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自然杀伤细胞系NK-92治疗卵巢癌的体外及动物实验研究

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中华妇产科杂志 2005年第7期40卷 476-479页

作者：陈纲凌斌祝怀平赵卫东王群华张红雁吴爱东魏海明田志刚安徽省立医院妇产科安徽省分子医学重点实验室安徽省立医院放疗科中国科学技术大学生命科学院

目的研究放射线照射后的自然杀伤细胞系NK92对人卵巢癌细胞的体外杀伤活性及对卵巢癌动物模型的治疗效果。方法医用电子直线加速器照射NK92细胞,照射剂量分别为0、1、2、4、8、16Gy,将NK92细胞按照上述不同照射剂量分为6组。台盼蓝拒染... 详细信息

目的研究放射线照射后的自然杀伤细胞系NK92对人卵巢癌细胞的体外杀伤活性及对卵巢癌动物模型的治疗效果。方法医用电子直线加速器照射NK92细胞,照射剂量分别为0、1、2、4、8、16Gy,将NK92细胞按照上述不同照射剂量分为6组。台盼蓝拒染法进行细胞计数,氚标记的胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖活性,51Cr释放法检测NK92细胞对靶细胞HO8910的杀伤活性。观察照射后的NK92细胞对NOD/SCID鼠卵巢癌皮下移植瘤的治疗效果,NOD/SCID鼠分肿瘤组(仅注射人卵巢癌细胞系HO8910细胞)和治疗组(同时注射HO8910和8Gy组NK92细胞)。结果(1)体外实验:4、8Gy组NK92细胞数量在照射后的第5天分别减少到10%、0%;照射后48h,与0Gy组NK92细胞相比,4、8Gy组增殖活性分别降至29%、6%。对HO8910细胞杀伤结果显示,4、8Gy组杀伤率分别在42%～62%、33%～58%之间。(2)动物实验:接种后30、40、50d,肿瘤组NOD/SCID鼠瘤结节体积分别为(0.214±0.061)cm3、(0.382±0.051)cm3、(0.428±0.021)cm3,治疗组分别为(0.047±0.019)cm3、(0.167±0.021)cm3、(0.343±0.022)cm3,治疗组与肿瘤组相比均有减小,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组NOD/SCID鼠全部存活到120d,肿瘤组于接种后74～82d全部死亡,中位生存时间为76d,与治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论放射线照射后的NK92细胞治疗卵巢癌是有效的。

关键词：自然杀伤动物实验研究 NK-92细胞电子直线加速器照射 HO-8910细胞 SCID鼠人卵巢癌细胞系放射线照射体外杀伤活性台盼蓝拒染法细胞增殖活性胸腺嘧啶核苷治疗效果照射剂量皮下移植瘤 NOD 治疗组动物模型细胞计数

桂皮酸对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞增殖和分化作用

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肿瘤 2002年第4期22卷 282-284页

作者：张迎红曾宪昌张克俭刘兵城武汉大学中南医院血液内科武汉430071 中国医学科学院血液学研究所

目的　探讨桂皮酸 (CinnamicacidCINN )对急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞增殖和分化的作用。方法　将APL细胞株NB4细胞与不同浓度CINN在体外共同培养 ,应用台盼蓝拒染试验及MTT比色法观察细胞生长曲线、生长抑制率 ;用光学显微镜观察... 详细信息

目的　探讨桂皮酸 (CinnamicacidCINN )对急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞增殖和分化的作用。方法　将APL细胞株NB4细胞与不同浓度CINN在体外共同培养 ,应用台盼蓝拒染试验及MTT比色法观察细胞生长曲线、生长抑制率 ;用光学显微镜观察细胞形态变化 ;以NBT还原试验检测药物作用前后NB4细胞NBT还原能力改变 ;用流式细胞仪测定细胞周期及细胞分化抗原CDlla、CDllb的表达。结果　lmmol/LCINN、3mmol/LCINN和 5mmol/LCINN能明显抑制NB4细胞增殖 ,呈剂量时间依赖性 ;lmmol/L、3mmol/LCINN能诱导NB4分化 ,表现在NBT还原能力显著增强 ,CDlla、CDllb表达升高 ,药物组与对照组之间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,流式细胞术分析发现 ,CINN处理组细胞被阻滞于S期 ,S期细胞数明显增多 ,G2 期细胞数减少。结论　CINN体外能诱导NB4细胞分化 ,增殖能力下降。

关键词：急性早幼粒细胞白血病台盼蓝拒染法细胞增殖细胞分化药理学 MTT比色法桂皮酸

白细胞介素-2对脐血CIK细胞体外增殖活性的影响

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华中医学杂志 2005年第4期29卷 265-266页

作者：王利刘德立黄倩华中师范大学生命科学院生物技术系武汉430079 武汉大学中南医儿科武汉430071

目的研究白细胞介素2对脐血细胞因子诱导的杀伤细胞增殖的影响。方法将白细胞介素2与经CD3单抗、γ干扰素活化的脐血细胞因子诱导的杀伤细胞体外共培养,以台盼蓝拒染法、MTT法检测细胞增殖水平,Giemsa染色观察细胞集落。结果体外培养3、... 详细信息

目的研究白细胞介素2对脐血细胞因子诱导的杀伤细胞增殖的影响。方法将白细胞介素2与经CD3单抗、γ干扰素活化的脐血细胞因子诱导的杀伤细胞体外共培养,以台盼蓝拒染法、MTT法检测细胞增殖水平,Giemsa染色观察细胞集落。结果体外培养3、7、10d后脐血单个核细胞分别扩增至3倍、9倍、25倍,培养10d后细胞密度增大,集落形成。结论白细胞介素2能诱导脐血细胞因子诱导的杀伤细胞增殖,是脐血造血干细胞扩增的重要细胞因子。

关键词：脐血单个核细胞白细胞介素-2 细胞体外增殖活性细胞因子诱导的杀伤细胞 CIK 造血干细胞扩增体外共培养细胞增殖台盼蓝拒染法

氨基葡萄糖硫酸盐诱导K562细胞凋亡的实验研究

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实用癌症杂志 2005年第1期20卷 20-23,27页

作者：梁蓉王哲黄高乔岩王爱勤董宝侠郭英王娟红第四军医大学西京医院 710033 中国科学院兰州化学物理研究所 730000

目的　探讨氨基葡萄糖硫酸盐(GS)对慢性髓系白血病K 5 62细胞凋亡诱导作用和分子机理。方法　采用台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线来观察GS对K5 62细胞的生长抑制作用;取对数生长期K 5 62细胞,在0 .5 ,1.0 ,5 .0mmol/LGS不同浓度作用48h后... 详细信息

目的　探讨氨基葡萄糖硫酸盐(GS)对慢性髓系白血病K 5 62细胞凋亡诱导作用和分子机理。方法　采用台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线来观察GS对K5 62细胞的生长抑制作用;取对数生长期K 5 62细胞,在0 .5 ,1.0 ,5 .0mmol/LGS不同浓度作用48h后,利用细胞计数、电镜、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色、DNA梯状电泳、流式细胞仪等方法来观察GS对K 5 62细胞的抑制效应和促凋亡作用。并用Westernblot检测活化的caspase 3和bcl- 2基因的表达。结果　0 .5 ,1.0 ,5 .0mmol/LGS对K 5 62细胞的生长有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性(P 染色法发现5mmol/LGS作用K 5 62细胞后,出现典型的凋亡形态学改变。AnnexinV染色后流式细胞仪能检测到早期凋亡细胞,细胞周期显示:G1期细胞比例增高,S期比例减低,并有凋亡峰。有明显的梯状DNA。同时GS诱导K 5 62细胞凋亡后出现活化的Caspase 3 ,而Bcl- 2蛋白表达减弱,甚至消失。结论　GS能诱导白血病K- 5 62细胞凋亡,该过程伴有Caspase- 3的活化和Bcl- 2蛋白表达降低。

关键词： K562细胞凋亡氨基葡萄糖硫酸盐实验研究 Caspase-3 caspase-3 Bcl-2蛋白表达 AO/EB染色法慢性髓系白血病 Western bcl-2基因 Annexin 流式细胞仪凋亡诱导作用生长抑制作用细胞生长曲线台盼蓝拒染法 blot检测对数生长期

残留冻存保护剂对慢性髓系白血病细胞株K562生存的影响

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国际输血及血液学杂志 2008年第4期31卷 321-323页

作者：刘佳胡兰萍曾琛湖南省长沙市长沙医学院生物系

目的研究冻存保护剂甘油、二甲亚砜(DMSO)、乙二醇和丙二醇对细胞生长的抑制作用。方法常规进行细胞培养后,用台盼蓝拒染法、MTT 法和流式细胞术检测不同浓度的冻存保护剂对慢性髓系血病 K562细胞的生长抑制作用。结果四种冻存保护剂终... 详细信息

目的研究冻存保护剂甘油、二甲亚砜(DMSO)、乙二醇和丙二醇对细胞生长的抑制作用。方法常规进行细胞培养后,用台盼蓝拒染法、MTT 法和流式细胞术检测不同浓度的冻存保护剂对慢性髓系血病 K562细胞的生长抑制作用。结果四种冻存保护剂终浓度为3%时,均会明显抑制 K562细胞的生存;终浓度为1%的甘油和1%的 DMSO 对细胞的增殖无影响,其中甘油的安全性高于 DMSO;而终浓度为0.5%的丙二醇会影响细胞的生存。结论少量冻存保护剂残留可能影响 K562细胞的生存,四种冻存保护剂中对细胞生长影响最小的是甘油。

关键词： K562细胞冻存保护剂台盼蓝拒染法 MTT 法流式细胞术

木犀草素对人白血病HL-60细胞内蛋白激酶C的抑制作用

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右江医学 2005年第2期33卷 106-108页

作者：蔡良真广东医学院附属医院肿瘤科广东湛江524001

目的　观察木犀草素对HL- 60细胞内蛋白激酶C活性的影响。方法　采用台盼蓝拒染法,在不同条件下测定细胞增殖的抑制率。PKC活性通过测定转移到CK2 底物上的[γ 32P]ATP的32P的放射性活度来检测。结果　木犀草素能够显著地抑制HL- 60细胞... 详细信息

目的　观察木犀草素对HL- 60细胞内蛋白激酶C活性的影响。方法　采用台盼蓝拒染法,在不同条件下测定细胞增殖的抑制率。PKC活性通过测定转移到CK2 底物上的[γ 32P]ATP的32P的放射性活度来检测。结果　木犀草素能够显著地抑制HL- 60细胞内PKC的活性并呈剂量依赖性关系,其IC50为2.38μmol/L,作用效果强于阳性对照槲皮素(IC50=2.54μmol/L)。结论　木犀草素作为一种细胞内的PKC抑制剂具有潜在的抗肿瘤临床应用价值。

关键词： HL-60 木犀草素细胞内抑制作用人白血病蛋白激酶C活性台盼蓝拒染法临床应用价值 PKC抑制剂放射性活度 PKC活性 mol/L 细胞增殖 ^32P 剂量依赖 IC50 阳性对照作用效果抑制率性关系槲皮素抗肿瘤测定

羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长增殖的影响

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广西医学 2013年第10期35卷 1273-1274,1287页

作者：吴峰萍张劼罗佐杰文静梁杏欢广西医科大学第一附属医院内分泌科南宁市530021

目的观察羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长增殖的影响。方法体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞,随机分为干预组和对照组,干预组加入羟喜树碱使其终浓度为0.8μg/ml,对照组不加羟喜树碱,分别培养48 h后,采用台盼蓝拒染法观察羟喜树... 详细信息

目的观察羟喜树碱对人肾上腺皮质癌SW-13细胞生长增殖的影响。方法体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞,随机分为干预组和对照组,干预组加入羟喜树碱使其终浓度为0.8μg/ml,对照组不加羟喜树碱,分别培养48 h后,采用台盼蓝拒染法观察羟喜树碱对SW-13细胞生长增殖的影响。结果光镜下可见干预组SW-13细胞数减少,死亡细胞数较多,干预组活细胞率明显低于对照组(P<0.05)。结论羟喜树碱可能具有抑制人肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖并促进其死亡的作用。

关键词：肾上腺皮质癌羟喜树碱人肾上腺皮质癌SW-13细胞台盼蓝拒染法

当归多糖诱导K_(562)白血病细胞凋亡及相关凋亡基因的实验研究

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医学新知 2005年第2期15卷 30-32页

作者：曾炜炜邹典定武汉大学中南医院儿科武汉430071

目的从细胞凋亡角度探讨当归的成分当归多糖(ASP)抑制白血病细胞增殖的机制。方法体外培养白血病细胞株K562,培养时添加25μg/ml、250μg/ml、2500μg/mlASP,分别于第2、4、6d取细胞,用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,观察细胞形态改变,免... 详细信息

目的从细胞凋亡角度探讨当归的成分当归多糖(ASP)抑制白血病细胞增殖的机制。方法体外培养白血病细胞株K562,培养时添加25μg/ml、250μg/ml、2500μg/mlASP,分别于第2、4、6d取细胞,用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,观察细胞形态改变,免疫组织化学检测bc12、cmyc基因的表达。结果2500μg/ml的ASP对白血病细胞株K562有显著抑制作用,且呈剂量效应关系;ASP诱导细胞后bc12、cmyc均明显降低(P<0.05)。结论ASP对白血病细胞株K562细胞增殖具有显著抑制作用,bc12、cmyc表达降低可能是ASP诱导白血病细胞凋亡重要途径之一。

关键词：细胞凋亡当归多糖白血病细胞株K562 实验研究凋亡基因免疫组织化学检测 K562细胞增殖 bcl-2 c-myc基因相关台盼蓝拒染法剂量效应关系抑制作用 ASP 体外培养细胞计数形态改变表达降低 ml 5μg

大豆黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞系体外增殖和细胞周期的影响

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右江医学 2005年第3期33卷 223-225页

作者：蔡良真陈韵广东医学院附属医院肿瘤科广东湛江524001 广东医学院附属医院放射科广东湛江524001

目的观察大豆黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞体外增殖及细胞周期的影响并探讨其作用机制。方法分别采用台盼蓝拒染法、流式细胞术,在不同条件下测定大豆黄酮对细胞增殖抑制率及细胞周期分布的影响。蛋白激酶C(PKC)活性通过测定转移到CK2底物上... 详细信息

目的观察大豆黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞体外增殖及细胞周期的影响并探讨其作用机制。方法分别采用台盼蓝拒染法、流式细胞术,在不同条件下测定大豆黄酮对细胞增殖抑制率及细胞周期分布的影响。蛋白激酶C(PKC)活性通过测定转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP的32P的放射性活度来检测。结果大豆黄酮能够显著地抑制MCF-7细胞的体外增殖,作用24h可使MCF-7细胞的细胞周期阻滞于G2/M期和S期。细胞内PKC活性分析表明:大豆黄酮能够显著地抑制MCF-7细胞内PKC的活性并呈剂量依赖性关系,其IC50为13.27μmol/L。结论大豆黄酮可抑制人乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖,其作用机制可能与细胞周期G2/M期和S期阻滞及抑制PKC的活性有关。

关键词：大豆黄酮人乳腺癌MCF-7细胞蛋白激酶C(PKC) 细胞系细胞体外增殖台盼蓝拒染法细胞周期分布细胞周期阻滞作用机制流式细胞术增殖抑制率放射性活度 mol/L ^32P 剂量依赖活性分析 IC50 细胞内 24h 性关系测定