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嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病应用中的研究进展

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中国免疫学杂志 2021年第22期37卷 2803-2809页

作者：张敏崔振泽李悦徐超大连市儿童医院大连116000

21世纪以来,过敏性疾病的发病率逐年增高,严重威胁着人类的生命健康。然而临床中针对这一类疾病目前没有安全高效的检测方法。本文通过梳理过敏性疾病及嗜碱性粒细胞活化试验的相关文献资料,认为该试验是一种安全高效的辅助诊断过敏性... 详细信息

21世纪以来,过敏性疾病的发病率逐年增高,严重威胁着人类的生命健康。然而临床中针对这一类疾病目前没有安全高效的检测方法。本文通过梳理过敏性疾病及嗜碱性粒细胞活化试验的相关文献资料,认为该试验是一种安全高效的辅助诊断过敏性疾病的方法,其理论依据是嗜碱性粒细胞的表面标志物会随着过敏反应的发生而变化。基于这一理论依据,传统的嗜碱性粒细胞活化试验是利用流式细胞术对细胞进行检测,进而体外辅助诊断过敏性疾病。近年来基于微流体技术的新型嗜碱性粒细胞活化试验逐步兴起。流式细胞术是一种对细胞进行快速定量分析和筛选的方法。微流体技术是一种高精度处理小体积流体的技术,具有成本低、操作简便且所需样本及试剂量少的优点。本文就嗜碱性粒细胞的相关概念、分别基于流式细胞术及微流体技术的嗜碱性粒细胞活化试验及其在临床过敏性疾病中的应用价值做一综述,以期为嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病诊断领域的应用提供理论支持。

关键词：嗜碱性粒细胞流式细胞术微流体技术嗜碱性粒细胞活化试验过敏性疾病

嗜碱性粒细胞活化试验在儿童食物过敏中的诊断价值

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中华实用儿科临床杂志 2017年第9期32卷 714-717页

作者：范久亿邢燕周薇北京大学第三医院儿科 100191

目前儿童食物过敏的诊断程序包括病史、皮肤点刺试验、血清特异性免疫球蛋白E（sIgE）抗体检测、食物激发试验等。其中皮肤点刺试验和sIgE抗体检测为初筛试验，其诊断敏感性高而特异性低；双盲安慰剂对照食物激发试验为诊断的金标准，... 详细信息

目前儿童食物过敏的诊断程序包括病史、皮肤点刺试验、血清特异性免疫球蛋白E（sIgE）抗体检测、食物激发试验等。其中皮肤点刺试验和sIgE抗体检测为初筛试验，其诊断敏感性高而特异性低；双盲安慰剂对照食物激发试验为诊断的金标准，但可能引发全身过敏反应，临床上应用较少。嗜碱性粒细胞活化试验作为一种体外变应原诊断试验，因其特异性高、安全等因素在儿童食物过敏诊断中有重价值。此外，嗜碱性粒细胞活化试验还可用于评价儿童食物过敏的严重程度及免疫治疗监测等。

关键词：儿童食物过敏嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞活化试验诊断

嗜碱性粒细胞活化试验在变态反应性疾病诊断中的应用

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免疫学杂志 2017年第4期33卷 360-363页

作者：高翠娥宋志强第三军医大学西南医院皮肤科重庆400038

变态反应性疾病是影响人类生命健康和生活质量的疾病之一。随着流式细胞术的发展,嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)成为临床中诊断变态反应性疾病的一种新型方法,建立标准化的BAT方法对不同研究结果的比较和验证非... 详细信息

变态反应性疾病是影响人类生命健康和生活质量的疾病之一。随着流式细胞术的发展,嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)成为临床中诊断变态反应性疾病的一种新型方法,建立标准化的BAT方法对不同研究结果的比较和验证非常重要。本文就BAT的技术细节以及在临床诊断和监测不同变态反应性疾病中的应用进行综述。

关键词：嗜碱性粒细胞活化试验变态反应性疾病

嗜碱性粒细胞活化试验在儿童粉尘螨致敏诊断及皮下脱敏疗效评价中作用的探讨

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嗜碱性粒细胞活化试验在儿童粉尘螨致敏诊断及皮下脱敏疗效评价中...

作者：李宜凡天津医科大学

学位级别：硕士

目的:使用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测过敏性哮喘合并鼻炎患儿的外周血嗜碱性粒细胞活化率(%CD63),从而分析嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)在粉尘螨致敏诊断及监测皮下免疫治疗(subcutaneous immunotherap... 详细信息

目的:使用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测过敏性哮喘合并鼻炎患儿的外周血嗜碱性粒细胞活化率(%CD63),从而分析嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)在粉尘螨致敏诊断及监测皮下免疫治疗(subcutaneous immunotherapy,SCIT)中的应用价值及其临床相关性。方法:1、研究对象及方法本研究为前瞻性研究。研究对象为2018年10月至2019年5月就诊于天津医科大学第二医院儿科哮喘专病门诊的儿童。入组年龄为5-12岁,初诊确诊为哮喘合并鼻炎且粉尘螨致敏患儿22例作为致敏组,平均年龄(8.0±2.6)岁;非粉尘螨致敏患儿7例作为非致敏组,平均年龄(6.6±1.8)岁;另取健康儿童4例作为对照组,平均年龄(5.8±1.0)岁。分别用1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml粉尘螨提取液作为刺激源,以CD123、HLA-DR联合设门,获取嗜碱性粒细胞,采用FCM检测%CD63,从而反映嗜碱性粒细胞的活化程度。通过分析比较以上三组儿童%CD63,从而评估BAT在粉尘螨致敏诊断中的作用及其与皮肤点刺试验(skin prick tests,SPT)、血清总IgE(total IgE,TIgE)、特异性IgE(specific IgE,sIgE)、sIgE/TIgE、特异性IgG4(specific IgG4,sIgG4)、肺通气功能中的第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)占预计值的百分比(FEV1%pred)、呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,Fe NO)及儿童哮喘控制测试(children asthma control test,C-ACT)、鼻炎视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)之间的相关性。致敏组中,15例接受规范化SCIT者进行纵向疗效监测,6个月后再次评估%CD63、sIgG4及相关临床指标,分析其内在联系。2、统计分析采用SPSS 20.0软件进行分析,计量资料不服从正态分布,用中位数(四分位数间距)[P(P-P)]表示,采用非参数检验之Kruskal-Wallis H秩和检验;服从正态分布用?X±SD表示,采用单因素ANOVA。计数资料采用卡方检验和Fisher精确检验。病例资料采用Pearson和Spearman相关性分析,对%CD63与临床指标之间的相关性进行评估;用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分别对BAT(CD63)与sIgE两种方法在粉尘螨致敏诊断作以比较;p0.05);致敏组粉尘螨sIgE水平显著高于非致敏组和对照组(p细胞即为嗜碱性粒细胞,并可体现嗜碱性粒细胞的活化。3、不同刺激浓度下致敏组嗜碱性粒细胞活化率比较粉尘螨致敏组在1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml的粉尘螨提取液刺激浓度下%CD63平均水平分别为22.3(12.1-37.2)%、29.0(16.2-53.4)%、40.8(22.4-65.4)%,整体呈现出递增的浓度依赖趋势,差异有统计学意义(p嗜碱性粒细胞活化率比较在1μg/ml浓度刺激下致敏组、非致敏组、对照组外周血%CD63平均水平分别为22.3(12.1-37.2)%、4.2(2.3-6.3)%、2.7(2.0-4.0)%,致敏组明显高于其它两组,差异有统计学意义(p嗜碱性粒细胞活化率、sIgE评估粉尘螨致敏的诊断价值以SPT作为金标准,ROC曲线分析BAT用于粉尘螨致敏诊断结果显示,在1μg/ml刺激浓度下,ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.992,其敏感度及特异度分别为77.3%

关键词：嗜碱性粒细胞活化试验粉尘螨过敏性疾病诊断治疗流式细胞术儿童

采用流式细胞术分析过敏性休克大鼠嗜碱性粒细胞活化试验

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采用流式细胞术分析过敏性休克大鼠嗜碱性粒细胞活化试验

作者：景丽霞山西医科大学

学位级别：硕士

目的应用流式细胞术(FCM)检测过敏性休克大鼠血中嗜碱性粒细胞CD63的表达，确定过敏性休克时嗜碱性粒细胞的活化情况，探讨FCM及嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）在过敏性休克诊断中的应用价值。方法40只Wistar-Hokkaido大鼠，雌雄不限，体... 详细信息

目的应用流式细胞术(FCM)检测过敏性休克大鼠血中嗜碱性粒细胞CD63的表达，确定过敏性休克时嗜碱性粒细胞的活化情况，探讨FCM及嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）在过敏性休克诊断中的应用价值。方法40只Wistar-Hokkaido大鼠，雌雄不限，体重200～220g。将40只大鼠随机分为对照组和实验组，实验组包括致敏不激发组、过敏性休克死亡组、过敏性休克死后12h组、过敏性休克死后24h组，每组8只。采用卵蛋白腹腔注射建立过敏性休克大鼠动物模型，在休克死亡后的不同时间点提取各组大鼠右心室血及其肺组织。用三色免疫荧光标记流式细胞技术和CD63/CD45/CD203c组合抗体检测各组大鼠血嗜碱性粒细胞活化情况。以CD45和CD203c联合设门，CD63作为嗜碱性粒细胞活化标志物，检测各组大鼠血液中嗜碱性粒细胞表面CD63表达率，以代表各组大鼠血嗜碱性粒细胞的活化情况。提取的肺组织于10%的中性甲醛固定，石蜡切片，常规HE染色，并采用免疫荧光染色法观察各组大鼠肺组织CD63的表达情况，BI-2000病理图像分析仪对图像进行分析，并采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果（1）过敏性休克死亡组CD63的表达率为17.341±2.044%，休克死亡后12h组CD63的表达率为13.631±2.199%，休克死亡后24h组CD63的表达率为12.236±1.646,对照组CD63表达率为1.423±0.383%，致敏不激发组CD63表达率为1.465±0.337%。结果表明，过敏性休克死亡组、休克死亡后12h组、休克死亡后24h组CD63的表达率均明显高于对照组（P=0.000,P嗜碱性粒细胞发生活化，且随着时间的延长，阳性染色逐渐减少。结论（1）大鼠过敏性休克时血嗜碱性粒细胞存在异常活化。（2）CD63可作为I型过敏反应中嗜碱性粒细胞特异性激活标志物，为过敏性疾病的诊断提供辅助的检测指标。（3）嗜碱性粒细胞活化试验有望作为过敏反应体内试验的补充，为临床诊断及法医学鉴定过敏性休克提供新的方法和途径。

关键词：过敏性休克嗜碱性粒细胞活化试验流式细胞术 CD63 CD203c

流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病诊断中的应用

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中国医药导报 2014年第10期11卷 164-168页

作者：张皓月侯养栋高彩荣宋伟山西医科大学法医病理学教研室山西太原030001

流式细胞术是20世纪70年代发展起来的一种快速的细胞定量分析和分选的新技术,具有测量速度快、高灵敏度、高精确度、多参数分析、高纯度分选的特点。过敏性疾病为威胁人类生命健康的疾病之一,但其诊断通常依赖病史以及适当的确证试验,... 详细信息

流式细胞术是20世纪70年代发展起来的一种快速的细胞定量分析和分选的新技术,具有测量速度快、高灵敏度、高精确度、多参数分析、高纯度分选的特点。过敏性疾病为威胁人类生命健康的疾病之一,但其诊断通常依赖病史以及适当的确证试验,但这些确证实验尚缺乏有力确证依据。过敏反应发生时,嗜碱性粒细胞表面分子可发生相应变化,通过对其表面标志物的检测,可达到对过敏性疾病进行鉴别诊断的目的。本文就流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验的几种设门筛选嗜碱性粒细胞思路加以介绍,并对流式细胞术在过敏性疾病诊断中的应用价值做一综述,从而为流式细胞术在过敏性疾病诊断领域中广阔的应用前景提供一有力的理论支持。

关键词：流式细胞术嗜碱性粒细胞活化试验过敏性疾病

流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病中的应用

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国际儿科学杂志 2020年第9期47卷 607-611页

作者：李宜凡(综述) 刘长山(审校) 天津医科大学第二医院儿科 300211

过敏性疾病是影响人们健康和生活质量的常见疾病。随着流式细胞术的发展,嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)作为一种体外激活试验,已成为诊断血清特异性免疫球蛋白E(specific immunoglobulin E,sIgE)介导的过敏性疾... 详细信息

过敏性疾病是影响人们健康和生活质量的常见疾病。随着流式细胞术的发展,嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)作为一种体外激活试验,已成为诊断血清特异性免疫球蛋白E(specific immunoglobulin E,sIgE)介导的过敏性疾病的一种新型方法。将BAT标准化,并将其应用于临床实践及过敏机制的探索这一过程非常重要。该文就BAT的主要原理及其在过敏性疾病诊治方面的应用进行综述。

关键词：流式细胞术嗜碱性粒细胞活化试验过敏性疾病

儿童慢性自发性荨麻疹病因及严重程度相关因素分析

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中华皮肤科杂志 2024年第4期57卷 324-330页

作者：周甜甜吴雪歌杨欢方晓蒋金秋陈静思罗晓燕王华重庆医科大学附属儿童医院皮肤科、国家儿童健康与疾病临床医学研究中心、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿科学重庆市重点实验室、儿童感染免疫重庆市重点实验室重庆400014

目的分析儿童慢性自发性荨麻疹(CSU)常见病因及影响疾病严重程度的相关因素。方法本研究为单中心横断面研究。前瞻性招募2021年11月至2022年11月重庆医科大学附属儿童医院皮肤科门诊就诊的≤17岁CSU患儿,收集临床资料,进行血清总IgE、... 详细信息

目的分析儿童慢性自发性荨麻疹(CSU)常见病因及影响疾病严重程度的相关因素。方法本研究为单中心横断面研究。前瞻性招募2021年11月至2022年11月重庆医科大学附属儿童医院皮肤科门诊就诊的≤17岁CSU患儿,收集临床资料,进行血清总IgE、过敏原特异性IgE(sIgE)检测,同时进行嗜碱性粒细胞活化试验(BAT)和自体血清皮肤试验(ASST)。根据ASST和BAT结果将患儿分为慢性自身免疫性荨麻疹(CAU)组(ASST、BAT均阳性)、非CAU组(ASST、BAT均阴性)和部分CAU组(ASST和BAT任一阳性),比较CAU和非CAU组病因和临床特征的差异。根据每周荨麻疹活动评分(UAS7),将CSU患儿分为轻度组(UAS70.05),CAU组UAS7≥16分患者比例(16/18)高于非CAU组(11/24,P试验,BAT有助于识别CAU和预测疾病的严重程度。

关键词：荨麻疹儿童自身免疫慢性自发性荨麻疹慢性自身免疫性荨麻疹嗜碱性粒细胞活化试验自体血清皮肤试验

嗜碱性粒细胞在过敏性疾病中研究进展及临床应用展望

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临床儿科杂志 2022年第8期40卷 566-572页

作者：钟文伟李京阳耿丽婷张建华上海交通大学医学院附属新华医院上海200092

Th2免疫应答是过敏性疾病发病最重要的免疫学机制。嗜碱性粒细胞(Ba)在过敏性炎症中起着始动者、效应者和调节者作用。在过敏性炎症的始动阶段,Ba可能通过独立或与树突状细胞(DCs)间通过协同作用完成抗原递呈作用而启动Th2免疫应答。Ba... 详细信息

Th2免疫应答是过敏性疾病发病最重要的免疫学机制。嗜碱性粒细胞(Ba)在过敏性炎症中起着始动者、效应者和调节者作用。在过敏性炎症的始动阶段,Ba可能通过独立或与树突状细胞(DCs)间通过协同作用完成抗原递呈作用而启动Th2免疫应答。Ba还表现出增强记忆性Th2、Th17免疫应答的免疫学效应,提示其在记忆性免疫应答中起着重要作用。临床研究发现嗜碱性粒细胞活化试验(basophil activation test,BAT)在过敏性疾病诊断中具有独特优势,且在监测评估特异性免疫治疗和生物制剂治疗疗效中具有作为生物学标记的潜在价值。

关键词： Th2免疫应答过敏性疾病嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞活化试验