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可注射型富血小板纤维蛋白促进人脐静脉内皮细胞成血管能力的体外实验研究

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同济大学学报（医学版） 2023年第5期44卷 634-639页

作者：罗琳涓潘菁厉超元蒋备战同济大学口腔医学院•同济大学附属口腔医院儿童口腔科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072 同济大学口腔医学院•同济大学附属口腔医院种植科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的探究可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin,iPRF)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)成血管分化能力的影响。方法CCK-8实验检测HUVECs增殖能力并筛选最佳浓度的可注射型富血小板纤维蛋白提取液(injectable platelet-rich fibrin extract,iPRFe);划痕实验和小管形成实验分别检测HUVECs迁移能力和成血管分化能力;实时定量PCR检测成血管相关基因的mRNA表达。结果0.4 mg/mL浓度的iPRFe促进HUVECs增殖效果最佳;iPRFe对HUVECs迁移和小管形成有显著的促进作用,还能明显提高血管生成素(angiogenin,ANG)、C-X-C基序趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)、血小板衍生生长因子受体A(platelet-derived growth factor receptor A,PDGFRA)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平。结论iPRF可以促进HUVECs增殖、迁移和成血管能力,有望成为用于牙髓再生的新材料。

关键词：可注射型富血小板纤维蛋白血管生成人脐静脉内皮细胞牙髓再生

可注射型富血小板纤维蛋白应用于口腔组织再生的研究进展

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临床口腔医学杂志 2022年第6期38卷 379-382页

作者：李诗琪(综述) 苏镇亚莫安春(审校) 口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院种植科四川成都610041

第二代血小板浓缩物——富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)是从自体血液中离心获得的纤维蛋白物,富含血小板和白细胞,且能够持续释放细胞因子和生长因子。可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin,i-PRF)... 详细信息

第二代血小板浓缩物——富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)是从自体血液中离心获得的纤维蛋白物,富含血小板和白细胞,且能够持续释放细胞因子和生长因子。可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin,i-PRF)是通过降低离心速率、减少离心时间的条件下获得的液体形式的PRF衍生物。研究证明i-PRF能够促进细胞增殖、迁移及分化,同时具有抗炎作用与杀菌活性,加速组织愈合过程。临床上i-PRF可直接注射使用或与其他生物材料联合应用,在口腔医学领域中具有良好的应用前景。本文就i-PRF的制备技术、生物学特性、作用机制及其在口腔组织再生方面的潜能及临床应用作一综述。

关键词：可注射型富血小板纤维蛋白口腔组织再生血小板浓缩物黏性骨块

可注射型富血小板纤维蛋白联合封闭式负压引流技术治疗慢性难愈性创面的应用研究

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安徽医科大学学报 2021年第10期56卷 1622-1626页

作者：陈道才谢娟李红红朱邦中陈增红娄寅方颖曹东升安徽医科大学第二附属医院整形外科合肥230601 安庆市立医院整形外科安庆246003

目的探讨可注射型富血小板纤维蛋白(i-PRF)联合封闭式负压引流(VSD)技术治疗慢性难愈性创面的疗效。方法选取80名慢性难愈创面患者,随机均分为对照组和i-PRF组。对照组予创面清创后行封闭式负压引流治疗,i-PRF组予创面清创后即行创面及... 详细信息

目的探讨可注射型富血小板纤维蛋白(i-PRF)联合封闭式负压引流(VSD)技术治疗慢性难愈性创面的疗效。方法选取80名慢性难愈创面患者,随机均分为对照组和i-PRF组。对照组予创面清创后行封闭式负压引流治疗,i-PRF组予创面清创后即行创面及创周i-PRF多点分散注射,再行封闭式负压引流治疗,两组患者均以7 d为一周期重复上述治疗,达修复标准后修复创面。比较两组患者治疗后第7、14天的细菌培养结果、白细胞计数、C反应蛋白、红细胞沉降率、新鲜肉芽组织生长情况及疼痛评分,记录达修复标准准备时间及创面愈合时间。结果治疗后第7、14天i-PRF组各项炎症指标及疼痛评分降低较对照组更明显,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后第7、14天观察组新鲜肉芽组织覆盖率及细菌转阴率更高,差异有统计学意义(P<0.05);i-PRF组达修复标准准备时间及创面愈合时间均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论i-PRF联合VSD治疗慢性创面相比于单纯应用VSD技术,能更有效控制创面感染,减轻患者疼痛,加速创面愈合,减少住院时间。

关键词：可注射型富血小板纤维蛋白封闭式负压引流慢性难愈性创面局部注射

可注射型富血小板纤维蛋白在组织再生中的作用

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可注射型富血小板纤维蛋白在组织再生中的作用

作者：王旭竹武汉大学

学位级别：硕士

血小板浓缩制品因其富含各种生长因子已被广泛应用于组织再生的领域中。目前,已证实第一代血小板浓缩制品富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对骨组织及软组织有明显的修复作用,但是加入其中的抗凝剂能够抑制组织再生。富血小板纤... 详细信息

血小板浓缩制品因其富含各种生长因子已被广泛应用于组织再生的领域中。目前,已证实第一代血小板浓缩制品富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对骨组织及软组织有明显的修复作用,但是加入其中的抗凝剂能够抑制组织再生。富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)是第二代血小板浓缩制品,不含抗凝剂,呈纤维凝胶状,能包裹丰富的细胞因子和生长因子,使其持续释放,加速骨组织及软组织的愈合,同时PRF中的白细胞还具有抗炎作用,在组织再生方面具有明显的优势。但由于PRF呈纤维凝胶状,不利于与其他生物材料结合,限制了其临床应用。因此本课题通过改变离心速度和时间,研制出一种不含抗凝剂的可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin,i-PRF),制备15分钟内为具有流动性的液体,与传统的PRF相似,含有大量生长因子与白细胞。通过研究i-PRF对不同钛片上牙龈成纤维细胞的影响、对成骨细胞的影响以及对软骨损伤修复的能力,探究其在种植体周围软组织、骨组织以及软骨组织再生中的作用。第一部分:i-PRF对种植体周围软组合愈合的影响[实验目的]研究比较PRP及i-PRF对光滑和粗糙钛片上牙龈成纤维细胞的影响。[材料与方法]1.PRP及i-PRF的制备:PRP通过取人来源血液加入抗凝剂EDTA,900 g离心5分钟取上清后,2000 g离心15分钟取沉淀获得。i-PRF通过取人来源血液后立即700 rpm离心3分钟后取上清获得。2.将牙龈成纤维细胞培养在空白对照孔、光滑钛片及粗糙钛片上,分别给予不加刺激、PRP及i-PRF培养。细胞活死染色检测细胞活性。Transwell检测细胞迁移能力。CCK8检测第1、3、5天细胞增殖程度的变化。细胞骨架染色(鬼笔环肽)检测细胞形态。RT-PCR检测第7天再生相关基因PDGF及TGF-β,细胞外基质相关基因COL1A1及FN1的mRNA表达变化。免疫荧光检测第7天Ⅰ型胶原蛋白的表达。[结果]1.本实验成功制备出不含抗凝剂的可注射型富血小板纤维蛋白。2.粗糙钛片明显抑制牙龈成纤维细胞的贴附、增殖。3.与PRP相比,i-PRF无论在空白对照孔、光滑还是粗糙钛片上都能够更好地促进细胞迁移、增殖以及再生相关基因以及细胞外基质生成相关基因的表达,同时促进Ⅰ型胶原蛋白的合成。[结论]与PRP相比,i-PRF对于种植体周围软组织再生有更明显的优势,能够促进种植体周围软组织愈合。第二部分:i-PRF对骨再生的影响[实验目的]研究比较PRP与i-PRF对人成骨细胞行为及骨再生的影响。[材料与方法]1.PRP及i-PRF的制备。2.体外实验培养人成骨细胞,分别给予不加刺激、PRP及i-PRF。细胞活死染色检测细胞活性。Transwell检测细胞迁移能力。CCK8检测第1、3、5天细胞增殖程度的变化。对成骨细胞进行矿化诱导,通过ALP染色、ALP活性、茜素红染色检测对成骨细胞矿化能力的影响。RT-PCR检测第3和14天成骨基因ALP,OCN,Runx2及COL1的mRNA表达变化。免疫荧光检测第14天OCN的表达。[结果]PRP及i-PRF均表现出很好的生物相容性,均能促进人成骨细胞迁移、增殖,但是与PRP相比,i-PRF能够明显促进人成骨细胞的迁移、增殖。对人成骨细胞进行矿化诱导后,PRP及i-PRF均能促进人成骨细胞的矿化,ALP染色、ALP活性、茜素红染色以及成骨相关指标表达变化均增加,但是i-PRF增加更为显著。[结论]与PRP相比,i-PRF对于成骨细胞迁移、增殖以及矿化能力有更明显的优势。第三部分:i-PRF对软骨再生的影响[实验目的]体外研究比较PRP与i-PRF对兔软骨细胞的作用。[材料与方法]1.PRP及i-PRF的制备。2.体外实验培养兔软骨细胞,分别给予不加刺激、PRP及i-PRF。CCK8检测第1、3、5、7天细胞增殖程度的变化。RT-PCR检测第7天软骨向分化相关基因SOX9,COL2A1及ACAN的mRNA表达变化。[结果]PRP及i-PRF均能促进兔软骨细胞的增殖,而在第5和7天,i-PRF的促进作用更为显著。PRP及i-PRF促进软骨向分化相关基因SOX9,COL2A1及ACAN表达,i-PRF组促进作用更为显著。[结论]与PRP相比,i-PRF对于软骨细胞增殖、分化有更明显的优势。

关键词：富血小板血浆可注射型富血小板纤维蛋白组织再生

可注射型富血小板纤维蛋白联合封闭式负压引流技术治疗慢性难愈性创面的应用研究

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可注射型富血小板纤维蛋白联合封闭式负压引流技术治疗慢性难愈性...

作者：陈道才安徽医科大学

学位级别：硕士

背景及目的:可注射型富血小板纤维蛋白（injectable platelet-rich fibrin,i-PRF）作为新一代自体血小板浓缩物,通过模拟自然凝血过程运用更低的离心力与离心速度制得,其中的血小板及白细胞含量更高,富含纤维蛋白及多种生长因子,具有更... 详细信息

背景及目的:可注射型富血小板纤维蛋白（injectable platelet-rich fibrin,i-PRF）作为新一代自体血小板浓缩物,通过模拟自然凝血过程运用更低的离心力与离心速度制得,其中的血小板及白细胞含量更高,富含纤维蛋白及多种生长因子,具有更强的抗菌能力及一定的抗细菌生物膜活性,制备过程简单,操作方便可快速获取,不含任何添加剂,避免了免疫排斥及过敏反应等问题,而且具有良好的流动性可局部注射,增强了局部应用时的可操作性,在组织再生及修复重建领域应用广泛。慢性难愈性创面的治疗仍然是当前具有挑战性的问题,封闭式负压引流（vacuum sealing drainage,VSD）技术的应用较传统治疗方法取得不错的临床效果,i-PRF具有促进组织再生及抗菌活性,在口腔治疗各方面获得不错的疗效。然而i-PRF在慢性难愈性创面治疗中罕见报道,笔者研究旨在探讨i-PRF联合封闭式负压引流技术对比单纯应用封闭式负压引流技术在慢性创面治疗中的疗效。方法:依照选择及纳入标准选取2018年10月至2020年11月在安徽医科大学第二附属医院整形外科收治的80名慢性难愈性创面患者,根据随机数字表法将患者随机分为A组（对照组）和B组（观察组）,每组各40例。A组患者予创面清创后行封闭式负压引流治疗,B组患者予创面清创后即行创面及创周i-PRF多点分散注射,再行封闭式负压引流治疗,两组患者均以7天为一周期重复上述治疗,至创面达修复标准后修复创面。比较两组患者治疗后第7天和14天的细菌培养结果、白细胞计数（WBC）、C反应蛋白水平（CRP）、红细胞沉降率水平（ESR）、新鲜肉芽组织生长情况以及疼痛评分,记录创面达到修复标准准备时间及创面愈合时间。结果:两组患者治疗后第7天、14天炎症指标（WBC、CRP、ESR）水平及疼痛评分均呈下降趋势,B组患者下降趋势更明显,差异均有统计学意义（P＜0.05）;治疗后第7天、14天B组患者创面新鲜红色肉芽组织覆盖率更高,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗后第7天、14天B组患者细菌转阴率更高,差异有统计学意义（P＜0.05）;B组患者创面达到修复标准准备时间及创面愈合时间均低于A组患者,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:i-PRF联合封闭式负压引流技术治疗慢性创面相比于单纯应用封闭式负压引流技术,能更加有效地控制创面感染,减轻患者疼痛,减少患者创面达修复标准准备时间,加速创面愈合,值得临床推广应用。

关键词：可注射型富血小板纤维蛋白封闭式负压引流慢性难愈性创面局部注射

改良型与可注射型富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响

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北京口腔医学 2023年第1期31卷 6-11页

作者：唐一月曹春花常尧仁上海市浦东新区芦潮港社区卫生服务中心口腔科上海201306 上海交通大学医学院附属第六人民医院口腔科不详

目的探究改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin, A-PRF)和可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin, i-PRF)对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响,为两种血小板纤维蛋白制品促进软组织愈合的表观差... 详细信息

目的探究改良型富血小板纤维蛋白(advanced platelet-rich fibrin, A-PRF)和可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet-rich fibrin, i-PRF)对人牙龈成纤维细胞增殖及分化的影响,为两种血小板纤维蛋白制品促进软组织愈合的表观差异及临床效能评估提供实验数据参考。方法观察A-PRF及iPRF显微及超微结构,测定血小板浓缩物生长因子(PDGF-BB,TGF-β1,EGF)的释放情况,将A-PRF及i-PRF作用于人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts, HGFs),观察两者对HGFs的增殖影响及HGFs I型胶原蛋白(COL1)的表达情况,通过qRT-PCR进一步检测I型胶原蛋白α2(COL1α2)、纤连蛋白I (FN1)、转移生长因子β(TGF-β)、血小板衍生生长因子(PDGF)基因的表达。结果 i-PRF中白细胞层较A-PRF更宽,且白细胞数量更多,而A-PRF的纤维网状结构更为致密。A-PRF、i-PRF中的细胞因子随着时间的延长,在各时间点释放量逐渐降低,A-PRF中TGF-β1在第1天及EGF在第7天释放量低于i-PRF,其余各个时间点A-PRF生长因子的释放量均高于i-PRF (P型胶原蛋白及COL1a2、FN1基因的上调作用更为明显。结论 A-PRF、i-PRF均对HGFs的增殖具有明显的促进作用,且二者对HGFs I型胶原蛋白的表达起到了显著促进作用,在同一时间段A-PRF可分泌更多的软组织愈合相关生长因子,提示A-PRF在促进软组织修复愈合方面表现更优。

关键词：改良型富血小板纤维蛋白可注射型富血小板纤维蛋白牙龈成纤维细胞

可注射型富血小板纤维蛋白对人根尖牙乳头干细胞生物学行为的影响

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口腔医学 2021年第7期41卷 594-598,613页

作者：潘菁曹子蔚管贇蒋备战同济大学口腔医学院·附属口腔医院儿童口腔科上海牙组织修复与再生工程技术研究中心上海200072

目的探讨可注射型富血小板纤维蛋白(injectable platelet rich fibrin,iPRF)对人根尖牙乳头干细胞(human stem cells from apical papilla,hSCAPs)生物学行为的影响。方法酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定可注射型富血小板纤维蛋白提取液(injectable platelet rich fibrin extract,iPRFe)生长因子的含量;CCK-8、Transwell实验、茜素红染色分别检测iPRFe对hSCAPs增殖、迁移、矿化诱导的影响;荧光实时定量PCR检测与成骨/成牙向分化相关基因的mRNA表达水平。结果iPRFe中可检测到血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF1)和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1);iPRFe能促进hSCAPs的增殖,且在1/4×浓度时hSCAPs增殖效果最佳;1/4×浓度的iPRFe对hSCAPs的迁移和矿化也有明显的促进效果;iPRFe还可明显促进碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的表达(P可能。

关键词：可注射型富血小板纤维蛋白根尖牙乳头干细胞生物学行为牙髓再生

可注射型富血小板纤维蛋白在年轻恒牙感染根管牙髓血管再生治疗中的临床应用

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四川医学 2021年第10期42卷 1012-1016页

作者：胡凌洁周吉颜玉希宜宾市中医医院口腔科四川宜宾644000

目的比较可注射型富血小板纤维蛋白(i-PRF)作为支架和血凝块作为支架在年轻恒牙感染根管牙髓血管再生治疗中的临床应用效果。方法选取2018年1月至2020年6月在我院口腔科就诊的患儿44例为研究对象,按随机数字表法分为观察组与对照组,各2... 详细信息

目的比较可注射型富血小板纤维蛋白(i-PRF)作为支架和血凝块作为支架在年轻恒牙感染根管牙髓血管再生治疗中的临床应用效果。方法选取2018年1月至2020年6月在我院口腔科就诊的患儿44例为研究对象,按随机数字表法分为观察组与对照组,各22例。对照组将血凝块作为支架行牙髓血运重建术,观察组将i-PRF作为支架行牙髓血运重建术。所有患儿治疗后的第3、6、12个月进行复诊。评价临床疗效;根据X线片测量两组患牙术前术后根管长度、根管壁厚度、根尖孔直径,计算并比较根管长度、牙本质壁厚度及根尖孔直径的变化值;进行牙髓电活力测试。结果随访过程中,观察组失访4例,对照组失访1例,引血不足1例,最终纳入观察组18例,对照组20例,随访6~24个月。术后,两组临床疗效有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组根管长度增加比及根管壁厚度增加比高于对照组(P0.05);观察组牙髓电活力测试阳性者与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用i-PRF及血凝块作为支架材料进行牙髓血运重建术对年轻恒牙感染根管的治疗效果均较好,但使用i-PRF较血凝块更能促进患儿年轻恒牙根管长度增加及根管壁增厚。

关键词：牙髓血运重建术牙髓血管再生可注射型富血小板纤维蛋白年轻恒牙

基于可注射型富血小板纤维蛋白在慢性难愈合创面治疗中的研究进展

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第9期 166-169页

作者：杨水静徐顺利新乡医学院外科学河南新乡214100 新乡医学院第五临床学院骨一科河南新乡214100

慢性难愈合创面也被称作为溃疡,是不同因素相互作用的结果,使正常皮肤组织缺失,通过1个月左右的基础治疗,仍然难以通过自身恢复而保证创面完整,临床上常见于压力性溃疡、糖尿病足溃疡、下肢静脉性溃疡等,发病原因相对复杂,病程周期比较... 详细信息

慢性难愈合创面也被称作为溃疡,是不同因素相互作用的结果,使正常皮肤组织缺失,通过1个月左右的基础治疗,仍然难以通过自身恢复而保证创面完整,临床上常见于压力性溃疡、糖尿病足溃疡、下肢静脉性溃疡等,发病原因相对复杂,病程周期比较长,治疗难度比较高。注射型富血小板纤维蛋(i-PRF)是浓度较高的血小板浓缩物,含有许多生长因子、纤维蛋白,能够增强创面的修复能力,促进软组织的愈合,提高病患的愈合效果。现阶段,注射型富血小板纤维蛋白在软组织缺损修复方面起到不可忽视的作用。

关键词：可注射型富血小板纤维蛋白慢性难愈合创面研究进展