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叶下珠有效成分提纯工艺和质量控制研究进展

中国医药导刊 2024年第4期26卷 378-383页

作者：张培李飞亳州市食品药品检验中心安徽亳州236800

叶下珠主要成分包括黄酮类、酚酸类、木脂素类、生物碱类及多糖等,具有清热解毒、利水消肿、明目消积的功效,以及抗菌、抗氧化、抗病毒、抗血栓、提高脾细胞活性、长期使用毒副作用小的特点。临床上,叶下珠联合其他药物治疗乙型肝炎、... 详细信息

叶下珠主要成分包括黄酮类、酚酸类、木脂素类、生物碱类及多糖等,具有清热解毒、利水消肿、明目消积的功效,以及抗菌、抗氧化、抗病毒、抗血栓、提高脾细胞活性、长期使用毒副作用小的特点。临床上,叶下珠联合其他药物治疗乙型肝炎、脂肪肝效果理想。由于药效明确,开发利用前景良好,关于叶下珠各类成分提取利用和质量控制方面的研究及技术不断革新。为提供叶下珠药材开发利用的参考依据,本研究结合相关文献,综述了叶下珠部分有效成分的提纯工艺和近10年来质量控制方面的研究,发现(1)对于叶下珠中总酚类的提取,超声法适用于工业化生产,而柯里拉京的提取方面,膜过滤技术和柱色谱分离技术最有望用于工业生产;其他成分的提取工艺目前主要以传统方法为主,新方法处于实验探索阶段。(2)尽管有关叶下珠药理作用的研究较多,但是单个活性成分的构效关系研究较少,不利于进一步开发新药。(3)质量控制多集中在含量测定和指纹图谱方面,对重金属和33种农残的研究未见报道;市场上仍存在部分易混品常见的有苦味叶下珠、珠子草等,目前仍缺乏简单有效的鉴别手段。

关键词：叶下珠有效成分提纯工艺质量控制研究进展

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叶下珠饮片质量标准优化研究

中医药导报 2024年第3期30卷 61-65,69页

作者：黎旭包敏胡冠宇吴茜谢嘉驰郭宇鸽湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 株洲市食品药品检验所湖南株洲412000 湘潭市中医医院湖南湘潭411100

目的:优化叶下珠饮片的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对叶下珠饮片进行定性鉴别;采用电子显微镜观察叶下珠饮片粉末及横切面特征;采用高效液相色谱法测定没食子酸、柯里拉京的含量;参照2020年版《中华人民共和国药典》测定叶下珠... 详细信息

目的:优化叶下珠饮片的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对叶下珠饮片进行定性鉴别;采用电子显微镜观察叶下珠饮片粉末及横切面特征;采用高效液相色谱法测定没食子酸、柯里拉京的含量;参照2020年版《中华人民共和国药典》测定叶下珠饮片中水分、总灰分、酸不溶灰分和醇溶性浸出物的含量。结果:TLC分析中,叶下珠饮片与对照药材在相近位置均显示紫红色斑点。显微鉴别中,饮片粉末、横切面所含各种组织结构均可作为鉴别依据。含量分析中,没食子酸的线性回归方程为Y=15068X-14509(r=0.9998),含量为0.0110%~0.2582%;柯里拉京的线性回归方程为Y=38265X-7032(r=0.9999),含量为0.1267%~0.3291%;水分、总灰分、酸不溶灰分及醇溶性浸出物含量分别为9.49%~11.29%、6.02%~9.92%、0.64%~1.67%、15.73%~30.25%。结论:该质量标准可为准确、全面控制叶下珠饮片质量提供技术支持。

关键词：叶下珠薄层鉴别显微鉴别含量测定质量标准

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叶下珠黄化植原体和丛枝植原体的分子鉴定

热带作物学报 2024年第4期45卷 864-871页

作者：林兆威牛晓庆唐庆华王晔楠孟秀利宋薇薇中国热带农业科学院椰子研究所/海南省院士团队创新中心海南文昌571339

2022年8月在海南省文昌市一个槟榔黄化病园内,分别发现叶片黄化和丛枝症状的叶下珠,前期检测均为植原体感染。为了明确叶下珠黄化植原体和丛枝植原体的分类鉴定,本研究通过克隆16S rDNA基因和核糖体蛋白(rp)基因,并进行基因序列一致性... 详细信息

2022年8月在海南省文昌市一个槟榔黄化病园内,分别发现叶片黄化和丛枝症状的叶下珠,前期检测均为植原体感染。为了明确叶下珠黄化植原体和丛枝植原体的分类鉴定,本研究通过克隆16S rDNA基因和核糖体蛋白(rp)基因,并进行基因序列一致性、系统发育树及虚拟RFLP等分析。结果显示:克隆获得叶下珠黄化植原体16S rDNA片段1246 bp,rp基因1212 bp;叶下珠丛枝植原体16S rDNA片段1827 bp,rp基因1240 bp。基因序列一致性显示,叶下珠黄化植原体与丛枝植原体的16S rDNA基因序列均与16SrⅠ组的植原体一致性高达98%以上,与槟榔黄化植原体海南株系的16S rDNA序列一致性达100%;而二者的rp基因序列均与rpⅠ组的植原体一致性高达99%以上。系统发育树分析显示,叶下珠黄化植原体和丛枝植原体16S rDNA基因均与翠菊黄化组(16SrⅠ)植原体聚于一个大分支,且与16SrⅠ-B亚组的槟榔黄化植原体聚于同一个小分支,亲缘关系接近;而rp基因均与翠菊黄化组(rpⅠ)植原体集聚于一个大分支,且与rpⅠ-B亚组的翠菊黄化植原体聚于同一个小分支,亲缘关系接近。虚拟RFLP分析显示,叶下珠黄化植原体和丛枝植原体的16S rDNA基因序列虚拟RFLP图谱与16SrⅠ-B的洋葱黄化植原体的参考图谱相同,且相似系数为1.00。综上表明,叶下珠黄化植原体和丛枝植原体均属于16SrⅠ-B亚组成员。研究结果可对采用铲除槟榔黄化病中间寄主的防控手段提供理论依据。

关键词：叶下珠黄化丛枝植原体分子鉴定

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叶下珠新鞣花鞣质的分离与鉴定(英文)

药学学报 2004年第2期39卷 119-122页

作者：张兰珍郭亚健涂光忠郭五保苗峰北京中医药大学中药学院北京100102 北京微量化学研究所北京100091 陕西中医研究院陕西西安710003

目的　研究叶下珠 (PhyllanthusurinariaL .)的化学成分。方法　用多种色谱法进行分离纯化 ,现代波谱法鉴定结构。结果　分离得到一个新的鞣花鞣质叶下珠素G ,结构为 1 O galloyl 2 phyllanthoyl 3 ,6 (R) HHDP β D glucose。结论　... 详细信息

目的　研究叶下珠 (PhyllanthusurinariaL .)的化学成分。方法　用多种色谱法进行分离纯化 ,现代波谱法鉴定结构。结果　分离得到一个新的鞣花鞣质叶下珠素G ,结构为 1 O galloyl 2 phyllanthoyl 3 ,6 (R) HHDP β D glucose。结论　叶下珠素G(phyllanthusiinG)

关键词：叶下珠鞣花鞣质色谱法波谱法叶下珠素G

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叶下珠人工种植正交实验研究

中国中药杂志 2006年第12期31卷 969-972页

作者：范俊安张艳夏永鹏邱宗荫重庆医科大学药学系重庆400016 重庆市中药研究院重庆400065 重庆市食品药品监督管理局重庆400042

目的:研究人工种植条件下叶下珠的生长发育规律、产量构成及影响因素,为叶下珠规范化种植提供依据。方法:3因素3水平正交设计田间实验,并将种植叶下珠与野生叶下珠进行性状比较。结果与结论:人工种植条件下叶下珠的株高、分枝数、单株... 详细信息

目的:研究人工种植条件下叶下珠的生长发育规律、产量构成及影响因素,为叶下珠规范化种植提供依据。方法:3因素3水平正交设计田间实验,并将种植叶下珠与野生叶下珠进行性状比较。结果与结论:人工种植条件下叶下珠的株高、分枝数、单株干重等性状均比野生叶下珠有极大的提高,其中单株产量提高达3.27倍;播种期是影响叶下珠单位面积产量和单株性状的最敏感因素,不同播种密度和施肥水平对产量也有显著影响;叶下珠4月中旬前期播种,20 cm行距条播,1周左右开始出苗,6至8月为生长旺盛期,9月份生长减缓,10月下旬采收,每公顷产量可达5 750 kg。

关键词：叶下珠栽培技术田间实验生长规律

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叶下珠药材HPLC指纹图谱的研究

中药材 2007年第2期30卷 150-153页

作者：刘慧盛卫国彭松西南大学中医药学院重庆400716 上海中医药大学中药学院上海201203 湖北中医学院湖北武汉430061

目的:建立叶下珠药材高效液相指纹图谱,为叶下珠的鉴别及质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法对不同产地,不同采摘时间的叶下珠水溶性成分进行指纹图谱的研究。结果:HPLC指纹图谱中峰的分离均较好,得到10个共有峰。结论:该指纹... 详细信息

目的:建立叶下珠药材高效液相指纹图谱,为叶下珠的鉴别及质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法对不同产地,不同采摘时间的叶下珠水溶性成分进行指纹图谱的研究。结果:HPLC指纹图谱中峰的分离均较好,得到10个共有峰。结论:该指纹谱能够用于叶下珠药材的鉴定及质量评价。

关键词：叶下珠指纹图谱 HPLC

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叶下珠种质资源遗传多样性的ISSR分析

中草药 2012年第1期43卷 159-163页

作者：张忠廉李学兰张丽霞宋美芳唐德英中国医学科学院药用植物研究所云南分所云南景洪666100

目的对分布于我国30个居群的叶下珠进行遗传多样性分析。方法采用ISSR分子标记技术,研究来自我国重庆、陕西、河南、云南、广西、广东、浙江、贵州、福建、海南省区共30个叶下珠居群的遗传多样性。结果从60个ISSR引物中筛选出24个用于扩... 详细信息

目的对分布于我国30个居群的叶下珠进行遗传多样性分析。方法采用ISSR分子标记技术,研究来自我国重庆、陕西、河南、云南、广西、广东、浙江、贵州、福建、海南省区共30个叶下珠居群的遗传多样性。结果从60个ISSR引物中筛选出24个用于扩增,共扩增得到264条条带,其中共有条带19条,多样性条带245条,多态位点百分率(PPB)为92.80%,遗传相似性系数(GS)值在0.579 5～0.916 7,多态性较高。UPGMA聚类结果显示我国叶下珠居群大致可以分为3支,即内陆分支、沿海分支及位于云南省区的过渡分支;个别居群呈现明显的居群特异性。结论叶下珠种质资源遗传多样性较高。

关键词：叶下珠遗传多样性 ISSR 聚类分析遗传相似性系数

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叶下珠化学成分研究

中草药 2016年第20期47卷 3573-3577页

作者：杨孟妮张慧刘娟李洋李文婷夏厚林成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室四川成都611137

目的研究叶下珠Phyllanthus urinaria全草的化学成分。方法应用硅胶、Sephadex LH-20、RP18、MCI-gel柱色谱和半制备HPLC等色谱方法对叶下珠的乙醇提取物进行分离纯化；根据理化性质和波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从叶下珠95％乙... 详细信息

目的研究叶下珠Phyllanthus urinaria全草的化学成分。方法应用硅胶、Sephadex LH-20、RP18、MCI-gel柱色谱和半制备HPLC等色谱方法对叶下珠的乙醇提取物进行分离纯化；根据理化性质和波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从叶下珠95％乙醇提取物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位中分离得到16个化合物，分别鉴定为没食子酸（1）、咖啡酸（2）、没食子酸乙酯（3）、没食子酸甲酯（4）、4-乙氧基苯甲酸（5）、邻苯二甲酸二异丁酯（6）、邻苯二甲酸二丁酯（7）、（4R，6R）-2，3-dihydromenisdaurilide（8）、（4R,6s）-2，3-dihydromenisdaurilide（9）、aquilegiolide（10）、menisdaurilide（11）、cassipourol（12）、（9Z,12Z）-nonadeca-9，12-dienoicacid（13）、亚油酸甲酯（14）、豆甾醇（15）、（8R，8墨7S）-4′-（3＂-methoxyrhanmopyranosyl）oxy-8′-hydroxy-3，3′，4-trimethoxy-8-hydroxymethyl-lign．7，9′-1actone（16）。结论化合物5-7、10、11、13、14为首次从该植物中分离得到，化合物8、9、12、16为首次从该属植物中分离得到。

关键词：叶下珠咖啡酸没食子酸乙酯 4-乙氧基苯甲酸邻苯二甲酸二异丁酯

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叶下珠愈伤组织的诱导与培养

中草药 2008年第11期39卷 1723-1726页

作者：常莉薛建平淮北煤炭师范学院生命科学学院安徽淮北235000 资源植物生物学安徽省重点实验室安徽淮北235000

目的建立叶下珠愈伤组织培养方法。方法采用组织培养方法,比较不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对叶下珠愈伤组织诱导的影响。结果茎段的诱导率最高,为55.56%,叶片诱导不出愈伤组织。6-BA是叶下珠愈伤组织形成的主要影响因素,2,... 详细信息

目的建立叶下珠愈伤组织培养方法。方法采用组织培养方法,比较不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对叶下珠愈伤组织诱导的影响。结果茎段的诱导率最高,为55.56%,叶片诱导不出愈伤组织。6-BA是叶下珠愈伤组织形成的主要影响因素,2,4-D、NAA、蔗糖次之。结论叶下珠愈伤组织诱导及继代的适宜培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖10g/L。

关键词：叶下珠组织培养愈伤组织