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APAAP桥联酶标技术检测支原体和虫媒病毒

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军事医学 1989年第4期34卷 315-,322页

作者：杨保安辛颜彬孟玲珍刘景兰军事医学科学院微生物流行病研究所

APAAP免疫酶标技术(即碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标显色技术)是最近几年随着单克隆抗体(McAb)技术进展而发展起来的一新兴组化染色技术.此项技术在国内首先由杨志刚等同志建立并推广应用.我们将这一方法应用于支原体和虫媒病毒抗原... 详细信息

APAAP免疫酶标技术(即碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标显色技术)是最近几年随着单克隆抗体(McAb)技术进展而发展起来的一新兴组化染色技术.此项技术在国内首先由杨志刚等同志建立并推广应用.我们将这一方法应用于支原体和虫媒病毒抗原检测,获得了满意结果.材料与方法支原体:口腔支原体引自生物制品检定所,猪鼻支原体(BTS-7CF8)引自中监所.病毒:辛德比斯病毒引自生物制品检定所,森林脑炎病毒(森张株)引自长春生物制品所.上述支原体和病毒感染敏感细胞一定时间后按常规法进行细胞滴片,经丙酮固定后,作为感染抗原片.

关键词： APAAP桥联酶标桥联酶标技术猪鼻支原体虫媒病毒免疫酶标技术口腔支原体辛德比斯病毒生物制品检定抗原检测单克隆抗体

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用PCR检测支原体及大白鼠的支原体感染

中国兽药杂志 1994年第4期 27-29页

作者：尹秋生刘耀清北京军区总医院检验科

用ＰＣＲ检测支原体及大白鼠的支原体感染尹秋生，刘耀清指导马立人武仰晶（北京军区总医院检验科）支原体１６Ｓ和２３ＳｒＲＮＡ有较保守的重复序列。本文从中选择了两段高度重复的核酸序列作为支原体共同引物，扩增１６Ｓ和２３Ｓｒ... 详细信息

用ＰＣＲ检测支原体及大白鼠的支原体感染尹秋生，刘耀清指导马立人武仰晶（北京军区总医院检验科）支原体１６Ｓ和２３ＳｒＲＮＡ有较保守的重复序列。本文从中选择了两段高度重复的核酸序列作为支原体共同引物，扩增１６Ｓ和２３ＳｒＲＮＡ之间的空间区域。目前已经扩增...

关键词：支原体感染血清北京军区总医院检验科 PCR 引物扩增莱氏无胆甾原体解脲脲原体溶脲脲原体关节炎支原体口腔支原体空间区域大白鼠家鼠属

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易致污染的支原体在固体培养基上的形态特征

微生物学免疫学进展 2015年第5期43卷 17-22页

作者：傅元欣魏然宣俊文于佳王轶峰姜宝芹刘晓凡兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

目的：研究不同条件下、不同生长期易致污染的支原体在固体培养基中的形态特征。方法通过改变支原体菌体浓度、培养时间及培养基组成，观察支原体在固体培养基中的形态变化。结果支原体菌体浓度小于103 cfu／mL时，培养至2～3天后可在... 详细信息

目的：研究不同条件下、不同生长期易致污染的支原体在固体培养基中的形态特征。方法通过改变支原体菌体浓度、培养时间及培养基组成，观察支原体在固体培养基中的形态变化。结果支原体菌体浓度小于103 cfu／mL时，培养至2～3天后可在固体培养基中形成典型的“油煎蛋”状形态，以蔗糖作为碳源培养支原体会导致葡萄糖发酵型支原体（肺炎支原体）不能在固体培养基中形成典型菌落，当使用牛血清代替马血清为支原体提供外源胆固醇时，猪鼻支原体在固体培养基中不能形成典型菌落。结论支原体的不同生长期、菌体浓度、培养基的组成都会使易致污染的支原体在固体培养基上的形态发生变化。

关键词：肺炎支原体口腔支原体猪鼻支原体固体培养基形态

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支原体菌株低温保存活力稳定性研究

微生物学免疫学进展 2019年第2期47卷 36-39页

作者：魏然傅元欣于佳宣俊文高雪军兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

目的研究低温冻存时间及温度对支原体菌种保存稳定性和菌种活力的影响。方法用固体平板计数法计算不同冻存时间、温度下的口腔支原体、肺炎支原体菌落数差异,分析这2个因素对口腔支原体、肺炎支原体菌种活力的影响。结果口腔支原体在生... 详细信息

目的研究低温冻存时间及温度对支原体菌种保存稳定性和菌种活力的影响。方法用固体平板计数法计算不同冻存时间、温度下的口腔支原体、肺炎支原体菌落数差异,分析这2个因素对口腔支原体、肺炎支原体菌种活力的影响。结果口腔支原体在生长48 h后达到生长高峰,肺炎支原体生长较为缓慢,在103 h到达生长高峰。口腔支原体在-70℃冻存1个月时,菌落数由10^(12) cfu/mL下降至10^(11) cfu/mL,冻存1个月的菌落数和冻存3个月、12个月的菌落数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。肺炎支原体在-70℃的冻存条件下,菌落数一直处于稳定水平;比较-35℃与-70℃的冻存条件下肺炎支原体的菌落数,差异无统计学意义(P>0.05),口腔支原体在-70℃冻存条件下的菌种活力明显高于-35℃(P口腔支原体生长迅速,但对于储存温度的敏感性较高,肺炎支原体相较口腔支原体生长缓慢,停滞期较长,菌株对冻存温度和时间的敏感度较低,稳定性高。菌种冻存温度应选择较低温度,冻存周期在1年内较为稳定。

关键词：肺炎支原体口腔支原体菌种冻存活力

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单克隆抗体反向间接血凝试验检测支原体

医学研究杂志 1995年第3期29卷 32-34页

作者：李敏郭章溉曹兰华孙红妹王丽红首都儿科研究所

培养细胞感染支原体仍然是某些实验室的严重问题,感染率达6％-26％或更高。猪鼻支原体(M·hyorhinis).口腔支原体(M·orale),精氨酸支原体(M·arginini)和莱氏支原体(M·Laidlawii或Acholeplasma Laidlawii)占感染细胞支原体的95％以上... 详细信息

培养细胞感染支原体仍然是某些实验室的严重问题,感染率达6％-26％或更高。猪鼻支原体(M·hyorhinis).口腔支原体(M·orale),精氨酸支原体(M·arginini)和莱氏支原体(M·Laidlawii或Acholeplasma Laidlawii)占感染细胞支原体的95％以上,其中猪鼻支原体感染率最高,占检出支原体的30％～39％。诊断支原体感染采用包括分离培养、DNA染色、血清学方法及DNA探针。

关键词：口腔支原体单克隆抗体猪鼻支原体支原体感染分离培养感染率杂交瘤细胞精氨酸血清学方法细胞感染

反向线点杂交同时检测和鉴定十种常见的细胞污染和致病支原体

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反向线点杂交同时检测和鉴定十种常见的细胞污染和致病支原体

中华中医药学会皮肤科分会学术会议、全国中医药防治皮肤病成果与技术交流大会、全国中西医结合皮肤科治疗新技术临床推广应用高级研修班

作者：王辉王玮蓁孔繁荣段逸群琳.吉尔伯特武汉市第一医院皮肤科

目的使用反向线点杂交方法检测、鉴定常见细胞污染支原体(猪鼻支原体、发酵支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体)和临床致病支原体(生殖道支原体、人型支原体、微小脲原体、解脲脲原体和肺炎支原体)。方法设计这十种支原... 详细信息

目的使用反向线点杂交方法检测、鉴定常见细胞污染支原体(猪鼻支原体、发酵支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体)和临床致病支原体(生殖道支原体、人型支原体、微小脲原体、解脲脲原体和肺炎支原体)。方法设计这十种支原体16S-23SrRNA间隔区公共引物巢式扩增间隔区片段。生物素标记的PCR扩增片段与标记在尼龙膜上的支原体种特异性探针杂交,鉴定支原体种。结果反向线点杂交方法能准确鉴定这十种支原体的标准株。我们使用支原体反向线点杂交方和种特异性PCR方法同时检测和鉴定100例临床分离株和92例细胞污染支原体标本。两种检测方法结果一致。结论支原体反向线点杂交方法是一种快速、灵敏和特异的检测支原体的方法。

关键词：生殖道支原体人型支原体微小脲原体解脲脲原体肺炎支原体猪鼻支原体发酵支原体口腔支原体精氨酸支原体莱氏无胆甾原体反向线点杂交聚合酶链式反应

来源： cnki会议评论

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去除传代细胞中支原体污染的研究

传染病信息 1994年第2期7卷 76-77页

作者：刘洪李泉根邹正升解放军302医院

支原体污染人和动物细胞系一直是组织培养中常见而又难以解决的问题,各实验室污染率不等,高的可达92％。

关键词：支原体污染口腔支原体传代细胞系组织培养研究污染率动物细胞病毒学实验室常见

用巢式多聚酶链反应检测细胞培养中污染支原体方法的建立

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医学研究杂志 1994年第1期28卷 32-32页

作者：王正森吴建新赵小元孙宝岭郭章溉李敏首都儿科研究所生化免疫室首都儿科研究所细菌室

细胞培养技术已经成为生物学和医学研究的重要工具,而细胞培养中支原体污染已是极严重的问题。而应用已被支原体污染的培养细胞或组织进行生物学和医学研究,必将导致错误结果。本文用三个引物(F1、F2及R1),建立巢式多聚酶链反应(nested ... 详细信息

细胞培养技术已经成为生物学和医学研究的重要工具,而细胞培养中支原体污染已是极严重的问题。而应用已被支原体污染的培养细胞或组织进行生物学和医学研究,必将导致错误结果。本文用三个引物(F1、F2及R1),建立巢式多聚酶链反应(nested PCR)方法,选择性扩增16s-23srRNA间区序列,并对其通用性、特异性、灵敏性进行鉴定。该法具有五大特点: 1.通用性常见污染细胞培养的支原体有精氨酸支原体、口腔支原体。

关键词：检测细胞培养支原体培养口腔支原体 nested 选择性扩增医学研究精氨酸多聚酶特异性 DNA