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基于适配体的酶联吸光度法检测血小板衍生生长因子-BB

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基于适配体的酶联吸光度法检测血小板衍生生长因子-BB

作者：吕莉山西大学

学位级别：硕士

第一章：对核酸适配体的定义、筛选过程和优点以及血小板衍生生长因子的结构和作用进行了简单的介绍,在此基础上对基于适配体的血小板衍生生长因子-BB的不同检测方法进行了综述;并对本论文的立题背景、研究内容以及创新点进行了阐述。... 详细信息

第一章：对核酸适配体的定义、筛选过程和优点以及血小板衍生生长因子的结构和作用进行了简单的介绍,在此基础上对基于适配体的血小板衍生生长因子-BB的不同检测方法进行了综述;并对本论文的立题背景、研究内容以及创新点进行了阐述。第二章：本章发展了一种基于抗体和适配体的酶联吸光度法检测血小板衍生生长因子-BB。在修饰有抗体的微孔板中加入分析物血小板衍生生长因子-BB,则抗体能够将其特异性捕获。然后加入生物素标记的适配体,适配体与血小板衍生生长因子-BB结合,从而形成三明治结构。再加入酶标抗体工作液,则通过生物素和链霉亲和素之间的相互作用,适配体可以与酶分子结合。加入酶的底物,进行酶催化反应。通过测定酶催化产物的吸光度值从而实现血小板衍生生长因子-BB的定量检测。该方法当血小板衍生生长因子-BB的浓度为2.5 pM—40 pM时与吸光度值具有较好的相关性,线性方程为y=0.056 x-3.14×10-4(R2=0.9992).该方法操作简单,灵敏度较高,具有较好的选择性和较高的回收率。第三章：本章建立了一种基于双适配体的酶联吸光度法检测血小板衍生生长因子-BB。在链霉亲和素包被的微孔板中加入生物素标记的适配体,通过生物素和链霉亲和素之间的相互作用,使适配体修饰于微孔板中。当加入血小板衍生生长因子-BB,适配体可以特异地将其捕获。再次加入生物素标记的适配体,则其可以与血小板衍生生长因子-BB结合,从而形成三明治结构。再加入酶标抗体工作液,通过生物素和链霉亲和素间的相互作用,酶分子可以与适配体结合。加入酶底物,进行酶催化反应。通过测定催化产物的吸光度值实现对血小板衍生生长因子-BB的定量检测。当血小板衍生生长因子-BB浓度在12.5 pM—400 pM范围内时与吸光度值具有较好的相关性,线性方程为：y=0.005 x+0.03(R2=0.998),检测限约为5.8 pM。而且该方法可以实现在稀释的牛血清复杂样品中对血小板衍生生长因子-BB的检测。第四章：结合适配体和滚环扩增技术的优势,我们发展了一种灵敏地检测血小板衍生生长因子-BB的方法。首先,血小板衍生生长因子-BB被修饰于微孔板中的抗体特异性捕获,然后与连接引物序列的适配体结合,从而形成三明治结构。通过滚环扩增反应,引物序列可以延长形成长的具有重复序列的的单链DNA,该产物可以结合大量的生物素标记的短链DNA探针,然后与标记有链霉亲和素的辣根过氧化物酶结合,它可以催化底物转化成有颜色的产物,通过吸光度分析对血小板衍生生长因子-BB进行检测。由于结合了滚环扩增技术和辣根过氧化物酶催化法,实现了灵敏地检测血小板衍生生长因子-BB,且这种方法具有较好的选择性。这种方法检测限可达3.1 pM,线性范围是3.1 pM—200 pM。

关键词：适配体血小板衍生生长因子-BB 吸光度法辣根过氧化物酶 3,3’,5’,5’-四甲基联苯胺滚环扩增法

吸光度法对30例全口义齿咀嚼效能的比较研究

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临床口腔医学杂志 2009年第11期25卷 687-688页

作者：肖严湖北职业技术学院湖北孝感432100

目的:比较不同方法制作全口义齿的咀嚼效能。方法:应用吸光度法测量30例无牙颌患者分别采用直接咬合法和哥特氏弓描记法确定正中关系制作完成的全口义齿的咀嚼效能。结果:经统计学分析,哥特式弓描记法优于直接咬合法制作的全口义齿。结... 详细信息

目的:比较不同方法制作全口义齿的咀嚼效能。方法:应用吸光度法测量30例无牙颌患者分别采用直接咬合法和哥特氏弓描记法确定正中关系制作完成的全口义齿的咀嚼效能。结果:经统计学分析,哥特式弓描记法优于直接咬合法制作的全口义齿。结论:哥特式弓描记法是可推广的确定正中颌位关系的方法。

关键词：吸光度法全口义齿咀嚼效能

吸光度法测量正常合者和错合畸形者咀嚼效能的研究

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医学信息（医学与计算机应用） 2014年第25期18卷 403-404页

作者：陈卫卫北京中医医院顺义医院北京101300

目的比较18~22岁错合畸形者与正常合者咀嚼效率的差异。方法采用722型光栅分光光度计吸光度法测量错合畸形者与正常合者的吸光度值,用SPSS13.0件对有关组分别进行比较。结果错合畸形者的吸光度值明显低于正常合者(P<0.05)。结论错合畸... 详细信息

目的比较18~22岁错合畸形者与正常合者咀嚼效率的差异。方法采用722型光栅分光光度计吸光度法测量错合畸形者与正常合者的吸光度值,用SPSS13.0件对有关组分别进行比较。结果错合畸形者的吸光度值明显低于正常合者(P<0.05)。结论错合畸形者的咀嚼效能比正常合者低。

关键词：错合吸光度法咀嚼效能

环境样品中镉、铜和铅的测定——火焰原子吸光度法中流动注射—在线吸附提取作用的估价

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检验检疫学刊 1994年第4期17卷 27-34页

作者：薛华广东商检局

火焰原子吸收光度法(FAAS)作为最广泛使用的测定技术之一,是非常精密和准确的,但是一般地由于灵敏度不高或者基体干扰,不能用来测定环境样品中痕量重金属元素,用手动分批方法对分析物进行予浓缩和基体分离,由于消耗时间和试剂而会有污... 详细信息

火焰原子吸收光度法(FAAS)作为最广泛使用的测定技术之一,是非常精密和准确的,但是一般地由于灵敏度不高或者基体干扰,不能用来测定环境样品中痕量重金属元素,用手动分批方法对分析物进行予浓缩和基体分离,由于消耗时间和试剂而会有污染和损失的危险。

关键词：流动注射环境样品中吸光度法火焰原子吸附提取铅的测定痕量重金属络合剂峰面积湖沉积物

用吸光度法对正常青年人咀嚼效能的测定与分析

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上海铁道大学学报 1998年第1期19卷 43-44页

作者：苏剑生口腔医学院修复学教研室

研究影响咀嚼效能的因素。方法采用吸光度法来测定１８名正常Ｈｅ青年人在自由咀嚼状态下的半分钟咀嚼效能、吞咽反射前咀嚼效能以及限定用单侧咀嚼的半钟喟嚼效能。

关键词：正常He 咀嚼效能吸光度法青年人测定分析

用ATP颗粒剂吸光度法的新的咀嚼功能测定法——第1部份:关于测试方法和测试材料ATP的性质

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国外医学.口腔医学分册 1982年第4期 250-251页

作者：陈正刚

虽然过去报告过多种咀嚼功能测定法,即使有的可用于戴义齿的患者,但是对于因上颌肿瘤切除术后或外伤等原因所致的上颌缺失,用义颌修复的患者来说,则因测试材料太硬、有粘着性、测定方法烦杂等而难以

关键词： ATP 吸光度法口腔咀嚼功能颗粒剂剂型测试材料测定法

多波长标准加入吸光度法同时测定锌汞双组分体系

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兵团教育学院学报 1999年第1期9卷 76-77页

作者：洪成林唐辉陈文石河子大学医学院药学系

本文采用多波长标准加入法 ,利用 3,5 -diBr -PADAP/SLS显色同时测定锌、汞 ,既改善选择性又不降低灵敏度 ,而且标准加入法一定程度上消除了基质的影响 ,多元回归降低了随机误差 ,方法简便 ,回收率。

关键词：吸光度法上消同时测定标准加入法降低影响显色双组分多波长选择性

用吸光度法对正常青年人咀嚼效能的测定与分析

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上海铁道大学学报(医学辑) 1998年第Z1期 48-49+53页

作者：苏剑生

目的研究影响咀嚼效能的因素。方法采用吸光度法来测定１８名正常牙合青年人在自由咀嚼状态下的半分钟咀嚼效能、吞咽反射前咀嚼效能以及限定用单侧咀嚼的半分钟咀嚼效能。结果①自由咀嚼的半分钟咀嚼效能高于限定用单侧咀嚼的效能（Ｐ... 详细信息

目的研究影响咀嚼效能的因素。方法采用吸光度法来测定１８名正常牙合青年人在自由咀嚼状态下的半分钟咀嚼效能、吞咽反射前咀嚼效能以及限定用单侧咀嚼的半分钟咀嚼效能。结果①自由咀嚼的半分钟咀嚼效能高于限定用单侧咀嚼的效能（Ｐ＜０．０５）；②自由咀嚼的半分钟咀嚼效能与其吞咽反射前咀嚼效能间无明显差别（Ｐ＞０．０５），前者男女间有明显差异（Ｐ＜０．０５）。而后者男女间却无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结论①单侧咀嚼将明显影响口颌系统功能的发挥。②半分钟咀嚼效能存在着性别上的差异，而吞咽反射前咀嚼效能却无性别上的差别。

关键词：咀嚼效能吸光度法

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关于用吸光度法直接测定分配比的改进

分析化学 1983年第12期 924-926页

作者：陈连山赵洪刚何锺林大连辽宁师范学院化学系大连轻工学院化工系

本文提出用吸光度法直接测定分配比的改进方法。讨论了方法的相对误差,手续简便,在一定条件下能得到准确结果。这种方法虽也属于差减法的一种,但不需要知道溶质的总浓度和测出摩尔吸光系数。在萃取过程中分配比是一个很有实际意义的实... 详细信息

本文提出用吸光度法直接测定分配比的改进方法。讨论了方法的相对误差,手续简便,在一定条件下能得到准确结果。这种方法虽也属于差减法的一种,但不需要知道溶质的总浓度和测出摩尔吸光系数。在萃取过程中分配比是一个很有实际意义的实验量。由于萃取分离一般适用于微量物质。所以分配比的测定,通常是用光度法分别测萃取分层后两相中的溶质总浓度来求算分配

关键词：分配比相对误差吸光度法测量误差溶质浓度直接测定