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新型淡水微囊藻噬藻体vB_MweS-yong2的分离与基因组分析

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微生物学报 2022年第10期62卷 3784-3800页

作者：王飞潘灵婷钱敏桦蔡汝倩林威洪斌鑫杨佳豪李靓李登峰童贻刚宁波大学海洋学院浙江宁波315000 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029

【目的】蓝藻(cyanobacteria)水华频繁暴发,引起水质恶化,使水生生物大量死亡,给水产养殖业造成巨大的经济损失;其代谢产物藻毒素具有肝毒性、神经毒性、生殖毒性、遗传毒性和肿瘤促进作用,并可在水生生物中富集,造成饮用水安全风险和... 详细信息

【目的】蓝藻(cyanobacteria)水华频繁暴发,引起水质恶化,使水生生物大量死亡,给水产养殖业造成巨大的经济损失;其代谢产物藻毒素具有肝毒性、神经毒性、生殖毒性、遗传毒性和肿瘤促进作用,并可在水生生物中富集,造成饮用水安全风险和水产品食用安全风险。噬藻体(cyanophages)是一类特异性侵染蓝藻的病毒,参与调控蓝藻的种群密度和丰度,被认为是极具潜力的蓝藻水华生物防控工具。以往的研究报道多集中于海水噬藻体,有关淡水噬藻体的报道寥寥无几,迄今尚无惠氏微囊藻(Microcystis wesenbergii)噬藻体的研究报道。本研究的目的在于分离、鉴定惠氏微囊藻噬藻体。【方法】以惠氏微囊藻FACHB-1112为指示宿主,采用双层平板法从淡水中分离出噬藻体vB_MweS-yong2,对其进行全基因组测序、基因功能注释和系统进化分析。【结果】vB_MweS-yong2的基因组长44530 bp,G+C含量为71.6%,有61个开放阅读框(ORF)、1个tRNA基因。成对序列比较(pairwise sequence comparison,PASC)表明,vB_MweS-yong2与所有已知噬菌体间的全基因组核苷酸序列相似度最高只有20.21%,小于噬藻体在基因水平上的安全性。【结论】vB_MweS-yong2在有尾目的长尾科中代表一个新的属。本研究丰富了淡水噬藻体库、基因库,并为以后研发该噬藻体的功能基因、进一步研发用于治理以惠氏微囊藻为优势种引起的水华的产品与技术奠定了基础。

关键词：惠氏微囊藻噬藻体基因组系统进化分析

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云南不同高原湖泊噬藻体psbA基因多样性

微生物学报 2023年第2期63卷 760-774页

作者：赵恒刘玉珊陈彤刘丽昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500

【目的】噬藻体(cyanophage)广泛存在于自然水体生态系统中,通过侵染蓝藻进而调控蓝藻种群及群落结构,具有重要生态功能和生态地位,在控制蓝藻水华方面有巨大开发潜力。本研究旨在探究云南高原湖泊噬藻体psbA基因多样性,分析其系统进化... 详细信息

【目的】噬藻体(cyanophage)广泛存在于自然水体生态系统中,通过侵染蓝藻进而调控蓝藻种群及群落结构,具有重要生态功能和生态地位,在控制蓝藻水华方面有巨大开发潜力。本研究旨在探究云南高原湖泊噬藻体psbA基因多样性,分析其系统进化地位,为深入了解高原湖泊生态功能、开发利用噬藻体资源奠定理论基础。【方法】以云南高原主要湖泊滇池、抚仙湖和星云湖等为研究对象,以psbA基因作为分子靶标,对湖泊水体中噬藻体遗传多样性进行研究。【结果】从不同湖泊中共获得100条环境噬藻体psbA基因序列,系统发育分析表明,湖泊的噬藻体psbA基因序列与中国东湖、中国东北稻田、日本稻田等淡水中的环境噬藻体psbA基因亲缘关系较近,与海洋环境噬藻体psbA基因亲缘关系较远;抚仙湖中的噬藻体psbA基因多样性高于滇池、星云湖和异龙湖中的噬藻体psbA基因多样性;云南高原湖泊中存在新的噬藻体类群;各湖泊秋冬季节噬藻体psbA基因遗传多样性差异不明显。【结论】云南主要高原湖泊噬藻体psbA基因遗传多样性高,与淡水环境噬藻体psbA基因亲缘关系较近,且存在独特的噬藻体类群。

关键词：高原湖泊噬藻体遗传多样性 psbA基因

滇池南部和北部噬藻体群落多样性及其环境因子相关性

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基因组学与应用生物学 2023年第9期42卷 973-985页

作者：杞丽红王子艺肖炜王永霞张仕颖云南农业大学云南省土壤培肥与污染修复工程实验室昆明650201 云南大学生命科学学院云南省微生物研究所昆明650091

噬藻体是一类能特异性感染蓝藻的双链DNA病毒,是水环境浮游病毒的重要组成部分,参与调控藻类群落结构、藻类生理代谢和水圈元素循环等。但目前对淡水湖泊中噬藻体群落结构及其驱动因素的认识很有限。为了解滇池噬藻体种类和数量、不同... 详细信息

噬藻体是一类能特异性感染蓝藻的双链DNA病毒,是水环境浮游病毒的重要组成部分,参与调控藻类群落结构、藻类生理代谢和水圈元素循环等。但目前对淡水湖泊中噬藻体群落结构及其驱动因素的认识很有限。为了解滇池噬藻体种类和数量、不同区域噬藻体群落结构及其驱动因子,本研究采集滇池南部(DCS)、北部(DCN)表层水样,采用克隆文库和PCR技术比较两区域噬藻体多样性和数量,结合相关性分析探究噬藻体群落形成的驱动因子。研究结果显示噬藻体g20基因克隆文库包含182条序列和44个操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)(南部24个,北部20个),南部噬藻体g20基因多样性高于北部的。系统发育分析显示,44个OTU分布在4个簇(α、β、γ和ε)和3个新的亚簇(DC-Ⅰ、DC-Ⅱ和DC-Ⅲ)。文库中仅有1条序列与海洋来源的噬藻体g20基因同源(同源性67.96%),其他序列均与淡水环境中的噬藻体g20基因同源(同源性70.56%~100.00%)。主坐标分析(principal co-ordinates analysis,PCoA)也显示,滇池与其他淡水生境的噬藻体g20基因较相似,而远离海洋噬藻体。相关性分析显示滇池南北两岸噬藻体g20基因多样性主要与pH、叶绿素a呈负相关。滇池噬藻体g91基因拷贝数为4.462×10^(6)~2.596×10^(7)copies/mL,北部噬藻体g91基因拷贝数显著高于南部的,噬藻体g91基因拷贝数与温度、总氮呈负相关。本研究表明滇池的噬藻体比较丰富,且南北两区域噬藻体的多样性与数量存在差异,这些差异与水体pH、叶绿素a、温度、总氮相关。

关键词：滇池噬藻体 g20基因 g91基因环境因子

噬藻体MinS1和YongM基因组分析及定量蛋白质组学分析

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噬藻体MinS1和YongM基因组分析及定量蛋白质组学分析

作者：张珊珊河北师范大学

学位级别：硕士

水体富营养化是全球性的水污染问题,会导致蓝藻的大量繁殖,蓝藻的爆发性生长容易引起湖泊蓝藻水华,其中微囊藻（Microcystis）和念珠藻（Nostoc sp.）是淡水生态系统中最普遍的水华形成的蓝藻。藻华水体的特点是其含有化学多样性很高的... 详细信息

水体富营养化是全球性的水污染问题,会导致蓝藻的大量繁殖,蓝藻的爆发性生长容易引起湖泊蓝藻水华,其中微囊藻（Microcystis）和念珠藻（Nostoc sp.）是淡水生态系统中最普遍的水华形成的蓝藻。藻华水体的特点是其含有化学多样性很高的非核糖体肽（Nonribosomal peptide synthetase,NRPs）,包括肝毒素节球藻素（Hepatotoxin nodularin,NOD）、藻毒素（Cyanotoxin）等,不仅对水生生物产生毒害作用,也会对人类健康及生态系统功能产生不利影响。感染蓝藻的病毒被称为噬藻体（Cyanophage）,可在蓝藻群落的结构、动态、遗传多样性中发挥重要作用,是蓝藻水华的无害生物控制因子,为藻类爆发的生物防治提供了新的可能。与已经被广泛研究的海洋噬菌体相比,淡水噬藻体相关研究还非常有限。目前已报道的噬藻体大多具有很强的宿主特异性、杀藻谱窄、裂解周期长,而水华通常由多种蓝藻混合爆发形成,所以现有噬藻体的应用受到限制。因此筛选获得具有广泛宿主范围的高效广谱噬藻体并研究其特性和侵染机制对水华治理尤为重要,对未来水域环境的保护和防控也具有十分重要的意义。本研究以铜绿微囊藻（Microcystis aeruginosa）FACHB-905藻株为宿主分离出了一株新型广谱烈性淡水噬藻体,命名为Microcystis aeruginosa cyanophage Min S1（简称Min S1）。Min S1包含一个直径约54 nm的二十面体头部和一个260 nm长的非收缩性尾巴。噬藻体Min S1基因组由49966 bp的双链DNA分子组成,与NCBI数据库中已知病毒序列的同源性很低（用Megablast分析时,只有1%的基因组与已知的噬菌体显示出弱同源性）。该噬藻体含有75个开放阅读框（Open reading frame,ORF）,其中23个ORFs被预测为编码已知功能的蛋白质,39个ORFs编码未知功能的蛋白质,13个ORFs与任何序列都没有相似性。透射电子显微镜和系统发育分析表明,Min S1属于长尾病毒科（Siphoviridae）家族。实验证实,该噬藻体可以感染几种不同目的藻类,包括色球藻目（Chroococcales）、念珠藻目（Nostocales）、颤藻目（Oscillatoriales）、段殖藻目（Hormogonales）和聚球藻目（Synechococcales）,这表明它有非常广泛的宿主范围。此外,Min S1没有已知的抗生素耐受基因、毒力基因、t RNAs并对温度、p H值、紫外线、盐度及金属离子均具有一定的耐受性,这表明Min S1具有良好的应用潜力,可以作为一种生物控制剂来对抗蓝藻水华。Nostoc cyanophage Yong M（Yong M）是以念珠藻FACHB-596藻株为宿主藻分离出的一株新型高效念珠藻噬藻体,其对宿主念珠藻FACHB-596藻株具有很高的杀伤效率。然而,在侵染和杀死宿主的过程中,宿主藻的蛋白变化仍然是未知的。为了确定被Yong M侵染裂解的宿主蓝藻的蛋白质及其调控网络的特征并评估该株噬藻体Yong M是否可以作为对抗蓝藻水华的有力工具的底盘病毒,本研究首次应用非标高通量定量蛋白质组学和生物信息学方法对强裂解性新型噬藻体Yong M侵染1 h和8 h后的宿主藻株的差异表达蛋白（Differentially expressed proteins,DEPs）进行了分析。研究发现光合作用、光合作用-天线蛋白、氧化磷酸化、核糖体、碳固定和糖酵解/糖异生等代谢途径在被感染的宿主中发生了显著改变,而DEPs主要与光合作用、前体代谢物、能量生产、有机氮化合物等代谢过程相关。此外,在这些DEPs中参与Yong M-宿主相互作用的关键蛋白是光系统I P700叶绿素a载脂蛋白（Photosystem I P700 chlorophyll a apoprotein）、二氧化碳浓缩机制蛋白（Carbon dioxide concentrating mechanism protein）、细胞色素B（Cytochrome b）和一些Yong M侵染裂解相关酶,这些酶可能作为Yong M与宿主互作机制研究的靶点。该研究提供了蛋白质组水平上有关噬藻体与宿主蓝藻相互作用的新信息,扩展了噬藻体的多样性及噬藻体生物学特性等相关知识,为开发新的预防、控制蓝藻水华的措施提供了有利信息,这可能对未来设计和操纵人工超级噬藻体来对抗蓝藻水华有所启示。

关键词：噬藻体蓝藻基因组分析生物学特性定量蛋白质组学

两株新型高效噬藻体的分离鉴定、基因组学分析和生物学特性研究

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两株新型高效噬藻体的分离鉴定、基因组学分析和生物学特性研究

作者：贺晓琪北京化工大学

学位级别：硕士

目的蓝藻的季节性爆发形成水华现象,破坏生态平衡,威胁人类生存。传统治理方法收效甚微,人们不断寻求生物友好的新型治理方案,噬藻体治理蓝藻便是其中之一。通过筛选以引起水华的常见蓝藻为宿主的噬藻体,分析其基因组学信息和生物学特性... 详细信息

目的蓝藻的季节性爆发形成水华现象,破坏生态平衡,威胁人类生存。传统治理方法收效甚微,人们不断寻求生物友好的新型治理方案,噬藻体治理蓝藻便是其中之一。通过筛选以引起水华的常见蓝藻为宿主的噬藻体,分析其基因组学信息和生物学特性,为其应用于水华治理提供理论支持。方法通过富集、筛选、纯化等流程从各地水样中分离能够有效裂解蓝藻的噬藻体;通过二代测序和透射电镜鉴定噬藻体基因序列及病毒形态;通过基因组注释和系统发生树构建分析噬藻体蛋白功能及进化关系;通过同源基因组比对解释生物学特性和基因组序列相关性;通过点斑法或液体感染法研究噬藻体宿主范围,通过MOI及一步生长曲线探究噬藻体裂解能力等。结果本研究以鲍氏织线藻FACHB-240作为宿主分离出一株有快速裂解效果的鲍氏织线藻噬藻体Plectonema phage Jing P1(简称Jing P1,Gen Bank登录号:ON677538),电镜结果显示其为短尾噬藻体;基因组全长40,797 bp,G+C含量为52.25%,编码49个ORFs,可分为复制、包装、裂解、结构以及未知功能等5个模块。BLAST及系统发生树结果显示Jing P1与淡水噬藻体Phormidium phage Pf-WMP4存在37%的同源性,二者功能蛋白序列及生物学特性有所相似。Jing P1可裂解包括两株鲍氏织线藻在内的四株蓝藻,其最佳MOI为1,潜伏期约5 h,最高滴度为1.02×10PFU/m L,爆发量为50 PFU/cell。向混合藻体系中加入Jing P1进行锦鲫的动物保护实验,杀藻效果好,保护效果不佳。本研究以聚球藻FACHB-805作为宿主分离出一株广谱的聚球藻噬藻体Synechococcus cyanophage Min M2(简称Min M2,Gen Bank登录号:OQ594354),电镜结果显示其为肌尾噬藻体;基因组全长65,014 bp,G+C含量为68.85%,编码102个ORFs,可分为DNA复制及代谢、包装、裂解、结构、调节以及未知功能等6个模块,其中含有多个DNA修复相关蛋白。Min M2可以裂解来自三个目的共17个藻种(44.7%),具有广谱裂解性。其最佳感染复数为MOI=1,最高可以达到1.99×10PFU/m L的滴度。Min M2的潜伏期约为32 h,爆发量可达到302 PFU/cell。结论本实验分离出具有快速裂解能力的噬藻体Jing P1和具有广谱裂解性的噬藻体Min M2,二者在杀灭蓝藻方面特点突出,有较高的应用潜力和实用价值,希望对实现噬藻体治理水华有所助益。

关键词：有害蓝藻水华噬藻体生物学特性

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大庆湿地水体蓝藻及其噬藻体多样性研究

大庆湿地水体蓝藻及其噬藻体多样性研究

作者：卫佳琪黑龙江八一农垦大学

学位级别：硕士

蓝藻是一类光合自养的原核生物,是生态系统的初级生产者,噬藻体是一类专一性侵染蓝藻的病毒,二者均广泛分布在地球的各种生境中。为了探究大庆湿地水体中噬藻体及蓝藻的遗传多样性,采用PCR-克隆测序技术对编码T4型噬藻体衣壳组装蛋白g2... 详细信息

蓝藻是一类光合自养的原核生物,是生态系统的初级生产者,噬藻体是一类专一性侵染蓝藻的病毒,二者均广泛分布在地球的各种生境中。为了探究大庆湿地水体中噬藻体及蓝藻的遗传多样性,采用PCR-克隆测序技术对编码T4型噬藻体衣壳组装蛋白g20基因和噬藻体光合系统Ⅱ反应中心蛋白D1亚基psb A基因的多样性进行研究;采用高通量测序技术解析大庆湿地水体蓝藻遗传多样性;采用传统分离纯化方法获得大庆湿地水体中蓝藻和噬藻体,明确噬藻体的生物学特性,挖掘大庆湿地水体中蓝藻和噬藻体的种质资源,主要结果如下:(1)采用简并性引物CPS1.1/CPS8.1,对大庆湿地水体病毒组分的DNA进行PCR扩增-克隆测序,共获得噬藻体g20基因序列130条,同源序列相似性在63.74～100%之间。将本研究获得的g20基因序列与不同生境中(海洋、淡水湖泊和稻田)的肌尾噬藻体g20基因进行系统发育分析,发现大庆湿地的g20基因序列形成4个特有的类群(g20-DWW-Ⅰ～DWW-Ⅳ)。非度量多维尺度(NMDS)分析发现,大庆湿地水体中噬藻体g20基因集群存在地域和时间差异;黎明湖与淡水湖泊及稻田生境中噬藻体g20基因集群亲缘关系较近,与海洋中的亲缘关系较远,万宝湖和扎龙湿地与其他生境中噬藻体g20基因集群均较远。(2)采用简并性引物psbA-F/psbA-R,对大庆湿地水体中病毒组分的DNA进行PCR扩增-克隆测序,共获得86条psbA基因序列,结合GC含量、三肽元件及系统发育分析,确认其中68条psb A序列为噬藻体来源,且存在两个特有的类群(psb A-DWW-I和psb ADWW-II)。非度量多维尺度(NMDS)分析发现,大庆湿地水体中psb A基因集群与稻田中psb A基因集群更为相近,与湖泊中psb A基因集群相比,与海洋中psb A基因集群相对较远。(3)大庆湿地水体中的蓝藻多样性采用高通量测序技术进行调查,发现扎龙湿地蓝藻的多样性显著高于黎明湖和万宝湖,6个样点的群落多样性为ZLW-Jun最高,LWB-Jun最低;除LWB-Jun外的其余5个样点均以Cyanobium PCC-6307为优势菌属;蓝藻群落组成因时间和取样点的不同存在差异。(4)采用富集分离法,共获得4株单株可培养的丝状蓝藻,经显微观察及16S rRNA基因鉴定,3株属于盖丝藻(相似性为99.70%),1株属于席藻(相似性为96.84%)。(5)采用双层平板法从大庆湿地水体中以鱼腥藻为宿主获得4株纯化噬藻体,电镜观察均属于短尾噬藻体。其生物学特性研究表明,噬藻体在温度高于50℃时失活;在p H中性(7-8)条件下病毒活性最高;在紫外灯下照射6min失去90%以上活性;分别在不同温度(4℃、-20℃及-80℃)加保护剂条件下进行保藏,噬藻体活性在短期内保持不变。综上所述,大庆湿地水体存在着新的噬藻体和蓝藻,仍需继续挖掘湿地水体中蓝藻及其噬藻体的种质资源,为蓝藻与噬藻体间的生态关系提供基础资料。

关键词：噬藻体蓝藻大庆湿地多样性群落结构

新型噬藻体的生物学特性、基因组学及蛋白组学分析

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新型噬藻体的生物学特性、基因组学及蛋白组学分析

作者：成冬晓北京化工大学

学位级别：硕士

目前国内蓝藻水华现象严重,噬藻体防治是治理蓝藻水华的生物方法之一。本研究分离得到一株新型微囊藻噬藻体MJing1和一株新型念珠藻噬藻体NMeng1。MJing1具有裂解广谱性,其对9株蓝藻具有裂解作用,其中7株属于微囊藻目,1株属于束丝藻目,... 详细信息

目前国内蓝藻水华现象严重,噬藻体防治是治理蓝藻水华的生物方法之一。本研究分离得到一株新型微囊藻噬藻体MJing1和一株新型念珠藻噬藻体NMeng1。MJing1具有裂解广谱性,其对9株蓝藻具有裂解作用,其中7株属于微囊藻目,1株属于束丝藻目,1株属于鱼腥藻目;该噬藻体基因组为双链DNA,全长42070 bp,透射电镜结果显示MJing1具有正二十面体头部,头部直径约为59 nm,尾部约为12 nm,属于短尾型噬藻体。NMeng1能够高效裂解宿主,一步生长曲线结果显示NMeng1潜伏期约为24 h,之后进入裂解期,在48 h左右进入平台期,其爆发量约为67 PFU/cell;NMeng1基因组也是双链DNA,全长44509bp;透射电镜结果显示其头部正二十面体对称,直径约为83 nm,基因组注释结果显示其编码尾丝蛋白相关基因,但透射电镜下未观察到其亚末端尾纤维,提示NMeng1属于Podoviruses噬藻体。本研究以广谱噬藻体MJing1为研究对象,研究其裂解宿主的作用机制,通过非标定量法测定微囊藻FACHB-915被MJing1侵染前后的蛋白变化,发现共有805个蛋白显著差异表达,GO分类和KEGG通路显示,MJing1侵染宿主后,在蛋白质水平上宿主藻的呼吸作用、光合作用以及宿主藻自身防御功能减弱,宿主RNA的结合催化以及金属簇结合相关的功能蛋白上调,促进宿主死亡,有利于噬藻体相关蛋白的转录,促进其合成、组装及释放。

关键词：噬藻体蓝藻生物学特性基因组学分析蛋白质组学分析

肌尾噬藻体Pam3尾丝蛋白gp24及其分子伴侣gp25的结构研究

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肌尾噬藻体Pam3尾丝蛋白gp24及其分子伴侣gp25的结构研究

作者：魏紫露中国科学技术大学

学位级别：硕士

尾丝是肌尾噬菌体用于识别并结合宿主表面受体、起始侵染的重要装置。尾丝的正确折叠和组装通常需要特定的分子伴侣——尾丝组装蛋白(tail fiber assembly protein,TFA)的协助,例如T4噬菌体的尾丝蛋白gp37和gp12三聚体的正确折叠和组装... 详细信息

尾丝是肌尾噬菌体用于识别并结合宿主表面受体、起始侵染的重要装置。尾丝的正确折叠和组装通常需要特定的分子伴侣——尾丝组装蛋白(tail fiber assembly protein,TFA)的协助,例如T4噬菌体的尾丝蛋白gp37和gp12三聚体的正确折叠和组装需要分子伴侣gp57a和gp38的协助。尽管TFAs广泛存在于各种噬菌体中,但TFA的三维结构及其促进尾丝组装的分子机理仍不清楚。本文解析了一种简化的肌尾噬菌体尾丝与其分子伴侣的复合物结构,并由此推测了分子伴侣协助尾丝组装的分子机制。本课题组前期从巢湖分离得到一株特异侵染伪鱼腥藻Chao 1806的肌尾噬藻体,命名为Pam3。通过基因组分析,推测Pam3的尾丝仅由gp24一种蛋白组成,gp25可能为gp24组装的分子伴侣。大肠杆菌体外共表达gp24-gp25表明gp25能促进gp24组装成三聚体,并与之形成稳定的3:3的复合物。我们通过冷冻电镜单颗粒技术解析了 gp24-gp25的复合物结构,整体分辨率为3.1 (?)。结构分析可知,gp24单体由α-helical、TNF-like与glycine-rich三个结构域组成,其中N端的α-helical结构域形成螺旋束促进gp24三聚体结构的稳定;中间的TNF-like结构域为两个平行排列的β-折叠片,并向外延伸形成glycine-rich结构域。该结构域内含12个甘氨酸富集基序(glycine-richmotif,GRM),相邻GRM之间通过广泛的氢键网络维持glycine-rich结构域的紧凑结构,并形成了较为规则的四层loop排列。gp25单体由N端的β-sandwich和C端的α-helical两个结构域组成。其中α-helical结构域相互交错形成螺旋束结构并介导三聚体的形成,封闭了 gp24的glycine-rich结构域上的宿主识别位点。gp25的β-sandwich结构域通过氢键和疏水作用与gp24的TNF-like和glycine-rich结构域的外侧结合,进一步提高了gp24的结构稳定性。基于复合物的结构分析,我们提出分子伴侣协助尾丝蛋白折叠和组装的分子机理,为噬菌体尾丝的体外组装和改造以及人工噬藻体的合成提供了结构支持。

关键词：噬藻体冷冻电镜尾丝蛋白分子伴侣

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营养条件对噬藻体PP感染席藻动力学的影响

应用生态学报 2016年第4期27卷 1271-1276页

作者：尚时雨马慧赵以军程凯湖北工业大学资源与环境工程学院河湖生态修复与藻类利用湖北省重点实验室武汉430068

本试验设计了从正常的AA培养基(CK组)到N和P含量只有正常AA培养基1/600的6种培养基.在25℃、2000 lx条件下将宿主席藻在6种培养基中培养8个月后,用显微直接计数法测定了席藻的生长曲线以及噬藻体PP感染宿主席藻的裂解周期与致死率,用离... 详细信息

本试验设计了从正常的AA培养基(CK组)到N和P含量只有正常AA培养基1/600的6种培养基.在25℃、2000 lx条件下将宿主席藻在6种培养基中培养8个月后,用显微直接计数法测定了席藻的生长曲线以及噬藻体PP感染宿主席藻的裂解周期与致死率,用离心法测定了噬藻体PP对宿主席藻的吸附率,用一步生长曲线法测定了噬藻体PP的释放量和裂解周期.结果表明:提高N和P含量会促进宿主席藻的生长,统计分析也显示,在对数中期(第6天),高营养盐浓度中细胞密度显著高于低营养盐浓度中的密度;提高营养盐浓度噬藻体PP的吸附率会显著增高,主要表现为在AA中噬藻体PP的吸附率极显著高于其他组;同时6种培养基条件下噬藻体PP对席藻的致死率变化不大;随着营养水平的升高,噬藻体PP的潜伏期和裂解周期明显缩短,平均释放量显著增加,但裂解宿主的效率却没有显著变化.上述结果说明噬藻体PP对宿主藻的感染力会随着营养水平的提高而明显增强,并可能在水体富营养化进程中发挥着调控藻类种群更替的作用.

关键词：营养盐浓度噬藻体吸附率裂解周期释放量致死率