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含缬酪肽蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义

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吉林大学学报（医学版） 2020年第3期46卷 600-606页

作者：郭小菲刘立红艾浩锦州医科大学附属第三医院妇产科辽宁锦州121000 锦州医科大学附属第一医院妇产科辽宁锦州121000

目的:观察上皮性卵巢癌(EOC)组织中含缬酪肽蛋白(VCP)的表达情况及其与EOC患者临床病理特征的关系,为EOC的分子治疗提供依据。方法:采用免疫组织化学法检测94例EOC组织标本、13例卵巢交界性肿瘤组织标本、36例卵巢良性肿瘤组织标本和8... 详细信息

目的:观察上皮性卵巢癌(EOC)组织中含缬酪肽蛋白(VCP)的表达情况及其与EOC患者临床病理特征的关系,为EOC的分子治疗提供依据。方法:采用免疫组织化学法检测94例EOC组织标本、13例卵巢交界性肿瘤组织标本、36例卵巢良性肿瘤组织标本和8例正常卵巢组织标本中VCP的表达情况。分析VCP阳性表达率与EOC患者各临床病理参数(年龄、FIGO分期、病理类型、组织学分级、是否有淋巴结转移、是否有腹水和术前CA125水平)的关系。采用免疫荧光技术和Western blotting法检测人卵巢上皮HOSEpiC细胞和人EOC SKOV-3细胞中VCP表达;将SKOV-3细胞分为对照组(未经CB-5083处理)和处理组(经CB-5083处理),划痕实验分析2组SKOV-3细胞迁移率,平板克隆形成实验分析2组SKOV-3细胞克隆形成率,免疫荧光法分析2组SKOV-3细胞中VCP表达情况,Western blotting法检测2组SKOV-3细胞中VCP、NF-κB/P65、IκBα和p-IκBα蛋白表达水平。结果:EOC、交界性卵巢肿瘤、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中VCP阳性表达率组间比较差异有统计学意义(P0.05)。SKOV-3细胞中VCP表达水平高于HOSEpiC细胞(P蛋白表达水平低于对照组(P蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:VCP在EOC组织和细胞中呈高表达,VCP高表达可促进肿瘤的迁移和增殖。

关键词：卵巢肿瘤含缬酪肽蛋白划痕实验平板克隆形成实验

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含缬酪肽蛋白在神经退行性疾病中的作用

中华神经医学杂志 2013年第7期12卷 745-748页

作者：程传东牛朝诗安徽医科大学附属省立医院神经外科脑功能与脑疾病安徽省重点实验室安徽省脑立体定向神经外科研究所.合肥230001

含缬酪肽蛋白（valosin—containingprotein，VCP）是一种重要的Ⅱ型三磷酸腺昔（ATP）酶，细胞内含量丰富且结构保守，在内质网相关蛋白降解、自噬等途径中起重要作用。VCP的活性取决于其复杂的分子结构，可与不同的衔接蛋白或辅助蛋... 详细信息

含缬酪肽蛋白（valosin—containingprotein，VCP）是一种重要的Ⅱ型三磷酸腺昔（ATP）酶，细胞内含量丰富且结构保守，在内质网相关蛋白降解、自噬等途径中起重要作用。VCP的活性取决于其复杂的分子结构，可与不同的衔接蛋白或辅助蛋白结合改变构象．促进与泛素蛋白的相互作用而发挥作用。近年来，VCP的突变和功能障碍在神经退行性疾病的发病机制中的作用受到重视。本文将围绕VCP及其复合物在神经退行性疾病中的作用研究进展展开综述。

关键词：含缬酪肽蛋白泛素 VCP衔接蛋白神经退行性病变

含缬酪肽蛋白表达与侵袭性B细胞淋巴瘤预后的相关性分析

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现代免疫学 2020年第2期40卷 142-146页

作者：李星石昊延安市人民医院肿瘤血液科延安716000 延安市人民医院耳鼻咽喉头颈外科延安716000

为了探讨含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)表达与侵袭性B细胞淋巴瘤预后的相关性,选取90例侵袭性B细胞淋巴瘤患者作为研究对象,采用免疫组化技术检测所有患者石蜡包埋样本的VCP表达水平,根据其表达水平将患者分成VCP高表达... 详细信息

为了探讨含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)表达与侵袭性B细胞淋巴瘤预后的相关性,选取90例侵袭性B细胞淋巴瘤患者作为研究对象,采用免疫组化技术检测所有患者石蜡包埋样本的VCP表达水平,根据其表达水平将患者分成VCP高表达组(n=42)和VCP低表达组(n=48),比较两组患者的临床特征以及预后情况,并对患者的预后影响因素进行单因素和多因素分析。结果显示,两组患者的安阿伯(Ann Arbor)分期和复发率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);VCP高表达组患者无病生存期(disease-free survival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)均显著低于VCP低表达组(P<0.05);单因素和多因素分析结果均显示,Ann Arbor分期和VCP表达水平是侵袭性B细胞淋巴瘤患者DFS和OS的独立影响因素。提示VCP的表达水平显著影响侵袭性B细胞淋巴瘤的预后,VCP在侵袭性B细胞淋巴瘤的发生和发展过程中起重要的作用,可作为预测侵袭性B细胞淋巴瘤预后的有效指标。

关键词：含缬酪肽蛋白侵袭性 B细胞淋巴瘤预后

含缬酪肽蛋白调控猪瘟病毒胞内运输与脱衣壳的分子机制研究

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含缬酪肽蛋白调控猪瘟病毒胞内运输与脱衣壳的分子机制研究

作者：孙睿聪南京农业大学

学位级别：硕士

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、热性、高度接触性的传染病,不同年龄、性别、品种的猪均对其易感,猪瘟给世界养猪业带来了巨大的经济损失,被世界动物卫生组织(OIE)列... 详细信息

猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、热性、高度接触性的传染病,不同年龄、性别、品种的猪均对其易感,猪瘟给世界养猪业带来了巨大的经济损失,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的疫病。含缬酪肽蛋白(VCP)广泛存在于真核生物中,可以通过与不同的辅助因子结合从而参与发挥不同的细胞功能:如多种蛋白的降解、泛素蛋白酶体系统(UPS)、DNA的复制及断裂修复、膜融合以及自噬等。此外,VCP还参与了病毒生命周期的多个阶段,包括入侵和脱衣壳、胞内运输、复制和释放等。本研究基于si RNA、激光共聚焦显微镜、Co-IP、内质网和高尔基蛋白提取技术,解析了VCP调控CSFV入侵以及脱衣壳的分子机制。通过对VCP调控CSFV入侵以及脱衣壳研究的深入,不仅使我们更好地理解、认识病毒的致病机理,而且有助于抗病毒新药的开发和疫苗的研制,为预防、控制和消灭猪瘟奠定了基础。本研究将从以下三个方面展开:1.含缬酪肽蛋白是猪瘟病毒感染猪肾细胞的一种关键蛋白。为了探究VCP在参与调控CSFV感染PK-15细胞的分子机制,我们首先使用了VCP的三种抑制剂DBe Q、NMS-873、ML-240处理细胞,然后感染CSFV,通过RT-q PCR与IFA技术发现了这些VCP的抑制剂均对CSFV的复制具有明显的抑制作用。其次,过表达外源性VCP蛋白可以显著促进CSFV的复制,而干扰VCP的正常表达明显抑制了CSFV的增殖。此外,通过不同时间点添加抑制剂的实验(time of addition),我们发现了药物对病毒的抑制作用主要体现在早期感染阶段。另外,干扰VCP后感染CSFV,并于不同时间点收取样品,结果显示CSFV的入侵受到了明显的抑制。并且在感染CSFV后早期阶段,细胞内源性VCP表达水平显著上升。综上所述,VCP参与了CSFV感染PK-15细胞的早期入侵阶段。2.含缬酪肽蛋白调节猪瘟病毒从早期内体到溶酶体的运输。为了研究VCP调控CSFV早期感染PK-15细胞的具体分子机制,首先本研究于CSFV感染后15～60 min固定细胞样品,通过激光共聚焦显微镜观察到VCP与病毒粒子共定位,并且与病毒感染时间呈正相关。其次,在CSFV感染后1 h,VCP表现出明显的聚集现象。此外,本研究发现了CSFV感染1 h后,VCP明显与Rab5和Lamp-1蛋白共定位,并且干扰VCP后还发现病毒粒子与Rab5蛋白的共定位更加明显,但是却不再与Rab7蛋白共定位,表明VCP能够调节病毒粒子从早期内体到溶酶体的转运。3.含缬酪肽蛋白通过内质网相关蛋白降解途径帮助猪瘟病毒脱衣壳。内质网相关蛋白降解途径(Endoplasmic Reticulum-associated Degradation,ERAD)是细胞中降解错误折叠蛋白的主要方式,而VCP作为ERAD的关键蛋白之一,通过与病毒蛋白相互作用从而被病毒劫持并利用ERAD途径逃避免疫反应。为了进一步解析VCP参与调控CSFV脱衣壳的分子机制,我们分别过表达外源性的CSFV蛋白于PK-15细胞中,通过激光共聚焦显微镜观察到VCP与Core蛋白明显共定位,并且Co-IP的结果也显示VCP与Core蛋白相互作用。此外,与对照组相比,干扰VCP后Core蛋白明显聚集于溶酶体中,但不能定位到内质网上,表明Core蛋白从溶酶体转运到内质网的过程需要VCP的参与。其次,过表达外源性Core蛋白在胞内表现为不断降解状态,而添加VCP的抑制剂(NMS-873)或干扰VCP均能显著抑制Core蛋白的降解,并且过表达外源性VCP也可以加速Core蛋白的降解,暗示了VCP对Core蛋白的降解表现出明显的促进作用。另外,干扰蛋白酶体亚基(PSMB2、PSMD2),然后感染CSFV,会导致Npro蛋白显著降低,并且通过激光共聚焦显微镜也发现PSMB2、PSMD2与VCP以及Core蛋白三者之间明显共定位,表明Core蛋白的降解依赖于VCP和蛋白酶体,也就是说Core蛋白是通过ERAD途径降解的。最后,通过提取复制复合体、内质网和高尔基体中的总蛋白,发现与Mock组相比,VCP的表达水平在CSFV感染后均无明显差异,表明VCP不参与CSFV复制复合体的形成。总之,本研究表明VCP通过ERAD途径帮助病毒粒子完成脱衣壳,但是不参与病毒制复合体的形成,为VCP调控病毒脱衣壳的研究奠定了丰富的理论基础。

关键词：含缬酪肽蛋白猪瘟病毒转运内质网相关蛋白降解途径脱衣壳

含缬酪肽蛋白（VCP）在胶质瘤组织中的表达及其临床意义

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含缬酪肽蛋白（VCP）在胶质瘤组织中的表达及其临床意义

作者：王刘帅河北医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨含缬酪肽蛋白(Valosin-Containing Protein,VCP)在胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法:1临床标本的采集:从河北医科大学第二医院神经外科采集一年的不同级别神经胶质瘤及正常脑组织标本。以2007年WHO标准病理分级为标准,采... 详细信息

目的:探讨含缬酪肽蛋白(Valosin-Containing Protein,VCP)在胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法:1临床标本的采集:从河北医科大学第二医院神经外科采集一年的不同级别神经胶质瘤及正常脑组织标本。以2007年WHO标准病理分级为标准,采集I级的神经胶质瘤标本共58例,其中II级、III级、IV级神经胶质瘤标本分别为26例、18例、14例,同时取脑外伤患者行颅内减压术的正常脑组织标本12例作为对照组。2采用免疫组织化学染色及Western Blot的方法检测并比较各级别胶质瘤组织及正常脑组织中VCP蛋白表达量。结果:1免疫组织化学染色结果显示:在正常脑组织细胞中VCP未见阳性表达,在胶质瘤细胞中VCP呈阳性表达,且随着肿瘤病理级别的升高,VCP表达量逐渐增加。正常脑组织、Ⅰ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤组织的平均光密度值分别为(0.4275±0.0498)、(0.6910±0.1464)、(1.1840±0.2922)、(2.052±0.3571)。任意两组之间平均光密度的差异均有统计学意义,P<0.05。2 Western Blot结果显示:在正常脑组织细胞中VCP表达量较低,在胶质瘤细胞中VCP表达量明显升高,并且随着肿瘤病理级别的升高,VCP表达量逐渐增加。正常脑组织、Ⅰ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤组织的灰度值比值(VCP/β-action)分别为(0.2312±0.0171)、(0.4129±0.0130)、(1.0148±0.2047)、(2.1886±0.1538)。任意两组之间灰度值的差异均有统计学意义,P<0.05。结论:1在正常脑组织中VCP的表达水平较低,在胶质瘤组织中VCP的表达水平升高。2不同级别胶质瘤组织中VCP的表达水平存在差异,且随着胶质瘤病理级别的增高呈现出递增的趋势,与疾病的恶性程度密切相关。VCP有可能成为胶质瘤治疗的新靶点,检测VCP的表达,有助于判断胶质瘤患者的预后,从而指导临床治疗。

关键词：胶质瘤含缬酪肽蛋白病理级别

猪源含缬酪肽蛋白(VCP)的真核表达及其活性鉴定

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畜牧与兽医 2022年第8期54卷 66-72页

作者：孙睿聪胡家欢李晓晗陈婧周斌南京农业大学动物医学院江苏南京210095 农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

含缬酪肽蛋白(VCP)作为细胞中的重要活性蛋白,参与多种细胞过程,也在许多病毒的感染过程中发挥重要作用。为了探究VCP对猪瘟病毒(CSFV)、日本脑炎病毒(JEV)和伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响,试验扩增了猪源VCP的基因片段,并将其连接到pEGF... 详细信息

含缬酪肽蛋白(VCP)作为细胞中的重要活性蛋白,参与多种细胞过程,也在许多病毒的感染过程中发挥重要作用。为了探究VCP对猪瘟病毒(CSFV)、日本脑炎病毒(JEV)和伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响,试验扩增了猪源VCP的基因片段,并将其连接到pEGFP-C1载体中。经双酶切鉴定结合基因测序结果,成功构建真核表达重组载体pEGFP-VCP。通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)证实,重组质粒EGFP-VCP能在猪肾细胞(PK-15)中成功表达。而在表达pEGFP-VCP的细胞中分别感染CSFV、JEV和PRV后,通过Western blot、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、半数细胞感染量(TCID_(50))以及IFA试验,检测到过表达VCP能够明显促进CSFV、JEV以及PRV病毒蛋白的表达,提高胞内病毒核酸的含量,并且使胞外病毒滴度增加,极大地促进了3种病毒在PK-15细胞中的复制,为深入研究VCP促进多种病毒感染宿主细胞的分子机制奠定了理论基础。

关键词：含缬酪肽蛋白猪瘟病毒日本脑炎病毒伪狂犬病毒猪肾细胞复制

我国原发性青光眼患者外周血中含缬酪肽蛋白和α-胞衬蛋白含量的研究

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眼科新进展 2018年第10期38卷 968-971页

作者：吴德福周利晓吕梁许冬董敬民郑州大学第五附属医院眼科河南省郑州市450052 郑州大学第一附属医院眼科河南省郑州市450052

目的检测不同类型青光眼患者与正常人外周血中含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)、α-胞衬蛋白(α-fodrin)的水平差异,评估各指标在青光眼诊断中的价值。方法收集2015年1月至2017年9月首诊于我院和郑州大学第一附属医院眼... 详细信息

目的检测不同类型青光眼患者与正常人外周血中含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)、α-胞衬蛋白(α-fodrin)的水平差异,评估各指标在青光眼诊断中的价值。方法收集2015年1月至2017年9月首诊于我院和郑州大学第一附属医院眼科的青光眼患者80例,其中原发性闭角型青光眼(primary angle-closure glaucoma,PACG)组40例,原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)组40例;同期收集我院健康体检者40例作为对照组。采用ELISA法分别测定各组外周血中VCP和α-fodrin的含量,并作对比,同时对上述指标绘制受试者工作特征曲线,计算曲线下面积。采用多因素Logistic回归分析青光眼患者发病的危险因素。结果POAG组、PACG组和对照组VCP含量分别为(124.866±34.858)ng·L^(-1)、(94.143±28.970)ng·L^(-1)和(44.707±8.892)ng·L^(-1),α-fodrin含量分别为(0.531±0.306)μg·L^(-1)、(0.399±0.213)μg·L^(-1)、(0.304±0.214)μg·L^(-1),3组间两两相比,VCP、α-fodrin含量的差异均有统计学意义(均为P含量高于PACG患者和正常人群,提示免疫因素可能在青光眼视神经损害机制中起重要作用,VCP是POAG发病的独立危险因素。

关键词：青光眼免疫因素含缬酪肽蛋白 α-胞衬蛋白

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含缬酪肽蛋白在肿瘤中的研究进展

黑龙江医学 2021年第23期45卷 2569-2572页

作者：郭小菲艾浩天津市滨海新区塘沽妇产医院天津300450 锦州医科大学附属第三医院辽宁锦州121001

近些年来多项研究表明,含缬酪肽蛋白(VCP)与多种肿瘤的发生有关,可以通过激活STAT3通路促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭与转移,通过激活NF-κB信号通路促进骨肉瘤细胞U2-OS的转移。通过对多种肿瘤的临床研究表明,VCP在肿瘤中阳性表达明显... 详细信息

近些年来多项研究表明,含缬酪肽蛋白(VCP)与多种肿瘤的发生有关,可以通过激活STAT3通路促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭与转移,通过激活NF-κB信号通路促进骨肉瘤细胞U2-OS的转移。通过对多种肿瘤的临床研究表明,VCP在肿瘤中阳性表达明显高于正常组织,且其表达情况与转移、复发明显相关,可以判断患者的预后。文章将从其结构、功能及在肿瘤中的研究进展做详细介绍。

关键词：含缬酪肽蛋白分子伴侣肿瘤

含缬酪肽蛋白基因单核苷酸多态性在肝细胞癌中的研究

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外科理论与实践 2014年第3期19卷 238-242页

作者：刘学谦王新景张天邓侠兴陈皓沈柏用彭承宏上海交通大学医学院附属瑞金医院外科上海200025

目的:探讨含缬酪肽蛋白(valosin containing protein,VCP)基因不同位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的关系。方法:采用病例组与对照组研究,收集122例HCC(HCC组)和120例非HCC(对照组)外周血标本,对VCP基因的4个标签SNPs采用直接测序法进行基因测定分型。采用卡方检验比较基因型及等位基因在HCC组与对照组之间分布的差异,采用非条件Logistic回归分析多态基因型与HCC的关系。结果:rs546982位点等位基因及基因型在HCC组与对照组中的分布具有显著性差异(P<0.05)。携带rs546982位点AA基因型者比GG基因型者发生HCC风险低,而携带AA基因型的HCC病人比携带GG基因型的HCC病人发生脉管癌栓及淋巴结转移的风险高。位点rs2074549、rs607671、rs10972300的基因型在HCC组和对照组之间差异无统计学意义。结论:VCP基因多态性与HCC存在关联,rs546982位点AA基因型可降低HCC发生率,但可增加HCC病人的淋巴结转移及脉管癌栓的风险。

关键词：含缬酪肽蛋白单核苷酸多态性肝细胞癌