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Akkermansia muciniphila对大鼠高温运动后器官损伤的影响

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中国微生态学杂志 2024年第2期36卷 125-134,146页

作者：杨展孙学伟秦明珂崔茜张昕蕊张若男路寒张明燕朱进郑峰唐成亮东部战区疾病预防控制中心江苏南京210002 滨州医学院基础医学院陆军军医大学军事预防医学系军队劳动卫生学教研室东部战区空军医院南京中医药大学医学院整合医学学院南京医科大学病原生物学系南京医科大学第二附属医院南京中医药大学金陵临床医学院

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(... 详细信息

目的探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)通过干预肠道微生态,对大鼠高温运动后的器官损伤的影响。方法采用6~8周龄的Sprague Dawley大鼠,随机分成对照组(n=5)、常温运动组(RT组,n=8)、高温运动组(HT组,n=8)、***干预组(AKK干预组,n=8)、高温粪菌移植组(HT.R组,n=4)和***粪菌移植组(AKK.R组,n=4),在力竭运动后采集大鼠的血液、组织及粪便样本,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的变化。通过16S rRNA基因测序和GC-MS方法分析粪便中菌群和代谢产物的改变,对结肠组织和肝脏组织进行病理检测,采用免疫组化方法评估肠道屏障功能。结果HT组和AKK干预组大鼠在(35±2)℃、湿度(55±5)%的环境下平均运动时间分别为(13.76±3.454)和(19.55±1.997)min,差异有统计学意义(t=4.104,P=0.0011)。***干预后,大鼠血清的AST(U/mL)、ALT(U/mL)、BUN(mmol/L)和Cr(μmol/L)平均水平(3.953±1.877、2.622±1.086、10.040±1.088、65.800±12.010)均低于HT组(6.358±1.436、4.335±1.304、15.010±1.913、93.980±39.110),其中AST、ALT、BUN水平检测差异均有统计学意义(t=2.878、2.856、6.381,P=0.0122、0.0127、菌群组成结构在属水平上发生变化,粪便中代谢产物水平有不同程度的改变。病理结果显示,AKK干预组大鼠的肝脏损伤较HT组有显著缓解。AKK干预组大鼠的肠道屏障相关连接蛋白ZO-1和Occludin表达量的累积光密度值(6330±481.8、6140±281.7)较HT组(3425±257.0、3943±242.1)上调(t=9.216、10.250,P=0.0008、0.0005)。结论***能够在一定程度上通过维持肠道屏障功能,改善肠道微生态,减轻高温运动带来的肠道及肝脏损伤。

关键词：运动高温嗜黏蛋白阿克曼菌肠道菌群器官损伤

Akkermansia muciniphila发酵不同浓度复配脱脂乳的理化特性比较

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现代食品科技 2024年

作者：叶根云吴中琴徐璐蒋佳彦袁滨锋李宗军湖南农业大学食品科学技术学院

嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila，简称Akk）作为潜在新型益生菌被广泛关注。本研究将脱脂牛奶与Akk营养培养基按照一定比例进行复配，制备不同浓度的复配脱脂乳，接种Akk后进行发酵。通过测定发酵牛奶的p H值、稳定性、可... 详细信息

嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila，简称Akk）作为潜在新型益生菌被广泛关注。本研究将脱脂牛奶与Akk营养培养基按照一定比例进行复配，制备不同浓度的复配脱脂乳，接种Akk后进行发酵。通过测定发酵牛奶的p H值、稳定性、可溶性蛋白质、蛋白酶活力、游离氨基酸、短链脂肪酸含量以及DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、ABTS·+清除能力，来评价Akk发酵牛奶的营养特性。结果表明Akk发酵脱脂乳产生的主要短链脂肪酸为乙酸，且随着发酵液中BHI含量升高，发酵液的p H值与可溶性蛋白含量呈现显著下降趋势，分别下降至5.21与4.9mg/m L；蛋白酶活力不断增强，最高可达51.02U/m L；游离氨基酸共检测了17种，其中亮氨酸含量最高（305.517 8μg/mL），半胱氨酸含量最低；谷氨酸呈显著降低（62.495 5μg/m L降低至5.818 9μg/mL）;DPPH自由基清除能力与还原力不断增强，羟自由基清除力下降。综上所述，在有生长因子存在的情况下，Akk菌可以用于牛奶发酵，未来在进一步确证动物源生长因子的安全性、排除科技伦理的影响后，或者寻找到了新的非动物源Akk生长因子的情况下，有望推出新一代Akk发酵功能牛奶。

关键词：嗜黏蛋白阿克曼菌发酵脱脂乳抗氧化氨基酸短链脂肪酸

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黏蛋白阿克曼菌辅助治疗恶性肿瘤的研究进展

微生物学报 2023年第10期63卷 3746-3757页

作者：唐海茹解有成李娜王盼于晓辉甘肃中医药大学第一临床医学院甘肃兰州730000 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院消化内科甘肃兰州730050 中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院基础医学实验室、甘肃省干细胞与基因药物重点实验室甘肃兰州730050

恶性肿瘤是威胁人类健康的全球重大公共卫生问题,多种方法联合,特别是以靶向治疗联合免疫治疗为主的治疗手段,在一定程度延缓了恶性肿瘤的发展,提高了患者的近期生存率,但这些治疗方法并不能覆盖所有患者,远期疗效仍然有限。因此,如何... 详细信息

恶性肿瘤是威胁人类健康的全球重大公共卫生问题,多种方法联合,特别是以靶向治疗联合免疫治疗为主的治疗手段,在一定程度延缓了恶性肿瘤的发展,提高了患者的近期生存率,但这些治疗方法并不能覆盖所有患者,远期疗效仍然有限。因此,如何提高患者的生存质量和远期生存率,降低死亡率,成为当前亟待解决的关键问题。近年来越来越多的研究显示肠道微生物的分布与恶性肿瘤的发生、发展密切相关,或可成为治疗恶性肿瘤的新辅助方法,特别是嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila)的报道较多,然而,关于该菌在恶性肿瘤辅助治疗中安全性和有效性的文献报道尚不多见。因此,本文旨在通过收集近年来嗜黏蛋白阿克曼菌在恶性肿瘤方面的文献,将其研究成果和应用结果进行归纳、分析,以期为临床综合治疗提供一定的药物选择。

关键词：嗜黏蛋白阿克曼菌肠道微生物恶性肿瘤辅助治疗

生酮饮食调控肠道菌群在疾病治疗中的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2022年第4期42卷 545-550页

作者：吴亚殷峻上海市第八人民医院内分泌科上海200235 上海交通大学医学院附属第六人民医院内分泌代谢科上海市糖尿病临床医学中心上海市内分泌代谢病临床医学中心上海200233

生酮饮食是一种高脂肪、极低碳水化合物、适量蛋白质和其他营养素的饮食模式,最早被用于治疗儿童癫痫。随着医学的不断发展,生酮饮食被逐渐用于其他疾病的辅助治疗,但其具体作用机制尚不明确。最近的研究发现,生酮饮食可影响肠道菌群的... 详细信息

生酮饮食是一种高脂肪、极低碳水化合物、适量蛋白质和其他营养素的饮食模式,最早被用于治疗儿童癫痫。随着医学的不断发展,生酮饮食被逐渐用于其他疾病的辅助治疗,但其具体作用机制尚不明确。最近的研究发现,生酮饮食可影响肠道菌群的多样性和数量,对宿主的健康有着重要的意义。研究表明,生酮饮食可以增加小鼠肠道中的嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,***)和副拟杆菌的丰度,导致γ-谷氨酰氨基酸生成减少、海马体中γ-氨基丁酸/谷氨酸比值升高,从而降低癫痫的发作频率;***丰度增加还可以改善脑血管功能,降低阿尔茨海默病的发生风险。另外,生酮饮食还可降低小鼠肠道双歧杆菌的丰度,导致肠道乳酸水平下降,从而改善认知和记忆功能;同时,该丰度的下降还可导致具有促炎作用的辅助性T细胞17水平的下降,从而治疗肥胖。基于此,该文就生酮饮食调控肠道菌群在神经系统疾病(包括癫痫、阿尔茨海默病、多发性硬化症、孤独症)、代谢性疾病(包括糖尿病、肥胖)及肿瘤中的治疗作用及可能的机制进行综述。

关键词：生酮饮食嗜黏蛋白阿克曼菌双歧杆菌糖尿病肥胖

基于肠道菌群探究中药枯芩“善清肺热”的科学内涵

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基于肠道菌群探究中药枯芩“善清肺热”的科学内涵

作者：熊诗慧江西中医药大学

学位级别：硕士

目的:本文以传统中药饮片黄芩为研究对象,以枯芩、子芩两种传统商品规格临床作用方向的巨大差异为出发点,采用现代药效评价方法,评价两种传统规格黄芩的疗效差异,验证枯芩对肺部疾病的“药物靶向性”;结合代谢组学与肠道菌群研究,阐释... 详细信息

目的:本文以传统中药饮片黄芩为研究对象,以枯芩、子芩两种传统商品规格临床作用方向的巨大差异为出发点,采用现代药效评价方法,评价两种传统规格黄芩的疗效差异,验证枯芩对肺部疾病的“药物靶向性”;结合代谢组学与肠道菌群研究,阐释枯芩“善清肺热”传统靶向用药的现代科学内涵,为中医古籍的经典理论提供现代科学依据。方法:1.采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)对子芩与枯芩的药材提取液进行质量考察;2.不同类型黄芩提取物分组预防给药:选用雄性C57BL/6小鼠分组为正常组(NC组)、脂多糖(Lipoplysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤小鼠组(ALI组)、地塞米松给药治疗组(DEX组)、子芩治疗组(ZQ组)、枯芩治疗组(KQ组)。用生理盐水、低塞米松注射液、子芩提取液与枯芩提取液对各组小鼠进行治疗7天后,气管滴注脂多糖,构建急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)小鼠模型,评价枯芩、子芩的疗效差异;3.采用肺干湿重、脏器指数、H&E染色切片方法评价基础形态差异;酶联免疫吸附测试法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定小鼠肺泡灌洗液中炎症因子水平;***-Q-TOF-MS非靶代谢组方法测定小鼠血浆中差异代谢物;5.16S r RNA测序结合气相质谱联用技术,分析菌群结构的变化和粪便中的短链脂肪酸(Short-chain fatty acid,SCFAs)的水平。6.采用混合抗生素(Antibiotic mixtures,ABX)疗法消除小鼠的内源性微生物,验证关键菌株嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,AKK)对ALI小鼠的治疗作用。采用实时定量PCR和免疫荧光染色法,验证关键酶吲哚2,3双加氧酶1(Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)的表达水平。结果:1.子芩与枯芩的疗效差异:与正常组相比,ALI小鼠的肺水肿严重且免疫功能降低,机体炎症因子水平也极显著升高(p菌群研究:与正常组相比,ALI小鼠的肠道菌群丰度显著降低(p菌门与拟杆菌门的比值下调(p菌群丰富度升高,厚壁菌门与拟杆菌门相对含量的比值、短链脂肪酸含量显著升高(p菌AKK的相对丰度显著升高(p菌株功能验证:两种形式的AKK(活菌组和灭活组)均可改善肺水肿、脏器损伤、与小鼠全身炎症效应(p菌组疗效优于灭活组(p菌嗜黏蛋白阿克曼菌的丰度,抑制色氨酸代谢关键酶IDO1在肺组织中的表达,从而调节色氨酸代谢通路,以此维持小鼠体内的免疫稳态,发挥缓解肺部炎症的作用。

关键词：枯芩急性肺损伤科学内涵嗜黏蛋白阿克曼菌吲哚胺2,3-双加氧酶1

肠道来源丁酸梭菌的分离、鉴定和培养工艺及其与AKK菌对糖尿病小鼠的影响

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肠道来源丁酸梭菌的分离、鉴定和培养工艺及其与AKK菌对糖尿病小...

作者：吴永威中国医药工业研究总院

学位级别：硕士

健康人体的肠道内栖息着大量的细菌,其优势菌群和次要菌群保持动态平衡,维持肠道正常的营养吸收、物质转化和生理生化功能,并且肠道菌群作为一个系统与机体其他系统协同维护机体健康。已有大量的研究表明,丁酸梭菌是人体肠道中重要的益... 详细信息

健康人体的肠道内栖息着大量的细菌,其优势菌群和次要菌群保持动态平衡,维持肠道正常的营养吸收、物质转化和生理生化功能,并且肠道菌群作为一个系统与机体其他系统协同维护机体健康。已有大量的研究表明,丁酸梭菌是人体肠道中重要的益生菌成分之一,能够抑制肠道内有害菌和腐败菌的增殖和生长,具有预防和治疗肠道疾病及调节肠道微生态平衡等重要作用。本研究旨在分离来源于健康人肠道中的丁酸梭菌,优化其培养工艺,最终考察其与嗜黏蛋白阿克曼菌分别对糖尿病小鼠的影响。首先,在健康人提供的粪便中,通过特异引物PCR鉴定和丁酸梭菌特异性考察,使用梭菌增殖培养基考察丁酸梭菌的严格厌氧特性、碳源利用特性和菌体形态特征,筛选获得了符合丁酸梭菌特征的菌株,最终经过16SrRNA鉴定了 10株与丁酸梭菌相似度在99%以上的菌株(分别命名为GYJK-2021D1～D10)。首先,以菌体发酵液中丁酸和总短链脂肪酸(SCFAs)的含量为指标,对上述10株菌株进行培养产酸性能考察,最终发现其中1株菌种GYJK-2021D4的产酸特性优良。以药品“泰康宁”中的丁酸梭菌(命名为菌种YX)为阳性对照菌株,优化菌种GYJK-2021D4的培养工艺,以梭菌增殖培养基(RCM)为基础,利用单因素考察方法,确定最佳的碳源、氮源的种类和浓度分别为:葡萄糖0.3%、麦芽糊精0.3%、酵母提取物1.2%、大豆蛋白胨1.2%。结果表明,丁酸梭菌GYJK-2021D4的最佳培养温度是37℃,培养基最佳起始pH为6.5,最佳接种量为10%。随后使用优化丁酸梭菌培养基和AKK优化合成培养基分别考察了丁酸梭菌GYJK-2021D4和嗜黏蛋白阿克曼菌GYJK-2021A1(以下简称AKK菌)的发酵罐培养工艺。其次,建立小鼠Ⅰ型糖尿病模型,用新鲜丁酸梭菌和AKK菌液灌胃以考察其对糖尿病小鼠的生理指标改善作用,考察因素包括小鼠空腹血糖、血脂代谢指标和肠道菌群结构。本研究以ICR小鼠作为复制Ⅰ型糖尿病模型动物,使用0.04 mg/10g的造模剂量给小鼠连续5天腹腔注射链脲佐菌素,以空腹血糖大于11.1 mmoL/L为成模小鼠,分为三组(模型组/AKK菌组/丁酸梭菌组),每组10只,模型组给予生理盐水,AKK菌组给予菌种A1菌液(OD600 1.0～1.3),丁酸梭菌组给予菌种D4菌液(OD600 1.3～1.6),灌胃0.4mL/只,每天2次,连续灌胃14天。灌胃结束后,检测各组小鼠的空腹血糖和血脂指标;并且解剖小鼠采集新鲜肠道物,使用Illumina高通量测序技术分析小鼠肠道的菌群特征。结果表明,益生菌AKK菌和丁酸梭菌具有改善Ⅰ型糖尿病小鼠空腹血糖和血脂的功能,并形成新的肠道菌群结构特征。该研究为开发治疗糖尿病的活菌制剂奠定了基础。

关键词：肠道菌群丁酸梭菌嗜黏蛋白阿克曼菌糖尿病

Akkermansia muciniphila的培养方法及其在疾病治疗中应用的研究进展

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黑龙江大学工程学报 2021年第4期12卷 84-90页

作者：楚福英李元敬王雨亭施树良张彦龙雷虹李文辉黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高校分子生物学重点实验室哈尔滨150080 黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心哈尔滨150500 华南师范大学汕尾校区海洋与环境工程学院广东汕尾516600 哈尔滨工业大学生命科学与技术学院哈尔滨150001

嗜黏蛋白阿克曼菌是定殖在胃肠道黏液层中的可以特异性的降解黏蛋白的严格厌氧的革兰氏阴性菌,最初是从人体粪便中分离出来的,在各种疾病的治疗过程中发挥着重要作用,有望成为下一代益生菌。综述了现有的嗜黏蛋白阿克曼菌的培养方法,准... 详细信息

嗜黏蛋白阿克曼菌是定殖在胃肠道黏液层中的可以特异性的降解黏蛋白的严格厌氧的革兰氏阴性菌,最初是从人体粪便中分离出来的,在各种疾病的治疗过程中发挥着重要作用,有望成为下一代益生菌。综述了现有的嗜黏蛋白阿克曼菌的培养方法,准确地认识嗜黏蛋白阿克曼菌与肥胖、早衰和阿尔兹海默症之间的关系,有利于为这些疾病的治疗提供新的治疗思路和理论依据。

关键词：嗜黏蛋白阿克曼菌培养方法肥胖早衰阿尔兹海默症