244,247,236页

作者：周慧马科周丽萍马治国边静姬秀娥宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院中医科银川750004 宁夏医科大学附属银川市中医医院内科银川750001

目的探讨回药爱康方(AKF)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖及周期的影响。方法雄性SD大鼠80只,按体重随机分为8组:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKFL、AKFM、AKFH)组,环磷酰胺(CTX)组,AKFL、AKFM、AKFH联合CTX组。... 详细信息

目的探讨回药爱康方(AKF)含药血清对人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖及周期的影响。方法雄性SD大鼠80只,按体重随机分为8组:生理盐水对照组(NS),回药爱康方低、中、高剂量(AKFL、AKFM、AKFH)组,环磷酰胺(CTX)组,AKFL、AKFM、AKFH联合CTX组。分别给予相应AKFL、AKFM、AKFH浓缩水煎剂灌胃,连续5d;CTX组和联合组再按20mg·kg-1给予环磷酰胺于第1、3、5天腹腔注射。NS组给予等量生理盐水。上述各组动物取血制备含药血清,体外培养人肺鳞癌SK-MES-1细胞。应用MTT法检测各组含药血清对SK细胞增殖的影响,流式细胞仪进行细胞周期时相分析。结果 AKF含药血清作用不同时间对SKMES-1细胞生长有抑制作用(P药血清能够抑制SK细胞增殖,其中AKFH联合CTX组的抑制率明显高于其他组,48h之内抑制程度呈时间和浓度依赖性。5%、10%、20%浓度组的含药血清作用SK-MES-1细胞24、48、72h后,与NS比较,除AKFL外,其余各组抑制率均有升高(P药血清及联合CTX含药血清能使SK细胞阻滞于G1期,随着药物浓度的增加,G1期细胞增多、S期细胞减少,和NS组比较,高剂量以及联合组尤为明显(P药血清组与NS组比较,各组的G0/G1期细胞增多、S期细胞逐渐减少(P药血清可抑制SK细胞增殖,并与CTX有协同作用,其机制可能与其阻滞细胞于G1期有关。

关键词：回药爱康方含药血清人肺鳞癌SK-MES-1细胞增殖周期

回药爱康方含药血清对人肺腺癌A549细胞生长增殖的影响

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宁夏医科大学学报 2013年第4期35卷 357-360,364页

作者：边静马科陈丽军周慧武震马治国周丽萍宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学总医院银川750004 宁夏医科大学附属银川市中医医院银川750001

目的探讨回药爱康方含药血清对人肺腺癌A549细胞生长的抑制作用及对细胞形态的影响。方法采用血清药理学方法,将SD大鼠分为对照组、爱康方低、中、高剂量组、环磷酰胺化疗组、回药爱康方低、中、高剂量分别联合环磷酰胺化疗组,制备含药... 详细信息

目的探讨回药爱康方含药血清对人肺腺癌A549细胞生长的抑制作用及对细胞形态的影响。方法采用血清药理学方法,将SD大鼠分为对照组、爱康方低、中、高剂量组、环磷酰胺化疗组、回药爱康方低、中、高剂量分别联合环磷酰胺化疗组,制备含药血清;培养人肺腺癌A549细胞,将细胞分为实验组和对照组,实验组分别给予含5%、10%、20%浓度的相应各组含药血清,对照组给予等浓度的对照组大鼠血清,培养24、48、72h后观察细胞形态变化,采用MTT法测定各组含药血清对A549细胞的生长抑制率。结果光镜下观察到,与对照组相比,各剂量回药爱康方含药血清可使A549细胞有不同程度的胞膜回缩、胞核固缩、细胞间距增大和染色质边缘化现象,其中以爱康方高剂量联合环磷酰胺组作用72h最明显。MTT法检测细胞生长抑制率发现,各实验组各浓度抑制率与相应对照组比较,实验组72h抑制率均高于对照组(P爱康方低、中、高剂量(P爱康方高剂量联合环磷酰胺72h抑制率高于爱康方低剂量联合环磷酰胺和单纯环磷酰胺(P回药爱康方可有效抑制A549细胞生长增殖,并增强环磷酰胺对A549细胞的抑制作用。

关键词：回药爱康方含药血清 A549细胞生长增殖