检索结果-南通市图书馆

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的FTIR谱的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物物理学报 2001年第2期17卷 267-274页

作者：龙敏南苏文金 S P J Albracht 张凤章许良树厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005 E C Slater Institute

光合细菌Chromatiumvinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶。氧化态可溶性氢酶在红外光谱区(1860 -2140cm -1)有四个特征吸收峰 (2103.7 ,2086.2,2054.8和1962.5cm -1)。其中1962.5cm -1处吸收带的位置与已知的NiFe -氢酶活性中... 详细信息

光合细菌Chromatiumvinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶。氧化态可溶性氢酶在红外光谱区(1860 -2140cm -1)有四个特征吸收峰 (2103.7 ,2086.2,2054.8和1962.5cm -1)。其中1962.5cm -1处吸收带的位置与已知的NiFe -氢酶活性中心 -CO基团所产生的吸收带位置相近 ;另外三条吸收带的位置与已知的NiFe -氢酶活性中心 -CN基团所产生的吸收带的位置相近。以2 ,6 -二氯酚靛酚 (DPIP)氧化可溶性氢酶时 ,四条吸收谱带的位置基本上没有发生变化。可溶性氢酶被Na2S2O4 充分还原时,-CO基团的吸收带移至1946.8cm -1 ,而 -CN基团的三条吸收带中的两条分别移至2076.8cm-1 和2093.1cm-1 处 ,另一条则消失了。还原态可溶性氢酶与CO反应后 ,其红外光谱显示七条吸收带 ,在 -CO基团红外光谱区和 -CN基团红外光谱区各产生了两条新的吸收带。研究表明 ,***可溶性氢酶的活性中心的结构类似于其它已知的NiFe -氢酶 ,但与活性中心金属原子相连的可能包括三个 -CN基团和一个 -CO基团 ,结合可溶性氢酶的EPR谱特征 ,推测***可溶性氢酶活性中心的结构可能为Ni(CN)Fe(CN)2(CO)。

关键词：可溶性氢酶 FTIR谱光合细菌

产酸克雷伯氏菌HP1可溶性氢酶的分离纯化及特性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

产酸克雷伯氏菌HP1可溶性氢酶的分离纯化及特性的研究

作者：徐云玲厦门大学

学位级别：硕士

氢酶是微生物氢代谢过程中的关键酶,它催化分子氢的氧化与质子还原（H2?2H++2e-）.对氢酶的研究不仅可以揭示微生物的生理代谢规律,而且对探索和利用微生物制取燃料氢有重要意义.产酸克雷伯氏菌HP1（Klebsiella oxytoca HP1）是一株放... 详细信息

氢酶是微生物氢代谢过程中的关键酶,它催化分子氢的氧化与质子还原（H2?2H++2e-）.对氢酶的研究不仅可以揭示微生物的生理代谢规律,而且对探索和利用微生物制取燃料氢有重要意义.产酸克雷伯氏菌HP1（Klebsiella oxytoca HP1）是一株放氢活性较高的菌株,其培养条件简单粗放,培养周期短,可以大规模发酵培养,菌体产量高.本研究对*** HP1的可溶性氢酶进行分离提纯,并分析了影响可溶性氢酶放氢活性的条件,为进一步研究该氢酶的结构与催化机理奠定了良好的基础. 取菌泥20g悬浮于Tris-HCl缓冲液（30mmol/L, pH 8.0）中.菌悬液经超声波处理（400W,破碎35s/次,间歇15s/次,共60次）,高速离心（8,000×g, 15min）和超速离心（100,000×g, 30min）后得到氢酶的粗提液.粗提液经过20%硫酸铵和60%硫酸铵分部沉淀后,酶被提纯了1.93倍.初步纯化酶液经过Sephadex G-25脱盐并超滤浓缩后,过DEAE-Sepharose F.F.柱,采用连续梯度洗脱（0~0.4 mol/L NaCl）.收集含可溶性氢酶的洗脱液,经过浓缩后,过Sephacryl S-200柱.收集含可溶性氢酶活性的组份,再经过浓缩脱盐后,过TSK-DEAE柱,采用分部洗脱,用含有0.3mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液（pH 8.0）洗脱氢酶.经过3次柱层析分离纯化后,氢酶被纯化约200倍,得率为15.3%,氢酶的放氢活性为17.68μmol H2/min·mg prot. K. oxytoca HP1可溶性氢酶催化放氢的最适温度为30℃,当温度超过65℃时,氢酶很快失活.氢酶催化的最适pH值为7.5,在pH 5.0~7.5范围内,氢酶的活性随着pH值的升高而增加,在pH 7.5~10.0范围内,氢酶的活性随着pH值的增加而降低.氧对氢酶活性有较大的影响,在用纯氧饱和的缓冲液中,氢酶催化活性在3h内失活50%以上.不同电子载体对氢酶的放氢活性有较大影响,甲基紫晶（MV）是氢酶催化放氢的最适人工电子载体.

关键词： Klebsiella oxytoca HP1 可溶性氢酶分离提纯理化特性

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的研究

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的某些理化性质

第三届全国氢能学术会议

作者：龙敏南苏文金 S P J Albracht 张凤章许良树厦门大学生命科学学院 E C Slater Institute University of Amsterdam1018TVAmsterdamthe Netherlands

光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经5次柱层析(DE-52,TSK-DEAE(Ⅰ),Ultragel AcA-44,TSK-DEAE(Ⅱ),Superdex TW75)分离后被纯化365倍,得率为32％,其催化放氢的活性为8.4μmolH/min·mg ***-PAGE结果显示,可溶性氢酶由52kD和21.5kD两个亚基组成.氧化态可溶性氢酶在45 K下,产生了典型的 Ni(Ⅲ)EPR信号(g=2.37,2.16,2.016和g=2.30,2.23,2.016):在10 K下,没有出现膜结合态氢酶中存在的[3Fe-4S]簇特征EPR信号.可溶性氢酶被H还原后,Ni(Ⅲ)的特征EPR信号消失,同时出现一个[4Fe-4S]簇的特征EPR信号(g=1.88,1.90,2.045).可溶性氢酶小亚基由179个氨基酸残基组成,分子量为21.8kDa,含有NiFe-氢酶保守的序列框:CxxC……GxCxxxG……GCPR.研究结果表明: ***可溶性氢酶的结构和功能不同于膜结合态氢酶,是一种新的催化放氢的NiFe-氢酶.

关键词： Chromatium vinosum 可溶性氢酶理化特性基因克隆

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

厦门大学学报（自然科学版） 2001年第6期40卷 1283-1288页

作者：龙敏南苏文金 S P J A lbracht 张凤章许良树厦门大学生物学系阿姆斯特丹大学E.C.Slater研究所

光合细菌 Chromatium vinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶 .在培养基中加入终浓度为 1μmol/ L的 Se,细胞中可溶性氢酶的含量增加 1.7倍 .***可溶性氢酶可以利用甲基紫精、苄基紫精和细胞色素 C为电子载体催化吸氢与放氢 ,但... 详细信息

光合细菌 Chromatium vinosum含有一种可溶性氢酶和一种膜结合态氢酶 .在培养基中加入终浓度为 1μmol/ L的 Se,细胞中可溶性氢酶的含量增加 1.7倍 .***可溶性氢酶可以利用甲基紫精、苄基紫精和细胞色素 C为电子载体催化吸氢与放氢 ,但不能利用 NAD,NADH,NADP和NADPH等进行催化放氢和吸氢 .可溶性氢酶易被 CO所抑制 ,在反应系统中加入终浓度为 2 .5μmol/ L的 CO时 ,可抑制氢酶最大放氢活性的一半 .与 ***膜结合态氢酶相比 ,可溶性氢酶较易被胰蛋白酶降解而使氢酶催化吸氢和放氢的活性降低 .

关键词： Chromatium vinosum 可溶性氢酶理化特性光合细菌最大放氢活性催化吸氢

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶小亚基基因的克隆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

厦门大学学报（自然科学版） 2000年第2期39卷 247-252页

作者：龙敏南苏文金 S P J Albracht 吴健民张凤章许良树厦门大学生物学系福建厦门361005 阿姆斯特丹大学E.C.Slater研究所

光合细菌 ***可溶性氢酶由 52 k Da和 2 1.5k Da两个亚基组成 .该酶大亚基 N-末端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基 N末端氨基酸序列为 :STQPKITVATXL DG.根椐大、小亚基 N-末端氨基酸序列设计两套引物 ,Primer1:5′g AT(g/ C) g... 详细信息

光合细菌 ***可溶性氢酶由 52 k Da和 2 1.5k Da两个亚基组成 .该酶大亚基 N-末端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基 N末端氨基酸序列为 :STQPKITVATXL DG.根椐大、小亚基 N-末端氨基酸序列设计两套引物 ,Primer1:5′g AT(g/ C) g T g AT(g/ C) g T(g/ A) Cg3′和 Primer2 :5′A g C AC(C/ g) CAg CC(C/ g) AA(g/ A) ATC3′,通过 PCR扩增获得 0 .6 kb的扩增片段 .克隆并对该片段序列进行分析 ,结果表明 ,该片段包含小亚基基因的全序列 .可溶性氢酶小亚基由 179个氨基酸残基组成 ,分子量为 2 1.8k Da,含有 Ni Fe-氢酶保守的序列框 :Cxx C......Gx Cxxx G......

关键词： vinosum 可溶性氢酶基因克隆光合细菌小亚基

光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶的分离提纯及特性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 2000年第6期16卷 710-715页

作者：龙敏南苏文金 S.P.J.ALBRACHT 张凤章许良树厦门大学生命科学学院 ECS later Institute University of Amsterdam1018TVAmsterdamthe Netherlands

光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 4次柱层析 (Whatman DE- 52 ,TSK- DEAE,Ultragel Ac A- 44 ,Mono Q)分离提纯后被纯化 630倍 ,得率为 33.5% .可溶性氢酶催化放氢比活性为 7.5μmol· min-1· ***- PAGE结果显示 ,可溶性氢酶... 详细信息

光合细菌 Chromatium vinosum可溶性氢酶经 4次柱层析 (Whatman DE- 52 ,TSK- DEAE,Ultragel Ac A- 44 ,Mono Q)分离提纯后被纯化 630倍 ,得率为 33.5% .可溶性氢酶催化放氢比活性为 7.5μmol· min-1· ***- PAGE结果显示 ,可溶性氢酶由 52 k D和 2 1 .5k D两个亚基组成 .大亚基 N端氨基酸序列为 :SRTITIEPVTRXEGHAR;小亚基 N端氨基酸序列为 :STQPKIT-VATXLDG.氧化态可溶性氢酶在 54K时产生了典型的 Ni( )电子顺磁共振 (EPR)信号 (gxyz=2 .37、2 .1 6、2 .0 1 6和 gxyz=2 .30、2 .2 3、2 .0 1 6) .研究结果表明 ,***可溶性氢酶是一种新的催化放氢的 Ni Fe-氢酶 .

关键词：可溶性氢酶纯化特性光合细菌

产酸克雷伯氏菌氢酶分离提纯与特性的初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

厦门大学学报（自然科学版） 2006年第5期45卷 709-712页

作者：徐云玲龙传南徐惠娟邬小兵张凤章厦门大学生命科学学院厦门大学生物能源中心福建厦门361005

采用硫酸铵沉淀和柱层析(DEAE-Sepharose F.F.,Sephacryl S-200,TSK-DEAE)初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1可溶性氢酶,研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响.研究表明,可溶性氢酶催化放氢的最适... 详细信息

采用硫酸铵沉淀和柱层析(DEAE-Sepharose F.F.,Sephacryl S-200,TSK-DEAE)初步分离纯化了产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1可溶性氢酶,研究了温度、pH值、电子载体等对氢酶催化放氢活性的影响.研究表明,可溶性氢酶催化放氢的最适温度为30℃,催化放氢的最适pH值为7.5,甲基紫晶(MV)是氢酶催化放氢的最适人工电子载体,氧对氢酶催化活性有较大的抑制作用.

关键词：产酸克雷伯氏菌可溶性氢酶分离纯化催化放氢

固氮鱼腥藻(Anabaena azotica Ley HB 686)氢酶的存在形式和性质

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物生理与分子生物学 1987年第4期 395-402页

作者：陈兆平程双奇莫熙穆华南师范大学生物系

Anabaena azotica HB 686氢酶有可溶性和膜结合两种存在状态,其中膜结合氢酶占总吸氢活性的67％,是吸氢酶的主要存在形式。在分离过程中,这两种氢酶在DEAE(DE—52)柱上的洗脱行为不同;此外,膜结合氨酶与氢的亲和力和吸氢能力均较强,对... 详细信息

Anabaena azotica HB 686氢酶有可溶性和膜结合两种存在状态,其中膜结合氢酶占总吸氢活性的67％,是吸氢酶的主要存在形式。在分离过程中,这两种氢酶在DEAE(DE—52)柱上的洗脱行为不同;此外,膜结合氨酶与氢的亲和力和吸氢能力均较强,对低温更敏感。这些差异可能与这两种氨酶的结构与生理功能不同有关。

关键词：固氮鱼腥藻氢酶可溶性氢酶膜结合氢酶吸氢活性