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用噬菌体随机肽库筛选SARS冠状病毒S蛋白单克隆抗体2C5的模拟表位

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生物工程学报 2006年第5期22卷 701-706页

作者：华荣虹吴东来童光志王云峰田志军周艳君中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

SARS-CoVS蛋白特异的单克隆抗体2C5具有病毒中和作用。以单克隆抗体2C5为筛选靶分子,筛选噬菌体展示随机7肽库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10个ELISAOD值大于0.2的阳性噬菌体克隆中,有8个噬菌体克... 详细信息

SARS-CoVS蛋白特异的单克隆抗体2C5具有病毒中和作用。以单克隆抗体2C5为筛选靶分子,筛选噬菌体展示随机7肽库。经三轮淘洗后随机挑选20个噬菌体克隆进行ELISA分析和序列测定。在10个ELISAOD值大于0.2的阳性噬菌体克隆中,有8个噬菌体克隆展示有共同的7肽序列TPEQQFT。展示有该序列的噬菌体克隆能竞争抑制SARS-CoVS蛋白抗原与单抗2C5的结合。结果表明TPEQQFT为单克隆抗体2C5的模拟表位。该结果可对进一步研究S蛋白结构与功能和设计SARS疫苗有一定的参考意义。

关键词： SARS冠状病毒(SARS-CoV) S蛋白单克隆抗体噬菌体随机肽库模拟表位

应用噬菌体随机肽库技术研究干扰素-α2b抗原表位

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 578-582页

作者：田旺李正赫曹学琳杨文博白钢南开大学生命科学学院天津华利达生物工程有限公司

目的应用噬菌体随机肽库技术,研究干扰素-α2b高抗原性表位。方法利用结合有干扰素-α2b多克隆抗体的免疫磁性微球,对噬菌体随机肽库进行生物淘筛,以ELISA方法鉴定阳性克隆。阳性克隆测序后与干扰素氨基酸序列进行了同源性分析,研究干扰... 详细信息

目的应用噬菌体随机肽库技术,研究干扰素-α2b高抗原性表位。方法利用结合有干扰素-α2b多克隆抗体的免疫磁性微球,对噬菌体随机肽库进行生物淘筛,以ELISA方法鉴定阳性克隆。阳性克隆测序后与干扰素氨基酸序列进行了同源性分析,研究干扰素-α2b分子中高抗原性表位。结果经4轮淘筛后噬菌体克隆的阳性率为57.6%,据随机挑选的12个阳性克隆的同源性分析结果将其分为3组,分别对应干扰素-α2b3个高抗原性表位与预测的结果吻合,其中第2组与干扰素受体结合区AB环接近。结论利用噬菌体随机肽库技术,成功筛选出3个与抗原性预测相符合的干扰素-α2b抗原表位,为研究干扰素分子的作用机理、制备抗特定表位的单克隆抗体以及设计和开发干扰素的小分子模拟肽奠定了基础。

关键词：噬菌体随机肽库免疫磁性微球抗原表位干扰素-α2b 噬菌体随机肽库技术 ELISA方法多克隆抗体同源性分析阳性克隆氨基酸序列

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从噬菌体随机肽库筛选CD137结合肽

中华微生物学和免疫学杂志 2005年第12期25卷 974-978页

作者：李娜张利宁王群刘成虎王晓燕山东大学医学院免疫学研究所济南250012

目的应用噬菌体随机七肽库筛选与人CD137特异结合的肽序列。方法以重组人CD137作为筛选分子,对噬菌体展示随机七肽库进行亲和淘选。经过5轮淘选后,共随机挑选23个噬菌斑并对其进行了扩增和测序,据此推导随机多肽的氨基酸序列。经夹心EL... 详细信息

目的应用噬菌体随机七肽库筛选与人CD137特异结合的肽序列。方法以重组人CD137作为筛选分子,对噬菌体展示随机七肽库进行亲和淘选。经过5轮淘选后,共随机挑选23个噬菌斑并对其进行了扩增和测序,据此推导随机多肽的氨基酸序列。经夹心ELISA进一步鉴定噬菌体克隆与CD137的结合力。3H-TdR法检测了噬菌体展示多肽对抗CD137Ab刺激的人外周血淋巴细胞增殖反应影响。结果5轮淘选所得的噬菌体回收率逐步提高,显示淘选过程对随机肽库有一定的富集效果。通过对阳性克隆的测序和序列比较分析,得到RPTQGAF、RPTQVAL、RPTQVAF的相似序列和与CD137L具有同源SRS序列的SRSRVRY、HRRPSRS肽序列,ELISA结果显示这5个克隆都有良好的与CD137的结合力。RPTQGAF、RPTQVAL、RPTQVAF和SRSRVRY4个噬菌体展示肽均能在体外抑制抗CD137Ab刺激的淋巴细胞增殖反应。结论通过对噬菌体随机肽库的淘选,得到与CD137结合的相关多肽,为进一步研究CD137与配体结合的特异性位点及其拮抗性多肽药物设计提供了实验依据和结构基础。

关键词： CD137 噬菌体随机肽库

从噬菌体随机七肽库中筛选抗H3N2亚型犬流感病毒多肽的研究

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华南农业大学学报 2015年第5期36卷 12-17页

作者：叶存栋胡静思贾坤李陆涛刘荣昌涂黎晴孙凌霜李守军华南农业大学兽医学院广东广州510642 华南农业大学广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室广东广州510642

【目的】以纯化的H3N2亚型犬流感病毒HA1蛋白为作用靶点,从噬菌体随机七肽库中筛选出具有抗流感病毒活性的亲和多肽.【方法】运用噬菌体展示技术,以纯化的H3N2亚型犬流感病毒HA1蛋白为作用靶点,从噬菌体随机七肽库中筛选HA1蛋白亲和多肽... 详细信息

【目的】以纯化的H3N2亚型犬流感病毒HA1蛋白为作用靶点,从噬菌体随机七肽库中筛选出具有抗流感病毒活性的亲和多肽.【方法】运用噬菌体展示技术,以纯化的H3N2亚型犬流感病毒HA1蛋白为作用靶点,从噬菌体随机七肽库中筛选HA1蛋白亲和多肽,并对获得的多肽进行鸡胚水平和细胞水平抗H3N2亚型流感病毒活性验证.【结果和结论】经过4轮体外亲和筛选获得了6条HA1蛋白亲和多肽,6条多肽对H3N2亚型流感病毒有不同程度的抗病毒活性,其中以HA-4的抗病毒活性最强.试验结果表明噬菌体随机肽库技术能够应用于抗病毒研究.

关键词：犬流感病毒 H3N2亚型血凝素HA1亲和肽噬菌体随机肽库抗病毒多肽

利用噬菌体随机肽库对神经胶质瘤母系SWO-38进行全细胞筛选

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中国病理生理杂志 2002年第8期18卷 946-948页

作者：高双荣钟雪云颜艳灵钟振宇秦艳芳孙艳花王冰于莉娜钟瑛暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632

目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用... 详细信息

目的和方法 :用噬菌体随机 7肽库对神经胶质瘤母细胞 (SWO - 38)进行全细胞筛选 ,并通过竞争结合实验检验所筛选出的克隆的结合特异性。结果 :经过 3轮“吸附 -洗脱 -扩增” ,噬菌体高度富集 ,并得到两个特异性较强的克隆。结论 :利用噬菌体肽库可以简便。

关键词：噬菌体随机肽库全细胞筛选噬菌体神经胶质瘤肿瘤导向治疗

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用强直性脊柱炎患者血清筛选噬菌体随机肽库

中国免疫学杂志 2009年第9期25卷 844-847页

作者：王敏李先平周勇曹虹何斌郑荣姚冬梅中南大学湘雅二医院检验科长沙410011 中南大学湘雅医学院医学检验系2003级长沙410013

目的:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中免疫筛选出能与强直性脊柱炎患者血清特异性结合的抗原模拟肽。方法:首先用正常人纯化血清免疫球蛋白IgG作为固相配基吸附非特异性噬菌体,然后以纯化强直性脊柱炎患者血清免... 详细信息

目的:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中免疫筛选出能与强直性脊柱炎患者血清特异性结合的抗原模拟肽。方法:首先用正常人纯化血清免疫球蛋白IgG作为固相配基吸附非特异性噬菌体,然后以纯化强直性脊柱炎患者血清免疫球蛋白IgG包被,按吸附-洗脱-扩增的淘洗过程对上述处理过的噬菌体液进行3轮筛选,随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,并对部分克隆进行测序。用ELISA方法初步观察阳性克隆的诊断价值。结果:3轮筛选的投入产出比逐轮升高,提示具有良好的富集效果。对从第3轮洗脱物中挑选出的20个克隆进行结合试验,发现17个克隆与强直性脊柱炎患者纯化血清IgG特异性结合。其中7个克隆测序表明,7个克隆源于同一克隆,其外源插入肽为LALPPLAPN-HHH。该阳性克隆对50例强直性脊柱炎患者血清的检出率为92.0%,但该克隆对正常人血清亦有14.0%的阳性率。结论:用纯化的强直性脊柱炎患者血清IgG从噬菌体随机12肽库中筛选到具有一定生物学功能的抗原模拟肽。

关键词：噬菌体随机肽库强直性脊柱炎血清标志物

应用噬菌体随机肽库研究抗溶藻弧菌及其外膜蛋白单抗识别的特异性表位

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中山大学学报（自然科学版） 2006年第5期45卷 67-70页

作者：黄志坚何建国中山大学生命科学学院广东广州510275

用噬菌体随机七肽库筛选制备的抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的纯化单抗,经3轮淘洗,获得较高程度富集的噬菌体,效价较高,第3轮淘洗比第1轮淘洗的产量高出近百倍。同时获得的阳性噬菌体经ELISA检测能与Va抗原发生强的阳性反应,确证了淘洗筛选... 详细信息

用噬菌体随机七肽库筛选制备的抗溶藻弧菌及其外膜蛋白的纯化单抗,经3轮淘洗,获得较高程度富集的噬菌体,效价较高,第3轮淘洗比第1轮淘洗的产量高出近百倍。同时获得的阳性噬菌体经ELISA检测能与Va抗原发生强的阳性反应,确证了淘洗筛选的结果。

关键词：噬菌体随机肽库溶藻弧菌外膜蛋白单克隆抗体表位

利用噬菌体随机肽库筛选抗原模拟表位的研究进展

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河南农业科学 2012年第10期41卷 14-18页

作者：裴亚峰胡骁飞王耀侯玉泽张改平邓瑞广河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南郑州450002 河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003

噬菌体随机肽库技术是将编码外源多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白结构基因的表达而表达,被展示的外源多肽可保持相对独立的空间结构和生物活性,是一种基因型与表达型的统一。近年来,噬菌体... 详细信息

噬菌体随机肽库技术是将编码外源多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白结构基因的表达而表达,被展示的外源多肽可保持相对独立的空间结构和生物活性,是一种基因型与表达型的统一。近年来,噬菌体随机肽库技术被广泛应用于各种抗原的模拟表位筛选中,并取得了显著成果。综述了利用噬菌体随机肽库技术在抗原模拟表位筛选中的研究进展。

关键词：噬菌体随机肽库噬菌体展示技术模拟表位抗原

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噬菌体随机肽库技术及其应用

热带医学杂志 2006年第4期6卷 463-466页

作者：杨海燕李妍董文其南方医科大学生物技术学院广州510515

噬菌体随机肽库是噬菌体呈现技术的重要分支,是应用噬菌体表面呈现技术将外源编码多肽基因随机克隆入噬菌体载体中而构建的噬菌体肽库。近年来,噬菌体随机肽库已成功地应用于基因治疗、表位研究、细胞信号传导与药物开发、寄生虫病研究... 详细信息

噬菌体随机肽库是噬菌体呈现技术的重要分支,是应用噬菌体表面呈现技术将外源编码多肽基因随机克隆入噬菌体载体中而构建的噬菌体肽库。近年来,噬菌体随机肽库已成功地应用于基因治疗、表位研究、细胞信号传导与药物开发、寄生虫病研究、肿瘤导向治疗等领域,显示了广阔的应用前景。本文就针对以上几个方面做一综述。

关键词：噬菌体随机肽库构建表位