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促红细胞生成素对急性肾损伤中干细胞因子及其受体表达的影响

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中国组织工程研究 2013年第53期17卷 9203-9208页

作者：王庆霞李洪杰刘雪梅徐岩青岛大学医学院附属医院肾内科山东省青岛市266071

背景:细胞因子在减轻肾脏缺血再灌注损伤中的作用日益受到重视,干细胞因子具有造血系统以外的器官保护作用。目的:探讨大鼠急性肾损伤模型中干细胞因子及其受体c-Kit表达的变化和促红细胞生成素预处理对其表达的影响。方法:成年雄性Wis... 详细信息

背景:细胞因子在减轻肾脏缺血再灌注损伤中的作用日益受到重视,干细胞因子具有造血系统以外的器官保护作用。目的:探讨大鼠急性肾损伤模型中干细胞因子及其受体c-Kit表达的变化和促红细胞生成素预处理对其表达的影响。方法:成年雄性Wistar大鼠34只,采用夹闭双侧肾蒂建立缺血再灌注模型,缺血45 min后再灌注24 h,随机分为假手术组(n=10)、缺血再灌注组(n=12)和促红细胞生成素组(n=12),促红细胞生成素组于造模前2 h一次性尾静脉注射重组人促红细胞生成素5 000 U/kg。免疫组化及图像分析技术检测各组肾组织中干细胞因子及c-Kit的表达变化,测定血清肌酐和尿素氮水平,苏木精-伊红染色观察肾组织病理学改变并计算肾小管损伤积分。结果与结论:干细胞因子及c-Kit在肾组织中的表达仅限于肾小管区域。与假手术组比较,干细胞因子和c-Kit在缺血再灌注组和促红细胞生成素组的表达均明显增高(P0.05);促红细胞生成素组血清肌酐与尿素氮水平明显低于缺血再灌注组(P<0.05),但高于假手术组(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,促红细胞生成素组肾组织病变减轻。说明缺血再灌注导致急性肾损伤发生时干细胞因子及c-Kit表达升高,而促红细胞生成素对急性肾损伤的保护作用可能与上调干细胞因子及c-Kit表达有关。

关键词：器官移植器官移植基础实验干细胞干细胞因子急性肾损伤促红细胞生成素细胞因子 c-Kit

链脲佐菌素对1型糖尿病小型猪肝肾功能的影响

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中国组织工程研究 2013年第18期17卷 3366-3373页

作者：田忠崔永春李凯李巨波王坤唐跃中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市100037

背景:高剂量链脲佐菌素建立小型猪1型糖尿病模型是目前国内外公认的方法,但其对实验动物肝肾功能有何影响?目的:观察高剂量链脲佐菌素建立小型猪1型糖尿病模型对其肝肾功能的影响。方法:将巴马小型猪随机分为对照组和模型组。分别在耳... 详细信息

背景:高剂量链脲佐菌素建立小型猪1型糖尿病模型是目前国内外公认的方法,但其对实验动物肝肾功能有何影响?目的:观察高剂量链脲佐菌素建立小型猪1型糖尿病模型对其肝肾功能的影响。方法:将巴马小型猪随机分为对照组和模型组。分别在耳缘静脉注射柠檬酸钠溶液或链脲佐菌素溶液前、后10min,30min,1h,2h,4h,1d,3d和7d各静脉采血1次,动态监测空腹血糖、C肽和胰岛素水平,检查肝肾功能,通过westernblot法检测猪胰腺、肝脏、肾脏葡萄糖转运蛋白2的表达水平。结果与结论:给药后24h开始,模型组空腹血糖明显升高并始终维持在17.7-20.1mmol/L的浓度范围,C肽和胰岛素水平显著降低。与给药前相比,模型组肝肾功能血液指标中总蛋白、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和肌酐均无明显改变;尿素氮和白蛋白虽略有降低,但尚未达到显著性水平;血尿酸水平明显降低(P<0.05)。Westernblot结果表明,与对照组比较,模型组胰腺、肝和肾小管基底膜细胞葡萄糖转运蛋白2的表达均显著减少。证实,一次性注射高剂量链脲佐菌素可成功建立1型糖尿病小型猪模型,且对模型猪的肝肾功能无显著影响。

关键词：器官移植器官移植基础实验糖尿病 1型糖尿病葡萄糖转运蛋白2 小型猪肝肾功能省级基金

紫癜性肾炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3和4的信号转导途径

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中国组织工程研究 2013年第53期17卷 9182-9188页

作者：付元刘秀琴程娜张守青常红张秋业陈秀霞高兴娟青岛大学医学院附属医院儿内科山东省青岛市266003 青岛市市立医院儿内科山东省青岛市266003 烟台市毓璜顶医院儿内科山东省烟台市264000

背景:目前关于Toll样受体3和Toll样受体4介导的信号转导通路在紫癜性肾炎的发病机制中的作用尚不清楚。目的:分析Toll样受体3和Toll样受体4在过敏性紫癜和紫癜性肾炎发病机制中的作用。方法:选取过敏性紫癜患儿64例,分为过敏性紫癜无肾... 详细信息

背景:目前关于Toll样受体3和Toll样受体4介导的信号转导通路在紫癜性肾炎的发病机制中的作用尚不清楚。目的:分析Toll样受体3和Toll样受体4在过敏性紫癜和紫癜性肾炎发病机制中的作用。方法:选取过敏性紫癜患儿64例,分为过敏性紫癜无肾损害组36例及过敏性紫癜性肾炎组28例,另选健康儿童30例作为正常对照组。实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞Toll样受体3、Toll样受体4、髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素12 mRNA的基因相对表达量;应用流式细胞术检测外周血单核细胞Toll样受体3、Toll样受体4蛋白表达率。结果与结论:①过敏性紫癜患儿Toll样受体4 mRNA及蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.05)。紫癜性肾炎组Toll样受体4 mRNA及蛋白表达均显著高于紫癜无肾损害组(P<0.05)。②过敏性紫癜组髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6 mRNA的表达均显著高于正常对照组(P<0.05),白细胞介素12 mRNA的表达显著低于正常对照组(P<0.05);紫癜性肾炎组髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6 mRNA的表达显著高于紫癜无肾损害组(P<0.05),紫癜性肾炎组白细胞介素12 mRNA的表达显著低于紫癜无肾损害组(P<0.05)。③过敏性紫癜组患儿外周血单核细胞Toll样受体4 mRNA与蛋白表达呈正相关(r=0.60,P<0.01);过敏性紫癜患儿Toll样受体4 mRNA与髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6表达均呈正相关(P<0.01),与白细胞介素12 mRNA表达呈负相关(r=-0.66,P<0.01)。提示Toll样受体4可能通过髓样细胞分化因子88依赖信号转导途径介导过敏性紫癜的免疫发病机制,Toll样受体4的过度活化可能与过敏性紫癜的肾损伤有关。

关键词：器官移植器官移植基础实验过敏性紫癜紫癜性肾炎单个核细胞 Toll样受体3 Toll样受体4 髓样细胞分化因子88 髓样分化蛋白2 白细胞介素类省级基金

半永久双腔中心静脉导管维持性血液透析患者的微炎症状态

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中国组织工程研究 2013年第5期17卷 913-919页

作者：张晓东李小萍宋洁李瑛李辉武警后勤学院附属医院肾脏病科天津市300162 武警医学编辑部北京市100039

背景:半永久性双腔中心静脉导管作为自体动静脉内瘘的重要补充形式在维持性血液透析患者中应用日益广泛,但有研究发现,将半永久性双腔中心静脉导管作为血液透析血管通路患者的死亡率高于使用自体动静脉内瘘者,原因尚未完全明确。目前不... 详细信息

背景:半永久性双腔中心静脉导管作为自体动静脉内瘘的重要补充形式在维持性血液透析患者中应用日益广泛,但有研究发现,将半永久性双腔中心静脉导管作为血液透析血管通路患者的死亡率高于使用自体动静脉内瘘者,原因尚未完全明确。目前不同类型血管通路对微炎症状态的影响还鲜有报道。目的:比较半永久性双腔中心静脉导管与自体动静脉内瘘作为血管通路维持性血液透析患者体内炎性因子的差异,探讨不同类型的血管通路对维持性血液透析患者微炎症状态的影响。方法:选择维持性血液透析患者80例,根据血管通路不同分为自体动静脉内瘘组48例及颈静脉半永久双腔静脉导管组32例,以门诊健康体检者60例作为健康对照。检测2组维持性血液透析患者及健康对照者血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平,并行对比分析。结果与结论:维持性血液透析患者血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平明显高于健康对照组,差异有显著性意义(P<0.01);半永久插管组患者血清超敏C-反应蛋白、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平高于内瘘组,差异有显著性意义(P<0.05)。结果提示维持性血液透析患者体内存在微炎症状态,使用半永久性双腔中心静脉导管作为血液透析血管通路较使用自体动-静脉内瘘可进一步加重微炎症状态。

关键词：器官移植器官移植基础实验半永久性双腔中心静脉导管自体动静脉内瘘维持性血液透析健康对照炎性因子超敏C-反应蛋白白细胞介素6 肿瘤坏死因子α 微炎症状态省级基金

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肝硬化部分切除后肝再生及结构变化

中国组织工程研究 2013年第53期17卷 9196-9202页

作者：郑晓筠罗倩欣陈倩琪熊喜峰刘玉荣马宁芳广州医科大学基础学院组织学与胚胎学教研室广东省广州市510182

背景:肝脏自身具有强大的再生能力,临床资料显示大部分肝癌患者合并有肝硬化,切除肿瘤后肝脏质量可逐渐恢复,提示硬化的肝脏仍具备修复潜能。目的:尝试用肝部分切除方法诱导小鼠硬化肝组织内具再生能力的细胞增殖,观察再生肝脏的结构变... 详细信息

背景:肝脏自身具有强大的再生能力,临床资料显示大部分肝癌患者合并有肝硬化,切除肿瘤后肝脏质量可逐渐恢复,提示硬化的肝脏仍具备修复潜能。目的:尝试用肝部分切除方法诱导小鼠硬化肝组织内具再生能力的细胞增殖,观察再生肝脏的结构变化。方法:使用CCl4皮下注射方法制备小鼠肝硬化模型。对肝硬化小鼠行肝部分切除,于切除后1,3,5,7,10,14及21 d取小鼠肝组织并称质量。观察比较肝部分切除后不同时间小鼠再生肝组织的结构变化;评估肝再生率;免疫组化方法分析肝星形细胞标志分子结蛋白及肝星形细胞活化标志分子α-平滑肌肌动蛋白的表达变化;5-溴脱氧尿核苷标记技术对增殖细胞进行定性、定位。结果与结论:肝硬化小鼠肝部分切除后第1,3,5,7,14,21天肝再生率分别为6.58%,22.03%,21.39%,29.05%,45.22%,50.98%。苏木精-伊红染色和Masson染色显示CCl4注射8周后呈早期肝硬化病理改变,肝部分切除后肝组织结构逐步改善。免疫组化结果显示肝部分切除后第1天再生肝组织内结蛋白表达减少,但第3天至第14天呈上升趋势,21 d则明显减少;肝再生过程中各时间点α-平滑肌肌动蛋白表达依时递减。5-溴脱氧尿核苷阳性细胞在肝部分切除后1-7 d主要为肝细胞,肝部分切除后14-21 d阳性细胞定位于肝血窦内皮及窦腔内。结果表明早期肝硬化小鼠大部肝切除后3 d出现明显的再生反应,并逐步恢复正常的肝组织结构。

关键词：器官移植器官移植基础实验肝硬化四氯化碳小鼠 Masson染色肝部分切除肝再生结蛋白 α-平滑肌肌动蛋白 5-溴脱氧尿核苷省级基金

改良心肌保护液在婴幼儿心内直视手术中的应用

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中国组织工程研究 2013年第31期17卷 5659-5665页

作者：程光存程明光汤丹丹董贵福蔡燕姜波严中亚安徽省心血管病研究所安徽医科大学附属省立医院心脏外科安徽省合肥市230001

背景:目前国内外对于适合未成熟心肌停搏液的研究均未取得突破性进展,通过添加成分来提高现有停搏液对未成熟心肌的保护可能是一个较好的手段。腺苷能减轻缺血和中性粒细胞介导的再灌注损伤;丹参能降低缺血心肌脂质过氧化物含量,增加心... 详细信息

背景:目前国内外对于适合未成熟心肌停搏液的研究均未取得突破性进展,通过添加成分来提高现有停搏液对未成熟心肌的保护可能是一个较好的手段。腺苷能减轻缺血和中性粒细胞介导的再灌注损伤;丹参能降低缺血心肌脂质过氧化物含量,增加心肌细胞对氧自由基的清除。目的:探讨添加腺苷和丹参的改良心肌保护液对心脏、肝脏、肾脏的保护作用。方法:60例首次心内直视手术婴幼儿随机分为3组,各20例,腺苷组采用改良心肌保护液添加腺苷,联合组采用改良心肌保护液添加腺苷和丹参,对照组采用等容量的改良心肌保护液。于麻醉诱导前、体外循环开始后30min、体外循环结束后30min及体外循环结束后24h采集患儿血标本,检测血清肌酸激酶同工酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10水平变化。结果与结论:3组患儿血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、肌酸激酶同工酶均有升高,但是对照组升高最明显(P<0.01),腺苷组和联合组比较差异有显著性意义(P<0.05);肿瘤坏死因子α、白细胞介素6,白细胞介素8水平均比术前显著升高(P<0.05)。对照组肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8明显高于诱导前以及相同时点腺苷组和联合组的水平(P<0.01);体外循环结束后30min及24h,3组白细胞介素10水平均明显增高,但腺苷组和联合组明显高于对照组(P<0.01)。提示改良心肌保护液对未成熟心肌有良好的保护作用,能明显降低心内直视手术患儿血浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8水平,促进抑制炎细胞因子白细胞介素10的分泌,有效降低由体外循环引发的炎症反应,对心、肺、肝、肾等重要脏器有保护作用。

关键词：器官移植器官移植基础实验体外循环心肌保护液腺苷注射液丹参注射液炎性因子肺保护心脏外科手术省级基金

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右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应

中国组织工程研究 2013年第53期17卷 9189-9195页

作者：陈克研张毅男刁玉刚周锦张铁铮解放军沈阳军区总医院麻醉科辽宁省沈阳市110016

背景:在缺血/再灌注肾脏损伤的防治研究中,用药物激活或抑制机体某些因子从而保护肾组织,对肾移植和移植物的功能恢复有着重要意义。目的:探索右美托咪定对大鼠肾缺血/再灌注炎性因子及C-X-C型趋化因子受体4表达的影响。方法:40只大鼠... 详细信息

背景:在缺血/再灌注肾脏损伤的防治研究中,用药物激活或抑制机体某些因子从而保护肾组织,对肾移植和移植物的功能恢复有着重要意义。目的:探索右美托咪定对大鼠肾缺血/再灌注炎性因子及C-X-C型趋化因子受体4表达的影响。方法:40只大鼠随机等分为假手术组、缺血再灌注组、右美托咪定预处理组及右美托咪定后处理组。后3组行右肾切除,左肾缺血45 min,再灌注60 min,造肾缺血再灌注模型;右美托咪定预处理组于大鼠股静脉穿刺置管后泵注1μg/kg右美托咪定,10 min后改为0.5μg/kg,泵注30 min直至缺血即刻;右美托咪定后处理组于左肾再灌注后静脉泵注0.5μg/kg右美托咪定30 min。结果与结论:肾脏缺血再灌注大鼠肾脏损伤严重,炎症明显,肾小管扩张,有肾小球肾炎表现,血清中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平显著升高(P<0.05),血清和肾脏中C-X-C型趋化因子受体4水平也明显增加(P<0.05);经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子α水平明显降低(P<0.05),血清和肾脏中C-X-C型趋化因子受体4水平也明显降低(P<0.05)。提示肾缺血再灌注可致以炎性反应为特征的肾损伤;右美托咪定可以抑制炎性反应并弱化C-X-C型趋化因子受体4的表达,具有一定的肾保护作用。

关键词：器官移植器官移植基础实验肾脏缺血再灌注右美托咪定预处理后处理白细胞介素1β 肿瘤坏死因子α C-X—C型趋化因子受体4 省级基金

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维持性血液透析患者的动脉粥样硬化

中国组织工程研究 2013年第31期17卷 5666-5672页

作者：吴道诩徐岩青岛大学医学院附属医院肾内科山东省青岛市266000

背景:动脉粥样硬化是糖尿病肾病及血液透析患者常见的并发症,维持性血液透析时间长短和其他相关因素对糖尿病肾病患者动脉粥样硬化的影响有待于进一步观察及研究。目的:观察不同时间维持性血液透析患者的动脉粥样硬化情况,评价血液透析... 详细信息

背景:动脉粥样硬化是糖尿病肾病及血液透析患者常见的并发症,维持性血液透析时间长短和其他相关因素对糖尿病肾病患者动脉粥样硬化的影响有待于进一步观察及研究。目的:观察不同时间维持性血液透析患者的动脉粥样硬化情况,评价血液透析时间及其他相关因素对糖尿病肾病动脉粥样硬化的影响。方法:利用高频超声检测糖尿病肾病血液透析组、非糖尿病肾病血液透析组、终末期肾病未透析组患者的颈动脉内中膜厚度变化,以健康志愿者作为正常对照组。分析血液透析患者颈动脉内中膜厚度与透析时间的关系,比较各组胰岛素抵抗的变化。结果与结论:与正常对照组相比,糖尿病肾病血液透析组和非糖尿病肾病血液透析组颈动脉内中膜厚度值增大(P0.05);非糖尿病肾病血液透析60个月组颈动脉内中膜厚度值较非糖尿病肾病血液透析24个月组增大(P0.05)。糖尿病肾病24个月组HOMA-IR值较糖尿病肾病未透析组稍微降低(P<0.05),糖尿病肾病60个月组HOMA-IR值较糖尿病肾病未透析组显著降低(P<0.01)。提示血液透析在一定程度上可以影响糖尿病肾病维持性血液透析患者动脉粥样硬化的进展,且这种作用与透析时间长短有关。

关键词：器官移植器官移植基础实验糖尿病肾病血液透析超声检查颈动脉内中膜厚度动脉粥样硬化胰岛素抵抗尿毒症低密度脂蛋白

双重复合糖基转移酶的ABO基因启动子CpG岛甲基化

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中国组织工程研究 2013年第31期17卷 5673-5679页

作者：喻琼苏宇清甄建新邓志辉深圳市血液中心广东省深圳市518035

背景:在ABO血型抗原的研究中,绝大多数样本是相同的ABO基因表达出正常的相同的ABH抗原。但有一定数量的样本表现出具有相同分子遗传背景但表达出来的抗原强度却随着家系\个体不同而有所差异,说明了ABO血型中复杂的表达调控机制。分析一... 详细信息

背景:在ABO血型抗原的研究中,绝大多数样本是相同的ABO基因表达出正常的相同的ABH抗原。但有一定数量的样本表现出具有相同分子遗传背景但表达出来的抗原强度却随着家系\个体不同而有所差异,说明了ABO血型中复杂的表达调控机制。分析一类罕见的双重复合型标本的ABO血型血清学与基因背景情况,深入表观遗传学的研究,有利于部分揭示ABO基因表达机制。目的:探讨双重复合型ABO糖基转移酶表达相关的ABO基因启动子CpG岛甲基化水平与ABH抗原表达的关系。方法:6例经血型血清学定为CisAB或B(A)型的标本,进行ABO基因编码区全长序列和启动子序列的测定,采用重亚硫酸盐处理法检测ABO基因启动子CpG岛甲基化程度。结果与结论:6例双重复合AB型的标本中,在B101等位基因基础上存在nt803C>G突变的2个CisAB05/B(A)06等位基因,在ABO启动子CpG岛区域两者在nt-33(30%)、nt+27(50%)、nt+49(50%)具有甲基化差异;在A101等位基因序列的基础上存在nt803C>G突变的2个CisAB01等位基因,在ABO启动子CpG岛区域两者在nt-26(10%)位置有甲基化差异;在B101等位基因基础上存在nt640A>G突变的2个B(A)04等位基因ABO启动子CpG岛,在nt-33(10%)、nt+16(50%)、nt+57(60%)、nt+59(60%)、nt+68(60%)和nt+74(60%)位有甲基化差异。全部的6例标本ABO基因启动子区域DNA序列无任何突变异常。结果提示在相同的ABO遗传基因背景下,ABO基因启动子CpG岛区域某些位点甲基化可能影响ABH抗原在红细胞膜表面的表达。

关键词：器官移植器官移植基础实验 ABO血型正反定型不符 ABO基因双重复合糖基转移酶启动子序列测定多态性 CpG岛基因甲基化表观遗传