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嗜吞噬细胞无形体致病机制的研究现状

中华微生物学和免疫学杂志 2021年第12期41卷 962-968页

作者：陈施华张秋宇袁瑾严敏岳磊昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系 650500 中国医学科学院医学生物学研究所疫苗诊断技术实验室昆明650118 荆州市第一人民医院检验科 434000

嗜吞噬细胞无形体以蜱虫为传播媒介,专性寄生于啮齿动物、反刍动物、鹿、马以及人类。当感染嗜吞噬细胞无形体的蜱虫吸食人类血液时,会将嗜吞噬细胞无形体传播至人体内,导致无形体病。随着人类户外活动的增加,蜱虫和人类的接触机会增多... 详细信息

嗜吞噬细胞无形体以蜱虫为传播媒介,专性寄生于啮齿动物、反刍动物、鹿、马以及人类。当感染嗜吞噬细胞无形体的蜱虫吸食人类血液时,会将嗜吞噬细胞无形体传播至人体内,导致无形体病。随着人类户外活动的增加,蜱虫和人类的接触机会增多,患无形体病的概率也相应增大。无形体病确诊患者经强力霉素治疗大多可以痊愈,但是免疫力低下的患者有并发癫痫、肾衰竭甚至死亡的风险。全面了解嗜吞噬细胞无形体的致病机制,可以为重症患者的治疗提供新的治疗策略。因此,本综述简介了嗜吞噬细胞无形体致病相关蛋白质,然后从干扰细胞骨架重塑、抑制宿主细胞凋亡、固有免疫应答失调三个方面总结了该病原体致病机制的研究现状,并提出需要解决的关键问题。

关键词：嗜吞噬细胞无形体无形体病致病机制

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嗜吞噬细胞无形体的流行特征及临床诊断进展

中华卫生杀虫药械 2022年第2期28卷 184-187页

作者：周琦贺真邵中军陕西中医药大学公共卫生学院陕西咸阳712000 空军军医大学军事预防医学系军队防疫与流行病学教研室陕西西安710032

嗜吞噬细胞无形体是一种重要的蜱传病原体,它的流行特征具有显著的季节消长、地理特质和人群差异,这些典型特征与宿主动物的生活环境密切相关。本文主要综述了嗜吞噬细胞无形体的流行特征、传播流行的影响因素以及目前临床常见的诊断方... 详细信息

嗜吞噬细胞无形体是一种重要的蜱传病原体,它的流行特征具有显著的季节消长、地理特质和人群差异,这些典型特征与宿主动物的生活环境密切相关。本文主要综述了嗜吞噬细胞无形体的流行特征、传播流行的影响因素以及目前临床常见的诊断方法,有助于了解嗜吞噬细胞无形体的三间分布流行特征,并结合临床诊断方法,加强对嗜吞噬细胞无形体的调查和监测。

关键词：嗜吞噬细胞无形体流行特征传播因素临床诊断

蜱媒中贝纳氏柯克斯体和嗜吞噬细胞无形体对肺炎致病性的相关性分析

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蜱媒中贝纳氏柯克斯体和嗜吞噬细胞无形体对肺炎致病性的相关性分...

作者：徐爱兰佳木斯大学

学位级别：硕士

目的:近年来蜱虫叮咬导致呼吸系统尤其是肺炎为主要症状的患者越来越多,通过对采集的蜱虫(Tick)进行高通量测序,获得贝纳氏柯克斯体及嗜吞噬细胞无形体的序列,根据二者与人源性肺炎患者的贝纳氏柯克斯体及嗜吞噬细胞无形体序列遗传进化... 详细信息

目的:近年来蜱虫叮咬导致呼吸系统尤其是肺炎为主要症状的患者越来越多,通过对采集的蜱虫(Tick)进行高通量测序,获得贝纳氏柯克斯体及嗜吞噬细胞无形体的序列,根据二者与人源性肺炎患者的贝纳氏柯克斯体及嗜吞噬细胞无形体序列遗传进化关系来了解蜱虫携带的病原体对呼吸系统尤其是肺炎可能的致病性大小。方法:在2020年4月-2021年6月,在中国辽宁省和中蒙边境收集的蜱虫250只。标记植被采集蜱类,以及从山羊和牛的体表采集寄生蜱类。昆虫学家从形态上对所有蜱类进行了物种水平和不同发育阶段的鉴定。核酸提取后进行文库制备,上机进行测序。测序所获得的数据,根据遗传信息的不同丰度可显示出各种微生物的不同生物含量。同时进行实时荧光定量PCR验证病原体。宏基因组测序(MNGS)获得的序列与NCBI数据库已报道的人源性贝纳氏柯克斯体及嗜吞噬细胞无形体的序列进行核苷酸比对和构建系统发育树。结果:本研究通过MNGS获得贝纳氏柯克斯体和嗜吞噬细胞无形体的部分序列,通过实时荧光定量PCR已经验证MNGS的结果。(1)本研究获得贝纳氏柯克斯体的部分序列,命名为CBNT1,CBNT1与肺炎患者的贝氏纳氏柯克斯体SFA053(登录号:MN540441.1)、贝纳氏柯克斯体SFA062(登录号:MN540440.1)的核苷酸同源性均大于95%。CBNT1与2015年在中国发现的森林革蜱分离株贝纳氏柯克斯体内共生体Dsilv1(登录号:KP994813.1)和森林革蜱分离株贝纳氏柯克斯体内共生体Dsilv2(登录号:P994814.1)均有100%的核苷酸同源性。(2)获得嗜吞噬细胞无形体的部分序列,命名为AP05。AP05与肺炎患者的人蛋白酶体组装伴侣3变种2(PSMG3)(登录号:NM 001134340.2)、人蛋白酶体组装伴侣3变种1(PSMG3)(登录号:NM32302.4)核苷酸同源性都大于95%。AP05与无形体分离株tick-XA143 16S核糖体RNA基因(登录号:MG869594.1)、与无形体分离株AK-Rm-429 16S核糖体RNA基因(登录号:MH762077.1)的核苷酸同源性均大于99%。结论:1.本研究通过MNGS技术在蜱虫中获得贝纳氏柯克斯体和嗜吞噬细胞无形体的部分序列,并已通过实时荧光定量PCR验证为阳性。2.对贝纳氏柯克斯体部分序列CBNT1和嗜吞噬细胞无形体部分序列AP05进行遗传进化分析,发现CBNT1、AP05分别与人源性肺炎患者的序列具有高度同源性。3.本研究的序列与已报道的序列比对后,表明肺炎患者致病病原体可能是由蜱媒传播所致,但需结合临床及流行病学。4.中蒙边境地区存在贝纳氏柯克斯体和嗜吞噬细胞无形体两种人肺炎相关病原体,具有重要的流行病学意义,值得高度专注,对于我国相关区域的蜱传疾病的诊断治疗具有重要的参考价值。

关键词：蜱虫贝纳氏柯克斯体嗜吞噬细胞无形体肺炎宏基因组测序系统发育分析

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嗜吞噬细胞无形体表面蛋白P44研究进展

中国人兽共患病学报 2020年第12期36卷 1038-1043页

作者：张秋宇王峰孙乐陈施华岳磊严敏昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系昆明650500 中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

P44是嗜吞噬细胞无形体p44/msp2基因家族编码的膜表面含量最多、研究最广泛的蛋白。其作为一个穿孔蛋白广泛参与病原体感染早期的黏附、入侵、免疫逃逸及新陈代谢等多种复杂生理活动,与嗜吞噬细胞无形体的致病机制密切相关,已成为当下... 详细信息

P44是嗜吞噬细胞无形体p44/msp2基因家族编码的膜表面含量最多、研究最广泛的蛋白。其作为一个穿孔蛋白广泛参与病原体感染早期的黏附、入侵、免疫逃逸及新陈代谢等多种复杂生理活动,与嗜吞噬细胞无形体的致病机制密切相关,已成为当下研究的热点分子。本文就该蛋白分子的主要生理功能、分子生物学特性等方面对其进行全面阐述。

关键词：嗜吞噬细胞无形体 p44/msp2 穿孔蛋白免疫逃逸

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嗜吞噬细胞无形体的分子检测技术研究进展

临床检验杂志 2014年第4期32卷 281-283页

作者：王峰宝福凯柳爱华昆明医科大学病原生物学与免疫学系昆明650500 昆明医科大学热带医学研究所昆明650500 昆明医科大学生物化学与分子生物学系昆明650500

嗜吞噬细胞无形体(AP)主要引起人类经蜱叮咬传播的人粒细胞无形体病(HGA)。快速、准确的针对HGA的检测技术能够有效地控制其爆发,减少死亡病例。目前AP感染的诊断方法有临床诊断、血清学诊断、形态学诊断、分子生物学诊断等。其中AP分... 详细信息

嗜吞噬细胞无形体(AP)主要引起人类经蜱叮咬传播的人粒细胞无形体病(HGA)。快速、准确的针对HGA的检测技术能够有效地控制其爆发,减少死亡病例。目前AP感染的诊断方法有临床诊断、血清学诊断、形态学诊断、分子生物学诊断等。其中AP分子检测技术特异性高、操作简便,快速,是目前对AP感染诊断的常用方法。针对AP分子检测主要方法包括巢式PCR(nested PCR)、实时定量荧光PCR(real time PCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)等。三类分子检测技术各有优缺点,应根据具体情况选用适当的检测手段,提高AP感染的早期诊断准确率。

关键词：嗜吞噬细胞无形体诊断分子检测技术

嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的生物信息学分析及表达鉴定

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生物技术通报 2015年第1期31卷 220-224页

作者：赵庆亮杨素芳梁田张殿卿杨霞盛金良石河子大学动物科技学院人兽共患病实验室石河子832003

分析预测嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的抗原性,对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白采用生物信息学对其进行分析二级结构,亲水性,疏水性,B细胞线性表位;根据分析的优势抗原表位区,进行基因合成并亚克隆至p ET32a表达载体,在大肠埃希菌中获得重... 详细信息

分析预测嗜吞噬细胞无形体msp4蛋白的抗原性,对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白采用生物信息学对其进行分析二级结构,亲水性,疏水性,B细胞线性表位;根据分析的优势抗原表位区,进行基因合成并亚克隆至p ET32a表达载体,在大肠埃希菌中获得重组蛋白。生物信息学分析结果显示msp4蛋白由283个氨基酸组成,分子量为29.8 ku,理论等电点为6.05,不稳定系数为32.79,总平均疏水性为0.063;二级结构预测msp4蛋白主要以无规卷曲、延伸链、α-螺旋为主;B细胞表位预测msp4蛋白有14个线性表位;根据分析的结果选取msp4蛋白亲水性高的膜外区的28-158位序列克隆至p ET32a进行原核表达,在34 ku出有目的蛋白的表达。成功对嗜吞噬细胞无形体的msp4蛋白原核表达及纯化,为无形体病血清学检测方法的建立奠定了物质基础。

关键词：嗜吞噬细胞无形体生物信息学分析 msp4蛋白原核表达

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嗜吞噬细胞无形体的致病机制的研究进展

中国人兽共患病学报 2013年第7期29卷 704-708页

作者：王勇陈创夫张丽娟新疆石河子大学动物科技学院石河子832003 中国CDC传染病预防控制所无形体室北京102206

嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum,APH)是重要人兽共患病——人粒细胞无形体病(HGA)的病原体。APH专性侵染哺乳动物中性粒细胞,入侵后在细胞内形成包涵体逃逸溶酶体酶的杀伤,APH同时破坏宿主细胞的凋亡和自噬,并抑制宿主细... 详细信息

嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum,APH)是重要人兽共患病——人粒细胞无形体病(HGA)的病原体。APH专性侵染哺乳动物中性粒细胞,入侵后在细胞内形成包涵体逃逸溶酶体酶的杀伤,APH同时破坏宿主细胞的凋亡和自噬,并抑制宿主细胞的氧化反应等杀菌活性。APH通过一系列毒力分子表达影响宿主细胞,使其在宿主细胞内有效生存和繁殖,最终导致机体感染的发生。

关键词：嗜吞噬细胞无形体致病机制研究进展

中国嗜吞噬细胞无形体分离株多间隔序列分型分析

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中华流行病学杂志 2014年第5期35卷 585-587页

作者：程雪琴张丽娟中国疾病预防控制中心传染病预防控制所无形体室北京102206

目的：对我国嗜吞噬细胞无形体分离株进行多间隔序列分型（MST）分型。方法根据GenBank收录的4株无形体全基因组序列，利用Mauve 2.3.1软件行种内基因组比对，选择具有变异间隔区进行引物设计，通过引物特异性及扩增效率等预实验筛选引... 详细信息

目的：对我国嗜吞噬细胞无形体分离株进行多间隔序列分型（MST）分型。方法根据GenBank收录的4株无形体全基因组序列，利用Mauve 2.3.1软件行种内基因组比对，选择具有变异间隔区进行引物设计，通过引物特异性及扩增效率等预实验筛选引物，并对实验菌株进行PCR扩增，分析单核苷酸多态性（SNPs）。将每株菌间隔序列拼接后进行分型分析并构建进化树，分析不同地区、不同动物种类来源菌株遗传变异关系。结果共筛选出22对引物，用于我国11株无形体分离株MST分型，SNPs分析显示，碱基转换发生率最高（60.2%，251/417），其中A-G转换居首（18.9%，79/417），颠换占23.0%（96/417），插入及缺失发生率占16.7%（70/417）。11株菌22条间隔序列拼接后（约11047 bp）均为独立变异型。进化分析发现山东省莱州地区重症患者分离株（LZ-H1、H2、H3、H4、H5）及当地长角血蜱分离株LZ-T1与美国Webster株及HZ株聚为一簇，而北京分离株BJ-H1与新疆分离株XJ-H1和XJ-H3聚为一类。莱州地区另一蜱分离株LZ-T2与新疆另外一人源分离株聚为一类，与莱州重症患者分离株遗传关系密切。结论我国无形体分离株间隔序列存在明显的遗传多态性，MST分型技术可用于无形体疫情暴发时的快速诊断和疫情追踪。

关键词：嗜吞噬细胞无形体多间隔序列分型

嗜吞噬细胞无形体ZJ-msp4基因的生物信息学分析

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黑龙江畜牧兽医 2017年第12期 32-35,287,288页

作者：赵庆亮杨斌王永树冉光鑫杨霞盛金良黔西南民族职业技术学院生物工程系贵州兴义562400 石河子大学动物科技学院/人兽共患病实验室新疆石河子832003

为了利用生物信息学预测嗜吞噬细胞无形体ZJ-msp4蛋白的优势抗原表位,给寻找无形体病诊断和预防的候选抗原表位提供参考,试验参照Gen Bank中的msp4基因序列(登录号为EU008082.1)进行生物信息学分析。结果表明:ZJ-msp4蛋白的分子质量为30... 详细信息

为了利用生物信息学预测嗜吞噬细胞无形体ZJ-msp4蛋白的优势抗原表位,给寻找无形体病诊断和预防的候选抗原表位提供参考,试验参照Gen Bank中的msp4基因序列(登录号为EU008082.1)进行生物信息学分析。结果表明:ZJ-msp4蛋白的分子质量为30.1 ku,理论等电点为5.71,该蛋白的不稳定系数为29.13,组成较多的氨基酸有丝氨酸(Ser,13.8%)、甘氨酸(Gly,9.2%)、丙氨酸(Ala,8.9%)等;二级结构预测ZJ-msp4蛋白主要以无规卷曲、延伸链、α螺旋为主,TMHMM2.0预测该蛋白的第7~29位氨基酸可能为跨膜区,该跨膜区可能为信号肽序列;Signal P 4.1预测在msp4蛋白的N端第1~29位氨基酸序列为信号肽序列,该分析结果与TMHMM2.0分析结果一致;B细胞表位预测该msp4蛋白有11个线性表位,其中以28~38位、64~77位、87~101位、134~143位、245~264位是ZJ-msp4蛋白的优势抗原表位区段,可以作为诊断无形体病的候选表位。

关键词：嗜吞噬细胞无形体生物信息学 ZJ—msp4 信号肽 B细胞表位