检索结果-南通市图书馆

色谱 2012年第3期30卷 239-244页

作者：王雪颖秦伟捷钱小红张养军沈阳药科大学辽宁沈阳110015 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京102206

建立了氨基酸同位素稀释液相色谱-串联质谱法准确测定合成肽段绝对含量的方法。实验中对合成肽段的纯度进行了表征,色谱纯度表征结果为99%以上,质谱纯度为90%以上。在肽段溶液中加入13C标记的氨基酸后进行酸溶液水解时间的优化,水解后... 详细信息

建立了氨基酸同位素稀释液相色谱-串联质谱法准确测定合成肽段绝对含量的方法。实验中对合成肽段的纯度进行了表征,色谱纯度表征结果为99%以上,质谱纯度为90%以上。在肽段溶液中加入13C标记的氨基酸后进行酸溶液水解时间的优化,水解后的氨基酸直接经液相色谱分离和质谱检测,结果表明肽段中的被测氨基酸在150℃、6 mol/L HCl溶液水解4～6 h就可以达到水解平衡。每个肽段选择两个或两个以上的被测氨基酸,测得随机选择的5种合成肽段的绝对含量为62.07%～88.18%,测定结果的相对标准偏差小于8%,相对误差小于5%,均满足定量要求。除常用的被测氨基酸苯丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸外,还考察了选择赖氨酸和精氨酸作为被测氨基酸的可行性,实验结果表明增加精氨酸为被测氨基酸是可行的,从而进一步增加了方法的普适性。该方法的建立避免了色谱法定量时氨基酸衍生化处理带来的副反应影响及操作繁琐等问题,提高了肽段含量测定的准确度和精密度,为肽段含量的准确测定提供了一种新的方法。

关键词：液相色谱同位素稀释质谱法合成肽段氨基酸分析

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

蛋清多肽制备及其抗氧化活性的研究

蛋清多肽制备及其抗氧化活性的研究

引用

作者：杨珊珊天津科技大学

学位级别：硕士

蛋清是一种优质的食物蛋白质来源,采用酶水解蛋清蛋白质制备生物活性肽能有效地利用我国丰富的禽蛋资源,提高禽蛋的商品附加值,增加禽蛋产业的经济效益,对禽蛋精深加工具有重要的研究意义及广阔的发展前景。本课题以鸡蛋蛋清为原料,分... 详细信息

蛋清是一种优质的食物蛋白质来源,采用酶水解蛋清蛋白质制备生物活性肽能有效地利用我国丰富的禽蛋资源,提高禽蛋的商品附加值,增加禽蛋产业的经济效益,对禽蛋精深加工具有重要的研究意义及广阔的发展前景。本课题以鸡蛋蛋清为原料,分别选用碱性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解蛋清蛋白,酶解结束后测定其水解度。结果表明,碱性蛋白酶水解效果最好,水解度可达到11.2±0.56%。故选用碱性蛋白酶为酶解蛋清蛋白的最佳酶种类。采用碱性蛋白酶水解蛋清蛋白,以水解度为指标,通过L9(34)正交试验优化最佳酶解工艺条件。结果表明,碱性蛋白酶最优水解条件为:温度53℃,底物浓度10%,加酶量1.5%,酶解时间为3h的条件下进行酶解,水解效果最好,水解度可达到12.87±0.48%。对蛋清多肽进行体外及体内抗氧化活性的研究。以DPPH·清除率、·OH清除率、ABTS·+清除率、总还原力以及铁离子螯合能力为指标,评价蛋清多肽的体外抗氧化能力。结果表明,蛋清多肽的体外抗氧化效果较好,在5mg/mL时,其中DPPH·、·OH和ABTS·+清除率以及铁离子螯合能力分别为66.60±2.31%、68.50±1.12%、76.20±1.27%和58.20±2.39%。另外,其抗氧化效果与浓度呈现一定的量效关系,在一定浓度范围内,随着浓度增大其抗氧化能力逐渐增强。对蛋清多肽进行动物试验,建立D-半乳糖衰老小鼠模型,并每天灌胃不同剂量的蛋清多肽。结果发现,不同剂量的蛋清多肽可显著提高小鼠血清、肝脏和心脏中SOD活力和GSH含量(p肽进行分离纯化及鉴定。超滤得到三个组分,其中F3组分的DPPH·清除率最高,可达到78.20±1.83%(5mg/mL)。对F3组分进行Sephadex G-25凝胶色谱分离得到四个组分,其中C组分对应的DPPH·清除率最高,可达到42.00±1.92%(0.5 mg/mL)。对组分C进行高效液相色谱分离得到7个组分,其中C4组分对应的DPPH·清除率最高,可达到48.70±1.83%(0.2 mg/mL)。采用LC-MS/MS对C4组分进行检测,鉴定得到16条潜在的具有抗氧化活性的肽段。挑选3条潜在的抗氧化多肽进行合成,分别是LELEEFRAD、LIHSDKDLFIL和ELPFASGTMSM。测定三条多肽的DPPH·清除能力、ABTS·+清除能力和·OH清除能力,验证其抗氧化活性。结果表明,LELEEFRAD和ELPFASGMSM具有较强的清除DPPH·的能力,清除率分别为91.50±0.89%和83.13±0.70%(2mg/mL)。三条多肽清除ABTS·+能力一般,相对而言ELPFASGMSM清除ABTS·+的能力较强,清除率为46.07±1.06%(2 mg/mL)。LIHSDKDLFIL具有较强的清除·OH的能力,清除率为74.33±1.56%(2mg/mL)。

关键词：蛋清蛋白酶解抗氧化肽纯化合成肽段

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：