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从RANK/RANKL/OPG信号通路探讨四仙逐痹汤减轻CIA模型大鼠骨破坏的作用机制

时珍国医国药 2023年第9期34卷 2091-2094页

作者：黄娅琪徐俊谢有琼李柏村胡昭端周晓红赵怡童肖雨杨泽灿彭锐湖北中医药大学湖北武汉430061

目的观察四仙逐痹汤对类风湿关节炎模型大鼠骨破坏的作用,并初步探索其作用机制。方法雄性SD大鼠40只随机分为对照组、模型组、四仙逐痹汤组、甲氨蝶呤组。除对照组外,其余3组均采用牛II型胶原与不完全弗氏佐剂构建CIA大鼠模型,间断性... 详细信息

目的观察四仙逐痹汤对类风湿关节炎模型大鼠骨破坏的作用,并初步探索其作用机制。方法雄性SD大鼠40只随机分为对照组、模型组、四仙逐痹汤组、甲氨蝶呤组。除对照组外,其余3组均采用牛II型胶原与不完全弗氏佐剂构建CIA大鼠模型,间断性进行大鼠关节炎评分及左后足关节肿胀度测量,HE染色法观察大鼠踝关节组织形态学变化,免疫印迹法(WB)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测关节核因子κB受体活化因子(RANK)、核因子-κB配体受体活化剂(RANKL)、骨保护素(OPG)蛋白及mRNA表达水平。结果与模型组相比,四仙逐痹汤组及甲氨蝶呤组大鼠关节炎评分以及关节肿胀度明显改善,炎性细胞数量明显减少,关节破坏减轻;与模型组相比,RANK、RANKL蛋白和mRNA表达下调(P四仙逐痹汤可减轻CIA模型大鼠骨破坏,其机制可能与RANK/RANKL/OPG信号通路相关。

关键词：类风湿关节炎四仙逐痹汤骨破坏核因子κB受体活化因子/核因子-κB配体受体活化剂/骨保护素信号通路

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基于RANK/RANKL/OPG信号通路探讨四仙逐痹汤对CIA模型大鼠骨代谢影响

基于RANK/RANKL/OPG信号通路探讨四仙逐痹汤对CIA模型大鼠骨代谢...

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作者：黄娅琪湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的基于RANK/RANKL/OPG信号通路,探讨四仙逐痹汤调控胶原诱导型关节炎CIA大鼠骨代谢的作用机制。方法40只雄性SD大鼠进行适应性喂养7d后,随机选取30只用于建立CIA大鼠模型,将II型胶原与不完全弗氏佐剂混合均匀后,按0.2ml/只皮内注射乳... 详细信息

目的基于RANK/RANKL/OPG信号通路,探讨四仙逐痹汤调控胶原诱导型关节炎CIA大鼠骨代谢的作用机制。方法40只雄性SD大鼠进行适应性喂养7d后,随机选取30只用于建立CIA大鼠模型,将II型胶原与不完全弗氏佐剂混合均匀后,按0.2ml/只皮内注射乳剂在大鼠尾根基底部建立CIA大鼠模型,7d后按0.1ml/只同样方法进行强化免疫,模型建立后对模型成功与否进行评估,剔除3只不成模大鼠,将其余大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=9)、四仙逐痹汤组(n=9)、甲氨蝶呤组(n=9)。大鼠在造模完成后进行给药干预(记为1d)。按照RA患者临床用量与人鼠体表面积交换算法估算药物用量,分别给予甲氨蝶呤(0.9mg/kg)灌胃甲氨蝶呤组大鼠、四仙逐痹汤(7g/kg)灌胃四仙逐痹汤组大鼠,用生理盐水(1ml/100g)灌胃对照组、模型组大鼠,甲氨蝶呤组每周一次,其余组每天1次,持续用药28 d。给药干预期间,观察并记录大鼠一般情况,每7d进行一次大鼠关节炎评分及左后足关节肿胀度测量。28d后处死大鼠,取左踝关节制成4μl石蜡切片,用HE染色法观察大鼠踝关节病理学变化。冰上取大鼠右踝关节软骨与骨组织保存于-80℃,通过免疫印迹法(WB)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测大鼠右踝关节软骨与骨组织核因子κB受体活化因子(RANK)、核因子-κB配体受体活化剂(RANKL)、骨保护素(OPG)蛋白及mRNA表达水平。结果模型组的大鼠,皮毛暗淡,精神萎靡,活动减少,进食减少,排尿增多,大便干燥,踝关节及足趾关节肿胀发红;对照组的大鼠全身皮毛光亮,精神活动尚可,进食正常、二便正常;四仙逐痹汤和甲氨蝶呤组关节肿胀程度较模型组有改善,进食略有增加,精神略有回转,二便情况略有好转。与对照组相比,模型组大鼠关节炎评分和左后足关节肿胀度明显加重;与模型组相比,四仙逐痹汤组和甲氨蝶呤组大鼠关节炎评分和左后足关节肿胀度均有明显下降。观察左踝关节HE染色切片,对照组大鼠切片可清晰看见踝关节关节腔,关节间隙正常,关节面平整光滑,周围无明显炎性细胞;模型组大鼠可见大量炎性细胞、滑膜组织增生甚至纤维化、关节间隙变窄,关节面凹凸不平,骨面破坏严重;四仙逐痹汤大鼠以及甲氨蝶呤组大鼠HE染色病理情况改善,特别是四仙逐痹汤组大鼠可观察到炎性细胞浸润和软骨骨面破坏明显改善。与对照组相比,模型组大鼠踝关节软骨与骨组织中RANKL、RANK蛋白和mRNA表达水平大幅度升高(P四仙逐痹汤组和甲氨蝶呤组大鼠踝关节软骨与骨组织中RANK、RANKL蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P四仙逐痹汤组大鼠踝关节软骨与骨组织中RANK蛋白表达水平差异无统计学意义,RANKL蛋白表达水平显著下降(P四仙逐痹汤组大鼠踝关节软骨与骨组织中RANK、RANKL mRNA表达水平无明显差异,OPG mRNA表达水平升高(P四仙逐痹汤能改善RA关节症状和骨破坏,其机理可能与上调OPG表达水平,下调RANK、RANKL表达水平,抑制破骨细胞分化相关,达到预防和治疗治RA目的。

关键词：类风湿关节炎四仙逐痹汤骨代谢

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彭锐教授养元通络法治疗类风湿关节炎经验总结

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中国中医骨伤科杂志 2022年第12期30卷 78-79,84页

作者：谢有琼彭锐黄娅琪徐俊湖北中医药大学武汉430061

类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以进行性关节滑膜炎症和骨侵蚀为特征的慢性自身免疫性疾病,可归于中医“痹证”“尪痹”范畴,本病目前尚无根治方法[1],彭锐教授经过多年临床经验,提出“养元通络”[2]的治疗理念,临床中常... 详细信息

类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以进行性关节滑膜炎症和骨侵蚀为特征的慢性自身免疫性疾病,可归于中医“痹证”“尪痹”范畴,本病目前尚无根治方法[1],彭锐教授经过多年临床经验,提出“养元通络”[2]的治疗理念,临床中常以药物配合针灸综合施治,中药以自拟四仙逐痹汤为治疗类风湿关节炎基本方,针灸以“同源点经络刺激疗法”[3]刺激穴位,共同调养脏腑元气,疏通脏腑相关经络.

关键词：养元通络法类风湿关节炎四仙逐痹汤同源点经络刺激

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