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18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中CCL11、AQP1和EOS表达的影响

四川大学学报：医学版 2015年第3期46卷 389-393页

作者：李娟丽席克虎侯赟江英桂岩王有虎张福宏张小兵兰州大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科兰州730000

目的观察18β-甘草次酸（glycyrrhetinic acid,GA）对变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞趋化因子11（CCL11）、水通道蛋白1（AQP1）和嗜酸粒细胞（EOS）表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分为生理盐水对照（NC... 详细信息

目的观察18β-甘草次酸（glycyrrhetinic acid,GA）对变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞趋化因子11（CCL11）、水通道蛋白1（AQP1）和嗜酸粒细胞（EOS）表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分为生理盐水对照（NC）组、AR模型（AR）组、氯雷他定（LOA）组、18β-GA组。1~14d腹腔注射卵清蛋白（OVA）和Al（OH）3基础致敏,14~21d用OVA鼻腔激发建立AR模型,NC组均以生理盐水替代。第21d始LOA和18β-GA组分别给予氯雷他定和18β-GA每日1次灌胃,NC与AR组以生理盐水替代。干预1、2、3周后比较各组大鼠行为学评分,取大鼠鼻黏膜行实时荧光定量PCR（RT-QPCR）检测CCL11基因、免疫组化（SP法）检测AQP1表达程度,HE染色观察鼻黏膜组织结构和EOS浸润程度。结果 AR组大鼠1、2、3周时均出现典型AR症状,行为学叠加评分〉5分,鼻黏膜中CCL11、AQP1表达和EOS浸润较NC组增强（P〈0.05）;各时间点,LOA组大鼠上述结果均低于AR组（P〈0.05）;18β-GA组大鼠1周时上述各结果与AR组比较下降（P〈0.05）,2周后各结果接近于LOA组、NC组（P〉0.05）。结论 18β-GA干预可降低CCL11、AQP1的表达水平及EOS浸润程度,抑制AR进展。

关键词：变应性鼻炎 18β-甘草次酸嗜酸粒细胞趋化因子1 水通道蛋白1 嗜酸粒细胞

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18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中CCL11、AQP-1和EOS表达的影响

18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中CCL11、AQP-1和EOS表达的...

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作者：李娟丽兰州大学

学位级别：硕士

目的①制备Wistar大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)模型。②观察正常大鼠和AR大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞趋化因子-1(eotaxin-1, CCL11)、水通道蛋白-1(aquaporin-1, AQP-1)的表达水平和嗜酸粒细胞(eosinophil, EOS)的募集程度。③探... 详细信息

目的①制备Wistar大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)模型。②观察正常大鼠和AR大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞趋化因子-1(eotaxin-1, CCL11)、水通道蛋白-1(aquaporin-1, AQP-1)的表达水平和嗜酸粒细胞(eosinophil, EOS)的募集程度。③探讨18β-甘草次酸(glycyrrhetinic acid, GA)灌胃对AR大鼠症状行为学、鼻黏膜中CCL11、AQP-1的表达水平和EOS浸润程度的影响及其相互作用的有关机制。方法①建立AR模型：Wistar大鼠,雄,180-220 g,随机分为生理盐水对照组(NC组)、AR无干预组(AR组)、氯雷他定(loratadine, LOA)干预组(LOA组)、18β-GA干预组(18β-GA组)。1-14 d,以Al(OH)3 30mg为免疫佐剂,AR、LOA和18β-GA组大鼠腹腔注射0.3 g OVA(ovalbumin, OVA)和生理盐水(normal saline, NS)的1 mL混匀液,隔日1次,持续14天,作为基础致敏。14-21 d,双侧鼻腔各滴入2%OVA与NS的混匀液,每次一侧鼻腔50 uL,每日1次,持续7天,作为鼻腔激发,建立AR大鼠模型。造模过程中,NC组大鼠以同量的NS替代作为对照,方法同其他组,并以被动皮内过敏反应(PCA)实验及大鼠AR症状行为学表现评估造模结果。②灌胃干预：第21d始LOA和18β-GA组分别给予LOA和18β-GA每日1次灌胃,持续3周,NC及AR组以同量的NS代替,方法同其他组。③结果观察：分别于灌胃干预1、2、3周后比较各组大鼠AR症状变化及行为学叠加量化评分;以P-actin作为内参,取大鼠鼻黏膜行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CCL11基因的相对表达量;用免疫组化(SP)法观察各组大鼠鼻黏膜中AQP-1的表达水平;光学显微镜下,通过苏木精-伊红(HE)染色观察鼻黏膜组织结构的变化和每高倍镜视野(×400)中EOS的数量。④数据分析：实验数据用SPSS19.0软件统计分析。结果 ①AR模型的鉴定：AR,LOA、18β-GA组大鼠基础致敏结束后行PCA实验均提示阳性,完成鼻腔激发后,观察3组大鼠的鼻部症状,发现均有挠鼻、流清水涕和频繁喷嚏的表现,症状叠加评分均高于5分,说明模型制造成功。②与NC、LOA、18β-GA组相比,AR组大鼠在1、2、3周时均出现典型AR鼻部症状,行为学叠加量化评分高于5分,鼻黏膜中CCL11 mRNA、AQP-1的表达水平和EOS的浸润程度较NC组显著增高(P0.05),2周后各结果均接近于LOA组、NC组(P>0.05)。结论①本研究以OVA作为过敏原,完成了Wistar大鼠AR模型的制备。②正常大鼠鼻腔黏膜有少量的CCL11、AQP-1和EOS分布;在OVA致敏的AR大鼠模型中,鼻腔黏膜出现慢性炎症改变,表现为典型的AR症状,鼻黏膜中CCL11、AQP-1的表达水平明显增高的同时,EOS在鼻腔黏膜的募集程度亦随之增加。③与LOA灌胃比较,18β-GA灌胃干预AR大鼠,能够明显改善AR症状,恢复鼻黏膜组织结构的异常改变,并能降低CCL11、AQP-1在鼻黏膜的分泌和EOS的募集,最终对AR的炎症反应起到抑制作用。

关键词：变应性鼻炎 18β-甘草次酸嗜酸粒细胞趋化因子1 水通道蛋白1 嗜酸粒细胞

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