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右归丸治疗腰椎间盘突出症:网络药理学分析活性成分及潜在治疗靶点

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中国组织工程研究 2024年第27期28卷 4346-4352页

作者：杨敬言马涉黄仁俊杨骁侠汤笑尘于栋北京中医药大学第三临床医学院北京市100029 北京中医药大学第三附属医院北京市100029

背景:右归丸具有温肾助阳、益精填髓的作用,临床多用于治疗肾阳虚证的腰椎间盘突出症且具有较好的疗效。目的:采用网络药理学、分子对接技术并结合动物实验探讨右归丸治疗腰椎间盘突出症的潜在靶点及作用机制。方法:①网络药理学分析:通... 详细信息

背景:右归丸具有温肾助阳、益精填髓的作用,临床多用于治疗肾阳虚证的腰椎间盘突出症且具有较好的疗效。目的:采用网络药理学、分子对接技术并结合动物实验探讨右归丸治疗腰椎间盘突出症的潜在靶点及作用机制。方法:①网络药理学分析:通过TCMSP等数据库获取经过筛选后的右归丸有效成分与作用基因靶点,在GeneCards等数据库中收集与腰椎间盘突出症相关的基因,取二者交集进行拓扑结构分析,得到主要活性成分及核心治疗靶点。使用R软件对核心治疗靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。②分子对接:运用Autodock和Pymol软件进行中药活性成分与核心治疗靶点分子结合能预测。③动物实验:将18只SD大鼠随机分为对照组、退变组与退变+右归丸组,每组6只。取退变组与退变+右归丸组大鼠,采用纤维穿刺法制备椎间盘退行性变模型,造模后2周,退变+右归丸组大鼠给予右归丸汤剂(1次/d)灌胃,连续给药2周。给药结束后,采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α质量浓度,苏木精-伊红染色后观察椎间盘纤维环及髓核细胞的形态学改变。结果与结论:①筛选出右归丸有90种活性成分和64种靶点,且主要活性成分为槲皮素、山奈酚、β-胡萝卜素、大豆黄素,4′-O-甲基尼亚萨酚。右归丸治疗腰椎间盘突出症的核心靶点为白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、AKT1、白细胞介素1B、血管内皮生长因子A。富集分析发现,交集基因可能通过白细胞介素17、肿瘤坏死因子、MAPK、PI3K-AKT等信号通路改善椎间盘退变。②分子对接实验验证了右归丸中的槲皮素、山奈酚、β-胡萝卜素等与核心靶点有较强的结合能力。③动物实验结果显示,退变组大鼠血清肿瘤坏死因子α质量浓度高于对照组(P右归丸组大鼠血清肿瘤坏死因子α质量浓度低于退变组(P右归丸组大鼠椎间盘纤维环可见重建趋势,髓核细胞数量较退变组增加。④结果表明,右归丸可能通过槲皮素、山奈酚、β-胡萝卜素等主要活性成分作用于肿瘤坏死因子α等核心靶点改善椎间盘退变,进而治疗腰椎间盘突出症。

关键词：右归丸腰椎间盘突出症网络药理学分子对接信号通路炎症因子潜在靶点纤维环穿刺

右归丸通过调节CXCL8/CXCR1/2信号通路及Ang-1,Ang-2表达促进大鼠卵巢血管生成的作用

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中国实验方剂学杂志 2022年第1期28卷 50-57页

作者：魏小晶段恒唐立明宋谦谦重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室重庆400016

目的:研究补肾中药复方右归丸对自然衰老致卵巢功能低下的大鼠血管生成的影响与CXC趋化因子8(CXCL8)/趋化因子受体1/2(CXCR1/2)信号通路及血管生成素-1(Ang-1),血管生成素-2(Ang-2)的关系,探讨其改善卵巢功能的作用机制。方法:将56只雌... 详细信息

目的:研究补肾中药复方右归丸对自然衰老致卵巢功能低下的大鼠血管生成的影响与CXC趋化因子8(CXCL8)/趋化因子受体1/2(CXCR1/2)信号通路及血管生成素-1(Ang-1),血管生成素-2(Ang-2)的关系,探讨其改善卵巢功能的作用机制。方法:将56只雌性SD大鼠随机分为青年组8只、自然衰老致卵巢功能低下的雌性大鼠模型组48只,青年组大鼠常规饲养,48只模型组大鼠常规饲养过程中做5~7 d阴道脱落细胞学涂片,将连续4个动情周期阴道细胞学表现为动情周期长、之后持续动情、反复假妊娠的大鼠作为初老大鼠,连续10 d表现为角化细胞指数高于50%的青年大鼠作为青年组。模型建立后,将存活造模大鼠随机分为初老空白组,结合雌激素组(65μg·kg^(-1)·d^(-1)),左归丸组(33 g·kg^(-1)·d^(-1)),右归丸低、中、高剂量组(1.2,2.4,4.8 g·kg^(-1)d^(-1)),青年组和初老空白组以等体积生理盐水灌胃,持续30 d。实验结束后,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠卵巢组织形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2的蛋白表达水平;免疫组化标记大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠卵巢组织中趋化因子CXCL8,CXCR1,CXCR2,Ang-1,Ang-2 mRNA表达。结果:与青年组比较,初老空白组各级生长卵泡数、黄体数、血管数目数量少且闭锁卵泡多(P右归丸可以通过下调大鼠卵巢组织中CXCL8,CXCR1及CXCR2水平,上调Ang-1和Ang-2水平,促进卵巢血管生成,改善大鼠的卵巢功能。

关键词：右归丸血管生成信号通路趋化因子(CXCL)8 CXC趋化因子受体1/2(CXCR1/2) 血管生成素

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右归丸组方单体对骨关节炎影响机制研究进展

中国实验方剂学杂志 2023年第2期29卷 212-221页

作者：杜一峰刘元禄郑浩侯殿东关雪峰辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属医院沈阳110032 湖州师范学院医学院浙江湖州313000

右归丸作为补肾阳之剂,契合骨关节炎的中医病机。辽宁中医药大学附属医院国医堂刘元禄教授在临床使用中药保守治疗骨性关节炎疼痛时,发现由右归丸加减疗效显著,右归丸的骨关节炎机制在国内尚有团队研究,但复方的深入研究需要其中各成分... 详细信息

右归丸作为补肾阳之剂,契合骨关节炎的中医病机。辽宁中医药大学附属医院国医堂刘元禄教授在临床使用中药保守治疗骨性关节炎疼痛时,发现由右归丸加减疗效显著,右归丸的骨关节炎机制在国内尚有团队研究,但复方的深入研究需要其中各成分单体的作用机制作为支撑。右归丸方中包含熟地黄、附子、肉桂、山药、山茱萸、菟丝子、当归、杜仲、鹿角胶、枸杞子10味中药,随着中药单体研究逐渐被重视,相关领域的研究在不断增加,故将其归纳总结对此方治疗骨性关节炎的机制研究有着重要意义。该文以此方组成中药的君臣佐使为纲领,利用中国知网(CNKI)、《中华人民共和国药典》2020年版第1部及ChemicalBook平台了解各中药的有效成分,并利用PubMed检索,归类综述与骨关节炎机制相交集的有效单体最新研究进展,主要包括抗炎、抑制疼痛、抗软骨细胞凋亡、抗氧化应激、抑制细胞外基质降解五种药理作用,涉及若干信号通路,将君臣佐使理论与分子机制相互渗透,分别评述,最后结合中医理论进行探讨,为今后关于此方向研究的学者提供理论参考。

关键词：右归丸有效成分骨关节炎信号通路

右归丸通过AOPPs调控RAGE/ROS/NF-κB轴及Wnt/β-catenin信号通路对阿霉素诱导肾病综合征大鼠的保护机制

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中国实验方剂学杂志 2022年第15期28卷 21-27页

作者：王新斌马睿玲李赟王丽丽章宪慧甘肃中医药大学中西医结合学院兰州730000

目的:探究右归丸对阿霉素诱导的肾病综合征(NS)大鼠的影响及其作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、右归丸低、中、高剂量组和泼尼松组。模型组大鼠尾静脉注射阿霉素构建NS模型,右归丸低、中、高剂量组分别按生药2.8、5.6、11... 详细信息

目的:探究右归丸对阿霉素诱导的肾病综合征(NS)大鼠的影响及其作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、右归丸低、中、高剂量组和泼尼松组。模型组大鼠尾静脉注射阿霉素构建NS模型,右归丸低、中、高剂量组分别按生药2.8、5.6、11.2 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,泼尼松组以醋酸泼尼松6.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃。各用药组连续给药6周,正常组及模型组灌服等体积生理盐水。BCA法检测24 h尿蛋白(24 h UP);全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理形态变化;试剂盒检测血清晚期氧化蛋白产物(AOPPs)、活性氧(ROS);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织晚期糖基化终产物受体(RAGE)、核转录因子-κB(NF-κB)磷酸化水平、Wnt及β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 h UP、血清BUN、SCr、TC、TG、AOPPs、ROS水平均显著升高(P右归丸低、中、高剂量组大鼠24 h UP、血清BUN、SCr、TC、TG、AOPPs、ROS水平均显著降低(P右归丸能够改善阿霉素诱导的NS大鼠肾损伤,其机制可能与降低AOPPs水平,抑制RAGE/ROS/NF-κB轴及Wnt/β-catenin信号活化相关。

关键词：右归丸肾病综合征晚期氧化蛋白产物晚期糖基化终产物受体(RAGE)/活性氧(ROS)/核转录因子-κB(NF-κB) Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)

基于血清代谢组学研究左归丸与右归丸辨证治疗卵巢储备功能减退

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中国中药杂志 2023年第13期48卷 3664-3677页

作者：曹莹陈思陈玥周科达王佩娟宋清霞南京中医药大学附属中西医结合医院江苏南京210046 南京中医药大学附属苏州市中医医院江苏苏州215009

基于代谢组学系统分析左归丸与右归丸辨证治疗卵巢储备功能减退(DOR)的代谢物质基础,为中医辨证论治DOR提供科学依据。医院门诊收集DOR肾阴虚患者给予左归丸治疗12周,DOR肾阳虚患者给予右归丸治疗12周,基于非靶向代谢组学研究技术,筛选... 详细信息

基于代谢组学系统分析左归丸与右归丸辨证治疗卵巢储备功能减退(DOR)的代谢物质基础,为中医辨证论治DOR提供科学依据。医院门诊收集DOR肾阴虚患者给予左归丸治疗12周,DOR肾阳虚患者给予右归丸治疗12周,基于非靶向代谢组学研究技术,筛选左归丸治疗DOR肾阴虚和右归丸治疗DOR肾阳虚的潜在生物标志物,并对其进行代谢通路分析。分别记录和统计患者治疗后的妊娠率及血清激素基础水平[基础卵泡刺激素(bFSH)、基础黄体生成素(bLH)、基础雌二醇(bE_(2))、抗缪勒管激素(AMH)]、中医证型评分、Kupperman评分的改变。结果显示,共收集DOR肾阴虚患者23例,肾阳虚患者25例。左归丸回调DOR肾阴虚患者的左旋肉碱、乙酰辅酶A、辅酶A、辅酶Q_(10)(CoQ10)等26种差异代谢物,映射到12条代谢通路;右归丸回调DOR肾阳虚患者的己二酰辅酶A、L-赖氨酸、赖氨酸精氨酸、α-生育酚等22种差异代谢物,映射到11条代谢通路。DOR肾阴虚和肾阳虚患者治疗后bFSH、bLH均明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);虽然bE_(2)、AMH差异没有统计学意义,但有改善趋势;中医证型评分和Kupperman评分均明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。

关键词：卵巢储备功能减退肾阴虚证肾阳虚证左归丸右归丸代谢组学

右归丸对膝骨关节炎模型鼠软骨组织显微结构及热休克蛋白90α蛋白表达的影响

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中国病理生理杂志 2020年第1期36卷 157-163页

作者：安方玉颜春鲁刘永琦王继龙赵磊夏鹏飞骆亚莉王国文赵崇博邓婕 [1甘肃中医药大学甘肃兰州730000 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室甘肃兰州730000 敦煌医学与转化教育部重点实验室甘肃兰州730000

目的:观察右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠软骨组织显微结构和热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,Hsp90α)蛋白表达的影响,进一步揭示右归丸防治KOA的机制。方法:将大鼠随机分为假手术对照组、KOA模型组、... 详细信息

目的:观察右归丸对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠软骨组织显微结构和热休克蛋白90α(heat shock protein 90α,Hsp90α)蛋白表达的影响,进一步揭示右归丸防治KOA的机制。方法:将大鼠随机分为假手术对照组、KOA模型组、硫酸氨基葡萄糖组和右归丸(高、中、低剂量)组,每组10只。采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,分别予相应药物灌胃8周。HE染色法观察软骨组织的形态学变化,并进行Makin评分;应用免疫组化法检测各组大鼠软骨组织Hsp90α、纤连蛋白(fibronectin,Fn)和Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,COL-Ⅱ)的表达;RT-qPCR法检测各组大鼠软骨组织Hsp90α、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和MMP-13的mRNA表达水平,应用Western blot法检测各组大鼠软骨组织Hsp90α和COL-Ⅱ的表达。结果:与假手术组比较,KOA模型组大鼠软骨组织Makin评分明显升高,软骨组织Hsp90α的蛋白表达显著升高,IL-1β、MMP-3和MMP-13的mRNA表达明显升高,COL-Ⅱ和Fn的蛋白表达明显降低(P右归丸高剂量干预组大鼠软骨组织Makin评分和Hsp90α的蛋白表达均明显降低,Fn的蛋白表达明显升高,右归丸中、高剂量组COL-Ⅱ的蛋白表达明显升高,右归丸各干预组IL-1β、MMP-3和MMP-13的mRNA表达均明显降低(P右归丸通过下调Hsp90α的蛋白表达并上调Fn的蛋白表达来减缓炎症因子的分泌和细胞外基质的降解,从而有效保护KOA模型大鼠关节软骨,延缓关节软骨退变。

关键词：右归丸膝骨关节炎纤连蛋白热休克蛋白90α 炎症因子

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右归丸中鹿角胶的鉴别

中成药 2022年第10期44卷 3298-3301页

作者：邓杰华李存金周云峰邓见春吴喆黄炳泉宜春市检验检测中心江西宜春336000 江西省药品检查员中心江西南昌330029 高安市人民医院江西宜春336000

目的建立右归丸中鹿角胶的鉴别方法。方法右归丸经酶解后,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)法进行检测,分析采用ACQUITY UPLC BEH C色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30... 详细信息

目的建立右归丸中鹿角胶的鉴别方法。方法右归丸经酶解后,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)法进行检测,分析采用ACQUITY UPLC BEH C色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃,以鹿角胶、猪皮源、牛皮源、驴皮源的特征离子对m/z 765.4/554.0和765.4/733.0、774.5/977.8和774.5/1 034.6、614.3/726.2和614.3/783.3、539.8/612.4和539.8/924.0进行多反应离子监测。结果 45批样品均能检出鹿角胶的特征离子,而3种非法添加成分的特征离子对均未检出。结论该方法快速准确,专属性强,可同时检测出鹿角胶和非法添加成分,有助于控制右归丸中鹿角胶质量。

关键词：右归丸鹿角胶非法添加超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)

右归丸对激素型肾阳虚证miRNA表达谱的影响及其靶基因功能分析

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辽宁中医杂志 2024年第5期51卷 184-187,I0003,I0004页

作者：鲁莎谭从娥肖雪王相东邢文文陕西中医药大学基础医学院陕西咸阳712046

目的探讨微小RNA(miRNA)在右归丸对激素型肾阳虚证肾组织与正常肾组织中的表达差异,并用生物信息学方法分析其意义,为右归丸干预肾阳虚证的进一步机制研究奠定基础。方法15只SD大鼠随机分为正常组(5只)和造模组(10只),正常组注射2 mL生... 详细信息

目的探讨微小RNA(miRNA)在右归丸对激素型肾阳虚证肾组织与正常肾组织中的表达差异,并用生物信息学方法分析其意义,为右归丸干预肾阳虚证的进一步机制研究奠定基础。方法15只SD大鼠随机分为正常组(5只)和造模组(10只),正常组注射2 mL生理盐水,造模组后肢肌注氢化可的松注射液。成模后将造模组随机分为模型组和右归丸组,每组5只。右归丸组给予右归丸汤剂灌胃,模型组和正常组给予生理盐水灌胃。麻醉处死后使用TRIzol法提取肾组织中RNA,使用NanoDrop ND-1000对总RNA进行质量检测,用标记后的RNA与Agilent Rat 8×60k miRNA芯片进行杂交。收集原始数据进行标准化处理,进行聚类分析和火山图分析。利用生物信息学方法,预测差异miRNA富集的基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路。结果筛选出右归丸干预肾阳虚证相关差异表达miRNA 18条(|log 2FC|≥1.5,P≤0.05),其中包括5条上调miRNA,分别是rno-miR-149-3p、rno-miR-188-5p、rno-miR-221-5p、rno-miR-762、rno-miR-877;13条下调miRNA,分别是rno-miR-101b-5p、rno-miR-125a-3p、rno-miR-125b-2-3p、rno-miR-3085、rno-miR-344a-5p、rno-miR-347、rno-miR-34b-3p、rno-miR-351-3p、rno-miR-3573-3、rno-miR-370-3p、rno-miR-409a-3p、rno-miR-448-3p、rno-miR-503-3p。GO分析显示差异表达miRNA主要参与DNA、RNA转录的正调控进程且与ATP的结合显著相关。KEGG分析显示差异表达miRNA显著富集于cAMP通路和FoxO信号通路,这两条通路与线粒体功能密切相关。结论右归丸通过干预miRNA的表达,改善肾阳虚证大鼠线粒体功能,调节能量代谢异常,进一步为右归丸干预肾阳虚证的机制研究提供理论依据。

关键词：右归丸肾阳虚证 miRNA 能量代谢

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右归丸对大鼠膝骨关节炎的干预作用及其机制

中国应用生理学杂志 2020年第5期36卷 511-516页

作者：颜春鲁安方玉汪永锋金华赵崇博王统香邓婕张蕾蕾无甘肃中医药大学中西医结合学院甘肃兰州730000 甘肃中医药大学教学实验实训中心甘肃兰州730000 甘肃中医药大学基础医学院甘肃兰州730000 甘肃中医药大学中医临床学院甘肃兰州730000 甘肃中医药大学临床医学院甘肃兰州730000 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室甘肃兰州730000 敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室甘肃兰州730000 兰州市疾病预防控制中心甘肃兰州730000

目的:探讨右归丸对膝骨关节炎(KOA)模型鼠关节软骨组织骨诱导因子(OGN)、骨黏连蛋白(ON)和纤维蛋白原2(FBN2)的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组,模型组,硫酸氨基葡萄糖组(硫酸氨基葡萄糖),右归丸(高、中、低剂量)组,每组10只。采用改... 详细信息

目的:探讨右归丸对膝骨关节炎(KOA)模型鼠关节软骨组织骨诱导因子(OGN)、骨黏连蛋白(ON)和纤维蛋白原2(FBN2)的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组,模型组,硫酸氨基葡萄糖组(硫酸氨基葡萄糖),右归丸(高、中、低剂量)组,每组10只。采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,右归丸高、中、低剂量组分别灌胃给予右归丸4.8,2.4,1.2 g/kg,硫酸氨基葡萄糖组灌胃给予硫酸氨基葡萄糖0.17 g/kg,连续给药8周。干预结束24 h后取鼠膝关节软骨,采用HE染色法观察各组软骨的病理改变,并进行Mankin评分;免疫组化法检测各组关节软骨组织中OGN、ON和FBN2的表达;Western blot法检测各组关节软骨组中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织Makin评分显著升高,软骨组织FBN2蛋白表达水平上显著增加,OGN、ON和GSK-3β蛋白表达水平上的显著降低(P右归丸高剂量干预组大鼠软骨组织Makin评分和FBN2蛋白表达水平显著降低,GSK-3β蛋白表达水平上显著增加,且右归丸中、高剂量组OGN、ON蛋白表达水平均显著增加(P右归丸能够延缓关节软骨退变,其可能机制是通过提高骨诱导因子和骨粘连蛋白的表达水平来促进关节软骨的骨化和重构。

关键词：膝骨关节炎右归丸骨诱导因子骨黏连蛋白纤维蛋白原2