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嗜盐古菌胞外蛋白酶HlyA酶学性质及在鱼露发酵中的初步应用研究

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嗜盐古菌胞外蛋白酶HlyA酶学性质及在鱼露发酵中的初步应用研究

作者：厉思雅江苏大学

学位级别：硕士

嗜盐古菌胞外蛋白酶通常具有嗜盐碱、耐高温、耐有机溶剂等特征,在工业上具有巨大应用潜力。本研究以低盐适应性嗜盐古菌Halococcus salifodinae的胞外蛋白酶Hly A为研究对象,探究Hly A在不同温度、盐度、p H下的稳定性及降解产物,比较H... 详细信息

嗜盐古菌胞外蛋白酶通常具有嗜盐碱、耐高温、耐有机溶剂等特征,在工业上具有巨大应用潜力。本研究以低盐适应性嗜盐古菌Halococcus salifodinae的胞外蛋白酶Hly A为研究对象,探究Hly A在不同温度、盐度、p H下的稳定性及降解产物,比较Hly A和C端延伸区(C-terminal extension,CTE)缺失突变体Hly A△CTE的酶学性质,初步研究具有优良催化性能的Hly A△CTE作为外加酶对鱼露发酵的影响。Hly A在高温或低盐条件下自加工降解成稳定的产物。采用Escherichia coli异源表达、镍柱亲和层析、体外复性及凝胶过滤层析,获得了纯度较高的Hly A。Hly A在低温、高盐、p H 6.0-10.0下均具有良好的稳定性,但是,在40℃以上的高温或2 M Na Cl以下的低盐环境中会自加工降解成稳定的产物。蛋白质C端测序结果表明降解产物是CTE缺失、仅含催化结构域的Hly A△CTE。纯化的重组Hly A△CTE前体未能复性获得成熟酶,表明CTE在自催化成熟过程中发挥着重要作用。自剪切位点(P1和P1’)定点突变Hly AE421A和Hly AE421A+T422A对重组菌株Haloferax volcanii胞外上清液酶活没有显著影响,但是,成熟酶仍然会发生自剪切。Hly A△CTE是高稳定性、高活性的广适性蛋白酶。Hly A的降解产物Hly A△CTE在广泛的温度(-20-60℃)、盐度(0.5-4 M Na Cl)和p H(6.0-10.0)范围内均具有良好的稳定性。Hly A的最适反应条件为40-45℃、p H 8.5,Hly A△CTE的最适反应条件为60℃、p H 7.0。Hly A和Hly A△CTE在低盐条件(0.5-1.5 M Na Cl)下活性较高。与Hly A相比,Hly A△CTE的温度耐受性更好,在高温下具有更高的活性。K、Ca、Mg和Sr促进Hly A和Hly A△CTE的酶活。Hly A和Hly A△CTE能够水解多种蛋白质底物,对DMSO、吐温20有较好的耐受性。Hly A△CTE最大反应速率V是Hly A的2.1倍。Hly A△CTE能够促进鱼蛋白水解,提高鱼露游离氨基酸含量。模拟鱼露发酵过程中,外加Hly A△CTE的鱼露氨基酸态氮含量、TCA-多肽含量和蛋白酶活性均高于外加碱性蛋白酶、外加中性蛋白酶和未加酶的鱼露。外加Hly A△CTE的鱼露人体必需氨基酸和鲜味氨基酸含量最高,其游离氨基酸总量分别是外加碱性蛋白酶、外加中性蛋白酶及未加酶鱼露的1.4倍、1.9倍和3.0倍。综上,Hly A在高温或低盐环境中会自加工降解,降解产物Hly A△CTE具有优良的酶学性质,能够促进鱼露发酵中蛋白质的水解。本研究将为嗜盐古菌胞外蛋白酶应用于高盐发酵食品工业提供重要的理论依据。

关键词：嗜盐古菌胞外蛋白酶 C端延伸区域酶学性质鱼露发酵

嗜盐古菌Halorubrum菌红素合成路径解析

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嗜盐古菌Halorubrum菌红素合成路径解析

作者：杨欢天津科技大学

学位级别：硕士

菌红素及其衍生物主要来源于嗜盐古菌细胞膜,是一种少见的羟基化C非环状类胡萝卜素。与常见的C类胡萝卜素相比,菌红素抗氧化活性较高,且具有抗菌、抗病毒、抗溶血、抗肿瘤等多重生物功能。目前菌红素的获取主要依赖于嗜盐古菌发酵,其存... 详细信息

菌红素及其衍生物主要来源于嗜盐古菌细胞膜,是一种少见的羟基化C非环状类胡萝卜素。与常见的C类胡萝卜素相比,菌红素抗氧化活性较高,且具有抗菌、抗病毒、抗溶血、抗肿瘤等多重生物功能。目前菌红素的获取主要依赖于嗜盐古菌发酵,其存在的主要问题是产量较低,难以实现规模化生产。菌红素产量低的根本原因是其在细胞内含量较低,解决这一问题的关键在于菌红素合成机制的解析。本论文以菌红素含量较高的嗜盐古菌盐红菌Halorubrum sp.IT-4为实验材料,通过菌体的形态观察和生理生化特性分析明确了Halorubrum sp.IT-4的基本特性;基于全基因组图谱,初步解析了Halorubrum菌红素从头合成途径;根据不同培养时期色素含量和比较转录组分析,挖掘了菌红素合成的候选关键基因,为进一步代谢调控提高菌红素含量提供理论依据,为新型古菌类胡萝卜素资源的开发利用奠定理论基础。具体结果如下:(1)Halorubrum sp.IT-4细胞短棒状,大小约为0.5～1μm×1～1.5μm。革兰氏阴性菌,菌落为圆形,直径为0.5～1 mm,表面光滑,边缘整齐,中间微有隆起,粘稠、湿润呈红色,具有氧化酶和过氧化氢酶活性。(2)Halorubrum sp.IT-4染色体基因组全长为2,996,265 bp,GC含量68.78%,含有2956个基因。基于基因组,推测Halorubrum sp.IT-4通过甲羟戊酸途径合成异戊二烯单元,异戊二烯单元经一系列反应合成番茄红素,进而合成菌红素。重点关注9个与番茄红素合成菌红素相关的基因,并对其进行生物信息学分析,包括编码类胡萝卜素水合酶的基因cru F,编码类胡萝卜素去饱和酶的crt D-1、crt D-2和crt D-3,编码番茄红素延长酶的lye J-1和lye J-2,编码β-胡萝卜素双加氧酶基因brp和blh,编码古菌视紫红质基因bop。(3)不同培养时期(24 h、48 h、96 h、144 h、192 h和240 h)细胞色素含量分析显示,在192 h内Halorubrum sp.IT-4细胞总类胡萝卜素和菌红素的相对含量随培养时间的增加而逐渐升高。192 h达到峰值,此时总类胡萝卜素含量为4.5×10±0.26×10μg/cell。192 h后细胞色素含量有所降低。(4)选取了不同培养时期(24 h、48 h、96 h和192 h)的Halorubrum sp.IT-4细胞进行了比较转录组分析。对重点关注基因进行荧光定量PCR,发现75%的基因表达趋势与转录组测序结果一致。转录组结果显示,与菌红素合成直接相关的crt D-1、crt D-2和crt D-3表达水平在96 h和192 h显著升高,cru F、lye J-1和lye J-2表达水平随培养时间的增加而降低。此外,间接影响菌红素合成的基因brp和bop表达量与培养时间呈正比,它们参与古菌视紫红质合成,与菌红素合成为竞争关系,可作为代谢调控的候选基因。

关键词：嗜盐古菌基因组转录组菌红素合成路径

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嗜盐古菌几种常见胞外酶研究进展

微生物学通报 2021年第3期48卷 830-841页

作者：王锐陈绍兴安徽师范大学生命科学学院安徽芜湖241000

嗜盐古菌是一类生活于极端高盐环境的化能异养型原核微生物,其所分泌的胞外酶(外泌酶)具有在高盐条件下仍能保持活性的特点,在制革工业、高盐有机废水处理和泡菜加工等腌制食品方面发挥重要用途。本文对嗜盐古菌的胞外蛋白酶、淀粉酶、... 详细信息

嗜盐古菌是一类生活于极端高盐环境的化能异养型原核微生物,其所分泌的胞外酶(外泌酶)具有在高盐条件下仍能保持活性的特点,在制革工业、高盐有机废水处理和泡菜加工等腌制食品方面发挥重要用途。本文对嗜盐古菌的胞外蛋白酶、淀粉酶、酯酶等几种常见胞外酶的来源和基本酶学性质的最新研究进展进行综述,为更好地开发利用嗜盐古菌胞外酶资源提供参考。

关键词：嗜盐古菌外泌酶蛋白酶淀粉酶酯酶

极端嗜盐多形性古菌病毒HRPV13的分离鉴定及生物学特性

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微生物学通报 2022年第5期49卷 1563-1580页

作者：宋珊珊邓晓园杜鑫成欧阳淑珊陈向东武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430072

【背景】与感染细菌和真核生物的病毒相比,目前发现的古菌病毒数量很少,但是却展现出形态多样性。因此,分离和鉴定新的古菌病毒具有重要意义。【目的】为了进一步了解古菌病毒的多样性,我们从青海省翡翠湖水样中分离到一株新的嗜盐古菌... 详细信息

【背景】与感染细菌和真核生物的病毒相比,目前发现的古菌病毒数量很少,但是却展现出形态多样性。因此,分离和鉴定新的古菌病毒具有重要意义。【目的】为了进一步了解古菌病毒的多样性,我们从青海省翡翠湖水样中分离到一株新的嗜盐古菌病毒株,研究其生物学特性并进行分类。【方法】首先通过挑取单菌落法分离嗜盐古菌,通过噬菌斑法获得嗜盐古菌病毒,PEG 6000两步沉淀法和CsCl密度梯度离心对病毒颗粒进行浓缩和纯化,用醋酸双氧铀对病毒负染染色,在透射电镜下观察病毒形态,提取病毒基因组后进行测序并进行生物信息学分析,以三氯乙酸法制备病毒蛋白样品并进行SDS-PAGE分析,分别用考马斯亮蓝和苏丹黑B染色并观察其蛋白和脂质条带。【结果】在以Halorubrum属极端嗜盐古菌K2菌株为敏感菌的双层平板上分离到了一株嗜盐古菌病毒,其噬菌斑为浊斑,透射电镜下呈多形性包膜病毒状,直径60 nm左右;含有9333 bp大小的双链环状DNA基因组,与已报道的β多形包膜病毒属(Betapleolipovirus)的HRPV11、HRPV12和HRPV10具有约75%的一致性,是该属的一个病毒新种。根据形态及基因组特征,将其归属于β多形包膜病毒属,命名为Halorubrum pleomorphic virus 13(HRPV13)。该病毒在50℃以下及pH 5.0−9.0具有较好活性,高盐浓度下具有侵染能力,而且病毒侵染宿主后不会造成宿主的大量裂解。【结论】通过电镜观察和生物学特性研究以及基因组测序分析,证实HRPV13为β多形包膜病毒属的新种,其分离和鉴定丰富了多形性病毒种类,这为研究不同区域多形性病毒的进化奠定了基础。

关键词：嗜盐古菌环境病毒多形性病毒分离纯化

乌勇布拉克盐湖嗜盐古菌絮凝效果筛选及活性检测

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微生物学报 2022年第11期62卷 4095-4107页

作者：刘冰冰王双雨申亚淇赵栩程爽王来友郭书贤李文均南阳理工学院河南省工业微生物资源与发酵技术重点实验室河南南阳473004 中山大学生命科学学院广东广州510275

【目的】从嗜盐古菌中筛选可产生生物絮凝剂的菌株,对发酵液、上清液、菌悬液、胞外聚合物的絮凝作用进行检测,筛选能够适应高盐废水处理,且具有广谱盐度及pH作用范围的微生物絮凝剂。【方法】以新疆乌勇布拉克干盐湖沉积物为研究对象,... 详细信息

【目的】从嗜盐古菌中筛选可产生生物絮凝剂的菌株,对发酵液、上清液、菌悬液、胞外聚合物的絮凝作用进行检测,筛选能够适应高盐废水处理,且具有广谱盐度及pH作用范围的微生物絮凝剂。【方法】以新疆乌勇布拉克干盐湖沉积物为研究对象,利用纯培养方法对嗜盐古菌进行分离,对絮凝菌株进行初筛及16S rRNA基因测序,构建系统进化树,初步判断菌株分类地位;复筛检测不同生物材料的絮凝效果;选择絮凝效果较好的生物材料,检测其盐度、pH的絮凝效果稳定性。【结果】采用纯培养方法共分离到28株嗜盐古菌,絮凝初筛共筛选出16株嗜盐古菌,分布于碱线菌属(Natrinema)、盐缓长菌属(Halopiger)和盐土生菌属(Haloterrigena)。菌株发酵液、上清液、菌悬液、胞外聚合物具有不同程度的絮凝效果。菌株A279-1、A133、RP33、NGA0064、RM-152、A389的发酵液、上清液的絮凝效果较好,其中菌株A389的发酵液絮凝率为61.06%,上清液为67.92%。所有菌株菌悬液的絮凝率达到80%以上。菌株所产胞外聚合物表现出较好的絮凝效果,菌株RM-152所产胞外聚合物的絮凝率最高,达89.86%,其次是A389(81.53%)。菌株A389所产胞外聚合物的产量最大,达12.53g/L,具有广泛的盐度和pH适应性。【结论】乌勇布拉克干盐湖沉积物中蕴含丰富的可产生微生物絮凝剂的嗜盐古菌资源。嗜盐古菌菌株发酵液、上清液、菌悬液及胞外聚合物均具有良好的絮凝作用,尤其是胞外聚合物表现出较好的絮凝效果,具有广谱的盐度和pH耐受性。嗜盐古菌所产生物絮凝剂的发现对于后续高盐废水功能材料开发具有重要应用价值。

关键词：嗜盐古菌絮凝作用高盐废水群落组成胞外聚合物

嗜盐古菌Haloferax volcanii WFD11中龙胆酸1,2-双加氧酶HagA的研究

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微生物学通报 2017年第8期44卷 1793-1801页

作者：巩红云周羽许楹周宁一上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室上海200240 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

【目的】研究嗜盐古菌Haloferax volcanii WFD11菌株以不同芳香酸作为碳源的生长情况;鉴定其通过龙胆酸途径代谢芳香酸过程中的开环酶龙胆酸1,2-双加氧酶的基因,并对其进行生化水平的研究;初步揭示古菌和细菌代谢芳香酸的可能差异。【... 详细信息

【目的】研究嗜盐古菌Haloferax volcanii WFD11菌株以不同芳香酸作为碳源的生长情况;鉴定其通过龙胆酸途径代谢芳香酸过程中的开环酶龙胆酸1,2-双加氧酶的基因,并对其进行生化水平的研究;初步揭示古菌和细菌代谢芳香酸的可能差异。【方法】分别以4 mmol/L的6种不同芳香酸为唯一碳源培养菌株WFD11,利用全自动生长曲线分析仪测定菌株生长情况并绘制生长曲线;利用高效液相色谱检测菌株WFD11代谢3-羟基苯甲酸的中间产物;对菌株WFD11的基因组进行生物信息学分析,寻找潜在的龙胆酸1,2-双加氧酶编码基因,并在Haloferax volcanii H1424中异源表达;通过快速纯化系统(采用Ni2+-NTA亲和层析柱)纯化异源表达的蛋白,以龙胆酸为底物通过紫外分光光度计检测粗酶液和纯化后的龙胆酸1,2-双加氧酶和相关酶学特性;通过实时定量PCR观察hag A的表达类型。【结果】菌株WFD11能以4 mmol/L的3-羟基苯甲酸和3-羟基苯丙酸为唯一碳源和能源生长;高效液相色谱检测证明菌株WFD11通过龙胆酸代谢3-羟基苯甲酸(3HBA);克隆和异源表达了龙胆酸1,2-双加氧酶基因hag A;Hag A粗酶液和纯化蛋白均具龙胆酸1,2-双加氧酶的活性,催化龙胆酸开环生成顺丁二酸单酰丙酮酸;Hag A的龙胆酸1,2-双加氧酶比活力为0.024 8 U/mg,且其活性不依赖于Fe2+;荧光定量PCR实验结果证明hag A是组成型表达。【结论】嗜盐古菌H.volcanii WFD11可能是通过龙胆酸途径代谢芳香酸类物质,为进一步研究古菌和细菌代谢芳香酸的可能差异打下了基础。

关键词：嗜盐古菌富盐菌WFD11 富盐菌H1424 龙胆酸龙胆酸1,2-双加氧酶顺丁烯二酸单酰丙酮酸

嗜盐古菌表型与基因型及其主导的盐渍土壤氮素循环研究

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嗜盐古菌表型与基因型及其主导的盐渍土壤氮素循环研究

作者：胡信玉江苏大学

学位级别：硕士

嗜盐古菌是一类嗜盐的微生物,在盐湖、盐矿、盐渍土壤等高盐生态系统中广泛分布。随着研究人员对极端环境生物资源的挖掘和基因组测序技术的发展,使得越来越多的嗜盐古菌被鉴定、描述和基因组测序。为了整体研究嗜盐古菌生长特性、代谢... 详细信息

嗜盐古菌是一类嗜盐的微生物,在盐湖、盐矿、盐渍土壤等高盐生态系统中广泛分布。随着研究人员对极端环境生物资源的挖掘和基因组测序技术的发展,使得越来越多的嗜盐古菌被鉴定、描述和基因组测序。为了整体研究嗜盐古菌生长特性、代谢特征和生态功能潜力,本文整合分析了国内外研究的嗜盐古菌的生理生化和基因组数据。并采集我国内陆和滨海不同地域盐渍土壤样品,将高通量数据与基因组数据结合分析,解析嗜盐古菌通过反硝化和硝酸盐异化还原为铵(DNRA)作用主导的盐渍土壤中的氮素循环过程。通过嗜盐古菌标准株基因组下载和分析,根据嗜盐古菌基因组数据绘制的基于122个古菌marker蛋白串联序列的系统发育树能够将三个目的进化枝分开。通过对嗜盐古菌基因组基本信息、生境及生长条件分析,发现盐古菌目(Halobacteriales)广泛分布于陆地、海洋和食品高盐生态系统中,基因组大小为2.09～5.61 Mb,蛋白质编码序列数量介于2140～5647,G+C mol%含量范围为47.7～68.7,可生长p H、Na Cl和温度范围分别为5.0～10.0,0.8～6.0 M,15～60℃;富盐菌目(Haloferacales)主要分布于陆地和海洋生态系统,且系统发育树中分布于陆地和海洋的嗜盐古菌能够较为明显的区分开,基因组大小为2.47～5.19Mb,蛋白质编码序列数量介于2570～5299,G+C mol%含量范围为58.9～69.2,可生长p H、Na Cl和温度范围分别为5.0～11.0,0.9～6.0 M,10～60℃;而无色需碱菌目(Natrialbales)属于嗜盐碱微生物,主要分布于陆地碱性生态系统中,基因组大小为3.22～5.44 Mb,蛋白质编码序列数量介于3124～5209,G+C mol%含量范围为60.2～66.1,可生长p H、Na Cl和温度范围分别为6.0～11.0,1.3～6.0 M,17～60℃。通过嗜盐古菌可利用碳源和能源物质分析发现,大部分嗜盐古菌对于葡萄糖、甘露糖、蔗糖和甘油的利用具有偏好性,无色需碱菌目可利用的醇、氨基酸和有机酸盐类物质较盐古菌目和富盐菌目少,表明无色需碱菌目对于碳源或能源物质要求较高。嗜盐古菌可利用碳源和能源物质的分析对其分离、培养和应用提供了一定参考。嗜盐古菌广泛的分布和能源物质利用,使其可以不受环境限制,在多种生态系统中发挥生态功能。对207个种的嗜盐古菌基因组注释结果分析发现,除Halodesulfurarchaeum formicicum、Halococcoides cellulosivorans等6株分离自缺氧、富含硫化物等环境的无机异养型或贫营养型嗜盐古菌外,其它嗜盐古菌都具有完整的TCA循环相关基因。我们推测嗜盐古菌通过三羧酸循环、糖酵解、磷酸戊糖途径等过程参与生态系统中碳元素循环,另外,部分嗜盐古菌还具有几丁质酶、酚酸降解途径关键酶(龙胆酸1,2-双加氧酶、β-酮己二酸烯醇内酯水解酶)编码基因,可以参与环境中几丁质和酚酸物质的转化。三个目的嗜盐古菌均可进行硝酸盐同化,但硝酸盐异化过程主要由盐古菌目和富盐菌目主导。其中,盐古菌目和富盐菌目可将硝酸盐转化为亚硝酸盐,且主要以反硝化过程进行硝酸盐异化还原并产生NO和N;无色需碱菌目无法异化还原硝酸盐,但可以亚硝酸盐为底物,通过反硝化和DNRA过程参与生态系统中氮素循环;所有反硝化嗜盐古菌中,富盐菌目和无色需碱菌目嗜盐古菌终产物以N为主,盐古菌目嗜盐古菌终产物以温室气体NO为主。部分嗜盐古菌具有编码硫代硫酸盐还原酶的基因phs ABC和砷氧化酶的基因,在硫还原和砷氧化过程中具有一定作用。因此,嗜盐古菌对于高盐生态系统中C、N、S等元素的生物地球化学循环具有不可或缺的作用。通过对3个内陆盐渍土壤样品和5个滨海盐渍土壤样品进行理化性质测定,确定盐渍土壤可提供适宜嗜盐古菌生长的盐度(19.34～29.07 g·kg);Microcosm试验表明古菌群落对于盐渍土壤微生物反硝化作用具有较细菌和真菌群落高的贡献率,因此,采用高通量测序技术对盐渍土壤中古菌群落进行解析,我们发现在内陆和滨海盐渍土壤中,嗜盐古菌均为主要优势类群,内陆盐渍土壤样品中嗜盐古菌三个目均有分布,包括内陆盐渍土壤特有的无色需碱菌目,而滨海盐渍土壤样品中嗜盐古菌则主要为盐古菌目和富盐菌目。将嗜盐古菌OTU与基因组功能注释相结合解析嗜盐古菌主导的硝酸盐和亚硝酸盐的循环过程,结果表明,内陆和滨海盐渍土壤均具有较高相对丰度的反硝化嗜盐古菌和较低相对丰度的DNRA嗜盐古菌,并且具有nor的嗜盐古菌丰度均高于具有nos Z的嗜盐古菌,我们推测盐渍土壤中嗜盐古菌反硝化产物均以温室气体NO为主。通过嗜盐古菌氮素循环代谢路径预测,我们推测嗜盐古菌进行反硝化作用时,所需的电子由土壤中有机质进入胞内参与糖酵解和TCA循环产生。另外,嗜盐古菌还可通过硫还原和砷氧化过程参与盐渍土壤生态系统中S和As元素的循环。因此

关键词：嗜盐古菌基因型生物地球化学循环反硝化微生态模拟体系

两株嗜盐古菌所产C50类胡萝卜素的鉴定及抗氧化活性

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中国食品学报 2019年第10期19卷 243-250页

作者：侯靖吕布崔恒林江苏大学食品与生物工程学院

采用紫外-可见光谱法、薄层层析和高效液相色谱-质谱联用技术对两株嗜盐古菌所产的类胡萝卜素进行组分鉴定、含量分析以及各组分的抗氧化能力研究。结果表明,解脂盐红菌的类胡萝卜素中菌红素占84.91%,单脱水菌红素占7.87%,双脱水菌红素... 详细信息

采用紫外-可见光谱法、薄层层析和高效液相色谱-质谱联用技术对两株嗜盐古菌所产的类胡萝卜素进行组分鉴定、含量分析以及各组分的抗氧化能力研究。结果表明,解脂盐红菌的类胡萝卜素中菌红素占84.91%,单脱水菌红素占7.87%,双脱水菌红素占4.03%。海滨盐水红菌的类胡萝卜素中菌红素占94.86%,单脱水菌红素占1.17%。利用硅胶柱层析纯化得到菌红素、单脱水菌红素和双脱水菌红素组分,其对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力均呈浓度依赖性,并显著高于同浓度的β-胡萝卜素,提示嗜盐古菌C50类胡萝卜素具有较高的抗氧化活性。本研究为天然类胡萝卜素资源的开发利用提供了理论基础。

关键词：嗜盐古菌类胡萝卜素组分鉴定菌红素抗氧化

嗜盐古菌Halorussus sp.XZYJ18产胞外蛋白酶特点及其酶学性质

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中国调味品 2018年第9期43卷 11-16页

作者：侯靖徐佳琪崔恒林江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013

通过脱脂牛奶平板从分离自我国西藏芒康盐井古盐田的133株嗜盐古菌中筛选获得11株产胞外蛋白酶菌株,其中XZYJ18产蛋白酶能力最强。16SrRNA基因序列分析表明XZYJ18为Halorussus属的新种。XZYJ18在对数生长后期开始大量合成胞外蛋白酶,营... 详细信息

通过脱脂牛奶平板从分离自我国西藏芒康盐井古盐田的133株嗜盐古菌中筛选获得11株产胞外蛋白酶菌株,其中XZYJ18产蛋白酶能力最强。16SrRNA基因序列分析表明XZYJ18为Halorussus属的新种。XZYJ18在对数生长后期开始大量合成胞外蛋白酶,营养丰富的培养基抑制胞外蛋白酶合成。XZYJ18胞外蛋白酶在55℃,pH 8.0和0mol/L NaCl的条件下酶活最高,在酸性、碱性、低盐或高盐条件下均具有良好的稳定性,因而能够在不同的环境中催化蛋白质水解。

关键词：嗜盐古菌胞外蛋白酶筛选酶学性质产酶特点